Name: 신경근육학 전기적 자극에 의해 근육 트레이닝의 Murine 모델 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-05-09T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 24 s
Description: 배우세요 생쥐에서 신경근육 전기자극을 이용한 근육 훈련 모델을 통해 근육 생리학을 연구하는 방법을. 이 기법은 임상 재활 프로토콜 개발에 활용될 수 있습니다.

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이 작품은 재활 연구 교육의 물리적 및 직업 치료사 - 종합 추천 (K12 HD055931), 물리 치료와 피츠버그 클로드 디 페퍼 이전 미국인들은 독립 센터 재단 (P30 AG024827을위한 건강 (NIH) K12의 국립 연구소에 의해 추진하는 사업 ).

1. 전극 준비 <ul><li> 벡터 회로 기판의 1cm X 1cm 부분을 잘라내기. </li><li> 간격은 약 3.5 mm를 잊어버리고 핀과 함께 바이스 그립를 사용하여 두 wirewrap 핀을 안정. 핀이 bifurcated 종료까지 직면해야한다. </li><li> needlenose 플라이어를 사용하여, 대략 중간 그들의 길이를 따라, 90 ° 각도로 핀을 wirewrap 잡아봐. </li><li> 와이어 절연가 벗겨진하여 커넥터, 리드 연결에서 약 7cm의 구리 전선을 쉽게받을 수 있습니다. </li><li> 하나 wirewrap 핀의 bifurcated 끝에 솔더 구리 전선 중 하나. 다른 wirewrap 핀에 대한 납땜 단계를 반복합니다. </li><li> 보온 및 안정화하기 위해 구리선과 금색 핀 사이에 납땜 연결에 튜브를 수축 당기세요. 납땜 팁을 사용하여 튜브를 가열. </li><li> 브레드 보드에 회로 기판의 인접한 개구부로 wirewrap 핀이 unsoldered 도움말을 넣습니다. </li><li> wirewrap 핀은 서로 평행하며 성임을 확인보드를 통해 배치하면 도움말이 동일한 거리에 위치하고있는 등 브레드 보드를 통해 ick. </li><li> 투명 에폭시의 핀이 납땜 끝을 포함시킵니다. 에폭시는 약 10 분 동안 치료하도록 허용하거나, 완전히 건조까지. </li><li> 핀 및 벡터 회로 기판이 완전히 리드 와이어에 대한 구조적 무결성 및 스트레인 릴리프를 제공하기 위해 임베디드 때까지 에폭시의 적용을 반복합니다. </li><li> 골드 핀의 팁을 노출 금속 파일을 사용하여 에폭시 아래로 모래. </li><li> 리드 와이어는 적절한 지속성을 가지고 두 개의 리드가 전기 누전되지 않도록하고 그것에 멀티미터를 사용하여 </li><li> 전극 여성 양방향 와이어 커넥터 (포모나 ​​패치 코드)로 NMES 장치에서 리드를 연결합니다. </li></ul> 2. 동물 준비 <ul><li> 동물은 100 % O 2 기체에 2 % isofluorane (애보트 래버러토리스, 노스 시카고, IL)을 사용하여 흡입을 통해 anesthetized 있습니다. 동물 t에 걸쳐 anesthetized 유지됩니다그는 세션을 NMES. </li><li> 시작하기 전에 NMES 프로토콜 동물 완전히 anesthetized한지 확인하는 것은 발가락 핀치를 수행합니다. </li><li> 동물은 정기적으로 마취 수준이 충분한지 확인하기 위해서는 자극에 대한 응답을 확인한다. 필요에 따라 마취가 조정되어야합니다. 자극 다리, 호흡 깊이의 변화, 그리고 점액 점막의 색깔의 그것보다 다른 운동은 모두 마취의 깊이를 모니터하고 정기적으로 평가되어야한다. </li><li> 측면 드러누움의 동물을 둡니다. </li><li> 절차를 수행하는 동안 각막 건조를 방지하기 위해 눈에 안과 윤활제를 적용합니다. </li><li> 취급하는 hindlimb 영역을 면도하고, 알코올로 닦아냅니다. </li><li> 물로 린스 후, 3 % 표백제와 전극을 닦아주십시오. </li><li> 전극이 적용됩니다 사이트를 통해 젤을 수행 레이어를 적용합니다. 