Name: Ixodes Scapularis 진드기의 타액, 침샘 및 Hemolymph 컬렉션 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-02-21T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 16 s
Description: 학습하세요 Ixodes scapularis 진드기에서 혈림프, 침샘 및 타액을 수집하는 방법을. 이 기술은 진드기 매개 병원체 역학 연구와 질병 전파 메커니즘 이해에 필수적입니다.

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저자는 벡터 매개로 질환 동물 리소스 지점 부문 감사드립니다, 특히 안드레아 피터슨, 리사 Massoudi, Verna 오브라이언, 그리고 생쥐와 토끼들의 관심과 유지 보수를위한 존 Liddell. 우리는 또한이 원고 향한 그들의 공헌에 대해 에이미 Ullmann, 테레사 러셀, 그리고 바바라 J. 존슨 감사드립니다. 마지막으로, 우리는이 원고의 촬영과 관련된 모든 위법를 찍는 동안 그래픽 삽화와 주디 Lavelle를 생산 CDC에서 커뮤니케이 션을위한 준회원 이사의 사무실에 Alissa Eckert을 인정하고 싶습니다.

1. 슬라이드 준비 Hemolymph 컬렉션 (동영​​상 1) <ol><li> 부드럽게 표면이 멸균을 위해 10 분간 70 % 에탄올에 나서 5 분 3퍼센트 국소 과산화수소의 동물과 장소에서 적극적으로 먹이 진드기를 제거합니다. </li><li> 자궁 펜은 실란 코팅 현미경 슬라이드에 동그라미를 그려와 자궁 펜 서클 내에서 움직이게 장소. <ol><li> 실란 코팅 슬라이드는 현미경 슬라이드에 hemolymph 최고의 준수를 위해 사용됩니다. </li></ol></li><li> 해부 현미경 (1X 목적, 10X 접안 렌즈, 3.5X 배율)에서 진드기를 볼 수 있습니다. </li><li> 부드럽게 진드기의 다리를 넓히다하고 움직이게 고정하기 위해 집게로 진드​​기의 dorsum 아래로 밀어. </li></ol> 참고 :이 midgut 또는 주사를 움직이게 방해하고 hemolymph을 오염시킬 수 있기를 움직이게 immobilizing가 너무 열심히 누르지 때. <ol start="5"><li> 일시 진드기의 다리 또는 다리를 절단일회용 메스 벌금 포인트와 전자 말초 관절. 감염을 확인하려면 hemolymph 통해 불과 1 다리는 절단해야합니다. 슬라이드에 hemolymph를 수집 몇 다리를 잘라야 수 있습니다. </li></ol> 참고 :이 hemolymph의 midgut 오염을 일으킬 수 있기 때문에 몸 가까이에 다리를 절단하지 마십시오. <ol start="6"><li> 다리 또는 다리가 절단되고 나면 부드럽게 슬라이드를 향해 다리를 밖으로 분비하는 hemolymph 위해 진드기의 dorsum에 압력을 적용하는 것을 계속한다. 부드럽게 hemolymph을 확산하기 위해 슬라이드에 주위를 움직이게 이동합니다. </li></ol> 2. 침샘 제거 (영화 2 및 3) <ol><li> 인산염의 명소 몇 25 μl 수영장 현미경 슬라이드 위에 식염수 (PBS)를 버퍼와 PBS의 수영장 중 하나에 진드기를 놓습니다. </li><li> 해부 현미경 (1X 목적, 10X 접안 렌즈, 3.5X 배율)에서 진드기를 볼 수 있습니다. </li><li> 미세 스쳐 forcep과 진드기를 안정화기준 capitulum (입 부분)이나 진드기의 후면을 개최하여의. </li><li> 진드기의 후면에 벌금 스쳐 포셉를 삽입하고 진드기가 장기를 노출 dorsum있어 최대 썰어. 