Name: 쥐 Orthotopic 작은 창자 이식 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-11-06T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 16 s
Description: 배우세요 쥐에서 정위 소장 이식술을 통해 장기 이식의 면역학적 및 염증 반응을 연구하는 방법을. 이 기술은 혈관 봉합과 장 연속성 재수립을 포함하며, 장기 생존 및 기능적 이식편 확보에 필수적입니다.

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1. 기부자 운영 <ol><li> 기증 쥐 24 시간 (물 / 혈당 솔루션을 무료로 이용하실 수)에 금식 보관해야합니다. </li><li> Isoflurane 흡입 마취를 유도하기 위해 표준 분무기에 2 %로 시작하고 개복술을 수행 한 후 1 % 줄일 수 있습니다. 진정 작용을 확인 발가락 핀치을 수행합니다. </li><li> 복부를 면도하고 피부 시험을 치루 3 회 (Kodan)로 청소하십시오. 그런 다음 진통제의 피하 투여 후 중간 절개를 수행합니다. </li><li> 이식은 생리 불린 거즈에 싸서되면 췌장 및 Q-팁 (6x 확대와 함께 수술 현미경)을 부드럽게 오름 콜론 사이의 생리 adhesions를 구분합니다. </li><li> Ligate와 7-0 실크를 사용하여 ileocecal &amp; 중간 &amp; 오른쪽 복통 혈관을 나눕니다. 오름 콜론은 장간막 정맥의 오른쪽 (SMV)에 퍼져 후, ileocecal 오른쪽 중간 잘록 창자 선박은 7-0 관계를 사용하여 결합 및 분할에 대한 식별 할 수 있습니다. </li><li> 전체 SMV는 정리와 노출되어 있도록 위쪽으로 배를 철회. 철회를위한 모기 겸자를 사용하십시오. 클램프는 필요에 따라 모양으로 형성 plasticine 질량에 의해 개최됩니다. </li><li> Ligate와 SMV에서 오는 pancreatico - 십이지장 정맥을 나눕니다. 췌장 조직 이식에서 제거 할 수 있습니다 전에 SMV에서 발생하는 모든 작은 pancreatico - 십이지장 정맥은 신중하게, 확인 7-0 실크로 출혈도 잡았와 구분해야합니다. </li><li> Ligate와 SMV과 복부 대동맥 사이 lymphatics를 포함하여 손실 결합 조직을 나눕니다. 여전히 복부의 오른쪽에있는 그라프로는 SMV 및 복부 대동맥에 액세스 할 사이 lymphatics 등의 결합 조직을 잃게됩니다. 이 결합 조직은 7-0 실크를 사용하여 출혈도 잡았와 장 이식의 수술 lymphorrhea을 피하기 위해 나눌 수 있어야합니다. </li><li> Ligate와 오른쪽 신장 동맥을 나눕니다. 결합 조직이 분열 한 후, 오른쪽 신장 동맥은 accessibl된다전자와는 출혈도 잡았와 7-0 실크를 사용하여 구분됩니다. </li><li> 체계적으로 음경 정맥을 통해 헤파린 IV 200 단위를 사용하여 쥐를 heparinise. </li><li> 한계 동맥을 Ligate하고 duodeno-jejunal 교차로에서와 터미널 회장에서 작은 창자를 나눕니다. </li><li> 대동맥은 SMA의 출처에 proximally 출혈도 잡았 있습니다. 포털 정맥은 지라 정맥과 합류에 가로로되어 있습니다. 그런 다음 이식은 대동맥 세그먼트와 SMA 자사의 혈관 작은 꽃자루로 구성된을 수확하고 있습니다. </li></ol> 2. Backtable 절차 <ol><li> 대동맥 도관을 통해 4에 위스콘신 솔루션 (UW)의 대학 ° C의 3 ML을 사용하여 이식을 Perfuse와 4 ° C (루멘 관개는 필수입니다)에서 Uro​​-Nebacetin N 솔루션의 30 ML과 jejunal 끝에서 장 내강을 관개 . </li></ol> 즉시 이식을 추출 후 대동맥 도관은 3 ML 차가운 UW 솔루션과 재관류에 사용됩니다. 에서이 들어, 20 G IV 카테터10 ML의 주사기가 사용됩니다. perfusate은 나누어 포털 정맥에서 자유롭게 밖으로 흘러하기 위해 관찰해야합니다. Nebacetin있는 장 관개를 들어, 50 ML의 주사기가 사용됩니다. <ol start="2"><li> 받는 사람의 준비 기간 동안 4 ° C에서 UW 솔루션에 이식을 저장합니다. </li></ol> 3. 