Name: 가역 Cholestatic 쥐 모델의 생성 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-05-21T17:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 39 s
Description: 학습하세요 쥐에서 가역적 담즙정체 모델을 생성하는 미세수술 기법을. 이소플루란 마취와 폴리에스터 튜브를 사용하여 담즙정체 연구에 필수적인 생리학적 변화를 연구할 수 있습니다.

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1. 쥐 담즙의 해부학 평균 담즙 덕트 직경 및 길이는 각각 1mm와 29mm였다. pylorus과 십이지장 유두 사이의 평균 거리는 28mm했습니다. 담즙 덕트에 열 두 가지 주요 췌장 덕트가있다 - 앞쪽에 덕트는 왼쪽에 열리고 후부 덕트의 오른쪽에 열립니다. 이러한 주요 덕트 이외에 췌장의 세 부분을 물기 사소한 관의 숫자가 담즙 덕트에 직접 열려 6. 2. 기술 모든 동물 실험 윤리 연구를위한 건강 지침의 국립 연구소와 계약에 수행되었으며 기관의 연구위원회 및 동물 관리위원회에 의해 승인되었습니다. 팔주 세 남자 스프 라그 - 돌리 쥐이 실험을 위해 사용되었습니다. 쥐 찰스 강 윌밍턴에 연구소, MA 및 모든 300g 이상했다 얻은했다. 쥐 표준 실험실 다이어트에 대한 액세스를했고 표준 실험실 조건에서 함께 보관되어 있었다. 쥐 처음 isofluorane와 anesthetized되었고 마스크를 통해 isofluorane와 수술 중 마취 유지. 2cm의 정중선 절개는 흉부의 검상 부부부터 만들어졌다. 일단 근막은 간 엽 (叶)가 센의 견인기와 cranially 철회했고 오픈, 그리고 십이지장은 caudally Q - 팁을 사용하여 철회했다. 담즙 덕트는 십이지장을 입력 관형 구조로 확인되었다. 담즙 관은 긴장에 따라 배치하고 부분적으로 오픈 컷했습니다. 0.6 mm와 0.9 mm의 외부 직경의 내경과 멸균 5cm 길이 폴리에틸렌 관을 사용했습니다. 이 튜브의 한쪽 끝을 열이 봉인되었고 다른 끝을 부드럽게 beveled되었습니다. beveled 끝을 다음 담즙 덕트에 통과되었다. 이것은 근위 및 담즙 덕트의 개방에 말초 모두 8-0 나일론 봉합을 사용하여 장소에 확보했다. 밀봉된 엔드와 함께 남아있는 튜브는 복막 캐비티에 배치되었다. 효과적인 사이트는 정상적인 생리와 irrigated했다. 복부는 다음 4-0 Polyglactin의 봉합과 함께 2 레이어에 폐쇄되었습니다. linea 알바는 연속 봉합과 함께 폐쇄되었으며 중단 피부 봉합이 배치되었습니다. 피부 접착제 그런 다음 피부에 적용되었습니다. 쥐가은 적절한 보습을 위해 매일 체중 모니터링 표준 실험실 조건에서 복구할 수있었습니다. cholestasis 반전 작업, 쥐들이 앞에서 설명한 것처럼 isofluorane를 사용 anaesthetized되었습니다. 복부는 이전 절개 사이트를 통해 오픈했습니다. 튜브는 식별 및 복막 캐비티에서 제거되었습니다. 튜브 주위 Omental adhesions는 무딘과 날카로운 해부를 사용하여 해제됩니다. 십이지장에있는 사이트는 다음 duodenostomy 튜브의 편안한 위치에 대한 확인되었다. 지갑 문자열 봉합, 직경 2~3mm은 다음 8-0 나일론을 사용하여 배치했다. 십이지장은 다음이 지갑 문자열 봉합 안에 문을 열었습니다. 튜브의 봉인 끝에 그런 다음 적절한 길이로 절단했다. 담즙의 흐름을 무료로 보장했다. 튜브의 끝이 다음 십이지장에 배치되었고 지갑 문자열 봉합이 강화되었습니다. 복부는 레이어에서 irrigated 및 폐쇄되었습니다. 이전 연구에서 궁극적 choledochoduodenostomy가 다른 기술을 사용하여 수행되었다, 쥐 12 주 동안 살아와 쥐 그 기간 동안 건강하게 하였다. 또한이 연구는 2 주 기간 동안의 담즙 덕트의 방해를 받게 쥐에 choledochoduodenostomy 이후 생화학 및 histological 변경 반전을 확인 7.