전극과 피부 사이의 전류 흐름을 보장하기 위해 NMES 프로토콜 전반에 걸쳐 필요한 경우 다시 적용합니다. </li><li> 가열 램프 OR 순환 용수 이불 정상 코어 바디 범위를 유지하는 데 사용해야합니다. </li><li> 참고 : 모든 절차 검토와 승인을 피츠버그 대학 기관 동물 관리 및 사용위원회와 보장 PHS와 AAALAC INT로 진행되었습니다. 공인 프로그램과 시설을 갖추고 있습니다. </li></ul> 3. 자극 <ul><li> 전극 배치 : <ul><li> tibialis의 앞부분과 신근 digitorum의 longus 근육을 포함한 앞부분 구획 근육의 자극을 위해 직접 일반적인 peroneal 신경의 말초 가지 꺼져 동물의 깊은 fibular 신경, 동안 표면 전극을 배치하고들에게 단지 앞쪽에 위치하고 있습니다 fibular 머리. </li><li> 자극은 전체 발목 dorsiflexion와 숫자의 전체 연장 elicits 때 앞부분 구획 근육의 자극은 전극의 위치가 확인됩니다. 한편, dorsiflexion은 자리 확장자의 부재로 제시만이 tibialis 앤티rior 근육이 자극되고 있습니다. 이러한 타겟 수축성 반응은 연구 설계에 따라 바람직있을 수 있습니다. </li><li> 초기 동안 발생 자유롭게 움직이는, 동심 단계 ~ 0.5 초 : 근육 수축은 자극의 2 단계로 나뉘어져 있습니다. 이 첫 단계 동안, 앞발로 땅을 차다는 최대한 dorsiflexion와 숫자 확장 휴식 위치에서 이동합니다. 자극의 두 번째 단계는 최종 범위 dorsiflexion 및 자리 내선 번호 지속 사시 수축이다. </li></ul></li><li> 자극 매개 변수 : <ul><li> 이 NMES 모델은 기존 NMES 2 채널 (표 참조) 제공 300 PV Empi 다기능 전기 요법 장치를 활용합니다. 이 모델의 목적을 위해서만 1 채널이 사용됩니다. </li><li> 사용되는 매개 변수는 대칭 파형 150 μs의 펄스 기간 및 50Hz의 주파수를 포함합니다. 자극 시간은 0.5 초 램프 위쪽 및 아래쪽 0.5 초 램프로, 5 초로 설정됩니다. 이것은 근육이 accli 더 점진적 수있게 해자극에 친구. 현재 프로토콜에서 수축 사이에 시간을 떨어져 10 초로 설정되었지만, 이것은 원하는 효과에 따라 조정될 수 있습니다. 배 밖 감소 근육 피로의 더 급속한 개시가 높아집니다. 이러한 자극 매개 변수는 상당한 골격근 손상 1, 15, 16를 유도하지 않고, 신경근육학 전기 자극을 사용하여 근육의 강도를 향상시키기위한 임상 프로토콜을 기반으로했다. </li><li> 마우스는 세트 사이에 5 분 휴식으로, 10의 수축이 두 세트를 완료합니다. </li><li> 성인 동물의 경우 NMES 강도는 일반적으로 9mA에서 시작됩니다. 우리의 경험에서 이것은 자극에 따라 즉시 눈에 보행 장애를 유발하지 않는 최대한의 농도로 시작하는 대략적인 것입니다. 이후 NMES 세션의 경우 강도가 1mA에 의해 동물 20 전체 dorsiflexions을 완료할 수 있습니다 때마다 증가합니다. </li></ul></li><li> 자극 프로토콜과 reco 완료 이후매우 마취에서 동물은 일반적으로 정상적인 걸음걸이와 자세를 보여줍니다. 걸음걸이는 NMES 프로그램의 기간에 걸쳐 손상되지 않은 유지됩니다. </li></ul> 4. 대표 결과 야생 유형 (B6/10), B6.SCID 및 MDX / SCID 마우스 :이 문서에서 설명 NMES 프로토콜 등 여러 가지 마우스 종자에서 구현되었습니다. 3-5개월에서 4 주 (20 세션)을 통해 수행 NMES 대표 결과는 오래된 MDX / SCID가 제공됩니다. 동물을 편안하게 마취 하의 경추 탈구에 의해 euthanized되었다. tibialis 앞쪽에 근육은 2 메틸 부탄 액체 질소에 미리 냉각하고, -80에 저장된 ° C로 수확 즉시 냉동되었다 시리얼 크로스 섹션 (10 μm의)을 취득하고 슬라이드에 탑재되었다. 통계 분석은 (SPSS, v19.0 소프트웨어) 표준 통계 소프트웨어 패키지를 사용하여 수행되었다. 첫째, Levene의 시험 여부가 WA를 평가하는 데 사용되었다변동의 님의 평등. 독립 표본 T-테스트는 다음 NMES 및 제어 그룹 간의 차이를 조사하기 위해 수행되었다. Hematoxylin과 Eosin (H &amp; E) 얼룩은 NMES 프로토콜은 dystrophic 근육의 증가 부상을 초래 하리라는 사실 여부를 조사하기 위해 수행되었다. 