Name: 쥐에서 자당의 갈망의 보육을 평가하기위한 일반적인 방법 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-11-04T12:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 44 s
Description: 학습하세요 쥐에서 자당 자기투여 후 강제 금단 기간에 따른 갈망의 보육 현상을 평가하는 방법을. 이 기법은 중독 연구에서 재발 메커니즘을 이해하는 데 활용됩니다.

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이 원고 및 비디오 제작은 보건 부여 R15의 약물 남용 / 국립 연구소 DA016285 - 02, 신경 과학 이니셔티브에있는 웨스턴 워싱턴 대학 바이오 메디컬 연구 활동에 국립 연구소, 그리고 웨스턴 워싱턴 대학에 의해 지원되었다.

1. 동물 과목 <ol><li> 남자 장기 에반스의 쥐이 연구의 시작 3 개월입니다. 쥐 웨스턴 워싱턴 대학 동식물 사육장에서 자란 (길로이, 캘리포니아, 미국) 시몬 슨 - 파생되며 Purina 밀 주식 Mazuri의 설치류 동반한 (회색 회담과 12 - H 역방향 주 / 야주기 (0700에서 꺼주)에 개별적으로 보관되어 아르 , MO, 미국)와 물 사용 가능한 광고 libitum. </li><li> 모든 교육 및 시험은 항상 훈련 매일 같은 시간에 테스트 쥐의 동료와 함께 0900-1300 사이에 일어난 일입니다. </li><li> 쥐은 연구 기간 동안 매주 월요일, 수요일, 그리고 금요일 무게입니다. </li><li> 훈련 단계 즉시 이전, 쥐가은 훈련의 첫날 자당 자기 관리를 장려하기 위해 약 20 H 물의 박탈됩니다. </li></ol> 2. 행동 절차 모든 operant 행동 절차는 표준 operant 조절 챔버 (클럽메드 어소 주식 회사, 세인트 Albans를 사용하여각 operant 조절 챔버 상단에있는 주입 펌프 (Razel 과학 인 스트 루먼트, 세인트 Albans, VT, 미국)과 VT, 미국). Operant 컨디셔닝 야근이로 묶어 사운드 attenuating 환기 팬과 캐비닛 (웨스턴 워싱턴 대학, 미국). 모든 실험 조건 및 데이터 수집은 클럽메드 PC IV 소프트웨어 (클럽메드 어소 주식 회사, 세인트 Albans, VT, 미국)에 의해 제어됩니다. Operant 컨디셔닝 챔버 스는 (30 X 20 X 24cm) 2 레버 (고정 하나는 개폐식 하나), 톤 발생기, 개폐식 레버 위에 하얀 자극 라이트 및 반대 벽면에 빨간 집 라이트가 포함되어 있습니다. 주입 펌프는 활성 레버의 오른쪽에 보상 콘센트로 자당을 제공합니다. 레버는 그리드 바닥에서 10cm입니다. 네 적외선 photobeams 각 챔버를 열십자. 전면 빔은 측면 벽에에서 각 10.5 cm이며, 측면은 측면 벽에에서 각 6cm를 빔. 각각의 빔은 스테인레스 스틸 바 층 이상 4.5 cm입니다. 빔완전한 휴식의 개수를 카운트로 설정 중입니다. 빔 휴식의 총수는 교육 및 갈망 테스트 중에 기록됩니다. 이전에 최초의 교육 세션에 물을 제한의 예외로, 쥐가는 홈 케이지와 operant 조절 실에서 모두 음식과 물을 광고 libitum를 제공하고 있습니다. 챔버 스는 동식물 사육장과 마찬가지로, 반대로 가벼운주기에, 전용 테스트 실에 있습니다. 쥐는 빛의 차단 섬유로 덮여있다 카트 방 사이 홈 케이지에 수송됩니다. 각 세션이 끝날 때, 쥐가 집에 연습장에 반환됩니다. 교육, 강제 금욕, 그리고 시험 : 전형적인 실험을 세 단계가 있습니다. 테스트 세션했었습니다의 갈망이 부과됩니다. 우리는 연구에 따라 두 개의 일반적인 시험 절차에 갈망을 평가합니다. 