Name: Poliovirus 식별을위한 입자 응집 방법 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-04-20T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 6 s
Description: 학습하세요 폴리오바이러스 격리주를 신속하게 식별하는 입자 응집 분석법을 통해 바이러스학 진단의 효율성을 높이는 방법을 배우세요. 이 기술은 기존 중화시험보다 간단하고 빠른 결과를 제공합니다.

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우리는 그녀의 뛰어난 기술 지원을 준코 와다에게 감사하고 있습니다. 우리는 친절 PVR - IgG2a위한 baculovirus 발현 벡터를 제공하는 교수 아키오 노모토에게 감사하고 있습니다. 이 연구에 의해 부분적으로 지원되었다 기금 - - 에이드의 소아 마비 박멸의 추진 및 후생 노동 장관의 전염병을 신흥 다시 새로운 연구하십시오.

1. 유지 보수 매체의 준비 (MM) 및 성장 매체 (GM) MM과 GM의 준비, 1 소아 마비 실험실 설명서를 참조하십시오. Dulbecco의 수정된 이글 배지 (DMEM)는 2퍼센트 소태아 혈청 (FCS)와 FCS가 각각 MM 및 GM의 대체로서 사용될 수 10 % 보충. 2. 안티 PV 항체의 준비 <ol><li> 안티 PV 항체 (타입 1, 2, 또는 3)의 각 유리병에 물 (유리병 당 0.5 ML)를 추가하여 Reconstitute 방지 PV 항체 (RIVM PV 입력 항혈청). 별도의 표시 튜브에 MM 4.5 ML이 재구성 항체 솔루션 (0.5 ML 각)를 추가합니다. 참고 : 안티 PV 항체 중 일부는 많은가 재구성 양식 (유리병 당 0.5 ML)로 제공됩니다. 안티 PV 항체의 같은 많은, reconstitution을위한 물 또한 필요하지 않습니다. </li><li> 재구성 방지 PV 항체의 동일한 음량을 섞는다. 에 대한 안티 PV1 2, 2 3, 또는 3 +1 : 혼합 각 재구성 항체의 1.8 ML (각 조합에 대해 1.8 ML + 1.8 ML = 3.6 ML). 에 대한 안티 PV1 2 세 : 혼합 각 재구성 항체 1.2 ML (1.2 ML + 1.2 ML + 1.2 ML은 = 3.6 ML). 참고 : PV 샘플은 PV의 다른 serotypes의 혼합물을 포함 수 있습니다. PVS의 혼합과 샘플의 PV 중 하나의 혈청형을 확인하려면 안티 PV 항체 (예 : 1 +2, 2 +3, 3 +1, 1 +2 +3)의 수영장이 필요합니다. </li><li> 각 백신 PV (1 +2, 2 +3, 3 +1, 또는 1 +2 +3) 항체 (3.6 ML 각) (최종 18.2 % FCS)에 FCS (0.72 ML)의 1 / 5 볼륨을 추가합니다. 참고 : FCS의 추가는 항체에 의한 젤라틴 입자가 아닌 구체적인 유착의 감소입니다. </li><li> -20 ° C에서 PA 분석에 사용할 때까지 항체 풀을 유지. </li></ol> 3. sensitized 젤라틴 입자의 Reconstitution <ol><li> sensitized 젤라틴 입자 중 하나 유리병 (동결 건조 분말로 제공)에 키트에 포함된 reconstitution 버퍼의 1.5 ML를 추가합니다. </li><li> 부드러운 감청에 의해 잘 믹스 </li><li> 4 재구성 sensitized 입자 ° C. 유지 재구성 젤라틴 입자는 4 ° C에 보관 적어도 이주 활성화 될 수 있지만, 단지 분석하기 전에 준비를해야합니다. </li></ol> 중요 사항 : sensitized 젤라틴 입자의 응집이 아닌 이미지는 입자의 많은에 의해 다를 수 수 있기 때문에, sensitized 젤라틴 입자의 다른 많은 혼합하지 마십시오. 각 실험, sensitized 젤라틴 입자의 단일 많이 사용해야합니다. 4. PV 식별 PA 분석 <ol><li> 마이크로 적정 플레이트를 준비합니다. 한 바이러스 샘플의 식별을 위해, 우리는 5 웰스 필요 + 적어도 하나의 대조군 (아래에 바이러스 및 항체없이 sensitized 입자 잘 # 6. 예에 대한 바이러스 및 항체 컨트롤을 참조하지 않음). 웰스의 총수는 분석에 + 하나 이상의 컨트롤 5 X 샘플입니다. 중요 사항 : 분석에 적어도 하나의 어떤 바이러스 및 항체 제어권을하시기 바랍니다. sensitized 입자 중 하나 유리병 10 바이러스 샘플을 식별 약입니다. </li><li> 마이크로 적정 플레이트 12 μL / 음 방지 PV 항체이나 GM의을 추가합니다. (아래 예제 참조) 다음과 같이 접시의 배열입니다. 항체 (물론 # 1 6)없이 샘플에서, 12 GM의 μL 대신 방지 PV 항체를 추가합니다. 중요 사항 : 많은 PV 샘플이 분석에서 테스트해야하는 경우, 멀티채널 피펫 또는 디스펜서이 단계에 대한 도움이 될 것입니다. <table border="1"><tbody><tr><td> 웰 # 1 </td><td> 웰 # 2 </td><td> 그럼 # 3 </td><td> 웰 # 4 </td><td> 웰 # 5 </td><td> 웰 # 6 </td></tr><tr><td> GM </td><td> 안티 P1 2 3 </td><td> 안티 - P1이 </td><td> 안티 P2 3 </td><td> 애니 - P1의 세 </td><td> GM </td></tr></tbody></table></li><li> 12 μL / 웰의 바이러스 샘플을 추가합니다. 