<ol><li>Gouma, D. J., Roughneen, P. T., Kumar, S., Moody, F. G., Rowlands, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+nutritional+status+associated+with+obstructive+jaundice+and+biliary+drainage+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Clin+Nutr%22%5BJournal%5D)">Changes in nutritional status associated with obstructive jaundice and biliary drainage in rats.</a> Am J Clin Nutr. 44, 362-369 (1986).</li>
<li>Ohtsuka, M., Miyazaki, M., Kondo, Y., Nakajima, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophil-mediated+sinusoidal+endothelial+cell+injury+after+extensive+hepatectomy+in+cholestatic+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Neutrophil-mediated sinusoidal endothelial cell injury after extensive hepatectomy in cholestatic rats.</a> Hepatology. 25, 636-641 (1997).</li>
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<li>Subhas, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+effect+of+methylprednisolone+on+warm+ischemia-reperfusion+injury+in+a+cholestatic+rat+liver%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Surg%22%5BJournal%5D)">Protective effect of methylprednisolone on warm ischemia-reperfusion injury in a cholestatic rat liver.</a> Am J Surg. 199, 377-380 (2010).</li>
<li>Kara, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+anatomical+study+on+the+rat+pancreas+and+its+ducts+with+emphasis+on+the+surgical+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Anat%22%5BJournal%5D)">The anatomical study on the rat pancreas and its ducts with emphasis on the surgical approach.</a> Ann Anat. 187, 105-112 (2005).</li>
<li>Ryan, C. J., Than, T., Blumgart, L. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Choledochoduodenostomy+in+the+rat+with+obstructive+jaundice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Choledochoduodenostomy in the rat with obstructive jaundice.</a> J Surg Res. 23, 321-331 (1977).</li>
</ol>

관심 없음 충돌 선언하지 않습니다.

Cholestasis은 위장 시스템의 변화 수많은로 연결됩니다. 연구는 면역 시스템과 영양 상태의 변화를 찾고 완료되었습니다. 1-3 Cholestasis는 간장 수술 결과에 영향을 줄 수 있습니다. 연구가 cholestasis의 존재에 간장 수술의 결과를 개선하기 위해 수행되었습니다. 의학 및 연구 개선으로 4-5, 추가 연구 cholestasis에서 수행됩니다. 따라서 그것은 좋은 cholestatic 모델을 가지고 필요합니다. 쥐가 그것은 쉽게 사용할 수 있기 때문에 실험 동물로 선호하는, 쉽게 처리, 저렴한과 hepatopancreatobiliary 시스템 연구를위한 튼튼한 모델 6.이 동영상이 문서를 통해 우리는 미래의 연구에 사용할 수있는 가역 cholestatic 모델의 생성을 설명합니다.

가역 cholestatic 쥐 모델의 생성

Creation of Reversible Cholestatic Rat Model

Cholestasis은 일반적으로 외과의와 소화기 전문 내과 모두에 의해 발생 임상 조건입니다. Cholestasis 다양한 생리 변화를 원인과 영양 상태 및 수술 결과에 영향을 미칠 수 있습니다. 간 및 다른 장기에서 발생 pathophysiological 변화 연구 중요하다. 다양한 연구 cholestatic 쥐 모델에서 수행되었습니다. 우리는 국소 빈혈 reperfusion의 부상에 methylprednisolone의 역할을 보는 우리의 최근 연구에서 가역 cholestatic 랫 모델을 사용합니다. 가역 cholestatic 모델의 창출을위한 다양한 기법을 설명하고 있습니다. 가역 cholestatic 랫 모델의 생성 쥐의 작은 크기와 독특한 hepatopancreatobiliary 해부학보기에 도전하실 수 있습니다. 이 동영상이 문서는 가역 cholestatic 모델의 생성을 보여줍니다. 이 모델은 같은 위장관의 영양, 생리, 병리, histological 및 면역 변화의 변화를보고 등 다양한 연구에 사용할 수 있습니다. 이 모델은 또한 cholestasis 주요 간장 수술에 대한 다양한 치료 개입의 효과를 볼 수 있습니다.