이 두 절차는 섹션 2.3.1과 2.3.2에 설명되어 있습니다. <ol><li> 훈련 <ol><li> 전형적인 실험에서는 쥐가를위한 H / 2 일 지출그들이 레버의 오른쪽에있는 소켓에 10 % 자당 솔루션의 0.2 ML 배달 개폐식 (활성) 레버를 눌러 허용하는 operant 조절 실에서 10 일 연속. </li><li> 이 응답은 또한 톤 (2 kHz에서, 주위 소음을 15dB 이상)과 흰색 빛으로 구성된 복합 자극을 활성화한다. 복합 자극은 5의 지속과 활성 레버에 프레스가 기록하지만 프로그램 결과가 없습니다되는 동안, 40의 시간에 의해 다음이다. </li><li> 비활성 (정지) 레버에 대한 답변은 프로그램 결과가 없습니다,하지만 프레스가 기록됩니다. 빔 휴식의 번호는 교육 및 테스트 중에 기록됩니다. 모든 반응과 전위의 측정은 시간 코스 (이분 방식)으로 기록하지만, 일반적으로 세션 당 합계로보고됩니다. </li></ol></li><li> 강제 금욕. 쥐 강제 금욕의 기간 동안 홈 케이지에 남아 있습니다. 우리가 사용하는 일반적인 강제 금욕 기간이 일을 쥐가 테스트를해야하는 건가요즉시 교육 (강제 금욕의 날 30)의 마지막 날 다음 마지막 연수 일 (강제 금욕의 1 일) 또는 30 일 전자 날. </li><li> 테스트 <ol><li> 단서없이 멸종. 이 테스트 절차에서 쥐가 먼저 반응 결과 및 세션 기간도없는 것을 제외하고 교육하기 위해 동일한 조건에서 활성 레버를 눌러 허용하는 것은 한 H. 있습니다 쥐 시험 당일에 이러한 멸종 세션 최소 6 경험을 할 수 있습니다. 각 멸종 세션은 활성 레버가 철회되고 집안 조명이 꺼져 5 분 시대로 구분됩니다. "멸종"는 반응 활성 레버가 20 명 미만 프레스 / H.로 축소되어있다면이 표시됩니다 일부 쥐들이은 7 번째 세션을 필요로합니다. 다음 세션 (다른 5 분 지연 후) 쥐 그러면 음색에 대한 언론 수있는 테스트 세션 + 초기 훈련 기간 동안 자당의 각 배달와 결합했습니다 밝은 신호이다. </li><li> 단서와 함께 멸종. 이 생략에D 테스트 절차, 쥐 그 자당이 전달되지 제외하고 교육하기 위해 동일한 조건에서 활성 레버를 눌러 사용할 수 있습니다. </li></ol></li><li> 누르면 비활성 레버는 레버 차별의 측정으로 사용됩니다. 그것은 아닌 특정 모터 활성의 측정으로 사용, photobeam 나누기와 함께도있다. Motoric 대 동기 변화가 갈망하는 동작의 해석을 복잡. 응답 비활성 레버와 photobeam 휴식 데이터 (예 : 7 자당 또는 다른 음식에 대한 높은 비율로 응답 쥐가 잠재적인 갈망에 영향을 미치는 화합물과 도전 아르 약리 연구에 비교 그룹이 같이 갈망하는 모터 대 동기 기여를 명확히에 유용 8). </li></ol> 3. 대표 노는 강제 금욕의 가변 기간 이후 자당의 갈망에 영향을 여기에서 설명한 일반적인 방법은 행동과 신경 생물학 determina을 탐사하는 방법을 제공한다강제 금단의 변수 기간 이후에 갈망의 국세청. 섹션 4에서 제공하는 대표 결과에 관한 방법은 여기에 설명되어 있습니다. <ol><li> 포만. 일부 쥐들이 바로 전에 테스트 8 17 H 위해 홈 케이지의 10 % 자당 병을 받았습니다. 본 연구에서는 쥐는 단서 절차없이 소멸을 사용하여 테스트되었습니다. </li><li> 환경 강화. 기타가 대형으로 이동하는 동안 강제 금욕 기간 동안 일부 쥐들이 개별 주택 (컨트롤)에 남아 (36 "폭 X 20"깊이 X 40 "높이; 품질 케이지 제품, 포틀랜드, OR, 미국) 3 동료와 케이지 (농축). 농축 동물 PVC 튜브를 포함하여 자신의 환경에서 여러 가지 장난감을했고 또한 새로운 장난감마다 M, W, F 10 제공되었습니다. 