받는 운영 <ol><li> 받는 사람 쥐 24 시간 (물 / 혈당 솔루션을 무료로 이용하실 수)에 금식 보관해야합니다. </li><li> Isoflurane 흡입 마취를 유도하기 위해 표준 분무기에 2 %로 시작하고 개복술을 수행 한 후 1 % 줄일 수 있습니다. 진정 작용을 확인 발가락 핀치을 수행합니다. </li><li> 복부를 면도하고 피부 시험을 치루 3 회 (Kodan)로 청소하십시오. 그런 다음 intraoperative 진통제에 대한 Carprofen 5 밀리그램 / kg SC의 피하 투여 후 중간 절개를 수행합니다. </li><li> 정상적인 생리 불린 거즈에받는 장을 정리하고받는 사람의 가슴에 놓습니다. </li><li> Q-팁과 퉁명스럽게 retroperitoneum를 열고 abdomi 노출단지 필요한 경우 다운 엉덩 혈관의 수준에 신장 혈관, 아래 NAL 대동맥과 아래 대정맥은 microscissors을 사용합니다. 혈액 손실을 방지하기 위해 7-0 실크를 사용하여 대동맥과 대정맥에서 작은 허리와 척추 tribuaries을 Ligate. (이 작업을 수행하려면 16X에 수술 현미경 줌을 변경할 수 있습니다.) </li><li> distally microvessel 클립을 사용하여 왼쪽 신장 혈관 proximally와 엉덩 분기 위 아래에있는 대동맥과 IVC를 건너서 - 클램프. 하나의 클램프를 동시에 혈관 클램프에 distally뿐만 아니라 proximally 사용됩니다. anteriorly microknife를 사용하여 모두 혈관을 절개하고 나머지 피를 씻어. </li><li> 연속 10-0 Prolene의 봉합을 사용하여 그라프 트 대동맥 세그먼트과받는 사람의 infrarenal 대동맥 사이의 엔드 - 투 - 측 문합 부위를 만들기 .. 처음에는 이식은 낮은 숙박 봉합의 동맥 문합하고 매듭 묶느라 뒷면 벽 바늘을 수행 할 수있는 복부의 오른쪽 (12시 위치 쥐의 머리)에 배치됩니다. 일실내, 이식은 문합의 전면 벽을 노출하고 봉합 할 수있는 복부 (8시와 9시에 위치 쥐의 머리)의 왼쪽으로 설정되어 있습니다. </li><li> 그라프 트 포털 정맥과받는 사람의 IVC 사이의 엔드 - 투 - 측 문합은 10-0 Prolene을 사용하여 봉합을 실행하여 마찬가지로 수행됩니다. 쥐와 함께 누워있는 옆으로는 (9시 위치에 머리), 이식은 복부의 왼쪽에 위치하며 낮은 숙박 봉합이 배치됩니다. 문합은 선박 내부에서 다시 벽으로 시작됩니다. 낮은 숙박 봉합이 연결된 후 전면 벽 바늘은 외부에서 수행 할 수 있습니다. </li><li> 상단 클램프 다음 먼저 말초 클램프를 제거합니다. 모든 anastomotic의 출혈은 Q-팁을 사용하여 직접 압력에 의해 제어됩니다. 이식은 동등하고 신속하게 reperfusion를 확인한다. </li><li> 창 자간 막 혈관의 결합 후 전체받는 사람의 작은 창자를 잘라내 다. 수상자는 프로로부터 2-3 센티미터 보존 소계 enterectomy을 받다ximal 공장 및 말초 회장의 1cm. </li><li> 근위 (jejuno-jejunostomy)과 말초 (ileo-ileostomy) 엔드 - 투 6-0 Monocryl을 중단 한 레이어 봉합을 사용하여 장 문합을 종료합니다.이 장의 연속성을 복원 약 16 봉합은 문합을 완료하기 위해 필요합니다. </li><li> 깨끗한 때까지 정상적인 생리와 복막 캐비티를 관개. 유체 교체 정상적인 생리 intraperitoneally 2 ML을 관리 할 수​​ 있습니다. 그런 다음 3-0 근육 레이어 Vicryl 플러스 지속적으로 피부 봉합과 연속 봉합을 사용하여 복부를 닫습니다. </li><li> 수술 기간에서 쥐 그런 다음 표준 쥐 수유와 물 광고 libitum에 다시 시작 또 다른 24 시간에 (물과 포도당 솔루션에 액세스 할 수있는) 금식 보관해야합니다. carprofen있는 진통제는 3 일 (이하 복용량을 참조) 관리해야합니다. </li></ol>