Cholestasis은 일반적으로 외과의와 소화기 전문 내과 모두에 의해 발생 임상 조건입니다. 가역 cholestatic 랫 모델의 생성 쥐의 작은 크기와 독특한 hepatopancreatobiliary 해부학보기에 도전하실 수 있습니다. 이 동영상이 문서는 가역 cholestatic 모델의 생성을 보여줍니다.

가역 Cholestatic 쥐 모델의 생성

담즙 정체는 외과 의사와 소화기 내과 의사 모두가 흔히 접하는 임상 상태입니다. 담즙 정체는 다양한 생리학적 변화를 일으킬 수 있으며...

가역적 담즙 정체 쥐 모델의 제작. 안녕하세요. 저는 미시간주 사우스필드에 위치한 프로비던스 병원 및 의료 센터의 일반외과 레지던트 Goulash입니다.오늘은 가역적 담즙 정체 쥐 모델 설정 방법을 시연하겠습니다. 쥐는 챔버 내에서 isof fluorine을 사용하여 마취하며, 이후에는 마스크를 사용합니다. 시술 과정에서는 외경 0.9 millimeter, 내경 0.6 millimeter의 폴리에스테르 튜브를 사용하며, 한쪽 끝은 개방하고 다른 쪽 끝은 밀봉합니다. 사용되는 기구로는 표준 rat pack, 미세 수술 기구, 안과용 겸자, Q-tips, 8-0 nylon이 있습니다. 시술은 수술용 현미경을 사용하여 수행합니다.대신 수술용 루프(Surgical loops)를 사용하여 수행할 수도 있습니다. 여기서는 안정적인 드레이핑을 적용하고 있습니다. 이 절차는 모든 멸균 예방 조치 하에 수행됩니다.흉골 지퍼 부위부터 시작하여 중앙선에 2cm 절개를 가하는 수술 단계입니다. 가위로 피하 조직과 근막을 절개합니다. 복막을 절개하여 간을 노출시킵니다.휴대용 소작기를 사용하여 지혈합니다. 이것은 간의 정중엽과 좌엽입니다. 쥐의 담도 해부학적 구조입니다. 이것은 쥐의 담도 해부학적 구조를 나타낸 모식도입니다.쥐의 간은 우엽, 중앙엽, 좌엽 및 미상엽으로 나뉩니다. 이것은 위이며, 이것은 담관입니다. 여기서 담관의 상당 부분이 문맥 및 간동맥과 연결되어 있지 않음을 확인할 수 있습니다.담즙 정체를 유도하고 낚아채기 위해 사용되는 담관의 이 부위입니다. 리트랙터를 사용하여 간엽을 젖히고, 면봉을 이용해 담관을 아래로 당깁니다. 그런 다음 미세수술 기구를 사용하여 담관 근처에서 담관을 낚아챕니다.이는 다른 쥐 모델에서 시연되고 있는 담관 결찰 단계입니다. 다시 한번, 이것은 수술 현미경 외부에서 촬영된 담관 결찰 단계입니다. 담즙 정체를 유도하기 위해, 4-0 폴리글리콜산(polyglycolic acid) 봉합사를 담관 아래로 통과시킨 후 담관을 견인합니다.견인 중인 담관입니다. 확대된 모습입니다. 여기서 담관을 절개하고 있습니다.그 후 폴리 튜브의 끝부분을 이 담관 속으로 통과시킵니다. 이 과정에서 튜브 피더 미세수술 기구를 사용하여 도움을 받습니다. 튜브를 부드럽게 밀어 넣도록 주의해야 합니다.그 다음 근위 담관에 창을 만듭니다. 이 창을 통해 8번 나일론 봉합사를 통과시킵니다. 그런 다음 ATO 봉합사를 세 번의 정방결절로 묶어 튜브를 고정합니다.