리어링을위한 최적화된 프로토콜 Fopius arisanus Tephritid 과일 Parasitoid 난다

FOIA Aus는 열대 지방 전역, 특히 이곳 하와이에서 심각한 경제적 해충인 과실파리를 공격하기 때문에 하와이에서 중요한 생물학적 방제 인자입니다. FOIA Aus의 장점은 해충의 알 단계를 공격하여 초기 단계에서 곤충을 제어한다는 점입니다. 다음 영상들에서 실험실 환경 내 FOIA Aus 사육 과정을 근접 촬영한 모습을 확인하실 수 있습니다.

본 프로그램의 마지막 부분에서는 이 특정 기생벌이 프랑스령 폴리네시아의 성공적인 방사 프로그램에 어떻게 활용되었는지에 대한 논의가 이어집니다. 먼저, 기주 초파리 알에 기생할 준비가 된 성체 기생벌을 이용한 프로토콜을 시작하겠습니다. 첫 번째 단계는 기생벌에게 제공할 초파리 알을 준비하는 것입니다.

다음으로, 초파리 유충이 부화하여 성장하고 번데기가 될 때까지 기다립니다. 초파리가 번데기 단계에 도달하면, 기생충을 농축하기 위해 크기별로 분류합니다. 마지막으로, 기생충이 우화하면 성숙할 때까지 사육합니다.

그 후 이들은 다시 만나 새로운 과일 묶이에 알을 낳을 준비를 합니다. 초파리 알을 통해 이 주기가 완료됩니다.

한 변의 길이가 약 10centimeters인 한천 블록을 만들어 초파리 알을 위한 기질 A를 준비합니다. 한천은 증류수 1liter당 한천 가루 9grams의 농도로 준비합니다.

평평한 표면에서 디쉬의 가장자리까지 액체 auger를 채우고, 최소 45분 동안 응고시킵니다. auger 블록이 응고되면, 각 auger 블록의 상단을 덮도록 티슈 페이퍼를 한 겹 덮습니다. 표면의 수분으로 인해 티슈가 auger에 쉽게 달라붙을 것입니다.

두 번째 롤링을 수행합니다. 초파리 알을 오거 블록의 조직 피복 표면에 도포합니다. 현탁액 상태의 초파리 알 0.5 milliliter는 블록당 약 6,000개의 알을 생성합니다.

물에 적신 2.5 centimeter 너비의 페인트 브러시를 사용하여 조직 표면에 초파리 알을 고르게 펴 바릅니다. 이제 기생충의 산란이 가능하도록 초파리 알을 기생충 케이지의 바닥 망 아래에 배치하며, 망의 아랫부분을 가볍게 두드려 초파리 알을 방해할 수 있는 죽은 기생충들을 제거합니다. 초파리 알은 기생충이 밤새 산란할 수 있게 합니다.

초파리 알의 높은 비율이 기생되기 위해서는 약 21시간이면 충분합니다. 노출 시간이 더 길어지면 중복 기생의 위험이 있습니다. 기생충 노출 후 알을 사육하는 데 필요한 주요 구성 요소는 초파리 유충 배지, 유충 배지 용기 및 번데기 용기입니다.

준비된 기생란 오거 블록 3~3.5개를 1.25L의 초파리 유충 배지가 담긴 용기에 넣습니다. 알이 들어 있는 배지 용기를 받침대 위에 올리고, 그 위에 1.5cm 깊이의 미세 등급 질석 또는 세척사가 깔린 번데기 형성 용기를 덮습니다.

마스킹 테이프로 번데기 용기의 가장자리를 테이핑합니다. 유충이 기어 나와 아래쪽의 버미큘라이트로 떨어질 수 있도록 먹이 용기의 상단과 번데기 용기 뚜껑 사이에 충분한 공간이 있는지 확인합니다. 번데기 용기를 27 °C, 상대 습도 80%의 실내로 옮겨 일주일 동안 보관합니다.

일주일 후 처음 4일 동안 용기를 두꺼운 천으로 덮어줍니다. 번데기 형성 용기를 열고 유충 먹이를 제거합니다. foia Airis를 사육하기 위해 Bre Dorsals를 호스트 초파리로 사용합니다.

Asfa 및 sitis 속의 다른 종들도 잠재적인 기주가 될 수 있습니다. 버미큘라이트에 입력되지 않은 유충이 있는 경우, 하룻밤 동안 번데기가 되도록 둔 후 체로 거릅니다. 버미큘라이트에서 번데기를 분리하려면 굵은 체와 큰 용기를 사용하십시오.

다음으로, 손 체를 사용하여 opia가 포함된 버미큘라이트(vermiculite) 덩어리를 제거합니다. 기생되지 않은 초파리와는 부분적으로 분리할 수 있습니다. 따라서 이전 연구 결과에 따라 직경 1.65에서 2.26 mm 사이의 aria만을 수집하며, 이보다 작은 것들은 대부분 크기가 미달인 기생벌을 포함하고 있습니다.

더 큰 체에는 주로 파리가 포함되어 있습니다. 번데기를 크기별로 분류하기 위해 다양한 방법을 사용할 수 있습니다. 본 영상에서는 수집된 기생된 aria를 위해 맞춤형 크기 분류기를 사용하는 기계적 방법을 설명하겠습니다.