<ol><li>Abu-Elmagd, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Five+Hundred+Intestinal+and+Multivisceral+Transplantations+at+a+Single+Center%3A+Major+Advances+With+New+Challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+Surg%22%5BJournal%5D)">Five Hundred Intestinal and Multivisceral Transplantations at a Single Center: Major Advances With New Challenges.</a> Ann. Surg. 250 (4), 567-56 (2009).</li>
<li>Berney, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Portal+versus+systemic+drainage+of+small+bowel+allografts%3A+comparative+assessment+of+survival%2C+function%2C+rejection%2C+and+bacterial+translocation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Coll.+Surg%22%5BJournal%5D)">Portal versus systemic drainage of small bowel allografts: comparative assessment of survival, function, rejection, and bacterial translocation.</a> J. Am. Coll. Surg. 195 (6), 804(2002).</li>
<li>Fishbein, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intestinal+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22N.+Engl.+J.+Med%22%5BJournal%5D)">Intestinal transplantation.</a> N. Engl. J. Med. 361 (10), 998(2009).</li>
<li>Hernandez, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Is+portal+venous+outflow+better+than+systemic+venous+outflow+in+small+bowel+transplantation%3F+Experimental+study+in+syngeneic+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pediatr.+Surg%22%5BJournal%5D)">Is portal venous outflow better than systemic venous outflow in small bowel transplantation? Experimental study in syngeneic rats.</a> J. Pediatr. Surg. 40 (2), 336(2005).</li>
<li>Monchik, G. J., Russell, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transplantation+of+small+bowel+in+the+rat%3A+technical+and+immunological+considerations%5BTitle%5D)+AND+%22Surgery%22%5BJournal%5D)">Transplantation of small bowel in the rat: technical and immunological considerations.</a> Surgery. 70 (5), 693(1971).</li>
<li>Murase, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Graft-versus-host+disease+after+brown+Norway-to-Lewis+and+Lewis-to-Brown+Norway+rat+intestinal+transplantation+under+FK506%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Graft-versus-host disease after brown Norway-to-Lewis and Lewis-to-Brown Norway rat intestinal transplantation under FK506.</a> Transplantation. 55 (1), 1(1993).</li>
<li>Murase, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunomodulation+of+intestinal+transplant+with+allograft+irradiation+and+simultaneous+donor+bone+marrow+infusion%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+Proc%22%5BJournal%5D)">Immunomodulation of intestinal transplant with allograft irradiation and simultaneous donor bone marrow infusion.</a> Transplant Proc. 31 (1-2), 565(1999).</li>
<li>Pech, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perioperative+infliximab+application+ameliorates+acute+rejection+associated+inflammation+after+intestinal+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Transplant%22%5BJournal%5D)">Perioperative infliximab application ameliorates acute rejection associated inflammation after intestinal transplantation.</a> Am. J. Transplant. 10 (11), 2431(2010).</li>
<li>Schaefer, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resident+macrophages+are+involved+in+intestinal+transplantation-associated+inflammation+and+motoric+dysfunction+of+the+graft+muscularis%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">Resident macrophages are involved in intestinal transplantation-associated inflammation and motoric dysfunction of the graft muscularis.</a> Am J Transplant. 7 (5), 1062(2007).</li>
<li>Schaefer, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanism+and+impact+of+organ+harvesting+and+ischemia-reperfusion+injury+within+the+graft+muscularis+in+rat+small+bowel+transplantation.+Transplant%5BTitle%5D)+AND+%22Proc%22%5BJournal%5D)">Mechanism and impact of organ harvesting and ischemia-reperfusion injury within the graft muscularis in rat small bowel transplantation. Transplant.</a> Proc. 38 (6), 1821(2006).</li>
<li>Schaefer, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+rejection+and+the+muscularis+propria+after+intestinal+transplantation%3A+the+alloresponse%2C+inflammation%2C+and+smooth+muscle+function%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Acute rejection and the muscularis propria after intestinal transplantation: the alloresponse, inflammation, and smooth muscle function.</a> Transplantation. 85 (10), 1465(2008).</li>
<li>Xue, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+experience+of+refined+3-cuff+technique+for+orthotopic+small-bowel+transplantation+in+rat%3A+a+report+of+270+cases%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Surg%22%5BJournal%5D)">Surgical experience of refined 3-cuff technique for orthotopic small-bowel transplantation in rat: a report of 270 cases.</a> Am. J. Surg. 198 (1), 110(2009).</li>
<li>Zhang, X. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simplified+techniques+in+rat+heterotopic+small+bowel+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant.+Proc%22%5BJournal%5D)">Simplified techniques in rat heterotopic small bowel transplantation.</a> Transplant. Proc. 38 (6), 1840(2006).</li>
<li>Zhao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+establishment+of+a+new+en+bloc+combined+liver-small+bowel+transplantation+model+in+rats.+Transplant%5BTitle%5D)+AND+%22Proc%22%5BJournal%5D)">The establishment of a new en bloc combined liver-small bowel transplantation model in rats. Transplant.</a> Proc. 39 (1), 278(2007).</li>
</ol>