첫 번째 봉합사 근위측의 Blac 아래에 두 번째 창을 만듭니다. 또 다른 ATO 봉합사를 사용하여 튜브의 근위부를 고정합니다. 그 후 담관의 원위부에 창을 만들고, 그곳으로 ATO 봉합사를 통과시킵니다.이는 처음에 담관을 결찰하는 데 사용됩니다. 그다음 이 봉합사를 튜브 주변으로 감아 묶어 튜브를 단단히 고정합니다. 봉합사를 절단하고 있으며, 여기에서 견인 봉합사를 당겨 제거합니다.여기서는 다시 화면을 확대합니다. 그 후 튜브를 복강 안으로 다시 밀어 넣어 편안하게 위치하도록 합니다. 그런 다음 2 ml의 생리식염수를 사용하여 복부를 세척합니다.그 다음 2x2 거즈를 사용하여 액체를 흡수시켜 제거합니다. 튜브가 적절하고 편안하게 자리 잡았는지 확인하고, 지혈 상태를 확인한 후 복부를 폐쇄하기 위해 최종 점검을 수행합니다. 근막은 5-0 poly actin 연속 봉합사로 봉합합니다.그런 다음 피부를 진피 단속 봉합으로 폐쇄합니다. 폴리에스테르 큐브를 오덤(odum)에 삽입하여 훈련함으로써 담즙 정체를 해소합니다. 동일한 환경의 쥐에서 담즙 정체 해소가 시연되고 있습니다. 여기에서 가위로 피부와 근막을 절개하고 있습니다.간을 견인하고 십이지장을 당깁니다. 면봉을 사용하여 폴리에스테르 튜브가 편안하게 놓일 수 있는 십이지장의 위치를 확인합니다. 그런 다음 튜브를 배치하기로 미리 선택한 부위 주변에 8-0 나일론으로 버스팅 봉합물을 배치합니다.각 봉합 시마다 혈청 근육 조직이 함께 포함되도록 합니다. 그 후 복강에서 NEP 폴리 튜브를 끌어냅니다. 튜브가 오랫동안 삽입되어 있었던 경우에는 튜브 주변에 상당한 유착이 있을 수 있으며, 이를 조심스럽게 분리해야 합니다.그 다음, 담즙 배액물을 흡수할 수 있도록 면봉 위에서 가위로 튜브를 절단합니다. 튜브를 더 오래 유치한 경우에는 상당한 양의 담즙이 쏟아져 나오는 것을 볼 수 있습니다. 튜브를 절단하여 개방하면, 가위로 펄스 스트링 봉합사(pulse string suture)의 중심부에서 경막을 절개하며, 이때 경막의 모든 두께가 완전히 절개되었는지 확인합니다.그 다음 튜브를 nu에 밀어 넣고, 튜브가 편안하게 자리 잡고 올바른 방향으로 정렬되었는지 확인합니다. 그 후 post stringing 봉합사를 세 번의 square knot으로 조여 튜브를 dynam에 고정합니다. 이어서 시술 중 누출되었을 담즙을 제거하기 위해 상처 부위를 세척하며, 폐쇄 전 튜브가 편안하게 위치해 있는지와 지혈 상태가 양호한지 확인한 후 ADOS를 폐쇄합니다.담즙 배액 시연입니다. 여기서는 시연 목적으로 튜브를 조던(Jordan)에서 뽑아 튜브를 통해 담즙이 자유롭게 배액됨을 보여드리겠습니다. 본 모델의 활용 방안입니다. 이 모델은 담즙 정체와 관련된 담도계 및 위장관의 생리학적, 병리학적 및 조직학적 변화를 연구하는 데 사용할 수 있습니다. 또한, 이 모델은 담즙 정체가 간 수술에 미치는 영향을 연구하거나 담즙 정체와 관련된 영양 상태의 변화를 연구하는 데 활용될 수 있습니다.

