Cryopreserved 샘플 복구를 위해 손수 함 장치 실수로 극저온 저장 탱크 떨어졌고

이 절차의 목표는 구성하기 쉬운 장치를 사용하여 액체 질소로 채워진 듀오 탱크에서 극저온 상자 및 극저온 바이알의 샘플을 쉽게 검색하는 것입니다. 이것은 먼저 작업자에서 하나 또는 두 개의 냉동 랙을 제거하여 기동할 수 있는 공간을 확보하고 장치를 작업자에 수직으로 삽입함으로써 수행됩니다. 두 번째 단계는 장치로 doer의 바닥을 따라 부드럽게 긁는 것입니다.

다음으로, 작업자의 벽을 따라 장치를 똑바로 당깁니다.탱크 밖으로 냉동실 상자를 퍼내려면 마지막 단계는 작업자의 바닥에서 꺼낸 상자를 잡고 제거한 냉동 선반을 교체하는 것입니다. 액체 질소로 가득 찬 바인 디캔팅과 같은 기존 방법에 비해 이 기술의 주요 장점은 샘플 무결성을 보존하고 단일 작업자가 수행할 수 있는 쉽고 안전하며 빠른 대안을 제공한다는 것입니다. 극저온 내성 장치의 조립을 시작하려면 플라이어를 사용하여 3면의 강한 넥타이의 한쪽 면을 곧게 펴서 LHA 강한 넥타이를 만듭니다.

여기에서 볼 수 있듯이 강한 넥타이의 치수는 수행하는 사람의 목 직경에 따라 선택할 수 있습니다. 장치가 5 개 반 x 5 인치 극저온 상자를 회수 할 수 있도록 두 개의 강력한 연결을 만들어야합니다. 크라운 볼트, 너트 와셔 및 나사를 사용하여 강력한 타이 TST 스트랩으로 고정하여 크라이오 스쿱의 바닥을 형성합니다.

이제 장치가 여기에 표시된 대로 나타나야 합니다. 이제 슬롯 플레이트를 사용하여 강력한 타이 티 스트랩의 슬롯을 슬롯 플레이트의 한쪽 끝에 있는 슬롯에 맞춥니다. 그런 다음 Hillman 너트와 볼트로 두 개를 함께 고정합니다.

홈이 있는 플레이트와 강한 타이에 미리 뚫린 구멍이 없는 경우 부착을 위한 구멍을 뚫습니다. 원하는 경우 홈이 있는 플레이트의 다른 쪽 끝을 구부리고 폼으로 감싸서 핸들을 형성할 수 있습니다. 장치를 더 잘 잡으려면 워터 클라 전에 거품을 제거해야 합니다.

극저온 내성 DIY 회수 장치는 극저온 바이알 회수에도 적용할 수 있습니다. 여기에는 액체에서 바이알을 퍼내기 위해 변경된 스테인리스 스틸 스트레이너로 평평한 바닥을 대체하는 것이 포함됩니다. 조립을 시작하려면 먼저 크라운 너트와 볼트의 나사를 풀고 강한 타이어 티 스트랩을 슬롯 플레이트에 부착합니다.

그런 다음 스테인리스 스틸 스트레이너를 슬롯 플레이트에 부착하기 전에 펜치를 사용하여 스트레이너의 목을 부드럽게 구부려 베이스를 국자와 유사한 각도로 배치합니다. 사용된 스트레이너가 립과 함께 제공되는 경우 플라이어를 사용하여 립을 아래로 구부립니다. 이렇게 하면 장치를 더 쉽게 조작할 수 있습니다.

스트레이너 손잡이의 구멍을 홈이 있는 플레이트의 구멍과 정렬하고 Hillman 너트와 볼트를 사용하여 스트레이너를 고정합니다. 스트레이너에 미리 뚫린 구멍이 없는 경우 구멍을 뚫습니다. 작업자로부터 냉동 상자를 회수하려면 먼저 극저온 장갑을 착용해야 합니다.

그런 다음 작업자에서 하나 또는 두 개의 냉동 랙을 제거하여 장치를 조작할 수 있는 공간을 확보합니다. 다음으로, 강력한 타이 ttra 베이스가 장착된 직립 극저온 내성 DIY 회수 장치를 사용하여 doer의 바닥을 따라 부드럽게 긁어내고 상자를 모아 doer 탱크 바닥으로 떨어뜨립니다. 그런 다음 작업자의 벽을 따라 장치를 똑바로 당겨 탱크 밖으로 냉동 상자를 퍼냅니다.

장치가 수직으로 잡고 똑바로 위로 당겨 상자가 작업자에게 다시 미끄러지지 않도록 해야 합니다. 극저온 바이알을 회수하려면 스트레이너가 장착된 크라이오 스쿱을 사용하여 크라이오 박스 회수와 유사하게 작업자의 바닥을 부드럽게 긁고 장치를 똑바로 당겨 스트레이너에 수집된 바이알을 잡습니다. 유전자 발현 연구의 주요 과제는 RNA의 품질이 냉동 조직 샘플과 추출된 RNA의 보관 조건에 따라 달라진다는 것입니다.

이 그림은 전체 RNA의 무결성에 대한 샘플 처리의 효과를 보여주며, 동일한 조직 소스의 총 RNA는 실험 전에 다른 샘플 취급을 받았고, RNA 준비 속도는 명확한 28 s 및 18 s 리보솜, 28 s 리보솜 RNA 밴드와 RNA 밴드를 보여주며, 18 s 리보솜 RNA 밴드보다 약 2배 강렬합니다. 이것은 RNA가 손상되지 않았다는 표시입니다. 3번 및 4번 레인은 작업자의 단기 회수에 의한 반복적인 부분 동결로 인해 심각한 저하가 있는 샘플을 묘사하며, 따라서 상자에 떨어진 바이알을 회수해야 하기 때문에 주기적인 디캔팅으로 장기 보관을 모델링합니다.

그러나 DIY 장치를 사용하여 doer 서비스에 저장된 샘플과 부분 동결이 없는 샘플에는 2열에 온전한 RNA가 포함되어 있습니다. 이 비디오를 시청한 후에는 디캔팅할 필요 없이 액체 질소로 채워진 dvar에서 샘플을 검색하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다.