원하는 경우 midgut이 시간에 제거하고 현미경 슬라이드에 PBS의 신선한 수영장 또는 PBS를 포함 microfuge 튜브로 전송할 수 있습니다. </li><li> 양자 진드기의 다리 옆에 위치한 침샘 (포도 같은 클러스터)의 쌍을 찾아보십시오. 침샘은 진드기의 잔해가 침샘의 파괴와 손실을 줄이기 위해 PBS의 신선한 풀에 여전히 침샘을 포함하는, 주요 진드기 부분을 이동 사이에서 볼 수없는 경우. </li></ol> 참고 : 이전 먹이에 침샘에 오신 것을 나중에 먹이의에 비해 그들로 개발되지 않았기 때문에 찾을 어렵습니다. <ol start="6"><li> 미세 스쳐 포셉와 PBS의 신선한 수영장에서 장소와 진드기의 침샘을 제거합니다. </li><li> 무선좋은 일은 포셉 어떤 외부 미생물과 진드기의 부스러기를 제거하려면이 세차 스텝에게 3-4 번 이상을 반복, 또 다른 깨끗한 25 μl PBS 수영장으로 침샘을 전송 줬지. </li></ol> 참고 : 각각의 침샘의 손실과 혼란을 줄이기 위해 부드럽게 침샘 클러스터를 씻으십시오. <ol start="8"><li> 실란 코팅 슬라이드에 PBS의 깨끗한 수영장으로 또는 PBS를 포함 microfuge 관의 분비를 놓습니다. </li></ol> 3. 침이 수집 (영화 4) <ol><li> 부드럽게 토끼 또는 완전히 부풀어 오른 그들이 내려준 직전 벌금 스쳐 포셉, 약 5~7일 후 첨부 파일을 사용하여 다른 호스트에서 성인 여성의 진드기를 제거합니다. </li><li> 스카치 테이프와 현미경 슬라이드의 한쪽 끝을 향해 거의 부풀어 오른 무슨일을 준수합니다. 테이프는 대략 위치해야 일정한 머리쪽으로 진드기의 dorsum까지 방식 때문에, 진드기의 기준 capitulum (입 부분)가 노출 떠난다.</li><li> 테이프가 5 % pilocarpine 솔루션의 진드기 등 부분의 표면 pipet 5 μl (메탄올에서)의 앞부분은 가장자리를 만나는 곳. 테이프가 pilocarpine은 진드기의 기준 capitulum 접촉 수없이 진드기의 dorsum 이상 pilocarpine을 심하도록 허용합니다. </li><li> 현미경 슬라이드를 향해 무독성 모델링 찰흙 조각 진드기의 mouthparts에서 약 1 인치를 탑재합니다. </li><li> 좋은 스쳐 포셉 원하는 직경으로 뽑았 모세관 28 팁을 끊다 사용합니다. </li><li> 해부 현미경 진드기의 기준 capitulum를 볼 수 있습니다. </li><li> 부드럽게 상악 palps는 모세관 튜브의 외부에있는 수 있도록 뽑아 모세관으로 진드기의 hypostome 맞네요. </li><li> 모세관 장소에서 잡고 모델링 찰흙으로 모세관 튜브의 반대쪽 끝을 누르십시오. </li><li> 높은 습도 (예, 젖은 아빠 줄지어 lidded 스티로폼 상자와 어두운 챔버 내부에 탑재된 침 진드기를 배치<html> 어 수건). 중력이 타액 수집을 도울 수 있도록 hypostome 점 때문에 컨테이너의 하단에 슬라이드를 기울이십시오. </li><li> 상온에서 컨테이너를 배치합니다. </li><li> 밀접하게 1 시간 침 진드기를 모니터링하고, 그것이 파스퇴르의 pipet 벌브와 모세관 튜브 밖으로 추방에 의해 생성되기 때문에 타액을 수집합니다. 첫 번째 시간 후 최소 4 시간 동안 축적 매 시간을 확인합니다. 그것이 생성되기 때문에 타액을 수집하기 위해 계속합니다. </li></ol> 참고 : 충분한 타액이 수행되고있는 연구를 위해 수집되면 타액 수집이 중지됩니다. <ol start="12"><li> 진드기 침되지 않는 이상 타액이 필요할 경우, 타액의 분비는 가끔 hypostome 마사지하는 모세관 튜브를 사용하여 유도된 수있다면. </li><li> 필요한 ° C까지 -80시 타액과 저장소에 테아제 억제제 칵테일의 0.1 볼륨을 추가합니다. </li></ol> 4. 