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연구

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Medicine

의학

담즙 흐름의 중단은 형태학적 변화의 특징적인 시간 의존적 순서와 함께 심각한 염증성 담즙 유발성 간 손상을 초래합니다. 여기에서는 21일에서 28일 후에 강한 섬유화 반응을 유도할 수 있는 마우스의 총담관 수술 결찰에 대한 프로토콜을 제시합니다.

마우스의 담관 결찰 : 폐쇄성 담즙에 의한 염증성 간 손상과 섬유화의 유도

상연 hepatectomy에 대 한 연결 간 파티션 및 포털 정 맥 결 찰을 사용 하 여 빠른 간 비 대를 유도 (ALPPS) 경계선 불과하다 간 종양의 절제에 대 한 제안 되었습니다. 이 모델 급속 한 비 대에 관여 하는 메커니즘을 명료 하 고 홍보 또는 중생의 가속을 차단 하는 약물의 테스트 있습니다.

연결 간 파티션과 무대 Hepatectomy (ALPPS) 절차에 대 한 포털 정 맥 결 찰의 쥐 모델

여기는 콜린 결핍 및 ethionine 보충 (CDE) 다이어트의 먹이로 쥐에 만성 간 상해를 유발 하는 일반적인 방법에 설명 합니다. 상태 모니터링, 간 관류, 절연 및 보존 설명합니다. 6 주 시간 코스 간 부상, pathohistology, 섬유 증, 염증, 간 조상 세포 응답에 대 한 알릴 수 있다.

Murine 콜린 불충분 한, Ethionine 보충 (CDE) 다이어트 만성 간 상해의 모델

여기, 선물이 간 부상 및 설치류에서 중생의 외과 모델로 부분 담 관 결 찰.

마우스에 부분적 담 관 결 찰: 지역화 된 폐쇄성 Cholestasis의 제어 모델

여기는 등 포털 압력, splanchnic 혈액 흐름, 조직의 hemodynamics 포털 고혈압 증후군 쥐에 성격을 나타내기 위하여 hemodynamic 매개 변수의 침략 적인 측정을 위한 상세한 프로토콜에 설명 합니다.

포털-고혈압 증후군 Cirrhotic 쥐에서의 침입 Hemodynamic 특성화

현재 연구에서 개발된 급성 간 부전 동물 모델은 잠재적인 치료법의 연구를 위한 실행 가능한 대안을 제시합니다. 현재 모델은 물리적 및 약물 유발 간 손상의 결합 된 효과를 채택하고 새로운 치료의 잠재력을 연구하기에 적합한 시간 창을 제공합니다.

70% 부분 간 절제술과 아세트아미노펜을 결합하여 급성 간 기능 부전의 쥐 모델 생성

이 프로토콜은 오로 위관을 통해 CCl4 노출을 통해 급성 간 손상 (ALI)을 유도하는 일반적이고 실행 가능한 방법을 설명합니다. CCl4 노출은 간에서의 생체 변환 동안 반응성 산소 종의 형성을 통해 ALI를 유도합니다. 이 방법은 ALI의 병리생리학을 분석하고 다른 간 보호 전략을 검사하는 데 사용됩니다.

탄소 테트라 클로라이드를 통해 쥐에 급성 간 상해를 유도 (CCl4)오로 위관을 통해 노출

가혹한 급성 췌장염을 위한 동물 모형은 염증성 사건의 진화의 관측을 용이하게 하는 초기 단계에서 병리학적 변화의 연구를 가능하게 합니다. 여기서 우리는 마취 C57BL/6 마우스의 췌장 덕트에 타우로콜린산 나트륨의 역그레이드 주입에 의하여 가혹한 급성 담즙 췌장염의 유도를 위한 프로토콜을 제공합니다.

C57BL/6 마우스에서 타우로콜레이트 나트륨 유도 심한 급성 췌장염

만성 췌장염 (CP)은 췌장의 염증과 섬유증을 특징으로하는 질병이며 종종 난치성 복통과 관련이 있습니다. 이 문서는 2,4,6 -trinitrobenzene 설포닉 산 (TNBS)로 담관 주입을 통해 CP의 마우스 모델을 생성하는 기술을 정제에 초점을 맞추고 있습니다.

담즙 덕트 TNBS 주입을 통한 만성 췌장염을 위한 마우스 모델

중증 급성 췌장염의 마우스 모델은 본원에 기재된다. 여기에 제시된 절차는 매우 빠르고 간단하며 접근 가능하므로 잠재적으로 분자 메커니즘및 급성 췌장염의 다른 치료 내정간섭에 대한 연구가 편리한 방법으로 허용됩니다.

비리오크크레아티드 덕트에 타우로콜레이트 나트륨의 역행 주입을 사용하여 마우스 심각한 급성 췌장염 모델의 설립

우리는 담도 폐쇄증(BA)에 대한 바이러스 유발 간 섬유증 기계론적 연구에 적합한 동물 모델과 향후 BA 치료를 위한 플랫폼을 제공하는 만성 간 섬유증의 마우스 모델을 확립했습니다.

담도 폐쇄증 연구를 위한 만성 간 섬유증의 마우스 모델

학습하세요 쥐에서 가역적 담즙정체 모델을 생성하는 미세수술 기법을. 이소플루란 마취와 폴리에스터 튜브를 사용하여 담즙정체 연구에 필수적인 생리학적 변화를 연구할 수 있습니다.

가역 Cholestatic 쥐 모델의 생성

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