섹션 중 하나가 선택되고, 사진은 빛을 현미경 (니콘 이클립스 E800, 니콘, 일본)를 사용하여 획득했다. 재생 인덱스에는 상당한 증가 (중앙 nucleated 섬유의 수가 없었습니다 개발 이미지 분석 소프트웨어, 이미지 제이 - 섬유 및 중앙에 위치한 핵 가진 섬유의 개수의 총수는 수동으로 국립 보건원 (NIH)을 사용하여 계산되었다 그림 1); / NMES에 제출된 동물 섬유의 총수)은 같은 컨트롤 (P = 0.802에 비해. 이것은 NMES의 응용 프로그램이 dystrophic 동물에서 관찰 변성 - 재생 계단식으로 증가하지 않는 것이 좋습니다, 따라서 가능성이 없습니다증가된 근육 부상을 일으킬 수 있습니다. CD31에 대한 Immunofluorescent 염색법은 근육 vascularity에서 4 주간의 NMES 프로토콜의 효과를 조사하기 위해 수행되었다. 간단히, 근육 섹션은 포르말린 4%에서 해결 5 % 말 혈청 (HS)를 사용하여 차단되었습니다. 섹션은 쥐의 반 마우스 일차 항체 (5 % HS에서 1:300 희석)으로 incubated 및 555-라벨이 염소 안티 쥐 이차 항체 (5 % HS에서 1:300 희석)로 치료되었다. CD31 양성 세포의 총 개수를 정할 한 섹션이 선택하고, 형광 현미경을 (니콘 이클립스 E800, 일본)를 사용하여 사진에 찍혔다. 모세 혈관의 총수는 수동 북부 이클립스 소프트웨어 (Empix 이미징 주식 회사)를 사용하여 계산되었다. NMES 프로토콜과 같은 골격 근육 angiogenesis를 촉진 설명을 나타냅니다; 컨트롤 (그림 2 P &lt;0.01)에 비해 NMES에 제출된 동물의 CD31 양성 세포의 수가 크게 증가가 발생했습니다. <stroNG&gt; 현장 수축성 테스트의 경우 : 4 주 NMES 프로토콜의 완료 후, 앞부분 구획 근육의 수축성 테스트는 현장 테스트 장치 (모델 809B, 오로라 과학 INC, 캐나다), 자극기 (모델 701C, 오로라 과학 INC에서를 사용하여 수행되었다 캐나다), 그리고 힘 변환기 (오로라 과학 INC, 캐나다). 간단히, anesthetized 동물의 peroneal 신경은 무릎의 측면에 작은 절개를 통해 격리되었다. 마우스는 다음 플랫폼에서 부정사 배치되었으며 테스트되고 발이 footplate에 위치했다. 테스트에 사용된 hindlimb는 무릎 및 발을 헝겊 테이프로 안정되었다. 근육이 피부 아래에 삽입 훅 전극을 사용하여 자극했다. 근육 파상풍의 수축은 4 주 NMES 프로토콜은 근육의 힘을 향상을 일으킬 것인지 여부 조사를 위해 350ms에 대해 150Hz의 주파수에서 테스트되었습니다. 결과는 서부 유럽 표준시 근육 무게로 정상화되었다. tetan의 약 30 % 증가가 발생했습니다설명된 프로토콜을 제안 컨트롤 (P = 0.005) (그림 3)에 비해 NMES에 제출된 동물의 IC의 수축은 MDX / SCID 동물의 골격 근육의 강도를 향상시킵니다. <img alt="그림 1" src="/files/ftp_upload/3914/3914fig1.jpg" /> NMES 4 주 후) 치료 컨트롤, B). 그림 dystrophic 1 Hematoxylin &amp; Eosin 골격근의 염색법 (MDX) / immunodeficient 생쥐 (4-5개월) (10 배 확대). <img alt="그림 2" src="/files/ftp_upload/3914/3914fig2.jpg" /> 그림 2. dystrophic의 골격근 (MDX) / immunodeficient 생쥐 (4~5개월) (20x 배율)) 치료 컨트롤에서 골격근의 vascularity의 마커와 같은 CD31 immunofluorescence (빨강), B) 4 주 후 NMES. <img alt="그림 3" src="/files/ftp_upload/3914/3914fig3.jpg" /> 그림 3. 수축성 테스트앞부분 구획 컨트롤의 근육 및 4 주간 NMES로 치료 동물. mNm = 밀리 뉴턴 미터. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/3914/3914fig3large.jpg">큰 그림을 보려면 여기를 누르십시오</a> .

