October 1st, 2007
성장 요인과 단백질의 다양한 세포가 개발하는 동안 다른 세포 운명을 맡을 유도하는 상호 작용. 여기 E2.5 여자의 배아에 구슬을 배치하여 개발에 서로 다른 단백질 간의 상호 작용 가능성을 해결하기 위해 비켜 준비의 사용을 보여줍니다.
Raburn Lab에 오신 것을 환영합니다. 저는 캘리포니아 대학교 어바인 캠퍼스(University of California Irvine)의 신경생물학 및 행동학과의 매트 콘(Matt Korn)입니다. 오늘 우리는 달걀을 가져다가 개봉하고 성장 인자에 담근 구슬을 놓을 것입니다.
난자의 놀라운 준비는 배아 발달의 초기 단계에서 여러 가지 다른 유형의 조직의 운명을 바꾸기 위해 성장 인자를 넣을 수 있게 해줍니다. 2일차 반, 또는 스테이지 17. 자, 이제 여기, 여기 스코프에 있습니다.
나는 내 달걀과 모든 도구를 가지고 있습니다. 그러니 가서 여기서 달걀을 뽑으면 우리 테이프가 어디에 있는지 볼 수 있습니다. 창 씰.
이 멋진 작은 도넛이 있습니다. 예술적인 점토로 만들어졌기 때문에 미술품 가게를 구할 수 있습니다. 그리고 저는 정말 나쁜 다섯 개의 집게를 가져갈 것입니다.
이것들은 오랫동안 사용되어 왔습니다. 팁 팁은 꽤 무디지만 창이 올라올 만큼만 테이프를 들어 올리는 데 효과적입니다. 나는 그것들을 내려놓을 수 있다.
이걸 접어서 달걀을 집어넣고, 이 창문을 저기 뒤에 넣으면 돼요. 이제 범위 아래에 놓고 모든 유형의 조작을 할 수 있습니다. 이 경우, 우리는 구슬을 만들 것이고, 저는 인도 잉크가 없는 지금 당장 인도 잉크를 잡을 것입니다.
보시다시피 바로 여기에 약간의 배아 디스크가 있고 약간 옆으로 치우쳐 있습니다. 그래서 만약 제가 난자를 뒤집기만 한다면, 저는 피의 일부가 여기에서 원을 형성하고 있는 곳을 볼 수 있습니다. 그리고 저는 계속해서 인도 잉크로 바늘을 얻을 수 있습니다.
그리고 저는 여기 옆으로 내려와서, 디스크 밑으로 들어가 볼 건데, 거기에는 배아가 있습니다. 나는 배아와 흑인의 대조를 볼 수 있을 만큼 그것을 너무 많이 넣고 싶지 않다. 그런 다음 배아의 명단 부분이 앞을 향하도록 이것을 회전시킬 것입니다.
그리고 여기서 볼 수 있는 것은 세팔론 지역입니다. 신경관이 여기로 다시 돌아오고 우리는 그것을 노화시킬 수 있는 몇 가지 소마구를 가지고 있습니다. 제가 확대해서 들여다보면, 심장이 매우 느리지만 일관되게 박동하는 것을 볼 수 있습니다.
심장은 있었지만 뛰지 않았습니다. 우리는 이것이 중요한 샘플인지 아닌지에 대해 약간 걱정해야 할 것입니다. 그래서 그 위에는 정말 두꺼운 멤브레인이 없기 때문에 여기에서 텅스텐 프로브로 진행할 수 있습니다.
저는, 그리고 저기 얇은 막이 있고, 저는 배아에 접근할 수 있도록 여기로 비켜갈 것입니다. 우리는 전뇌와 뒷뇌에 구슬을 꽂습니다. 그리고 이건, 저는 전뇌를 연구할 것입니다.
이제 그것에 도달하기 위해 멤브레인을 잘라야 합니다. 이제 아이들이 더 어렸을 때, 저는 텅스텐 프로브를 사용하여 신경관을 통해 들어갈 수 있고, 제가 구슬을 넣고자 하는 부위에 접근할 수 있습니다. 이제 텅스텐 프로브로 진행하겠습니다.
그리고 저는 손을 안정시키기 위해 두 손을 사용하고 있습니다. 나는 계속해서 배아를 움직일 것입니다. 그래서 일단 구슬을 여기에 넣으면 신경관에 직접 넣고 전뇌까지 넣을 수 있습니다.
