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리프트 밸리 열병 바이러스 백신 안전 및 효능을 향상하기 위해 MP - 12 스트레인의 NSS 진을 조작하는 ...
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JoVE Journal Immunology and Infection
Using Reverse Genetics to Manipulate the NSs Gene of the Rift Valley Fever Virus MP-12 Strain to Improve Vaccine Safety and Efficacy

리프트 밸리 열병 바이러스 백신 안전 및 효능을 향상하기 위해 MP - 12 스트레인의 NSS 진을 조작하는 역방향 유전자를 사용하여

Full Text
18,070 Views
09:13 min
November 1, 2011

DOI: 10.3791/3400-v

Birte Kalveram1, Olga Lihoradova1, Sabarish V. Indran1, Tetsuro Ikegami1

1Department of Pathology,University of Texas Medical Branch

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

리프트 밸리 열병 바이러스 MP - 12 백신 스트레인에 대한 역방향 유전 시스템은 증가 감쇄 및 immunogenicity로 추가 MP - 12 돌연변를 만들기위한 유용한 도구입니다. 우리는 NSS 돌연변이 변종을 생성하고 특성화 프로토콜을 설명합니다.

이 절차는 역유전학에 의해 돌연변이된 NSS를 인코딩하는 재조합 균열 계곡 열 바이러스 MP 12 균주를 생성하고 백신 개발을 위한 표현형을 특성화하는 것을 목표로 합니다. 먼저, T7 RNA 중합효소를 안정적으로 발현하는 Bhk T 7 9 세포에서 재조합 MP 12 균주 돌연변이를 회수하는 형질주입 시스템을 사용하여 Vero E 6 세포에서 회수된 재조합 MP 12 균주 돌연변이를 증폭하고 플라크 검정에 의해 증폭된 MP 12 돌연변이체를 적정한다. 절차의 마지막 단계는 돌연변이 NS 단백질에 의한 인터페론, 알파 또는 베타 억제 부족을 스크리닝하는 것입니다.

궁극적으로, 결과는 역유전학 시스템을 통해 리프트 밸리 열(Rift Valley Fever)에 대한 후보 약독화 생백신의 준비를 용이하게 할 수 있습니다. 화학적 질소 또는 연속 계대를 사용하여 바이러스 게놈에 무작위로 돌연변이를 도입하는 것과 같은 기존 방법에 비해 이 기술의 주요 장점은 유전자 시스템을 사용하여 바이러스 게놈에 지정 돌연변이를 도입할 수 있다는 것입니다. 이 방법은 백신 후보의 면역원성에서 주요 요인인 NSS의 중요성과 같은 계곡열 백신 분야의 주요 질문을 해결하는 데 도움이 될 수 있습니다.

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