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</ol>

우리는 공개 할게 없다.

이러한 결과는 NMES 우리의 개발 murine 모델은 골격근의 angiogenesis (그림 2)와 강화 (그림 3)을 촉진하지만, 골격근의 손상 (그림 1)을 유발하지 않는 것이 좋습니다. 그것은 여기에서 설명한 자극 매개 변수 앞부분 구획 근육에 과부하 근육을 유도하도록 설계되었습니다 것을인지해야합니다. 임상 시나리오의 경우는 것처럼, 전극 배치는 NMES으로 근육의 반응은 섬유 형태 구성에 따라 다를 수 있지만, 다른 근육 그룹을 자극하기 위해 조정할 수 있습니다. NMES 기간, 치료 세션의 총 개수, 그리고 반복의 총수는 디자인을 공부하고 따라 변경될 수 있습니다. 모든 프로토콜과 마찬가지로이 방법은 주목되어야 제한 사항이 있습니다. 현재의 연구에서는 자극이 깊은 fibular 신경을 통해 수행되었다. 그러나, 병원에서 자극 전S는 일반적으로 모터 단위에서 실시. 동물 모델에서 신경의 자극은 완전한 근육 수축을 유도하기 위해 낮은 강도를 요구한다. 제시와 같은 모델의 또 다른 한계는 우리가 동물 anesthetized는 것을 주어, NMES의 응용 중에 정보에 관한 안락 수준을 얻을 수없는 것입니다. 따라서 임상 인구의 비교 농도의 tolerability는 평가하기 어렵다. 그러나 저희 histological 결과 설명한 바와 같이, 근육 부상을 유발하지 않는, 우리의 NMES 모델을 제안한다. 일반적으로 병원에서 구현 modalities가 치료 개입에 대한 세포 및 분자 응답의 향상된 이해를 허용 유용한 실험 도구를 제공해 모방 동물 모델의 개발. 또한, 이러한 모델은 기존의 재활 프로토콜을 수정하고 새로운 징후를 개발하기위한 사전 임상 연구를 수행하는 데 유용합니다.