바이러스없이 한 샘플 (물론 # 6)에서, 12 GM의 μL 대신 바이러스 솔루션을 추가합니다. 참고 : 바이러스 샘플 감염된 세포, 보통 L20B 셀 또는 RD 세포의 문화 뜨는입니다. 중요 사항 : 많은 PV 샘플이 분석에서 테스트해야하는 경우, 멀티채널 피펫이 단계에 대한 도움이 될 것입니다. <table border="1"><tbody><tr><td> 웰 # 1 </td><td> 웰 # 2 </td><td> 그럼 # 3 </td><td> 웰 # 4 </td><td> 웰 # 5 </td><td> 웰 # 6 </td></tr><tr><td> 바이러스 샘플 </td><td> 바이러스 샘플 </td><td> 바이러스 샘플 </td><td> 바이러스 샘플 </td><td> 바이러스 샘플 </td><td> GM </td></tr></tbody></table></li><li> 실내 온도 ° C 4에서 재구성 sensitized 입자 솔루션을 가지고, 천천히 완전히 입자를 중지 누릅니다. 중요 사항 : 부드러운 감청에 의한 입자의 완전한 정지 후, 입자가 정지 입자 precipita 전에 접시에 즉시 추가되어야테와 형식이 아닌 단일 솔루션입니다. </li><li> 25 μL / 음의 모든 우물에 sensitized 입자를 추가합니다. 중요 사항 : sensitized 입자를 추가 후, 접시는 즉시 샘플 균일한 반응을 시작하는 혼합 플레이트를 받게됩니다. 따라서, sensitized 입자의 추가는 접시에있는 샘플 간의 시간 지연을 최소화하기 위해 디스펜서를 사용하여 수행되어야합니다. </li><li> 접시 믹서에 마이크로 적정 판을 넣어 30 초에 대한 번호판을 섞는다. </li><li> 상온에서 테이블에 흰 종이에 마이크로 적정 플레이트를 (시각 관찰 편의를 위해) 올려 (15 ~ 30 ° C) 2 H. 중요 사항 : 결과 관찰하고 복용 사진에 대한 반응 중 후 접시를 이동하지 마십시오. 형성 응집이 안정되지 않으며 쉽게 접시를 이동하여 방해. </li><li> 접시의 사진을 찍어. 중요 사항 : 사진의 부분을 볼 해석에 대한 결과를 나중에 심사 및 검토를위한 충분한 데이터를 얻을 수 없습니다. 여러 사진이 우물의 응집 이미지에 초점을 접시의 모든 우물을 커버로 이동해야합니다. </li></ol> 5. 결과의 해석 <ol><li> 긍정적이고 부정적인 우물의 식별. 아니오 바이러스 및 항체 제어 (젤라틴 입자가 아닌 응집의 강수량) (그림 1 및 2)의로 샘플의 응집을 비교합니다. 분명하게 노 바이러스없이 항체 제어 (비 응집, 대조군)에서 구별 아르 응집의 이미지는 긍정적인 판단되어야하고, 대조군과 유사한 유착의 이미지는 부정적으로 판단해야합니다. 분명하지만 일부 분만 응집을 보여 샘플은 '긍정적인 (일부 응집)'로 긍정하지만, 기록으로 판단 될 수 있습니다. </li><li> PV의 식별. PV의 serotypes를 식별하는 안티 - PV 항체와 긍정적이고 부정적인 우물에 따라 결과를 해석한다. 결과의 해석 원리는 세포 배양 시스템에서 중화 시험 (예 : 긍정적인 안티 - P1이 항체에 대한 샘플 타입 3 PV가 포함되어 있음을 나타냅니다)의 유사합니다. </li></ol> 6. 대표 결과 PA 분석 PV 식별 대표 결과는 그림 1에 표시됩니다. 모든 PV의 변종이 sensitized 젤라틴 입자 (노 항체 샘플)의 응집을 형성. 해당 안티 PV 항체, 아니 바이러스와 유사한 젤라틴 입자 (비 응집)의 강수량없이 항체 제어 (대조군)의 면전에서 (예를 들어, PV1 (사빈) 안티 - P1이의 존재 또는 관찰되었다 안티 P3 1 항체). <img src="/files/ftp_upload/2824/2824fig1.jpg" alt="그림 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 1"> 그림 1. PV1 (사빈)의 PA 분석하여 PV의 식별. 바이러스 솔루션, PV2 (사빈) 및 PV3 (사빈) (1.2 X 10 8 CCID 12분의 50 μL, 8.2 X 10 7 CCID 12분의 50 μL의 바이러스 titers, 그리고 3.5 X 10 7 CCID 12분의 50 각각 μL가) PA 분석하여 식별을 위해 사용되었습니다. 대한 바이러스없이 항체 제어 젤라틴 입자 (비 응집, 대조군)의 강수량을 보여 않습니다. <img src="/files/ftp_upload/2824/2824fig2.jpg" alt="그림 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 2"> 그림 2. 긍정적이고 부정적인 우물의 해석. PV1 (사빈)의 바이러스 솔루션, PV2 (사빈) 및 PV3 (사빈) (2.4 X 10 8 CCID 25분의 50 μL의 바이러스 titers, 1.7 X 10 8 CCID 25분의 50 μL와 각각 7.3 X 10 7 CCID 25분의 50 μL가) 320분의 1 to 20분의 1 희석되었고, 다음 희석 시료 25 μL는 안티 - PV 항체없이 PA 분석을 면밀히 검토했다.