대표 결과 e_content은 &quot;&gt; 영화 1은 부분적으로 싫증이 난 scapularis 요정을 보유하고 현미경 슬라이드에 hemolymph를 수집하기 위해 다리를 절단하는 방법을 보여줍니다. 다리 또는 다리가 맑은 액체가 (그림 1A와 1B) 분비되어 절단되면. 경우 midgut hemolymph 그것이 그대로 흐린 나타나는 절단 다리 (들) (그림 1C 및 1D)로 나오는 파열된다. 요정 48 또는 72 시간 동안 수유 후에도 침샘의 추출이 영화는 2와 3에서 증명된다. 진드기가 파편이 많이 일반적으로이 구멍되면 (기관, malpighian tubules, 혈액 구성되어, 결합 조직 등) 침샘의 손실이나 파괴를 방지하기는 PBS의 신선한 풀에 진드기 이동합니다. 요정이 오픈 컷 후 침샘이있는 그림 2A와 2B 쇼와 그림 2C는 PBS의 수영장에 침샘 클러스터를 제거 보여줍니다. 침이 컬렉션 전에서 설정 scapularis 성인 여성 전<html> s의 영화 4 그림 3. 모세관 튜브에 침 진드기가 영화 5에서 관찰된다. 타액의 분비를 자극하고, 성인 여성 진드기 당 타액의 20 μl를 통해 얻을 수있는 pilocarpine를 사용한 타액 수집이 메서드는. <img alt="1 그림." src="/files/ftp_upload/3894/3894fig1.jpg" /> 그림 1. I.의 scapularis의 요정의 라벨 구조. 영화 1. Ixodes scapularis hemolymph 컬렉션은. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/3894/3894movie1.avi">영화를 시청하려면 여기를 클릭하십시오</a> . <img alt="그림 2." src="/files/ftp_upload/3894/3894fig2.jpg" /> 그림 2. 오염 (&amp; B)와 요정의 다리에서 exuding (C &amp; D) hemolymph를 오염. 48시간 먹이기 전의 영화 2. 침샘 추출 scapularis 요정.pload/3894/3894movie2.avi은 &quot;&gt; 영화를보고하려면 여기를 클릭하십시오. 72시간 먹이기 전의 영화 3. 침샘 추출 scapularis 요정. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/3894/3894movie3.avi">영화를 시청하려면 여기를 클릭하십시오</a> . <img alt="그림 3." src="/files/ftp_upload/3894/3894fig3.jpg" /> 그림 3. Ixodes scapularis 요정 침샘. (&amp; B)를 사전에 추출에 72시간 수사관 요정의 침샘의 예. (C) 침샘 클러스터를 삭제했습니다. 영화 4. 침이 컬렉션은 성인 전에서 설정 scapularis 여성 눈금. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/3894/3894movie4.avi">영화를 시청하려면 여기를 클릭하십시오</a> . <img alt="4 그림." src="/files/ftp_upload/3894/3894fig4.jpg" /> 성인 전에서 그림 4. 타액 수집 scapularis여 ticks. (&amp; B) 모델링 클레이 주최 모세관 튜브의 unpulled 끝에있는 모세관 튜브 뽑아 결국 그 hypostome있는 슬라이드 마운트 틱. (C &amp; D) 침 성인 전을 포함한 Humidified 챔버 scapularis 여성 가고 있습니다. 영화 5. 모세관 튜브에 침 scapularis 여성 무슨일을 Ixodes. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/3894/3894movie5.avi">영화를 시청하려면 여기를 클릭하십시오</a> .