<table border="1"><tbody><tr><td> 시약의 이름 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 번호 </td></tr><tr><td> bifurcated 납땜 단자와 벡터 와이어 랩 게시물 </td><td> 뉴어크 </td><td> T68 </td></tr><tr><td> 벡터 회로 기판 </td><td> 뉴어크 </td><td> 3662-2 </td></tr><tr><td> 포모나 패치 코드 </td><td> 뉴어크 </td><td> P-36-0 </td></tr><tr><td> 오분 에폭시 </td><td> 조종 베이커 (주) </td><td> 4001 </td></tr><tr><td> 스펙트럼 360 전극 젤 </td><td> 밀리켄 의료 </td><td> MR41217 </td></tr><tr><td> 휴대용 신경근육학 자극 장치 </td><td> EMPI </td><td> 300pv </td></tr></tbody></table>

신경근육학 전기적 자극에 의​​해 근육 트레이닝의 murine 모델

A Murine Model of Muscle Training by Neuromuscular Electrical Stimulation

신경근육학 전기 자극 (NMES)는 널리 2 유지하거나 3-5 근육의 기능적 능력을 향상, 1을 복원하는 데 사용되는 일반적인 임상 양상이다. 골격근의 Transcutaneous 표면 자극이되므로 모터 유닛과 주위의 근육 섬유의 흥분을 유도하는 음극과 양극 사이의 전류 흐름을, 포함한다. NMES는 여러 가지 이유로 골격근 적응 반응을 평가하는 매력적인 양상이다. 첫째, 같은 myofiber의 hypertophy 및 근육 강화 6, angiogenesis 7-9, 성장 인자의 분비 9-11, 및 근육의 전구체 세포 활성화 12와 같은 생리적 adaptations은 잘 문서화되어있는 재현성 실험적인 모델을 제공합니다. 이러한 생리적 반응은 신중하게 자극을 서로 다른 매개 변수 (Cochrane 검토를 위해, 13 참조)를 사용 titrated 수 있습니다. 또한, 신병을 NMES모터 단위가 아닌 선택적으로, 그리고 spatially 고정하고 temporally 동기 방식 14, 모든 섬유에 대한 치료 효과를 exerting의 이점을 제공 관계없이 섬유의 유형. 말초 정맥 질환 또는 강한 악의를 포함한 임상 인구에서 NMES로 지정된 contraindications가 있지만 예를 들어, NMES도 질병 및 / 또는 누워만있는 사람과 엄격한 운동 도전 수있는 인구를위한 안전하고 가능한 것입니다. 여기서는 상용 전극을 채택하고 murine 모델을 사용 NMES 프로토콜을 수행하는 프로토콜을 보여줍니다. 이 동물 모델은 임상적으로 사용 가능한 장치를 이용하여 원하는 근육 수축성 효과를 유도하기위한 전극의 위치에 관한 즉각적인 피드백을 제공하는 장점이 있습니다. 본 원고의 목적을 위해서는 마우스 hindlimb의 앞부분 구획 근육의 근육 자극을 위해 프로토콜을 설명합니다.

앞부분 구획 근육에 신경근육학 전기 자극을 murine 모델 (NMES), 안전하고 저렴한 임상 양상은 설명되어 있습니다. 이 모델은 마우스로 타겟 및 특정 근육의 수축을 도출하도록 의도하기위한 목적으로 즉시 사용할 임상 장치 수정의 장점이 있습니다.

신경근육학 전기적 자극에 의​​해 근육 트레이닝의 Murine 모델

신경근 전기 자극(NMES)은 근육의 기능을 회복1, 유지2 또는 강화3-5하기 위해 널리 사용되는 일반적인 임상 양식으로...