암컷의 비율은 크기에 따라 증가합니다. 기계식 크기 선별기의 상단 깔때기에 치어를 넣습니다. 진동 피더가 치어들을 30도 각도로 약간 벌어진 한 쌍의 롤링 바 상단으로 이동시킵니다. 치어들은 개별적으로 슬롯 배열로 떨어지며, 깔때기를 통해 10개의 별도 용기로 배출됩니다.

크기가 1.65 millimeters에서 2.26 millimeters 사이인 고치들을 우화 케이지에 넣고, 기생된 고치에서 대부분의 파리가 우화할 때까지 7일 더 둡니다. 다음으로, 팬을 사용하여 살아있는 기생벌이 들어있는 고치와 빈 고치 껍질을 분리합니다. Opia Aus 군집을 유지하려면 각 변의 길이가 약 25 centimeters이며 전면 유리 제거가 가능한 기생벌 사육 케이지를 사용하십시오.

케이지 상단과 양측면에는 1 mm² 크기의 망이 설치되어 있습니다. 케이지 뒷면은 고무 시트로 덮여 있으며, 출입을 위한 9 cm 크기의 구멍이 있습니다. 케이지 바닥에는 컷아웃이 있으며, 내부에는 1~2 mm² 크기의 망으로 덮여 있습니다.

과일이 담긴 오거 블록 두 개와 기생충의 위치 선정을 위한 초파리 알을 배치할 수 있을 만큼 충분한 크기여야 합니다. 또한, 케이지 전면 유리의 하단 4분의 1 지점에는 기생충이 케이지 앞쪽으로 몰리는 것을 최소화하기 위해 색이 들어간 부분이 있어야 합니다. 선택한 배지를 약 11 grams 취해 지름 약 9 centimeters의 플라스틱 용기에 넣습니다.

이렇게 하면 케이지당 약 600에서 700마리의 기생충이 생성됩니다. 크기 선택을 통해 약 60%의 암컷을 확보해야 합니다. 용기에 스크린 뚜껑을 부착하십시오. 뚜껑은 2mm² 크기의 망으로 덮여 있어야 하며, 이는 우화 시 초파리가 용기를 빠져나갈 수 있게 하면서도 남아 있는 초파리들은 가두어 두는 역할을 합니다.

기생충을 24 °C, 상대 습도 약 45%, 12:12 광주기 및 양호한 환기 조건에서 사육하며, 케이지 상단에 원심 분리된 꿀을 최소 주 3회 선 모양으로 도포하십시오. 또는 가용한 꿀이 말랐을 때마다 손가락 끝을 이용하여 꿀을 좁은 선 모양으로 도포하십시오. 이때 꿀을 너무 두껍게 도포하면 케이지 내부로 꿀이 떨어질 수 있으며, 너무 얇게 도포하면 꿀이 빠르게 말라 자주 도포해야 하므로 주의하십시오. 기생충에게 수분을 공급하기 위해 가로세로 10 cm, 깊이 4 cm의 어거 블록(auger block)을 케이지 상단에 배치하십시오.

이 블록들은 일주일에 두 번 교체해야 합니다. 2001년에 저희는 프랑스령 폴리네시아에 생물학적 방제법을 도입하여 상황을 완화할 수 있는지 확인하기 위해 소규모 시드 그랜트를 받았습니다. 당시 동양초파리가 모든 열대 과일에 믿기 힘들 정도로 심각한 피해를 주고 있었기 때문입니다. 이곳 하와이에 있는 실험실에서 저희는 총 10회 분량을 발송했습니다.

따라서 이러한 각 운송분은 보통 약 10만 마리의 *Fopius arisanus*에 달했으며, 실제로는 그보다 훨씬 더 많았습니다. 우리는 기생벌이 들어 있는 동양초파리 PPE를 운송한 후 이를 우화시켰습니다. 우리는 타히티에 작은 실험실을 설치하여 이것들을 수령하고 *Fopius arisanus*를 우화시켰습니다. 그렇게 약 1년의 기간 동안, 우리는 거의 100만 마리의 *Fopius arisanus*를 방사했습니다.

전반적으로, 이것은 하와이 이외의 지역에서 가장 성공적인 사례입니다. 하와이에서 FOIA Aus가 처음 방출되었을 때, 이는 태평양 전역에서 초파리의 생물학적 방제에 대한 가장 훌륭한 예시가 되었습니다. 지난 10년 동안 전 세계적으로 Bactrocera dorsalis complex의 엄청난 확산이 있었습니다.

Bactrocera Carbo는 남미의 수리남으로 퍼졌으며, 현재는 브라질 북부에도 분포하고 있습니다. 또한 Bactrocera Inance라고 불리는 또 다른 종이 아프리카 전역으로 확산되어 온갖 피해를 주고 있습니다. 그리고 Bactrocera papaya의 확산 또한 있었습니다.

따라서 이러한 성공은 이제 남미, 아프리카 및 아시아의 다른 지역에 이러한 FOIA Aus를 출시할 수 있는 기회를 열어줍니다.