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<li>Barker, R. W., Burris, E., Sauer, J. R., Hair, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Composition+of+tick+oral+secretions+obtained+by+three+different+collection+methods%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Med.+Entomol%22%5BJournal%5D)">Composition of tick oral secretions obtained by three different collection methods.</a> J. Med. Entomol. 10, 198-201 (1973).</li>
<li>Burgdorfer, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemolymph+test.+A+technique+for+detection+of+rickettsiae+in+ticks%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Trop.+Med.+Hyg%22%5BJournal%5D)">Hemolymph test. A technique for detection of rickettsiae in ticks.</a> Am. J. Trop. Med. Hyg. 19, 1010-1014 (1970).</li>
</ol>

우리는 공개 할게 없다.

진드기의 hemolymph, 침샘, 그리고 타액의 컬렉션 진드기 매개로 병원체 전송 연구에 중요하다, 유행, 보급, 확산, 그리고 진드기 및 호스트 6,11-13,20,23,29 모두에서 끈기. 진드기 30,31 해부하는 방법에는 여러 가지가 있습니다. 그러나 침샘을 수집했을 때 제대로 때문에 침샘이 파열이나 진드기의 유골이 안되는 진드기를 해부하는 것이 중요합니다. 침샘들이 midgut 오염을 제거하고 침샘 추출물 (SGE)을 구하는 PBS의 염색법이나 그라운드에 대한 슬라이드로 해결할 수 있습니다 여러 번 씻어해야 진드기 제거하고 나면. SGE는 타액보다 수집하는 것이 더 쉽습니다 그리고 타액과 비슷한 특성을 가지고 있으므로, 그것은 타액 대안으로 사용할 수 있습니다. 그러나, SGE은 진드기의 타액에 존재하지 않습니다 침샘 세포에서 발생하는 추가적인 단백질이 포함되어 있습니다. SGE CAN B의 여분의 단백질뿐만 아니라E 장점이나 수행중인 연구에 따라 단점이 있지만,이 연구는 SG...

<table border="1"><tbody><tr><td> 시약 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 번호 </td></tr><tr><td> 과산화수소 </td><td> 어부 </td><td> H312-500 </td></tr><tr><td> 에탄올 </td><td> Acros </td><td> 61509-5000 </td></tr><tr><td> PBS </td><td> 보스턴 Bioproducts </td><td> BM-2205 </td></tr><tr><td> 뒤몽 파인 포셉 (3C) </td><td> 어부 </td><td> NC9906085 </td></tr><tr><td> 실란 처리 현미경 슬라이드 </td><td> Bioworld </td><td> 42763007-1 </td></tr><tr><td> 자궁 펜 </td><td> Bioworld </td><td> 21750008-1 </td></tr><tr><td> 슈퍼 서리 플러스 현미경 슬라이드 </td><td> 어부 </td><td> 12-550-18 </td></tr><tr><td> Pilocarpine </td><td> 시그마 </td><td> P6503-5G </td></tr><tr><td> 테아제 억제제 칵테일 </td><td> 시그마 </td><td> P2714 </td></tr><tr><td> # 11 메스 일회용 </td><td> 깃털 </td><td> 2975 # 11 </td></tr><tr><td> 독성 모델링 점토 </td><td&gt; 피셔 </td><td> S17307 </td></tr><tr><td> 모세관 튜브 </td><td> 체이스 과학적 유리, INC </td><td> 40A502 </td></tr></tbody></table>