이 실험 절차의 전반적인 목표는 신경근 전기 자극을 이용한 근육 훈련의 마우스 모델을 시연하는 것입니다. 이를 위해 먼저 사람용으로 설계된 임상용 표면 전극을 마우스에 사용할 수 있는 표면 전극으로 개조한 다음, 동물을 마취시키고 자극을 위해 위치시킵니다. 그 후, 비골두 바로 원위측의 심비골신경 위에 표면 전극을 직접 배치합니다.마지막 단계는 전방 굴곡근의 자극 프로토콜을 수행하는 것입니다. 최종적으로 조직학적 분석을 통해 골격근 혈관 분포의 증가가 확인되며, in situ 수축 테스트를 통해 최대 강직 강도의 증가가 나타납니다. 안녕하세요, 제 이름은 Fabrizio입니다.저는 피츠버그 대학교 재활의학과 조교수이자 세포 재활 연구실의 책임자입니다. 오늘은 신경근 전기 자극을 이용한 근육 훈련의 미러링 모델을 시연해 드리겠습니다. 이번 시연의 첫 번째 파트에서는 임상에서 사용 가능한 표면 전극을 마우스의 골격근 자극에 사용할 수 있는 전극으로 수정하는 방법을 보여드리겠습니다.두 번째 파트에서는 이러한 신경근 전기 자극 프로토콜을 실험에 구현하는 방법과 실제 양상을 밀접하게 모방하는 동물 모델 개발 방법을 시연하겠습니다. 임상 적용법을 사용하는 것은 골격근 생리학과 관련된 질문, 예를 들어 근육 활성화가 어떻게 기계적 신호 전달 반응을 유발하는지에 대한 답을 찾는 데 도움이 되며, 이를 분자, 세포 및 조직 수준에서 살펴볼 수 있기 때문에 중요합니다. 안녕하세요, 제 이름은 Ricardo Ferrari입니다.저는 피츠버그 대학교 물리치료학과의 박사 과정 학생입니다. 근육 전기 자극은 근력을 강화하고 근육 치유를 촉진하기 위해 임상에서 흔히 사용되는 절차입니다. 하지만 최적의 매개변수로 어떤 것을 사용해야 하는지에 대해서는 여전히 많은 의문이 남아 있습니다.이 동물 모델은 임상 환경에서 사용할 구체적인 전기 자극 프로토콜 개발에 도움이 될 수 있습니다. 전극을 준비하려면 6mm 길이의 금 핀 2개를 90도 각도로 구부리는 것부터 시작하십시오. 다음으로, 외부 절연체를 제거하여 두 구리 전선의 약 7cm 부분을 노출시킵니다.그런 다음 커넥터의 전선을 약 3.5 millimeters 간격으로 배치된 두 개의 금 핀에 납땜합니다. 그 후, 절연과 고정을 위해 구리 전선과 금 핀의 연결 부위에 수축 튜브를 씌우고 가열합니다. 금 핀이 서로 평행한지 확인한 뒤, 팁이 일직선이 되도록 회로 기판에 꽂습니다. 다음으로, 투명 에폭시를 여러 번 도포하여 핀을 고정시키며, 각 도포 단계 사이에 에폭시를 완전히 건조시킵니다. 마지막으로, 에폭시를 샌딩하여 금 핀의 팁이 드러나게 합니다.다음으로, 전압계를 사용하여 리드선이 전기적으로 단락되지 않았는지 확인합니다. 그 후 플라스틱 튜브를 사용하여 암컷 2방향 와이어 커넥터의 금속 핀을 절연합니다. 이어서 NMES 장치의 전극 리드를 암컷 2방향 와이어 커넥터에 연결합니다.모든 절차는 피츠버그 대학교(University of Pittsburgh) Iacuc의 검토 및 승인을 받았으며, PHS Assured 및 alac. International 인증 프로그램 및 시설에서 수행되었습니다. 동물은 isof fluorine 흡입을 통해 마취시킵니다. 동물은 NMES 세션 전반에 걸쳐 마취 상태를 유지해야 합니다.발가락 꼬집기 신전 반사 테스트를 통해 마취 상태를 확인해야 합니다. 그런 다음 동물을 측와위 자세로 놓습니다. 이어서 뒷다리를 면도하고 알코올로 닦아낸 후, 전극을 3% bleach로 닦습니다.그 다음 물을 사용하여 펄스 지속 시간 150 microseconds 및 주파수 50 PP s를 포함한 자극 파라미터를 설정합니다. 이어서 자극 시간을 5초로 설정하고, 0.5초의 램프 업(ramp up)과 0.5초의 램프 다운(ramp down)을 설정합니다. 이렇게 하면 근육이 자극에 점진적으로 적응할 수 있어 동물이 더 편안함을 느낍니다.그 후, 수축 사이의 휴지 시간을 10초로 설정합니다. 이는 원하는 효과에 따라 조정할 수 있으나, 휴지 시간을 줄이면 근피로가 더 빠르게 시작됩니다. 다음으로, 3% bleach와 물로 전극을 멸균한 후, 전경골근과 최장지신근을 포함한 전실 근육의 자극을 위해 전극에 전도성 젤을 도포하십시오. 표면 전극을 외측 대퇴 과 바로 원위쪽에 위치한 동물의 총회음신경 위에 직접 배치합니다.자극을 주었을 때 발목의 완전한 등측굴곡과 손가락의 완전한 신전이 유도되면 전극의 배치가 확인된 것입니다. 반면, 손가락 신전 없이 발등의 등측굴곡만 일어나는 것은 전경골근만 자극되고 있음을 시사합니다. 다음으로, NMES 강도를 9 mA에서 시작하여 총 20회의 수축이 되도록 2세트의 수축을 완료하며, 세트 사이에는 5분간의 휴식 시간을 가집니다. 휴식 기간 동안에는 반대측 사지에 대한 자극을 수행합니다.이제 동물을 회복 챔버에 넣습니다. 3~5개월령의 MDX skid 마우스에 4주 동안 NMES를 적용한 후, 헤마토실린-에오신 골격근 염색 결과 비자극 대조군과 비교했을 때 중심핵 섬유의 수가 증가하지 않은 것으로 나타났습니다. 이는 NMES 적용이 퇴행-재생 연쇄 반응을 유발하지 않음을 시사합니다.내피세포 마커로서의 CD 31 면역조직화학 염색 결과, 자극을 받지 않은 대조군 생쥐에 비해 4주간의 NMES 처리는 처리된 근육의 유의미한 혈관 신생을 유도했음을 보여줍니다. 이 그림은 처리되지 않은 대조군 근육 대비 NMES 처리 근육의 최대 등척성 근력 증가를 나타냅니다. 이 기술을 숙달하면, 동물 한 마리당 프로토콜 완료까지 약 15분이 소요됩니다.이 프로토콜에서 가장 어려운 부분은 원하는 근육 반응을 유도하기 위해 전극의 적절한 위치를 찾는 것입니다. 시청해 주셔서 감사합니다. 문의 사항이 있으시면 언제든지 저희 실험실로 연락해 주시기 바랍니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

