두개골 방사선 치료에 의한인지 감소를 Quantifying

뇌 종양의 radiotherapeutic 관리로 인한인지 장애에 부정적인 삶의 질을 영향 임상 처치하기 어려운 상태를 나타냅니다. 비판적으로 방사선 - 유발인지 감소를 ameliorating에 대한 잠재적인 개입을 평가하는 능력은 궁극적으로인지의 엄격한 양적 평가를 수행하는 기능에 따라 달라집니다.

이 절차의 전반적인 목표는 두개골 방사선 조사로 인한 행동 및 인지 변화를 정량화하는 것입니다. 첫 번째 단계는 새로운 장소 인식 작업을 사용하여 해마 기반 공간 인식 메모리를 테스트하는 것입니다. 다음으로, 해마 및 편도체 의존적 맥락적 공정 조건화 작업을 사용하여 elevated plus maze task, fear-based memory formation을 사용하여 불안 수준을 평가한 다음 amygdala dependent queued fear conditioning task를 측정합니다.

마지막 단계는 공간 학습, 공간 기억 및 역 학습 능력을 평가하기 위해 Maurice Water Maze 과제를 관리하는 것입니다. 궁극적으로 이 프로토콜은 기분, 공간 및 비공간 학습 및 기억의 변화뿐만 아니라 두개골 조사로 인한 감각 운동 장애를 감지합니다. 이 방법은 두개골 조사가 행동과 인지에 미치는 영향에 대한 통찰력을 제공할 수 있습니다.

또한 화학 요법 또는 화학 요법으로 인한 학습 및 기억 장애의 경우와 같이 다른 치료법의 원치 않는 부작용으로 인지가 손상된 다른 상황에도 사용할 수 있습니다. 이 방법을 처음 접하는 개인은 장비를 설정하고 최적화하는 데 시간이 많이 걸리기 때문에 어려움을 겪을 것입니다. 실험 절차가 엄격하게 통제되지 않는 경우 결과를 해석하기 어려울 수 있으며, 데이터의 변동으로 인해 대조군과 실험군 간의 차이를 감지하기 어렵습니다.

이러한 방법론의 시각적 시연은 매우 중요하므로 독자는인지 테스트가 수행되는 조직 또는 실험실과 관련된 미묘함과 사용 된 특정 절차를 이해할 수 있습니다. 동물을 일관되게 다루기 위해 테스트 환경을 준비하고 70% 에탄올로 두 개의 동일한 플라스틱 블록을 철저히 청소하고 경기장 내의 특정 위치에 배치하여 익숙해 단계를 시작합니다. 동물을 경기장 중앙에 놓고 자유롭게 탐험할 수 있도록 합니다.

5분 동안 탐색 동작에 점수가 매겨집니다. 자동 추적 시스템을 사용하여 탐사는 동물의 코가 반경 4cm 이내에 있고 블록을 향하는 것으로 정의됩니다. 시간이 다 되면 동물을 5분 동안 수용 케이지로 옮깁니다.

이 시간 동안 70% 에탄올로 테스트 경기장을 청소하십시오. 블록의 동일한 복사본 하나를 익숙화 단계에서와 동일한 공간 위치에 추가하고 다른 하나를 새로운 공간 위치에 추가합니다. 5분 지연 간격이 지난 후, 5분간의 실험 단계를 위해 동물을 실험장에 다시 들여보내고 3분 동안 자유롭게 탐험할 수 있도록 합니다.

익숙화 단계에서 블록의 공간 배치를 기억하면 쥐는 새로운 공간 위치에서 블록을 탐색하는 데 더 많은 시간을 할애할 것입니다. 다음 날, 동물들은 다시 한 번 투기장으로 돌아갑니다. 24시간 테스트 단계의 경우, 다시 한 블록은 익숙한 위치에 유지되고 다른 블록은 소설에 있습니다.

첫째, 동물을 경기장 중앙에 놓고 3분 동안 탐험을 기록합니다. 높은 플러스 미로는 설치류의 불안 수준을 측정합니다. 테스트하기 전에 미로가 철저히 청소되었는지 확인하십시오.

먼저 동물을 실험자로부터 팔을 벌린 채 마주 보고 있는 미로의 중앙 부분에 동물을 배치하고 5분 동안 탐험하도록 합니다. 열린 팔과 닫힌 팔에서 보낸 시간과 입력 횟수는 자동 추적 소프트웨어를 사용하여 추적됩니다. 쥐가 미로에서 떨어지면 재빨리 팔을 벌려 놓고 이벤트를 기록합니다.

또한 가능한 원인과 함께 동결 동작을 기록하십시오. 공포 조건화는 동물이 이전에 중립적이었던 자극을 두려워하는 법을 배우는 행동 패러다임입니다. 첫날에 유독한 자극과 짝을 이루어 동물을 철저히 청소된 방에 넣으십시오.

세 단계로 구성된 교육 시험을 시작합니다. 첫 번째는 훈련 단계에서 충격이나 톤이 투여되지 않는 5분 기준선 단계로, 5분 동안 여러 톤 쇼크 페어링이 제공됩니다. 마지막으로, 훈련 후 단계에서 동물에게 5분이 더 주어집니다.