ixodes scapularis 진드기의 타액, 침샘 및 hemolymph 컬렉션

Saliva, Salivary Gland, and Hemolymph Collection from Ixodes scapularis Ticks

진드기는 전세계 찾은 많은 진드기 매개로 질병으로 인간을 괴롭히다하고 있습니다. 진드기 라임 병 및 진드기 매개로 회귀열 (Borrelia SPP.), 록키 마운틴 뇌척수 막염 (Rickettsia rickettsii), ehrlichiosis (Ehrlichia chaffeensis와 E 동등), anaplasmosis (Anaplasma phagocytophilum), 뇌염 (똑딱똑딱의 원인 병원체에 대한 벡터입니다 매개 뇌염 바이러스), babesiosis (Babesia SPP.), 콜로라도 진드기 열 (Coltivirus) 및 tularemia (Francisella tularensis) 1-8. 제대로 호스트로 전송하기 위해서는 이러한 전염성 요원들은 differentially, 유전자 발현을 조절 진드기 단백질과 상호 작용하고, 진드기 3,9-13을 통해 마이 그 레이션. 예를 들어, 라임 병 에이전트, Borrelia burgdorferi는 진드기의 enzootic 사이클 14,15의 향연과 기근 단계로 차등 유전자 발현을 통해 적응. 또한, Ixodes의 진드기와 같은가를 소비bloodmeal Borrelia은 복제 및 midgut에서 그들이 침샘을 여행하고 퇴학 타액 9,16-19있는 호스트로 전송될 hemocoel,로 마이 그 레이션. 진드기는 피드로서 호스트는 일반적으로 강한 hemostatic와 타고난 면역 반응 11,13,20-22로 응답합니다. 이러한 호스트 반응에도 불구하고, 전 진드기의 타액은 3,11,20,21,23 먹이 진드기들을위한 immunomodulatory있는 단백질, lytic 대리인, anticoagulants 및 fibrinolysins가 포함되어 있기 때문에 scapularis는 몇 일 동안 먹을 수 있습니다. 진드기의 타액이나 침샘 추출물 (SGE)에 의해 점령 immunomodulatory 활동이 많은 진드기 매개로 병원균 3,20,24-27의 전염, 확산 및 보급을 촉진. 더 이상 그것이 진드기 먹이 적극적으로 해부하고 진드기의 타액을 수집하는 데 필수적이며 전염성 요원들이 질병을 일으킬 방법 진드기 매개로 이해하기 위해서. 이 비디오 프로토콜에 대한 해부 기술을 보여줍니다hemolymph의 수집 및 적극적 나도 먹이로부터 침샘의 제거 scapularis nymphs 48 후 72 시간 포스트 마우스 배치. 우리는 또한 성인 여성 I.에서 타액 수집을 보여줍니다 scapularis 눈금.

감염된 진드기의 hemolymph, 침샘, 그리고 타액의 컬렉션 병원균이 질병을 일으킬 방법 진드기 매개로 공부하는 것이 중요합니다. 이 프로토콜에서는 먹이로부터 hemolymph과 침샘을 수집하는 방법을 보여줍니다<em&gt; scapularis을 Ixodes</em&gt; nymphs. 우리는 또한 여성에서 타액 수집을 보여줍니다<em&gt; 전 scapularis</em&gt; 성인.

Ixodes Scapularis 진드기의 타액, 침샘 및 Hemolymph 컬렉션

진드기는 전 세계적으로 발견되며, 인간에게 다양한 진드기 매개 질환을 일으킵니다. 진드기는 라임병과 진드기 매개...를 유발하는 병원체의 매개체입니다.

