2012년 8월 22일
토양 - 전송 helminths (STHs)과 만성 감염 stunting, 그리고 성장 자녀의 낭비, 흡수 장애를 일으 킵니다. 따라서, 이러한 감염은 또한 아이들의 체력을 줄일 것을 그럴듯합니다. 여기, 우리는 STHs과 어린이의 물리적 피트니스을 평가하기위한 20 미터 셔틀이 운영하는 시험의 진단을위한 두 기술을 표시합니다.
다음 방법론의 목적은 그렇게 전파된 구충 감염 상태를 평가하고, 이러한 구충 감염이 학령기 아동의 신체적 건강 상태에 영향을 미치는지 확인하는 시도를 촉진하고 표준화하는 것입니다. 이는 Cato Katz 기법을 사용하여 흔한 토양 매개 구충인 Ascaris Lumoid TUS Tria, 그리고 구충류인 CLIs stoma Duo Denali 및 NTO ERUs의 감염을 진단함으로써 달성됩니다. 두 번째 단계로 Strully Stir Corrales 진단에 가장 널리 사용되는 방법인 Erman 기법을 수행합니다.
다음으로, 아동의 체력을 평가하기 위해 20미터 왕복 오래달리기 검사를 실시합니다. 앞서 언급한 방법론을 바탕으로 헬민스(Helmut) 감염 아동과 비감염 아동 간의 체력 수준 차이를 보여주는 결과가 도출됩니다. 이러한 방법들을 조합하면 토양 매개 헬민스 감염이 감염자의 체력에 영향을 미치는지, 그리고 이러한 감염의 실제 부담은 어느 정도인지와 같은 핵심 질문에 대한 답을 얻는 데 도움이 될 수 있습니다.
Cato-Catz 기법은 감염된 피검사자가 대변으로 배출하는 기생충 알의 검출을 용이하게 하기 위해 사용됩니다. 먼저 표준 Cato-CATT 템플릿을 현미경 슬라이드 중앙에 배치하십시오. 장갑을 착용한 상태에서, 템플릿 중앙의 구멍에 41.7 milligrams의 대변을 담습니다.
신선한 분변 샘플 2~3g을 신문지나 알루미늄 호일 위에 덜어냅니다. 그런 다음 분변 위에 와이어 또는 플라스틱 메쉬를 눌러 샘플을 체 가름합니다. 작은 플라스틱 스파튤라를 사용하여 메쉬에서 체 가름된 물질을 긁어내고, 이를 Cato Kat 템플릿의 펀치 구멍에 가득 채웁니다.
스패튤라를 사용하여 구멍 내부의 내용물을 평평하게 만들어 과도한 분변 물질을 제거하십시오. 그런 다음, 현미경 슬라이드에 부착된 분변 물질이 흐트러지지 않도록 템플릿을 수직으로 들어 올려 제거하십시오. 템플릿과 스패튤라는 세제와 물로 세척한 후 재사용할 수 있습니다.
다음으로 글리세린 말라카이트 그린 용액에 최소 24시간 동안 담가둔 셀로판 조각을 현미경 슬라이드 위의 분변 시료 위에 놓습니다. 분변을 두꺼운 도말 형태로 펴기 위해, 분변 시료가 담긴 슬라이드 위에 깨끗한 현미경 슬라이드를 대고 조심스럽게 눌러, 현미경 슬라이드의 너비보다 약간 작은 지름의 원형 범위 내에 시료를 고르게 분산시킵니다. 이제 슬라이드를 직사광선이 닿지 않는 곳에 두고 30분에서 60분 동안 투명해질 때까지 둡니다.