프로그램된 전기 자극은 심장의 전도 특성을 결정하는 능력, 다양한 서성 거려 프로토콜을 사용하여 심장 arrhythmias를 유도하고 종료할 수있는 가능성을 제공합니다. transvenous 카테터를 사용하여 intracardiac의 electrogram 레코딩은 arrhythmogenic 기판을 확인하기 위해 프로그램된 전기 자극 프로토콜을 다음과 생쥐에서 구할 수 있습니다.

마우스에 프로그램된 전기 자극을

설계 근육 조직은 질병 모델로 또한 고기에 대한 대체 소스로, 재생 의료에 큰 가능성이 있습니다. 여기 마우스 myoblast의 전구 세포, 및 전기 펄스에 의해 자극에서이 경우에, 근육 구조의 기술에 대해 설명합니다.

전기 자극의 손쥐 Myoblast의 전구 세포 및 응용에서 공학 골격근 조직도

신경근 기능의 변화를 평가하기 위한 프로토콜을 제시합니다. 경피적 전기 신경 자극은 근육 반응을 유발하는 비침습적 방법입니다. 이러한 반응의 전기생리학적, 기계적 특성을 통해 뇌에서 근육(척추상, 척추 및 말초 수준)에 이르는 신경근 기능을 평가할 수 있습니다.