본 절차의 전반적인 목적은 활발하게 흡혈 중인 ex ODI scapularis 진드기로부터 진드기 체액, 혈림프, 타액선 및 타액을 수집하는 것입니다. 먼저 진드기 다리의 원위 관절을 절단하여 혈림프를 배출시킴으로써 이를 수행합니다. 다음으로, 인산염 완충 식염수(PBS) 내에서 진드기를 해부하여 타액선의 위치를 찾고, 이를 깨끗한 PBS 풀로 옮겨 타액선을 수집합니다.필로카핀(pilocarpine)을 마이크로 피펫의 등쪽에 도포한 후, 진드기의 입 부분을 풀드 모세관(pooled capillary tube)에 삽입하여 진드기가 관 내부로 타액을 분비하게 함으로써 타액을 수집합니다. 최종적으로 면역형광법이나 단백질 분석을 통해 혈림프 또는 타액선에 존재하는 미생물을 확인할 수 있으며, 그 외에도 타액 단백질과의 단백질 상호작용 등의 결과를 얻을 수 있습니다.일반적으로 혈림프 채취에 익숙하지 않은 연구자는 진드기의 중장을 파열시키지 않고 고정하는 데 어려움을 겪으며, 이로 인해 혈림프가 오염될 수 있습니다. 또한, 모든 진드기가 타액을 분비하는 것은 아니기 때문에 타액 채취에 어려움이 있을 수 있습니다. 따라서 흡혈이 완료되었거나 완료 직전 단계인 진드기를 대상으로 타액 채취를 시도하는 것이 중요합니다.일반적으로 타액선 수집에 익숙하지 않은 사람들은 진드기 잔해 사이에서 타액선을 찾기가 어렵기 때문에 어려움을 겪습니다. 또한, 타액선을 찾더라도 세척 단계에서 쉽게 파열되어 손실될 수 있습니다. 동물 호스트로부터 활발하게 흡혈 중인 진드기를 조심스럽게 제거한 후, 3% 국소용 과산화수소에 5분 동안 담가 둡니다.진드기를 70% ethanol에 10분 동안 담가 표면을 멸균합니다. 파이펫을 사용하여 진드기를 70% ethanol에서 거름종이 위로 옮깁니다. 코팅된 현미경 슬라이드 위에 원을 그립니다.해부 현미경 아래의 펫 펜 원 안에 진드기를 밀어 넣습니다. 핀셋을 사용하여 진드기의 등면을 부드럽게 누릅니다. 진드기의 다리를 펼쳐 고정시킵니다.그런 다음 끝이 뾰족한 일회용 메스를 사용하여 진드기의 다리 또는 다리들을 원위 관절 부위에서 절단합니다. 다리를 절단한 후, 혈림프가 다리 밖으로 분비되어 슬라이드 위에 떨어지도록 진드기의 등면을 계속해서 압박하십시오.슬라이드 위에서 진드기를 부드럽게 움직여 혈림프를 퍼뜨림으로써 진드기 지점에서 침샘을 제거합니다. 인산 완충 식염수를 25 µL씩 여러 번 현미경 슬라이드 위에

saliva-salivary-gland-hemolymph-collection-from-ixodes-scapularis

Research

연구

JoVE Journal

Immunology and Infection

면역학 및 감염학

건강한 실험실에서 재배 한 진드기의 생산은 진드기 생물학 및 진드기 - 병원체 상호 작용에 대한 연구에 필수적입니다. 여기서 우리는 마우스에 비용 효과적이고 스트레스가 적은 미성숙 진드기 먹이를위한 간단한 프로토콜을 시연합니다.

사육<em&gt; Ixodes의 scapularis,</em&gt; 블랙 다리 틱 : 마우스에 미성숙 단계를 먹이

여기, 우리는 공간 및 일시적으로 틱 용기 수정된 전체 마운트 제자리 교 잡 방법을 사용 하 여 가능한 microbiota의 존재를 평가 하기 위해 프로토콜을 제시.

제자리에 전체 산 교 잡에 의해 틱 용기에 Microbiota의 시각화

진드기 혈 림프의 분석은 몇몇 병원 체가 질병을 일으키는 원인이 되는 방법에 대 한 정보의 중요 한 근원 및 어떻게 진드기 면역 학적으로이 감염에 반응 하는지 나타냅니다. 본 연구는 곰 팡이 propagules 접종 하 고 rhipicephalus 마이크로 플러스 튀 여성에서 혈 림프를 수집 하는 방법을 보여줍니다.