본 연구에서는 쥐가 단서 절차없이 소멸을 사용하여 테스트되었습니다. </li><li> 약리 도전한다. 시험 당일에 쥐가 도파민 D1 길항제 SCH 23390의 복용과 pretreated되었습니다. 이 연구의 WER 쥐E는 단서 절차와 멸종을 사용하여 테스트했습니다. </li></ol> 4. 대표 결과 : <img alt="그림 1" src="/files/ftp_upload/3335/3335fig1.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 1"> 그림 자당의 갈망 실험의 부화 1 대표 교육 및 테스트 데이터입니다. 데이터 포인트 수단 ± 전문가, 대리인을 나타냅니다. 그림 1A에 대한 그룹 크기는 77 쥐가하고 그림에 대한 1B 그룹 크기는 그룹당 11-12에서였다. 1 일 그룹, P &lt;0.05에서 * 상당한 차이. 이 수치는 스프링어의 허가를 8 데이터에서 적응됩니다. <img alt="그림 2" src="/files/ftp_upload/3335/3335fig2.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 2"> 강제 금단의 1 개 또는 30 일 후에 자당의 갈망에 대한 자당의 포만 2 효과 그림. 그룹 크기는 8-9 당 그룹입니다. 1 일 그룹, 제어 그룹, P &lt;0.05에서 † 상당한 차이에서 * 상당한 차이. 이 수치는 적응됩니다Elsevier의 허가 9. <img alt="그림 3" src="/files/ftp_upload/3335/3335fig3.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 3"> 그림 3은 환경 농축 1 개월이 자당의 갈망을 감소. 그룹 크기는 각각 8 쥐 있습니다. 1 일, 제어 그룹, P &lt;0.05에서 † 상당한 차이에서 * 상당한 차이. 이 수치는 10 Wolters Kluwer 건강의 허가 적응이다. <img alt="그림 4" src="/files/ftp_upload/3335/3335fig4.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 4"> 보다 효과적으로 강제 금욕의 하루 후 4 체계적 SCH 23,390 감소 자당의 갈망을 그림. 그룹 크기는 8-12 당 그룹입니다. 1 일 그룹, 0 복용 그룹, P는 &lt;0.05에서 † 상당한 차이에서 * 상당한 차이. 이 수치는 스프링어의 허가 8 적응됩니다. <ol><li> 그림 1은 쥐가 자기 관리 자당을위한 대표적인 교육 및 테스트 데이터 (그림을 나타냅니다한 TOP) 후 가능한 자당 - 이점 큐 (그림 1 아래)와 함께 종말을 응답. 그림과 같이, 쥐 훈련 기간 및 시험 기간 동안 활성 레버에 선택적으로 반응한다. 효과가 응답을 적극적으로 레버에 가장 강력한 있지만 흥미롭게도, 비활성, 응답 및 전위의 활동은 몇 가지 인큐베이션을 보여줍니다. </li><li> 그림 2는 강제 금욕의 1 개 또는 30 일 후에 자당의 갈망에 자당과 포만의 효과를 보여줍니다. 포만이 강제 금욕 중 기간이 지난 후 응답 단서도없이 소멸을 감소 있지만 감소 강제 금욕의 한 하루였다 쥐에서 혼자 자당의 신호에 대한 응답. </li><li> 그림 3과 같이, 환경 농축는 신호가 강제 금욕의 한 다음날 발견 수준으로 동작을 응답하고 혼자 자당의 신호에 대한 응답없이 incubated 멸종 감소. </li><li> 그림 4는 단서가 응답과 함께 소멸에 SCH 23390의 금욕 종속 효과를 묘사. SCH 23390 대부분의 EF되었습니다강제 금단의 1 일 이후 자당의 갈망을 줄이는 fective, 대 30, 일. </li></ol>