30분에서 60분 후, 슬라이드를 회수하여 광학 현미경의 40배에서 100배 배율로 두꺼운 도말 표본을 체계적으로 검사합니다. 충란의 수를 세고 종별로 분류합니다. 이제 충란 수에 24를 곱하여 감염 정도에 대한 표준화된 추정치를 구하며, 이는 관례적으로 분변 1g당 충란 수 또는 EPG로 표시합니다.
erman 기법을 수행하기 위해 먼저 유리 깔때기를 고정할 수 있는 스탠드를 설치합니다. 유리 깔때기를 가져와 줄기 부분에 고무 튜브를 연결합니다. 클램프나 스프링 클립으로 튜브를 막은 후, 깔때기를 스탠드에 고정하여 지지합니다.
다음으로 원뿔 모양의 체 또는 와이어 스크린 조각을 깔때기에 넣습니다. 이 스크린 위에 의료용 거즈 한 조각을 층이 지게 덮습니다. 그런 다음 장갑을 착용한 상태에서 깔때기에 수돗물을 채우고 장치에 누수가 없는지 확인합니다.
20~30g의 신선한 분변을 의료용 거즈 중앙에 덜어내고, 필요 시 물을 더 추가하여 분변이 물에 완전히 잠기게 합니다. 그 다음, 의료용 거즈로 시료를 감쌉니다. 이어서, 깔때기 아래쪽에서 2시간 동안 인공광을 쬐어줍니다.
이는 Baermann 기법이 유충의 광성(phototactic) 성질을 이용하여, 유충이 조명된 분변 시료 밖으로 이동한다는 원리를 기반으로 하기 때문입니다. 2시간 후, 고무 튜브의 클립을 조심스럽게 풀어 깔때기 하단부의 물 50 milliliters를 원심분리 튜브에 들이붓습니다. 이어서, 수집된 물을 600 ×g에서 5분 동안 원심분리합니다.
그 다음 침전물이 섞이지 않도록 상층액을 조심스럽게 따라냅니다. 튜브에 남은 마지막 몇 방울을 이용해 재현탁시킨 후, 해당 용액 두 방울을 현미경 슬라이드 위에 피펫으로 떨어뜨립니다. 광학 현미경을 사용하여 먼저 40배 배율로 기생충 존재 여부를 검사하고, 이어서 100~400배 배율로 종을 확인합니다.
셔틀런 테스트를 설정하기 위해 OID stir의 1단계 유충들이 살아있으며 현미경 아래에서 활발하게 움직여야 합니다. 먼저, 20m의 평평하고 곧은 달리기 코스를 측정하고 콘으로 거리를 표시하십시오. 테스트 참가자의 손목에는 심박수 측정기를, 가슴 주변에는 해당 송신기를 착용시키십시오.
이 장비는 테스트 전후의 심박수를 측정하여 참가자가 최대 노력을 기울였는지 모니터링합니다. 모니터를 착용한 후, 아동에게 8.5 km/h의 주행 속도로 설정을 시작하여 20m 랩에 해당하는 사전 녹음된 신호음의 속도에 맞춰 코스를 왕복하도록 요청하십시오. 20m 간격을 나타내는 신호음의 빈도는 매분 0.5 km/h에 해당하는 속도로 자동 증가하며, 참가자가 새로운 20m 구간의 주행을 시작하도록 안내합니다.
신호가 울릴 때마다 다음 신호가 오기 전에 완주해야 합니다. 아이가 20m 구간을 2회 연속으로 페이스에 맞춰 달리지 못하면 중단시키십시오. 그 다음, 마지막 구간의 달리기 속도를 기록하십시오.
참가자는 연령, 성별, 도달 심박수와 함께 모든 과정을 완료하였습니다. 테스트 종료 시, 해당 심박수가 아동의 최대 심박수인지 확인하십시오. 최대 심박수에 도달하지 않았다면 아동이 최대 노력을 기울이지 않았을 가능성이 있으며, 이 경우 테스트를 반복해야 합니다.