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쥐의 장 이식 모델 1970ies 5로 일찍 설명되어 있지만 최근 고용 모델의 대부분은 다른 기술이 13을 사용하여 heterotopic 장 이식을 포함한다. 일반적으로 heterotopic 절차를 쉽게 microsurgical 기법과 평가를위한 이식을보다 쉽게​​ 접근 할 수있는 장점을 가지고 있지만, heterotopic 장 이식이 계정에 이식 된 작은 창자의 여러 상호 작용과 수축 활동 등의 기능 측면을 복용하지의 가장 큰 단점을 가지고 있으며 commensals과 병원균의 광대 한 호스트의 맥락에서 orthotopic 이식을 특징 점막 장벽 기능. 우리 그룹이 여기에 설명 orthotopic 모델 및 결과를 갖춘 넓은 경험을 쌓았습니다하면 염증과 적응 면역 반응에 의해 발생하는 특정 변경의 많은 기능 프로와 함께 맥락에서 평가되어야하는 것이 좋습니다수축성 및 점막 무결성과 같은 이식 작은 변의 perties. 참고 여기 사용 된 anastomotic 기술은 절차를 촉진하고 특히 m...

<table border="1"><tbody><tr><td> 시약의 이름 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 번호 </td><td> 코멘트 (선택 사항) </td></tr><tr><td> 위스콘신 대학 (UW) 솔루션 (ViaSpan) </td><td> 브리스톨 - 마이어스 Squibb </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Uro-Nebacetin N 솔루션 </td><td> Nycomed </td><td> 6967855 </td><td></td></tr><tr><td> 암피실린 </td><td> Ratiopharm </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Carprofen (Rimadyl) </td><td> 화이자 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Prolene 10-0 unresorbable 봉합 </td><td> Ethicon </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Monocryl 6-0 resorbable 봉합 </td><td> Ethicon </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Vicryl 3-0 resorbable 봉합 </td><td> Ethicon </td><td></td><td></td></tr><tr><td> IV 카테터 G 20 1.1x33 mm </td><td> 브라운 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> IV 카테터 G 22 0.9x25 mm </td><td> 브라운 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Kodan 피부 준비 </td><td> Schülke </td><td></td><td></td></tr><tr><td> NaCl 0.9 % 주입 솔루션 </td><td> 브라운 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 구부러진 집게 작은 </td><td> FineScienceTools </td><td> 11009-13 </td><td></td></tr><tr><td> 마이크로 포셉가 휘어 </td><td> AESCULAP </td><td> BD 333 </td><td></td></tr><tr><td> 마이크로 포셉가 휘어 </td><td> AESCULAP </td><td> FD281R </td><td></td></tr><tr><td> 마이크로는 곧바로 1 포셉 </td><td> WPI </td><td> 5 </td><td></td></tr><tr><td> 마이크로는 곧바로 두 집게 </td><td> WPI </td><td> 이 </td><td></td></tr><tr><td> 마이크로 니들 홀더 </td><td> WPI </td> &lt;TD&gt; 14,081 </td><td></td></tr><tr><td> 마이크로 가위 </td><td> FineScienceTools </td><td> 15006-09 </td><td></td></tr><tr><td> 마이크로 메스 </td><td> 마니 </td><td> 안과 칼 </td><td></td></tr><tr><td> 마이크로 클램프 </td><td> AESCULAP </td><td> FB329R </td><td></td></tr></tbody></table>