자, 이제 배아를 열었으니 배아를 준비하고 구슬을 놓을 수 있습니다. 그래서 제가 할 일은 프로브를 조금 더 깊숙이 꽂고 신경관을 여는 것인데, 보시다시피 제가 거기서 한 것을 볼 수 있습니다. 조금 더 자세히 확대해 보겠습니다.
여기서 초점을 조금 바꿔 보겠습니다. 보시다시피 거기에 멋진 작은 구멍이 있지만 꼬리 세팔론이 있는 곳 위에 구멍을 뚫지 않았는데, 그것은 구슬이 갈 곳이 거기에 있기 때문입니다. 그래서 구슬이 떠다닐 수 있는 구멍을 원하지 않습니다.
나는 그것을 약간 뒤로 원하기 때문에 구슬을 넣고 앞으로 밀 수 있습니다. 이제 구슬을 가져오러 가겠습니다. 다양한 크기가 있는 것을 볼 수 있습니다.
이것들은 헤파린 아크릴이며 PBS에 있습니다. 저는 계속해서 55개의 집게를 가져갈 것입니다. 보시다시피 저는 PBS에 들어가서 제가 좋아하는 것을 찾을 것입니다.
그리고 일단 PBS에서 나오면 일반적으로 저기 집게에 달라붙어 저기서 볼 수 있습니다. 계속해서 구슬을 덮으십시오. 내 난자를 다시 가져와.
달걀에 초점을 맞출 것입니다. 그래서 저는 55개의 겸자에 구슬을 가져갈 것입니다. 내가 좋아하는 집게에서 조금 더 높지만 저기 있습니다.
그리고 저는 신경관에 구멍을 뚫은 곳으로 안내할 것입니다. 일단 신경관에 넣으면 발달 중인 뇌의 앞쪽을 조작하기가 쉬워집니다. 그래서 저는 텅스텐 프로브를 가지고 밀어 넣기만 하면 됩니다.
두족에 구슬을 놓을 때 배아가 나이가 들면서 앞으로 구부러지기 시작하고 옆으로 구부러지기 시작하기 때문에 주의해야 합니다. 그리고 많은 경우 전뇌에 구슬을 놓을 때 세팔론에게 부리가 뇌가 등쪽 부위에 있는 배아의 복부 부분에 형성되기 때문에 부리 쪽으로 떨어질 것이라고 말합니다. 그러나 이것은 꽤 좋아 보입니다.
나는 이것에 상당히 만족한다. 계속해서 10마이크로리터의 멸균 PBS가 든 피펫을 가져와서 여기에 몇 방울만 떨어뜨리겠습니다. 자, 이제 우리는 계속해서 달걀을 닫을 수 있습니다.
제가 할 일은 창문을 여기로 올리고, 위로 올리고, 또 다시 올리면 난자가 아직 밀봉되지 않은 것입니다. 그래서 제가 하고 싶은 것은, 마르지 않도록, 우리가 사용해온 이 플라스틱 테이프를 가져다가 한 조각만 자르는 것입니다. 창문보다 조금 더 큰 크기와
비슷합니다.그리고 저는 그것을 약간 늘려서 여기 창문 바로 위에 놓고 멋지고 포근하게 만들 것입니다. 그래서 우리가 알부민을 배수하거나 창문을 자를 때 만든 구멍은 모두 밀봉되어 있습니다. 이제 계란이 밀봉되어 우민을 잃을 수 없으며 건조하지 않습니다.
정상적으로 노화 할 수 있어야합니다. 이것이 비드 배치를 위한 것입니다. 당신의 병아리 실험에 행운을 빌며, 당신이 원하는 결과를 얻었기를 바랍니다.
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이 연구는 체내 준비를 사용하여 배아 발달 동안 성장 인자와 단백질 간의 상호작용을 탐구합니다. E2.5 닭 배아에 성장 인자에 적셔진 비드를 배치함으로써, 이 연구는 이러한 인자가 어떻게 세포의 운명에 영향을 미치는지 밝히는 것을 목표로 합니다.
This method enables spatially and temporally controlled delivery of growth factors in a vertebrate embryo, supporting mechanistic interrogation of signaling pathways critical for early neurodevelopment. By allowing sustained exposure and real-time observation of phenotypic changes, it provides a disease-relevant system for de-risking target hypotheses in preclinical discovery. The approach supports predictive confidence in pathway modulation before committing to compound screening or lead optimization efforts.
The method fits within early discovery to validate targets and pathway mechanisms before assay development and screening cascades, providing biological context for compound screening in neurodevelopment.