<ol><li>World Health Organization. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Polio+Laboratory+Manual+%284th+edition%29+WHO%2FIVB%2F04.10%22">Polio Laboratory Manual (4th edition) WHO/IVB/04.10</a>. , 4th Edition, World Health Organization. (2004).</li>
<li>Arita, M., Masujima, S., Wakita, T., Shimizu, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+particle+agglutination+method+with+soluble+virus+receptor+for+identification+of+poliovirus%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Development of a particle agglutination method with soluble virus receptor for identification of poliovirus.</a> J. Clin. Microbiol. 48, 2698-2702 (2010).</li>
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<li>McDermott, B. M., Rux, A. H., Eisenberg, R. J., Cohen, G. H., Racaniello, V. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two+distinct+binding+affinities+of+poliovirus+for+its+cellular+receptor%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biol.+Chem%22%5BJournal%5D)">Two distinct binding affinities of poliovirus for its cellular receptor.</a> J. Biol. Chem. 275, 23089-23096 (2000).</li>
<li>Pipkin, P. A., Wood, D. J., Racaniello, V. R., Minor, P. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterisation+of+L+cells+expressing+the+human+poliovirus+receptor+for+the+specific+detection+of+polioviruses+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Virol.+Methods%22%5BJournal%5D)">Characterisation of L cells expressing the human poliovirus receptor for the specific detection of polioviruses in vitro.</a> J. Virol. Methods. 41, 333-340 (1993).</li>
<li>Avoort, H. G. vander <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+study+of+five+methods+for+intratypic+differentiation+of+polioviruses%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Comparative study of five methods for intratypic differentiation of polioviruses.</a> J. Clin. Microbiol. 33, 2562-2566 (1995).</li>
<li>Kilpatrick, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+group-%2C+serotype-%2C+and+vaccine+strain-specific+identification+of+poliovirus+isolates+by+real-time+reverse+transcription-PCR+using+degenerate+primers+and+probes+containing+deoxyinosine+residues%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Rapid group-, serotype-, and vaccine strain-specific identification of poliovirus isolates by real-time reverse transcription-PCR using degenerate primers and probes containing deoxyinosine residues.</a> J. Clin. Microbiol. 47, 1939-1941 (2009).</li>
</ol>

