Determination of Lipid Raft Partitioning of Fluorescently-tagged Probes in Living Cells by Fluorescence Correlation Spectroscopy (FCS)

Catherine Marquer; Sandrine L&#233;v&#234;que-Fort; Marie-Claude Potier

doi:10.3791/3513

지질 뗏목의 결정은 형광 상관 분광학 (FCS)에 의해 살아있는 세포에서 Fluorescently 태그가 추가된 프...

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Determination of Lipid Raft Partitioning of Fluorescently-tagged Probes in Living Cells by Fluorescence Correlation Spectroscopy (FCS)

지질 뗏목의 결정은 형광 상관 분광학 (FCS)에 의해 살아있는 세포에서 Fluorescently 태그가 추가된 프로브의 파티션

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10:59 min

April 6, 2012

DOI: 10.3791/3513-v

Catherine Marquer¹, Sandrine Lévêque-Fort^2,3, Marie-Claude Potier¹

¹Centre de Recherche de l’Institut du Cerveau et de la Moelle Épinière,Hôpital de la Pitié-Salpêtrière, ²Institut des Sciences Moléculaires d'Orsay,Université Paris-Sud, ³Centre de Photonique Biomédicale du Centre Laser,Université Paris-Sud

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

살아있는 세포의 플라즈마 막의 형광 단백질 지질 뗏목의 파티션을 알아내기 위해 기술이 설명되어 있습니다. 그것은 지질 보트 내부 또는 외부에있는 단백질의 확산시기에 불균형을 이용합니다. 취득이 통제 조건이나 약물 이외 후에 동적으로 수행할 수 있습니다.

지질 뗏목(Lipid rafts)은 원형질막(plasma membrane) 내의 미시적 영역으로, 신호 전달 및 이동(trafficking)과 같은 세포 과정을 위한 조직 센터 역할을 합니다. 여기서, 살아있는 세포의 원형질막에서의 지질 뗏목 분할은 ganglioside GM one의 지질 뗏목 분할을 조사하기 위해 형광 상관 분광법을 사용하여 정량화됩니다. 포유류 세포는 Alexa 4 88로 표시된 콜레 독소의 B 소단위로 조사됩니다.

형광 단백질은 ganglioside GM one에 결합하며, 이는 컨포칼 현미경 검사를 사용하여 지질 뗏목으로 우선적으로 분할됩니다. 원형질막(plasma membrane)에서 미세한 형광 변동을 측정합니다. 자동 상관 관계 곡선이 생성되고 적절한 수학적 확산 모델이 적용되어 Fluor의 확산 시간을 결정합니다.

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