쥐 orthotopic 작은 창자 이식

Orthotopic Small Bowel Transplantation in Rats

작은 창자 이식은 비경 영양 짧은 창자 증후군과 실패 (돌이킬 수없는 장 실패) 환자에 대한 임상 승인 옵션이되고 있습니다. 전문 센터에서 수술을 향상과 생활 1,3의 높은 품질을 제공하는 동시에 관리 전략은 우수한 단기 및 중간 기간 환자와 이식 생존으로 이어 왔습니다. 다른 고체 기관의보다 일반적인 이식과 달리 (예 : 심장, 간) 장 이식에 의해 유도 그라프 트 기능과 immunologic의 변경의 여러 기본 메커니즘은 완전히 알려져 6,7 없습니다. 급성 거부, 패혈증 및 만성 이식 실패의 에피소드는 아직 덜 유리한 장기 성과에 기여하고 잠재적으로 이러한 이식의 혜택을받을 수 집 비경 영양에 대한 환자의 증가에도 불구하고 절차의보다 광범위한 고용을 방해 주요 장애물입니다. 소장을 포함여객 leucocytes의 큰 숫자가 일반적으로 내장 관련된 림프 시스템 (갈트) 장 이식의 높은 immunogenity 이유의이되는 부분의 일부라고. 이식 점막 무결성 (거절의 예를 들어) 손상되면 존재 속에서 많은 commensals과 병원균의 근접 패혈증 에피소드의 심각도를 설명합니다. 안정적이고 실현 가능한 동물 모델에서 생성 된 더 많은 장 및 multiorgan 이식 데이터의 필드를 이동하는 것은 필요합니다. 모델은 여기에 한 번 표준화 된 방식으로 설립 신뢰성과 타당성을 모두 결합하여 장 이식에 의해 실행되는 기본 복잡한 분자, 세포 및 기능 메커니즘에 중요한 통찰력을 제시 할 수 있습니다 제공됩니다. 우리는 성공적으로 우리의 실험실 8-11에서 5 년 이상 동안 사용 설명 절차를 수정했습니다. 주피터 동영상 기반 형식은 복잡한 proce을 설명 할 때 특히 유용합니다dure 및 장 이식을 조사 orthotopic 쥐 모델을 구축 할 계획 그룹에 대한 초기 함정을 피하십시오.

일반 수술 과정 이식 동물은 약 ​​1 시간에 대한 열 램프 아래의 절차에서 신속하게 복구해야합니다. 저체온은 수술 사망률의 주요 원인이며, 신중하게 내부 및 postoperatively 피해야한다. Intraoperative 유체 손실 2.5 ML 정상적인 생리의 SC 주입 플러스 2.5 ML 포도당 5퍼센트 첫 24 시간마다 8 시간으로 대체해야합니다. 쥐도 postoperatively 첫​​ 24 시간에 포도당 용액 (또는 겔 다이어트)와 물 PO를 무료로 이용하실 수 있습니다해야합니다. 이 기간 후에는 표준 쥐 수유와 물 광고 libitum에 무료로 액세스 할 수있는 정상적인 먹이 동작을 다시해야합니다. 통증은 마취 유도에서 관리 할 첫 번째 샷과 함께 3 일 동안 carprofen 5 밀리그램 / kg SC 매일의 관리에 의해 제어됩니다. Perioperative 항생제 예방은 allogenic 설정에 필요한 있으며, 5~7일 (암피실린 15​​ 밀리그램 / kg SC, ...

작은 창자 이식은 되돌릴 장 실패 환자에 대한 인정 치료 옵션이되었습니다. 쥐의 orthotopic 작은 창자 이식 우리의 실험 모델은 장 이식을 복잡하게 기본 immunologic과 염증 프로세스를 처리 할 수​​있는 신뢰할 수있는 도구로 제공하고 있습니다.

쥐 Orthotopic 작은 창자 이식

소장 이식은 단장 증후군 및 정맥 영양 실패 환자를 위한 인정된 임상적 선택지가 되었습니다...