Souji Masujima 새​​로운 제품 디자인학과, Fujirebio 주식 회사의 직원입니다

이 PA의 분석의 독특한 점은 PV 2의 검출을위한 안티 - PV 항체 대신 PVR 분자의 활용이다. 이것은 PV 3-6의 세 serotypes에 균일 친화력과 PV와 sensitized 젤라틴 입자의 구체적인 상호 작용을 허용합니다. PVR의 monomeric 형태 virion에서 단일 바인딩 사이트에만 중간 동질성 (~ -8 M 10 -7의 해리 상수) 7을 가지고 있기 때문에 우리는, 젤라틴 입자의 sensitization에 대한 PVR의 immunoadhesin 양식을 (PVR - IgG2a) 사용 8, 성공적으로 PV의 격리와 sensitized 젤라틴 입자의 특정 응집을 관찰했다. 높은 특이성과 sensitized 입자의 균일 친화력으로 PA 분석의 PV 식별의 중요한 요인은 바이러스 titer (PA 분석하여 PV의 유효 감지)과 2) 응집의 해석 (PV의 정확한 식별을위한)) 일아르 . <...

<table border="1"><tbody><tr><th> 시약의 이름 </th><th> 회사 </th><th> 카탈로그 번호 </th><th> 댓글 </th></tr><tr><td> Sensitized - 젤라틴 입자 </td><td> Fujirebio 주식 회사 </td><td></td><td> 테스트 키트 </td></tr><tr><td> Reconstitution 버퍼 </td><td> Fujirebio 주식 회사 </td><td></td><td> 테스트 키트 </td></tr><tr><td> Microtitration 플레이트 </td><td> Fujirebio 주식 회사 </td><td></td><td> 테스트 키트 </td></tr><tr><td> 안티 PV 항체 </td><td> RIVM </td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

poliovirus 식별을위한 입자 응집 방법

Particle Agglutination Method for Poliovirus Identification

세계 소아 마비 박멸 이니셔티브에서 실험실 진단 급성 이완된 마비 (AFP) 가지 경우 대변 샘플에서 PV를 분리하고 식별하여 중요한 역할을한다. 세계 보건기구 (WHO)의 글로벌 소아 마비 실험실 네트워크, PV 고립과 신원은 현재 각각 세포 배양 시스템 및 실시간 RT - PCR을 사용하여 수행되고있다. PV의 포스트 박멸의 시대에, 간단하고 신속한 식별 절차는 국가 실험실에서 소아 마비 가지 경우 신속한 확인 도움이 될 것입니다. 현재 연구에서 우리는 PV 식별용으로 개발된 새로운 PA 분석의 절차를 표시합니다. 이 PA의 분석은 PV 수용체 (PVR) 분자와 PV의 모든 serotypes에 구체적이고 균일 친화력이다 virion의 상호 작용을 활용합니다. 절차는 간단합니다 (반응 판에 한 단계 절차)와 빠른 (결과는 반응 2 H 내에서 얻을 수있다), 그리고 그 결과는 시각 (젤라틴 입자 응집의 관찰) 관찰합니다.

바이러스 수용체 분자를 이용한 최근에 개발된 새로운 입자 응집 (PA) 분석은 poliovirus (PV)의 신속하고 쉬운 식별을 허용했다. 이 문서에서는, 우리는 PV 식별을 위해 PA 분석을위한 절차를 표시합니다.

Poliovirus 식별을위한 입자 응집 방법

글로벌 소아마비 박멸 이니셔티브(Global Polio Eradication Initiative)에서 실험실 진단은 급성 환자의 분변 검체로부터 폴리오바이러스(PV)를 분리하고 식별함으로써 결정적인 역할을 수행합니다.