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</ol>

모든 절차는 &quot;실험실 동물 관리의 원칙&quot;(노 NIH 간행물. 86-23)에 명시된 지침을 따라하고 웨스턴 워싱턴 대학 기관 동물 관리 및 사용위원회에 의해 승인되었습니다.

이 대사에 대해 눌러 레버가 전에 갈망 테스트 세션에 소멸되지 않습니다 기술적으로 부정확하지만 우리가 여기서 설명하는 절차는 복직 절차로 식별 수 있습니다. 전형적인 복직 절차에서 보상 - 이점의 단서와 함께 응답하는 것은 소멸되고 다음 보상 (프라이밍 유도된 복귀)의 비 우발적인 프레 젠 테이션이나 footshock 같은 스트레스 (스트레스 유발 복직) 11 관리와 함께 &quot;복직&quot;. 대사 (항목 2.3.1)에 대한 액세스 뒤에 혼자 눌러 레버의 멸종은 복직 가장 가까운 근사치입니다. 그럼에도 불구하고, 우리가 설명하는 절차는 목표 - 감독 자당 - 이점 큐에 대한 응답의 측정을 수 있습니다. 운영 체제는이 문제가 재발 행동 4,12-14에 관련된 수있는 신호 향상된 &quot;갈망&quot;동작입니다. 단서 절차와 멸종의 몇 가지 구체적인 장점 (감지가 있습니다대사 절차 (항목 2.3.1)에 대한 액세스 뒤에 단서없이 ...

<table border="1"><tbody><tr><td> 항목 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 번호 </td></tr><tr><td> 농축 케이지 </td><td> 품질 케이지 회사 </td><td> FH - 36 ½ T - N </td></tr><tr><td> Operant 상공 회의소 </td><td> 클럽메드 어소 시에이츠 </td><td> MED - 008 - CT - B3 </td></tr><tr><td> SCH 23390 </td><td> 시그마 </td><td> D054 </td></tr></tbody></table>

쥐에서 자당의 갈망의 보육을 평가하기위한 일반적인 방법

A General Method for Evaluating Incubation of Sucrose Craving in Rats

식품 이점 단서에 대한 응답으로 음식을 제한 다이어트, 음식 갈망에 누군가 금욕과 1로 데려가는 음식 재발 사이의 주요 행동 변화 포인트 역할을 수 있습니다. 이런 방식으로 개념 음식 갈망은 약물 이점의 단서에 대한 응답으로 마약 갈망하는 유사한 것입니다. 풍부한 문학 약물 갈망의 행동 및 신경 생물학 determinants을 이해 주위에 개발되었습니다, 우리와 다른 사람들은 더 나은 음식 2-4 관련된 중독 같은 행동을 이해하는 기본적인 중독 연구에서 기술을 번역에 대한 최근 주력하고 있습니다. 마찬가지로 약물 갈망의 이전 연구에서 한, 우리는 재발의 쥐 모델을 이용하여 자당의 갈망 동작을 확인합니다. 이 모델에서는 쥐들이 며칠 동안 세션에 약물이나 음식 중 하나를 자동 관리할 수 있습니다. 세션에서 레버 응답 음색과 함께 보상 + 빛의 자극을 제공합니다. 갈망의 동작은 다음 운영 체제는에 응답으로 정의됩니다보상이 제공되지 않습니다 후속 세션. 쥐 안정적으로 음색에 대해 답변해 드리겠습니다 + 빛의 자극을 가능성이 자사의 인수 시설 강화 특성으로 인해 5. 이 문제는 때로는 자당의 추구 또는 대사 반응이라고합니다. 현재의 논의에서는 이러한 구조를 모두 포함하다하는 용어 &quot;자당의 갈망&quot;을 사용합니다. 지난 10 년간, 우리는 시간의 길이가 보상을 자기 관리에 영향을의 보상 갈망을 따라하는 방법에 초점을 맞추고있다. 흥미롭게도, 쥐가 강제 금욕 기간의 몇 주간의 과정을 통해 보상 - 이점 큐에 대한 응답을 향상시킬 수 있습니다. 이 &quot;갈망의 부화는&quot;남용 4,6의 자기 관리 중 음식이나 약물이 쥐에서 관찰됩니다. 우리가 동물 모델에서 확인된이 갈망하는이 시간에 의존 증가는 인간의 약물 및 식품 중독 행동에 큰 가능성이 관련이있을 수 있습니다. 여기 sucro의 평가 부화를위한 프로토콜을 제시쥐의 SE의 갈망. 절차의 변종이 갈망은 일반적인 멸종 컨텍스트에서 자당 자기 관리 컨텍스트 (단서도없이 소멸) 내에서 또는 자당 - 이점의 단서에 대한 응답으로 눌러 레버의 멸종 다음과 같은 이산 자당 - 이점 큐에 대한 응답으로 평가 어디에 표시됩니다 (단서와 함께 소멸).

음식이나 약물 이점 단서에 대한 응답을하는 것은 금욕의 기간 동안 증가하고 이것은 재발 행동으로 증가 자화율과 관련 있습니다. 자기 관리 자당을 가지고 쥐이 &#39;갈망의 배양 &quot;을 평가하기위한 우리가 세부 절차를.