본 절차의 전반적인 목표는 쥐에서 정위성 장 이식을 수행하는 것입니다. 이는 먼저 공여 동물로부터 소장을 적출함으로써 이루어집니다. 이 절차의 두 번째 단계는 이식 전 장 이식편을 준비하는 이른바 백테이블 준비 과정입니다.절차의 세 번째 단계는 동맥 및 정맥 문합술을 수행하여 이식물을 정착시킨 후, 이식물의 재관류를 진행하는 것입니다. 절차의 마지막 단계는 각각의 위루술 및 회장-회장 문합술 부위에서 단단-단단 방식으로 장 문합을 완료하여 장관의 연속성을 재건하는 것입니다. 최종적으로, 동종 이식된 동물에서 우수한 이식 기능과 알레르기 유발 조합에서의 충분한 경구 영양 흡수를 통해 장기 생존하는 결과를 얻을 수 있습니다.하지만 급성 및 만성 장 거부 반응의 다양한 측면을 연구할 수 있습니다. 이 방법은 이식편 실패를 유발하고 임상 결과를 저해할 수 있는 급성 및 만성 거부 반응의 메커니즘과 같이, 장 이식 분야의 핵심적인 질문들에 대한 답을 찾는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 방법의 시각적 시연은 매우 중요합니다.주요 단계들은 소혈관의 크기가 작고, 온허혈 시간을 최소화하기 위해 신속하고 정확한 미세수술 기법을 적용해야 한다는 점 때문에 습득하기 어렵습니다. 공여 쥐의 수술 전, 24시간 동안 물과 포도당 용액은 자유롭게 섭취하게 하되 금식시킵니다. 2% isof fluorine 흡입 마취 후, 발가락 꼬집기 반응을 통해 진정 상태를 확인합니다.복부를 집어 털을 깎고 skin prep으로 피부를 3회 소독합니다. 그 다음 진통제를 피하 투여하고 메스를 사용하여 정중 절개를 수행합니다. 수술 현미경 하에서 정중 절개를 수행합니다.소장을 식염수에 적신 거즈로 감싸고 멸균 거즈와 면봉과 함께 복부 왼쪽에 배치합니다. 필요한 경우 마이크로 가위(micros)를 사용하여 췌장과 상행결장 사이의 생리적 유착을 부드럽게 분리하며, 이때 7-0 실크(7-0 silk) 8자 결찰법을 사용합니다. 상행결장을 상장간막정맥(SMV)의 오른쪽으로 밀어낸 후, 7-0 결찰사(7-0 ties) 8자 결찰법으로 회맹관 및 우중결장 혈관을 분리하며, 모양을 잡은 플라스터-신(plaster scene)으로 고정된 모스키토 클램프를 사용하여 우결장 및 중결장 혈관을 분리합니다. 위를 위쪽으로 견인하여 SMV 전체가 곧게 펴지고 노출되도록 합니다.다음으로 SMV에서 나오는 췌장 십이지장 정맥을 결찰하고 절단합니다. 그 후 이식편을 복부 우측으로 돌리면, 이식편이 복부 우측에 있는 상태에서 SMV와 복부 A altar 사이의 모든 림프관을 포함한 느슨한 결합 조직에 접근할 수 있게 됩니다. 7-0 silk를 사용하여 해당 조직을 결찰하고 절단함으로써 장 이식편으로부터의 수술 후 림프 누출을 방지합니다.결합 조직을 박리하고 우측 신동맥을 결찰하여 절단합니다. 음경 정맥을 통해 heparin 200 units를 IV로 투여하여 쥐를 전신 헤파린 처리합니다. 주변 동맥을 결찰하고 십이지장-공장 접합부와 말단 회장의 소장을 절단합니다.SMA 기시부 근위측의 대동맥을 결찰하고, 비정맥과 합류하는 문맥을 절단합니다. 대동맥 분절을 포함한 SMA 혈관경과 함께 이식편을 채취합니다. 대동맥 도관을 통해 10 mL 시린지에 20 gauge IV 카테터를 장착하여 사용합니다.3 mL의 냉각된 University of Wisconsin 용액(UW solution)을 사용하여 이식편을 관류합니다. 그 다음, 수혜측 준비 과정 동안 50 mL 주사기를 사용하여 장관 내강의 AL 끝단부터 30 mL의 차가운 cetin 및 용액으로 세척합니다. 수혜측 쥐 수술 전까지 이식편을 차가운 UW 용액에 보관합니다.