다음 절차의 전체적인 목표는 간단한 프로토콜을 사용하여 폴리오 바이러스 분리주를 신속하게 식별하는 것입니다. 본 분석에서는 인간 폴리오바이러스 수용체의 세포 외 도메인과 IgG2 fc가 연결된 키메라 분자로 코팅된 감작 젤라틴 입자를 사용합니다. 이 입자들은 모든 혈청형의 폴리오바이러스 분리주에 대해 균일한 친화력을 가지므로, 인간 폴리오바이러스가 포함된 시료와 함께 배양하면 입자의 응집이 일어납니다.하지만 샘플에서 분리된 특정 바이러스를 인식할 수 있는 항체가 존재하면 중화 반응이 일어나 응집이 억제되므로, 이 실험 시스템을 사용하여 폴리오바이러스 분리주를 단일 단계 반응으로 신속하게 식별할 수 있습니다. 기존의 중화 시험과 같은 방식과 비교했을 때 이 기술의 주요 장점은 절차와 해석이 매우 간편하여, 필요한 노동력을 줄이고 결과를 도출하는 시간을 단축할 수 있다는 점입니다. anti PV one, PV two 및 PV three 항체를 재구성하려면 각 바이알에 0.5 milliliters의 물을 추가하십시오.그 다음 각 항체 용액을 4.5 milliliters의 유지 배지가 들어 있는 별도의 튜브로 옮깁니다. 일부 anti PV 항체 로트는 재구성된 형태로 제공되므로, 이러한 anti PV 항체 로트의 경우 재구성을 위한 물 첨가가 필요하지 않습니다.다음으로, 새로 라벨을 붙인 튜브에 혼합 항체 용액을 일대일 비율로 섞어 최종 부피가 3.6 milliliters가 되도록 준비합니다. 예를 들어, anti PV one 1.8 milliliters와 anti PV two 1.8 milliliters를 혼합합니다. anti PV one 및 PV two 조합을 준비하기 위해, 가능한 모든 쌍의 조합에 대해 이 과정을 반복하고, 또한 각 항혈청을 1.2 milliliters씩 함께 섞어 세 종류의 항체를 모두 포함하는 용액을 준비합니다.각 항체 용액에 720 µL의 FCS를 첨가하여 네 가지 혼합물을 만듭니다. 이는 분석 중에 항체에 의한 젤라틴 입자의 비특이적 응집을 줄이는 데 도움이 됩니다. 항체 풀은 응집 분석에 사용될 때까지 -20 °C에서 보관할 수 있습니다.본 분석법에서는 인간 폴리오바이러스 수용체의 세포 외 도메인과 마우스 FC 도메인의 IgG2가 코팅된 동결건조 젤라틴 입자를 사용합니다. 응집 이미지의 일관성을 보장하기 위해 한 실험 내에서 서로 다른 로트의 입자를 섞어 쓰지 말고 단일 로트의 입자만을

particle-agglutination-method-for-poliovirus-identification

Research

연구

JoVE Journal

Immunology and Infection

면역학 및 감염학

인플루엔자 바이러스의 게놈은 RNA와 단백질 여덟 별도 단지, 칭했다 바이러스성 ribonucleoprotein 컴플렉스 (vRNPs)로 구성되어 있습니다. 본 논문은 글리세롤 기울기 정화 및 독감 vRNPs의 전송 전자 현미경의 시각화에 대해 설명합니다.

인플루엔자 바이러스성 Ribonucleoprotein의 단지의 정화 및 시각화

단일 바이러스 게놈 (SVG)는 단일 virons의 게놈을 분리하고 증폭하는 방법이다. 혼합 조립의 바이러스 현탁액하여 virion의 캡처 및 다운 스트림 처리하는 동안 게놈 전단을 줄이고, 아가로 오스를 포함하는 개별 우물 현미경 슬라이드에 유동 세포 계측법을 사용하여 정렬됩니다. 전체 게놈 증폭 시퀀싱에 적합한 유전 물질의 결과로 여러 변위 증폭 (MDA)를 사용하여 수행됩니다.

&#39;단일 바이러스 게놈&#39;을 사용하여 단일 비리의 분리 및 유전체 분석

이 문서에서는 단순 양적, 액상 친화 캡쳐 분석이 제공됩니다. 그것은 한 손으로 그리고 다른 한편으로는 태그를 단백질과 두 번째 레이블이 붙은 단백질 (예 : poliovirus) 간의 친화력에 자석 구슬 및 태그 단백질 (예 : nanobodies) 사이의 상호 작용을 기반으로 안정적인 기술입니다.

단백질 - 단백질 상호 작용 연구를 자성 비즈를 사용하여 액상 동질 캡처 분석 : Poliovirus-Nanobody의 예

이 비디오에서는 샘플에서 항원 표시 바이러스 유사 입자(VLP)를 분리하기 위해 VLP 포획 분석이라고 하는 면역침전 분석을 시연합니다. 항원은 자기 비드에 결합된 특정 항체와 결합하여 고정화된 항원-항체 복합체를 형성하고 나중에 추가 분석을 위해 분리 및 저장됩니다.