음식 제한 식단을 따르는 사람의 경우, 음식과 연합된 단서에 반응하여 나타나는 음식 갈망은 금욕과 ... 사이의 핵심적인 행동 전환점으로 작용할 수 있습니다.

본 실험의 전반적인 목적은 설탕 자가 투여로부터의 강제적 금욕 기간을 짧게 또는 길게 설정한 후, 쥐의 설탕 갈망 정도를 평가하는 것입니다. 이를 위해 먼저 쥐가 10일 동안 매일 설탕을 자가 투여하도록 합니다. 그 후, 쥐를 홈 케이지에 1일 또는 30일 동안 유지함으로써 설탕 자가 투여로부터의 강제적 금욕 기간을 갖게 합니다.절차의 마지막 단계는 쥐를 자가 투여 환경으로 되돌려, 이전에는 설탕 및 자가 투여와 명시적으로 연관되었으나 설탕 자체는 제공되지 않는 단서에 반응하도록 하는 것입니다. 결과적으로, 설탕과 연합된 단서에 대한 반응의 Vigour가 강제 금욕 기간에 따라 어떻게 변화하는지 보여줍니다. 이전에 보고한 바와 같이, 설탕에 대한 갈망은 한 달 동안의 설탕 강제 금욕 기간 동안 증가하거나 잠복기(incubate)를 거칩니다.갈망의 잠복기(incubation of craving)에 대한 행동 및 신경생물학적 기질을 조사하기 위해 본 절차를 이용하여 자가 투여 실험을 수행할 수 있습니다. 기존 방법과 비교하여 이 기술의 주요 장점은 마지막 자가 투여 세션 이후의 시간 간격을 다양하게 설정할 수 있다는 점입니다. 이 방법은 특히 강제적 금욕 기간의 길이가 갈망에 어떠한 영향을 미치는지와 같이 중독 연구 분야의 핵심 질문들에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다.이 기술을 사용하는 것의 시사점은 재발 행동 치료로 확장됩니다. 특히, 대다수의 개인들이 장기간의 금욕 후에 재발을 경험하기 때문입니다. 비록 이 방법이 설탕 갈망에 대한 통찰력을 제공할 수는 있을 것입니다.이는 남용 약물과 같은 다른 보상에도 적용될 수 있습니다. 본 연구에서는 연구 시작 시점에 생후 3개월 된 수컷 long Evans 랫드를 사용합니다. 랫드들은 절차를 시작하기 전까지 12시간 역전 일주기 환경에서 펠렛 형태의 사료와 물을 자유롭게 섭취하며 개별 사육되었으며, 이후 모든 실험군 및 대조군 동물의 체중을 측정합니다.연구 기간 동안 매주 월요일, 수요일, 금요일에 동물의 체중을 측정해야 합니다. 마지막으로, 설탕 갈망 연구를 시작하기 약 20시간 전에 수분 섭취를 제한하십시오. 이는 훈련 첫날 설탕의 자가 투여를 촉진하기 위함입니다.모든 훈련과 테스트는 0900시에서 1300시 사이에 수행되며, 각 코호트는 매일 동일한 시간에 테스트실에서 훈련 및 테스트를 받습니다. 조작적 조건화 챔버는 환기 팬이 설치된 방음 캐비닛 내에 밀폐되어 있습니다. 본 연구에 사용된 챔버의 크기는 30 x 20 x 24 cm이며, 고정 레버와 수축형 레버 등 두 개의 레버가 포함되어 있습니다.두 레버는 격자 바닥에서 10 centimeters 떨어진 곳에 위치합니다. 또한, 챔버에는 톤 발생기, 접이식 레버 상단의 백색 자극등, 그리고 반대편 벽면의 적색 하우스등이 설치되어 있습니다. 운동 활성도를 평가하기 위해 챔버 내부에 적외선 포토 빔이 장착되어 있으며, 전면 빔은 측벽에서 10.5 centimeters, 측면 빔은 각각 측벽에서 6 centimeters 떨어진 곳에 위치합니다.각 빔은 스테인리스강 바 바닥에서 4.5 centimeters 위에 위치합니다. 각 챔버 상단에 위치한 인퓨전 펌프에 신선한 10%sucrose 용액을 추가합니다. 레버 오른쪽에 있는 수납 용기로 0.2 milliliters의 10%sucrose 용액이 전달되도록 펌프를 작동시키게 관련 소프트웨어를 프로그래밍합니다.