충격이나 신호음이 없을 때, 각 동물이 얼어붙는 데 소비하는 시간의 비율은 기준선 단계의 마지막 60초와 훈련 후 단계의 마지막 60초부터 측정됩니다.24시간 후, 5분간의 상황 테스트를 위해 동물을 챔버로 되돌리고 테스트 1시간 후 얼어붙는 데 소요된 시간의 백분율을 기록합니다. 익숙한 맥락에서 그리드 바닥을 제거하고 챔버 외부에 패널을 추가한 다음 향이 나는 가정용 세제로 청소합니다.

단서 공포 조건화를 테스트하기 위해 동물을 새로운 맥락에 놓고 이전에 유해한 자극과 쌍을 이룬 음색의 유무에서 얼어붙는 행동을 기록합니다. Morris Water Maze는 불투명한 물이 가득한 큰 웅덩이에서 물에 잠긴 탈출 플랫폼을 찾기 위해 원위 신호를 사용해야 하는 공간 학습 테스트로, 작업은 8일에 걸쳐 관리되며 대기열 테스트 및 수집의 4단계로 구성됩니다. 24시간 프로브 테스트 및 반전 학습 테스트.

대기 테스트를 시작하려면 플랫폼 중앙에 뚜렷한 검은색과 흰색 깃발을 배치하여 동물이 탈출 위치를 명확하게 알 수 있도록 합니다. 각 CUD 테스트 시험에 대해 동물을 수영장 주변의 미리 결정된 다른 시작 위치에 놓고 플랫폼을 다른 사분면으로 이동합니다. 네 번의 시도 각각에 대해 동물이 탈출 플랫폼을 찾을 수 있도록 30초 동안 시간을 줍니다.

최대 시간에 도달하면 동물을 직접 안내하십시오. 동물을 따뜻하게 한 우리에 넣기 전에 20초 동안 플랫폼에 그대로 두십시오. 다음 날, 5일 연속으로 하루에 4번의 시도로 구성된 수집 단계를 시작합니다.

이 단계에서 숨겨진 플랫폼은 동일한 위치에 유지되고 동물은 해당 플랫폼으로 이동하는 방법을 배웁니다. 원위실 신호를 사용하여 동물을 미리 결정된 다른 시작 지점의 수영장에 배치합니다. 각 시도에 대해 플랫폼을 찾기 위한 평균 대기 시간과 경로 길이를 공간 학습의 척도로 기록합니다.

동물이 최대 수영 시간인 60초 이내에 탈출하지 않은 경우 수동으로 플랫폼으로 안내하고 20초 동안 그대로 두십시오.최종 훈련 시험 후 24시간 후, 플랫폼을 제거하는 62차 프로브 시험을 수행하여 플랫폼을 포함하는 데 사용된 사분면에 대한 동물의 선호도를 확인합니다. 이 프로브 시험에 이어 플랫폼을 동일한 사분면으로 되돌리고 Reversal Learning 테스트를 위한 세 가지 추가 획득 시험을 관리합니다.

여덟 번째 날에는 플랫폼을 새 위치로 이동합니다. 동물을 수영장에 소개하고 이전 위치에서 플랫폼을 찾는 데 소요된 시간과 여기에서 새 위치를 비교하는 데 소요된 시간을 측정합니다. Control and Irradiated Animals In the Novel Place Recognition Task의 결과는 친숙화 단계에서 두 위치가 동일하게 탐색되었음을 보여주었습니다.

그러나 대조군 동물은 5분 및 24시간 지연 간격에 따른 새로운 공간 위치에 대한 명확한 선호를 보인 반면 방사선 조사를 받은 동물은 그렇지 않았습니다. 고가와 미로에서 통제 및 방사선 조사된 동물들은 우연히 예상할 수 있는 것보다 열린 팔을 탐험하는 데 더 적은 시간을 보냈습니다. 챔버에 처음 노출되었을 때의 결빙 비율은 다음 날 훈련 후 기간에 비해 매우 낮았습니다.

얼어붙는 행동은 여전히 익숙한 맥락에서 증가했지만, 새로운 맥락에 놓였을 때 방사선에 노출된 동물에서는 훨씬 덜했지만, 얼어붙는 행동은 기준선 수준으로 돌아갔지만 Morris Water Maze에서 음색이 표현됨에 따라 다시 높아졌습니다. Task Control Animals는 방사선을 조사한 동물에 비해 연속적인 실험을 통해 탈출 플랫폼을 더 빨리 찾았습니다. 방사선에 노출된 동물은 또한 프로브 시험에서 플랫폼까지 더 많은 시간과 더 긴 경로가 필요했으며, 24시간 후 반전 학습 테스트에서 플랫폼의 위치가 전환되면 일반 동물은 점차적으로 이전 사분면 검색을 중단하고 새 플랫폼 위치를 학습하는 반면 방사선 조사된 동물은 그렇지 않습니다.

이러한 작업을 수행하는 동안 비정상적인 이벤트나 동작뿐만 아니라 데이터를 분석하기 전에 해결해야 하는 추적 문제에 대해 자세히 기록하는 것이 중요합니다. 실험 동물과 함께 작업하는 것은 위험할 수 있으며 이러한 절차를 수행할 때 항상 개인 보호 장비 사용과 같은 예방 조치를 사용해야 한다는 것을 잊지 마십시오. 동물의 안전하고 윤리적인 사용을 위해 기관의 승인을 받고 기관 및 연방 지침을 따르는 것도 중요합니다.