Virus-like Particles Capture Assay: 중화 항체 접합 마그네틱 비드를 사용하여 샘플에서 항원 표시 VLP를 분리하는 방법

이 비디오는 인플루엔자 A와 B 바이러스 간의 항원 관계를 분석하기 위한 이미징 기반 미세 중화 분석을 보여줍니다. 바이러스 감염 예방에 대한 항체 또는 기타 치료법의 효과를 평가할 수 있는 정량적이고 시각적인 방법을 제공합니다.

이미지 기반 미세중화 분석을 사용한 바이러스 간의 항원 관계 분석

바이오패닝 기술과 원자력 현미경을 사용하여 낮은 농도에서도 모든 생물학적 물질에 존재하는 질병 특이적 단백질 변이체에 대한 항체를 획득하는 음성 및 양성 바이오패닝 시스템을 만들었습니다.  우리는 근위축성 측삭 경화증(Amyotrophic Lateral Sclerosis)과 관련된 TDP-43 단백질 변이체에 대한 항체를 획득하는 데 성공했습니다.

루게릭 병에 TDP-43 변종 형태론 특정 시약의 분리에 대한 소설 원자 힘 현미경 기반 Biopanning

우리는 아데노바이러스(Ad)에 감염된 인간 세포에서 바이러스 복제 구획(RC)을 분리하는 새로운 전략을 제공합니다. 이 접근법은 바이러스 게놈 복제 및 발현을 조절하는 분자 메커니즘과 RC에서 확립된 바이러스-숙주 상호 작용의 조절을 밝히는 데 도움이 될 수 있는 무세포 시스템을 나타냅니다.

아데노 바이러스에 감염된 정상적인 인간의 세포에서 바이러스 복제 구획 풍부한 하위 핵 분수의 분리

인쇄된 글라이칸 마이크로어레이 전략을 사용하여 인플루엔자 A 바이러스 헤마글루티닌 열성 및 시알산 함유 수용체에 대한 특이성을 분석하기 위해 기존의 96웰 플레이트 분석을 소형화했습니다.

인플루엔자 바이러스 Hemagglutinins의 결합력 및 특이도를 평가하기위한 소형화 글리 칸 마이크로 어레이 분석

여기서, 우리는 감염된 아메바의 분리를 위한 단일 세포 마이크로 흡인 방법을 기술한다. 파우스토바이러스와 알려지지 않은 거대 바이러스에 감염된 Vermamoeba vermiformis의 바이러스 하위 집단을 분리하기 위해, 우리는 아래에 자세히 설명된 프로토콜을 개발하고 두 개의 저풍부 신규 거대 바이러스를 분리하는 능력을 입증했습니다.

거대한 바이러스 혼합물 분리를 위한 형광 활성화 세포 분류에 대한 대체 전략으로서의 단일 세포 마이크로 포부

여기서는 항원 표시 바이러스 유사 입자(VLP)에서 중화 에피토프를 검출하는 프로토콜을 제시한다. 인간 면역결핍 바이러스(HIV)-유래 VLP의 면역 침전은 단백질 G-컨쥬게이트 자기 비드에 결합된 봉투 당단백질 특이적 단일 클론 항체를 사용하여 수행된다. 포획된 VLP는 이후 바이러스 성 코어 단백질 개그 특이적 항체를 사용하는 SDS-PAGE 및 서양 블롯 분석을 받게 된다.

포획 분석기를 사용하여 바이러스와 같은 입자(VLP) 기반 백신에 표시되는 항원에서 중화에 민감한 에피토프 검출

이 원고는 최적화된 헤파린 기반 친화성 크로마토그래피 방법을 사용하여 아데노 관련 바이러스 벡터의 생성 및 정제를 위한 자세한 프로토콜을 설명합니다. 간단하고 확장 가능하며 비용 효율적인 접근 방식을 제시하여 초원심분리가 필요하지 않습니다. 생성된 벡터는 높은 순도와 생물학적 활성을 나타내며 전임상 연구에서 그 가치를 입증합니다.

단일 단계 및 반자동 Heparin Affinity Chromatography Protocol을 통한 Adeno-associated viral vectors 분리

학습하세요 폴리오바이러스 격리주를 신속하게 식별하는 입자 응집 분석법을 통해 바이러스학 진단의 효율성을 높이는 방법을 배우세요. 이 기술은 기존 중화시험보다 간단하고 빠른 결과를 제공합니다.

Poliovirus 식별을위한 입자 응집 방법

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