또한, 관련 소프트웨어 프로그램을 사용하여 챔버를 설정함으로써, 수축식 또는 활성 레버를 누를 때 톤과 백색광으로 구성된 복합 자극이 함께 활성화되도록 합니다. 복합 자극은 5초 동안 지속되어야 하며, 이후 42초의 타임아웃 시간이 이어집니다. 이 시간 동안 활성 레버를 누르는 횟수는 기록되지만 프로그래밍된 결과는 나타나지 않습니다. 고정식 또는 비활성 레버는 눌러도 아무런 결과가 없도록 프로그래밍하되, 누른 횟수만 기록하도록 합니다.기본적으로, 소프트웨어는 두 레버의 모든 누름 횟수와 각 훈련 세션 동안 발생한 적외선 빔 차단 횟수를 기록해야 합니다. 훈련 첫째 날에는 쥐를 조작 조건 형성 챔버에 총 2시간 동안 둡니다. 이 시간 동안 쥐는 자유롭게 움직일 수 있으며, 10% Sucrose 용액을 제공받기 위해 retractable lever를 누르거나 비활성 stationary lever를 누를 수 있습니다.모든 반응 및 이동 측정값은 2분 단위의 시간 경과로 기록되지만, 일반적으로 세션당 총합으로 보고됩니다. 2시간이 경과하면 쥐를 꺼내어 홈 케이지로 돌려보냅니다. 이후 훈련 세션을 방해할 수 있는 잔여물이나 후각적 단서가 제거되도록 오퍼런트 컨디셔닝 챔버를 철저히 세척하십시오.강제 금욕 기간 동안, 쥐들은 펠릿 사료와 물이 자유롭게 제공되는 홈 케이지에 머뭅니다. 강제 금욕 기간은 필요한 만큼 길게 설정할 수 있습니다. 갈망 연구의 배양을 위한 일반적인 기간은 1일에서 30일 사이입니다.또한, 설탕물(sucrose), 포만감 또는 환경 풍부화의 효과와 같이 테스트할 다른 파라미터들을 대조군 조건하에 투여할 수 있습니다. 이 기간 동안 두 가지 테스트 패러다임이 여기에 제시됩니다. 그중 첫 번째는 단서가 없는 상태에서의 소멸을 보여줍니다.먼저 조작 조건 형성 챔버를 설정하여 훈련 조건을 복제하되, 활성 레버를 눌렀을 때 톤과 백색광이 활성화되지 않도록 설정하십시오. 챔버가 1시간의 소거 세션을 6회 수행하도록 프로그래밍하며, 각 세션 사이에는 하우스 라이트를 끄고 활성 레버를 회수하는 5분간의 간격을 두어 중단 없이 진행하십시오. 그 후 강제 금욕 기간이 완료되면, 쥐를 조작 조건 형성 챔버에 넣고 1시간의 소거 세션을 6회 진행하며 쥐가 활성 레버에 반응하도록 하십시오.6번째 소거 세션에서 능동적 레버 반응이 시간당 20회 미만으로 감소하면 행동 소거가 일어난 것으로 간주합니다. 소거가 발생하지 않은 경우, 쥐가 7번째 소거 세션을 수행하도록 합니다. 다시 5분간의 지연 후 다음 세션은 1시간의 테스트 세션이며, 여기서 쥐는 훈련 중 설탕의 매회 제공 시 함께 제시되었던 톤과 빛 신호를 위해 레버를 누를 수 있습니다. 신호를 동반한 두 번째 테스트 절차 소거를 위해 조작적 조건 형성 챔버를 훈련 조건과 동일하게 설정합니다.활성 레버를 눌러도 자당 용액이 공급되지 않는다는 점을 제외하고, 테스트 대상 쥐를 2시간 동안 조작성 조건화 챔버에 둡니다. 비활성 레버 누르기 및 빔 브레이크 데이터를 함께 사용하여 비특이적 운동 활성도를 측정할 수 있습니다. 이는 운동성 변화와 동기 부여적 변화가 Q 반응성 행동의 해석을 복잡하게 만들 수 있기 때문입니다.이 그림은 자가 투여하도록 훈련된 77마리의 정상 쥐 그룹에서 얻은 전형적인 데이터를 보여줍니다. 본 프로토콜에 기술된 훈련 패러다임에 따라, 쥐들이 훈련 과정 중 능동 레버에 선택적으로 반응함을 확인할 수 있습니다. 여기에는 테스트 세션에서 얻은 데이터가 제시되어 있습니다.