경피적 전기 신경 자극을 사용하여 신경 근육 기능의 평가

이 프로토콜 쥐 hindlimb에 골격 근육 자극 유도 적응을 관찰 하는 운동의 만성 수축 성 활동 모델의 사용을 설명 합니다.

수축 성 활동 유도 된 쥐 골격 근육 Phenotypic 적응 연구 만성 자극에의 응용

척수 상해 보조 만성 대사 질환의 높은 위험에 발생할 수 있는 충격적인 건강 상태 이다. 여기, 우리는 함께 사용 하 여 표면 신경 근육 학 전기 자극-저항 훈련 전략으로 사이클링 기능적 전기 자극 더 낮은 사지와 여러 의료 문제를 개량 하는 프로토콜을 제시.

척수 손상 후 더 낮은 말단 전기 자극 교육의 패러다임

쥐 골격 근육 수축 기능의 측정 치료 개입의 효능 뿐만 아니라 질병의 진행을 추적 하는 데 사용할 수 있는 유용한 도구입니다. 여기 같은 마우스에서 시간이 지남에 따라 반복 될 수 dorsiflexor 근육의 비-침략 적, vivo에서 평가 설명 합니다.

비-침략 적 쥐에서 Dorsiflexor 근육 기능 평가

우리는 인간 공학 골격근 조직과 광유전학적 모토뉴런을 사용하여 신경근 접합 기능을 특성화하기 위한 재현 가능하고 자동화되고 편향되지 않은 이미징 시스템을 설명합니다. 이 시스템은 시간이 지남에 따라 신경 근육 연결성의 기능적 정량화를 허용하고 신경 독소 및 중증 근무력증 환자 혈청으로 인한 감소 된 신경 근육 기능을 감지합니다.

인간 신경근 접합부의 광유전학 모델의 공학 및 특성화

이 절차는 마우스에서 번역 가능한 프로그레시브 로드 러닝 휠 저항 훈련 모델을 설명합니다. 이 저항 훈련 모델의 주요 장점은 전적으로 자발적이므로 동물의 스트레스와 연구원의 부담을 줄인다는 것입니다.

마우스의 점진적 저항 훈련을 위한 간단하고 저렴한 러닝 휠 모델

본 프로토콜은 마우스와 같은 작은 동물에서 수행되는 정밀 재활 연구에 통합될 수 있는 투여량 조정 저항 훈련(DART)이라는 독특한 기술을 설명합니다.

근육 손상 위험이 감소한 마우스에서 복용량 조정 저항 훈련

광학 선명도는 제브라 피쉬의 세포 생물학적 및 생리 학적 작업에 대한 주요 이점입니다. 골격근 및 이웃 조직의 성장이 전신 성장과 어떻게 통합되는지에 대한 새로운 통찰력을 허용하는 개별 동물의 세포 성장 측정을위한 강력한 방법이 설명됩니다.

변경된 전기적 활동을 받은 개별 살아있는 제브라피쉬의 골격근 성장에 대한 실시간 및 반복 측정

이 연구에서는 설치류 모델에서 신경근 접합부(NMJ) 전달의 생체 내 측정을 가능하게 하는 정교한 단일 섬유 근전도(SFEMG) 프로토콜을 시연합니다. 쥐 비복근의 NMJ 전달 변동성 및 실패를 정량화할 수 있도록 SFEMG 기술에 대한 단계별 접근 방식이 설명되어 있습니다.

설치류 모델에서 신경근 접합 전달을 평가하기 위한 자극 단일 섬유 근전도(SFEMG)

배우세요 생쥐에서 신경근육 전기자극을 이용한 근육 훈련 모델을 통해 근육 생리학을 연구하는 방법을. 이 기법은 임상 재활 프로토콜 개발에 활용될 수 있습니다.

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