이제 다음 공식을 사용하여 피실험자의 최대 유산소 능력 또는 VO₂ max를 추정하십시오. VO₂ max = 31.025 + 3.238 × 속도(km/h) - 3.248 × 연령(세) + 0.1536 × 속도(km/h) × 연령(세)입니다. 다음 두 이미지는 *Ascaris lumbricoides*의 알을 보여주며, 길이는 약 45~74 µm, 너비는 35~50 µm이며 두꺼운 껍질 벽을 가지고 있는데, 여기서는 수정된 *A. lumbricoides* 알로 표시되어 있습니다.
황갈색 외관을 나타내는 알부민 외피(albumins coat)의 형태에 주목하십시오. 이와 대조적으로, 여기에는 수정되지 않은 알루모이드-e 난자(alumoid e egg)가 제시되어 있습니다. 외피가 없으며, 난자가 수정란보다 약간 더 길고 크다는 점에 주목하십시오.
전반적으로, 이 이미지는 tea trico의 알을 보여줍니다. 길이는 약 50 microns, 너비는 22 microns이며, 양끝에 뚜렷한 극전(polar plugs)이 있는 길쭉한 형태입니다. 이와 대조적으로, 여기 보이는 구충(hookworm)의 알은 벽이 매우 얇으며, 알 중심부의 조밀한 세포 군집 주변으로 투명한 고리가 형성되어 있습니다.
이 이미지에는 S stir Corrales L 1기 유충이 나타나 있습니다. 길이는 약 180에서 380 µm이며 구강강이 매우 짧습니다. 뚜렷한 생식기 원기가 관찰되며 파란색 화살표로 표시되어 있습니다.
빨간색 화살표는 끝이 뾰족한 유충의 꼬리 부분을 나타냅니다. 체력을 측정하기 위해 20m 셔틀런 테스트를 실시하였습니다. 셔틀런 테스트 결과에 대한 해석은 다양한 방식으로 수행될 수 있습니다.
연령, 성별, 기타 관련 건강 상태, 사회경제적 지위 및 문화적 습관이 유사한 감염군과 비감염군 피험자 간의 아동 신체 적합도를 비교할 수 있습니다. 더 나아가 STH 감염 강도와 신체 적합도 사이의 잠재적인 용량 반응 관계를 확인하고, 다중 기생충 감염의 다양한 수준과 신체 적합도를 비교해 볼 수 있습니다. 예를 들어, 여기의 그래프는 T. trichiura에 감염된 아동의 신체 적합도가 감염되지 않은 아동에 비해 유의하게 감소했음을 보여줍니다.
이 영상을 시청하신 후, 여러분은 cut cuts 기법, bare mount 기법, 그리고 20미터 셔틀런 테스트를 수행하는 방법에 대해 충분히 이해하게 될 것입니다. 이러한 방법들은 soy transmitter 헬멧 감염이 학령기 아동의 신체 능력에 영향을 미치는지 평가하는 데 도움이 될 것입니다.
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본 연구는 토양 매개 기생충(STH) 감염이 학령기 아동의 신체 능력에 미치는 영향을 조사합니다. 진단 기술을 사용하여 감염 상태를 평가하고, 20미터 셔틀런 테스트를 통해 아동의 체력을 평가합니다.
토양 매개 기생충(STH) 감염 상태와 이것이 신체 적응력에 미치는 영향을 평가하는 것은 자원이 제한된 환경에서 공중 보건 부담을 평가하기 위한 질병 관련 시스템을 제공합니다. 표준화된 진단 및 적응력 측정 방법은 기생충 감염과 유산소 능력 및 생산성 저하를 연결하는 가설의 기전적 위험 요소를 제거할 수 있게 합니다. 이는 감염 강도와 기능적 결과에 대한 정량적이고 재현 가능한 데이터를 생성함으로써, 소외 질환 연구에서 표적 검증 및 표현형 스크리닝을 지원합니다.
이 방법은 STH 감염의 진단적 확인과 신체 적합도의 기능적 평가를 통합하여, 이를 소외된 감염성 질환의 초기 발견부터 전임상 워크플로우까지의 과정에 배치합니다.