쥐들이 단서가 없는 소멸 조건에서 반응하는 것이 관찰되었습니다. 테스트 중에 쥐들은 다시 활성 레버에서 선택적으로 반응했으며, 비활성 레버 반응과 운동 활성은 어느 정도의 부화 현상을 보였으나, 그 효과는 활성 레버 반응에서 가장 뚜렷하게 나타났습니다. 그룹 크기는 그룹당 11~12마리였으며, 1일째 그룹과 30일째 그룹 사이에 P 값이 0.05 미만으로 유의미한 차이가 관찰되었습니다. 이 그림은 단서 없는 소멸 조건을 이용한 테스트 직전 17시간 동안 홈 케이지에서 10% sucrose 병을 제공받은 일부 쥐들을 통해, 1일 또는 30일간의 강제 금욕 후 sucrose Q 반응성에 미치는 sucrose 포만감의 효과를 보여줍니다.절차적으로, 포만감은 강제적 금욕 기간 이후의 단서 반응 없이 소멸을 감소시켰으나, 단 하루만 강제적 금욕을 거친 쥐에서는 sucrose Q에 대한 반응만을 감소시켰으며, 그룹당 크기는 8~9마리였습니다. 별표(*)는 1일 차 그룹과 비교하여 유의미한 차이가 있음을 나타내고, 십자 기호(†)는 P < 0.05에서 대조군과 비교하여 유의미한 차이가 있음을 나타냅니다. 이러한 결과는 한 달간의 환경 풍요화가 쥐의 sucrose Q 반응성을 감소시켰음을 보여줍니다.강제 금욕 기간 동안, 대조군 쥐들은 개별 사육장에 계속 머물렀으며, 풍부화 군은 PVC 튜브를 포함하여 환경 내에 여러 개의 장난감이 배치된 대형 케이지로 옮겨졌습니다. 이 쥐들에게는 매주 월요일, 수요일, 금요일에 새로운 장난감이 제공되었습니다. 본 연구의 쥐들은 Q'S 없는 소거 절차를 사용하여 테스트되었습니다.환경 풍요화는 Q-반응 및 sucrose Q 단독 반응이 없는 상태에서 부화된 소거(incubated extinction)를 강제 금욕 1일 후의 수준까지 감소시켰으며, 각 그룹은 8마리의 쥐로 구성되었습니다. 별표는 1일 차 그룹과의 유의미한 차이를 나타내고, 십자 기호는 P < 0.05일 때 대조군과의 유의미한 차이를 나타냅니다. 여기에서 쥐들은 테스트 당일에 도파민 D1 길항제인 SCH 23390을 투여받았으며, QS를 이용한 소거 절차를 통해 테스트되었습니다.강제 금욕 1일 후 전신 s CH 2 3 3 9 0 투여 시 설탕 탐색 행동이 더 효과적으로 감소함을 확인할 수 있으며, 각 그룹은 8~12마리의 쥐로 구성되었습니다. 별표(*)는 1일 차 그룹과 유의미한 차이가 있음을 나타냅니다. 십자 기호(+)는 대조군과 유의미한 차이가 있음을 나타내며, 이때 P 값은 0.05 미만입니다.이 절차를 수행할 때는 강제 금욕 조건에 배정된 그룹들을 그들의 훈련 행동을 기반으로 균형 있게 구성하는 것이 중요합니다. 이 절차 이후에는 약물 자가 투여와 같은 다른 방법들을 수행하여, 갈망의 잠복기 효과가 나타난 후 그 일반성과 같은 추가적인 질문들에 대한 답을 얻을 수 있습니다. 이 기술은 중독 분야의 연구자들이 쥐의 금욕 중인 의존성 상태에서 나타나는 갈망 변화의 신경 기질을 탐구할 수 있는 방법을 제공하였습니다.이 영상을 시청한 후에는, 이전에 자당(sucrose) 자가 투여와 연관되었던 큐(Q)에 대한 쥐의 반응을 평가하여, 금단 현상에 따른 쥐의 자당 갈망을 측정하는 연구 수행 방법을 충분히 이해하게 될 것입니다.

a-general-method-for-evaluating-incubation-of-sucrose-craving-in-rats

Research

연구

JoVE Journal

Neuroscience

신경과학

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