동물을 2% isof fluorine으로 마취한 후, 물과 포도당 용액을 자유롭게 섭취하게 하며 24시간 동안 금식시킵니다. 수술 중 통증 완화를 위해 carprofen을 투여합니다. 복부를 면도하고 피부 준비물로 피부를 3회 소독합니다.그 다음 정중선 절개를 실시합니다. 수용측 장을 생리식염수에 적신 거즈(GREs)로 감싸 수용측의 가슴 위에 놓습니다. 멸균 면봉과 스왑을 사용하여 후복막을 둔탁하게 열고, 과도한 혈액 손실을 방지하기 위해 신혈관 바로 아래부터 장골혈관 수준까지 복부 대동맥과 하대정맥을 노출시킵니다.대동맥과 대정맥에서 나오는 작은 요추 및 척추 분지들을 미세혈관 클립으로 결찰합니다. 왼쪽 신혈관 아래쪽(근위부)과 장골 분지 위쪽(원위부)에서 대동맥과 하대정맥(IVC)을 교차 클램프로 잡습니다. 그 다음 두 혈관의 전벽을 절개하고 남아 있는 혈액을 씻어냅니다.이식편을 수술 부위로 이동시켜 이식편 대동맥 분절과 수혜자의 신하 대동맥 사이에 단단 문합술을 시행합니다. 이때 연속 10-0 proline 봉합사를 사용합니다. 이식편을 복부 우측에 배치하고 동맥 문합의 후벽 봉합을 수행한 뒤 하단 고정 봉합사를 묶습니다.그 다음, 이식편을 복부 왼쪽으로 돌려 이식편이 복부 왼쪽에 위치한 상태에서 문합부의 전벽이 노출되게 합니다. 하단 고정 봉합사를 배치하여 포터 케이블(porter cable) 문합을 시작합니다. 이어서 10-0 proline을 사용하여 이식편 문맥과 수혜자의 하대정맥(IVC) 사이에 단단 문합을 실시합니다.그 후 외부에서 모든 봉합사가 제자리에 위치하면 전벽 봉합 부위를 고정합니다. 원위부 클램프를 제거한 다음 상부 클램프를 제거합니다. 면봉을 사용하여 직접 압박함으로써 문합부의 출혈을 조절합니다.장간막 혈관 결찰 후 이식편에 혈류가 고르게 빠르게 재관류되는지 확인하고, 약 16개의 연속 6-0 Monocryl 봉합사를 사용하여 근위부 공장 2~3cm와 원위부 회장 1cm를 남기고 수여자의 소장 전체를 절제합니다. 근위부와 원위부의 장-장 단단문합술을 통해 장의 연속성을 복원합니다. 복강 내를 생리식염수로 깨끗해질 때까지 세척합니다.수액 보충을 위해 생리식염수 2 mL를 복강 내로 투여합니다. 그 후 3-0 Vicryl을 사용하여 근육층을 봉합하고, 수술 후 복부를 닫기 위해 피부를 연속 봉합합니다. 빠른 회복을 위해 쥐를 가열 램프 아래에 둡니다.물과 포도당 용액을 제공하며 동물을 금식시키고, 2일 차 처음 24시간 동안 8시간마다 생리식염수와 포도당을 피하 주사하십시오. 이식 절차 이후에는 rat chow와 물을 자유롭게 섭취할 수 있도록 하십시오. 수술 후 1일이 지나면 전신 외형, 털 상태 및 점막 외형이 정상이어야 합니다. 활동 수준은 수술 전 상태로 회복되어야 합니다.하지만, 무기력하거나 비정상적인 행동은 조기 수술 합병증을 시사합니다. 이 그림은 정위 소장 이식 후 평균 수술 후 체중을 보여줍니다. 초기에는 체중의 최대 20%까지 감소하지만, 쥐들은 수술 후 6~8일경부터 다시 체중이 증가하기 시작하여 통상적으로 수술 후 14일경에는 수술 전 체중의 약 90%에 도달하게 됩니다.이 절차를 수행할 때는 출혈을 최소화하고 온허혈 시간을 짧게 유지하는 데 집중하는 것이 중요합니다. 개발 이후 성공적인 결과를 얻기까지 시간이 걸렸습니다. 이 기술은 장 이식 분야의 연구자들이 설치류 모델에서 급성 및 만성 거부 반응을 탐구할 수 있는 길을 열어주었습니다.

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Research

연구

JoVE Journal

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