무척 추 병리학 연구를 향한 Rhipicephalus 마이크로 플러스 진드기에 Metarhizium 발 파 포자의 혈 림프 수집 및 접종을 공개

이 연구에서는 실험실 마우스에 부착된 캡슐을 사용하여 하드 틱의 님프및 애벌레 단계를 위한 먹이 시스템이 개발되었습니다. 수유 캡슐은 유연한 재료로 만들어졌으며 적어도 일주일 동안 마우스에 단단히 부착되어 있어 진드기 공급에 대한 편안한 모니터링을 가능하게 합니다.

실험실 마우스에 미숙한 하드 진드기 단계 감염에 대 한 캡슐 기반 모델

본 프로토콜은 진드기 타액선 및 정제된 세포밖 소포로부터 마이크로RNAs의 단리를 기술한다. 이것은 일반적으로 사용되는 시약과 공급을 결합하는 보편적 인 절차입니다. 이 방법은 또한 적은 수의 틱을 사용할 수있게하여 쉽게 시퀀싱 할 수있는 양질의 microRNA를 생성합니다.

Tick Ex Vivo Salivary Gland Cultures 및 Extracellular Vesicles에서 microRNAs의 분리

여기에 제시된 것은 다양한 진드기 수명 단계의 부분적 또는 전체 충혈을 허용하기 위해 인공 막 시스템을 통해 시험관 내에서 진드기를 혈액으로 공급하는 방법입니다.

Ixodes 견갑골에 대한 진드기 인공 막 공급

우리는 후속 분석을 위해 작은 절지동물에서 정량화 가능한 혈림프를 효율적으로 수집하는 방법을 설명합니다.

작은 절지동물에서 체림프를 수집하기 위한 정확하고 정량화 가능한 방법

이 기사에서는 임상 연구를 위해 인간을 유충 Ixodes scapularis 에 노출시키는 방법을 제시합니다. 이 기술은 비교적 간단하고 연구 지원자가 견딜 수 있으며 실험적 필요에 따라 수정할 수 있습니다. 인간 피험자를 대상으로 하는 이러한 연구는 해당 규제 당국이 승인한 임상 연구 프로토콜에 따라 수행되어야 합니다.

유충 Ixodes scapularis 진드기에 대한 인간의 실험적 노출을 위한 모델

여기에서는 먹이를 먹인 개별 진드기를 해부한 후 타액, 혈림프, 침샘 및 중장을 수집하여 진드기 매개 병원체의 조직 특이적 국소화를 연구하여 벡터 능력 및 병원체-미생물군집 상호 작용에 대한 이해를 높이는 프로토콜을 제시합니다.

개별 진드기(Acari: Ixodidae)에서 타액, 혈림프, 침샘 및 중장 추출

이 방법은 3D 프린팅 챔버와 실험실에서 제작한 실리콘 막을 통합한 시험관 내 진드기 혈액 공급 시스템 개발을 개략적으로 설명합니다. 이 시스템은 진드기 인공 먹이를 가능하게 하여 다양한 먹이 단계에서 쉽게 샘플링할 수 있고, 혈액량도 적어 이조디드 진드기 연구에 매우 유용한 도구가 됩니다.

Ixodid 진드기 연구에서 3D 프린팅된 챔버의 인공 막을 통해 진드기 혈액을 공급하는 모습

학습하세요 Ixodes scapularis 진드기에서 혈림프, 침샘 및 타액을 수집하는 방법을. 이 기술은 진드기 매개 병원체 역학 연구와 질병 전파 메커니즘 이해에 필수적입니다.

Ixodes Scapularis 진드기의 타액, 침샘 및 Hemolymph 컬렉션

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