쥐 온목 동맥에 개재 외부 경정맥 정맥 이식의 : 정교한 Microsurgical 기술을 교육
November 11th, 2012
Neointimal 증식이 arterialized 정맥의 협착의 주요 원인입니다. 우리는 오른쪽 바깥목 정맥은 Sprague Dawley 쥐 온목 동맥에 커프 기술을 사용하여 이식되어 상기 새로운 프로토콜을 제안합니다. 생존 속도는 희생의 시점에서 100 %이다.
신내막 증식증은 동맥 관상동맥 우회술, 말초 동맥 우회 수술 및 동맥 정맥 누공 정맥 이식에 사용되는 동맥 정맥 협착의 주요 원인 중 하나입니다. 총경동맥 삽입은 신내막 증식증의 병인과 현재 이를 해결하기 위한 치료 옵션을 연구하기 위한 여러 연구 프로젝트에서 수행되었습니다. 그러나 소동물 모델을 사용하는 기존의 미세수술 기법은 복잡하고 번거로우며 전체 절차를 단순화하기 위해 실험 동물을 과도하게 희생해야 합니다.
이 비디오는 초보 외과의가 절단 기술과 정맥 이식을 배우는 데 도움이 되는 자세한 수술 프로토콜을 보여줍니다. 상업 육종가의 공통 카트 동맥 21 마리의 암컷 나뭇가지 돌리 쥐를 3 개의 동등한 그룹으로 분류하여 각각 21 일, 42 일, 84 일에 수술하고 희생했습니다. 동물의 전신 마취는 마취 기계에 연결된 플렉시 유리 상자, 분당 1리터의 산소 유속으로 설정된 용액, 5% 마취 가스가 있는 이젤 불소 기화기를 사용하여 유도되었습니다.
이 그림에서는 오른쪽 흉골 cla 유양돌기 근육을 거래하기 전의 과학자들을 볼 수 있습니다. 외부 경정맥이 여기에 나와 있습니다. 여기에서 과학자들은 오른쪽 흉쇄유돌근을 거래한 후 오른쪽 총경동맥과 오른쪽 미주신경이 드러납니다.
다음 수술 중에는 커프 기술을 사용하여 문합을 수행합니다. 커프스는 3mm 길이로 자른 플라스틱 튜브로 수작업으로 제작되었습니다. 이 커프는 플라스틱 튜브의 전체 부피를 포함하는 관형 커프 몸체와 커프 부피의 절반으로 구성된 커프 핸들로 구성됩니다.
커프 몸체와 커프 핸들은 모두 똑같이 길습니다. 커프는 총각질 동맥 위로 당겨집니다. 선박과 커프 핸들은 미니 불독 cl을 사용하여 안전하게 고정할 수 있습니다.amp.
그 후, 혈관을 피하고 커프 몸체 바깥쪽으로 당깁니다. 그런 다음 실크 합자로 고정됩니다. 이런 식으로 컵의 루미나는 내피로 덮여 있습니다.
정맥 이식편은 양쪽 오목한 총경동맥 그루터기 위로 미끄러져 들어가 실크 결찰로 고정할 수 있습니다. 혈전 형성을 예방하기 위해, 특히 원위 문합에서 혈액이 동맥을 제자리에 고정하는 넥타이에 닿지 않도록 정맥 이식 타이를 커프 가장자리에 매우 가깝게 고정하는 것이 필수적이며, 2.5cm 길이의 정중 경추 절개는 흉골 CDO 유양돌기 근육의 흉골 측면 바로 위에 이루어집니다. 주변 조직과 완전히 분리된 넓은 외부 경정맥을 볼 수 있습니다.
여기에서 완전히 동원된 외부 경정맥을 볼 수 있으며, 이에 따라 정맥 지류는 7개의 오 실크 봉합사로 결찰되었습니다. 흉골 키토 유양돌기 근육은 흉쇄쇄돌근의 거래 후 여기에서 준비됩니다. 이제 올바른 일반 각질 동맥을 볼 수 있습니다.
총각질동맥은 동맥이나 미주신경을 압박하지 않도록 주의하여 세심하게 정돈되어 있으며, 이제 총각질동맥의 전체 길이를 볼 수 있습니다. 그런 다음 중간에 7 개의 오 실크 봉합사로 두 번 결찰됩니다. 그 후, 총경동맥은 두 합자 사이에서 바로 횡단됩니다.
그런 다음 몸체와 손잡이로 구성된 나일론 커프를 총각동맥의 말단부 위로 밀어 넣어 커프 손잡이가 혈관 뒤에 놓입니다. 그런 다음 원위 총각질 동맥의 커프가 있는 끝을 커프 손잡이 오른쪽에 미니 불독 클램프로 고정합니다. 이것은 안정성을 보장합니다.
그 후, 동맥은 결찰 바로 뒤에서 절단되며, 이에 따라 생성된 동맥 그루터기는 커프 몸체만큼 길어야 합니다. 동맥 내강은 헤파린 식염수로 헹굽니다. 그런 다음 결찰 루프를 따로 둡니다.
그 직후, 동맥 그루터기를 당겨 소매처럼 커프 몸체 위로 미끄러집니다. 그 후, 동맥이 소매에서 빠져나가는 것을 방지하기 위해 결찰 고리를 단단히 당기고 매듭을 지습니다. 우리는 동맥 벽과 봉합사를 동시에 한 쌍의 집게로 꼬집고 왼쪽 집게로 매듭을 만드는 트릭을 사용합니다.
그런 다음 근위 동맥 그루터기에 대해 동일한 절차를 반복하여 커프가 있는 공통 각질 동맥의 근위 끝 위로 커프를 밀어 넣고, 동맥을 절단하고, 헹구고, 동맥 그루터기 위에 결찰 고리를 놓고, 동맥 그루터기를 커프 위로 밀어 넣고, 마지막으로 결찰 고리를 매듭짓습니다. 고정된 외부 경정맥의 1cm 길이의 부분을 절제합니다. 커프가 있는 두 개의 동맥은 정맥 삽입이 시술의 정확한 거리를 대략적으로 측정하기에 너무 멀리 떨어져 있습니다.
3개의 오 Vicryl 봉합사가 각 미니 불독 클램프 주위에 고리가 있고 두 봉합사는 십자형으로 교차되어 있습니다. 그런 다음 봉합사를 반대 방향으로 당겨 컵이 있는 동맥 그루터기의 적절한 위치를 잡을 수 있습니다. 헤파린 식염수로 헹굽니다.
봉합사가 응석이 있는 원위 각질 동맥 주위로 고리를 이루면 역전되고 헹궈진 정맥 분절의 한쪽 끝이 커프가 있는 원위 각막 동맥 위로 미끄러집니다. 그런 다음 봉합사가 올바른 위치에 매듭을 지습니다. 따라서 결찰이 정맥 이식편의 전체 둘레를 통합하는지 확인하는 것이 중요합니다.
이제 정맥 분절은 다시 헤파린 식염수로 헹구고, 정맥 분절의 다른 쪽 끝은 근위 각질 동맥 그루터기 위로 미끄러집니다. 그 후, 합자가 완성됩니다. 여기에서 완전한 정맥 삽입 이식편을 볼 수 있습니다.
그 후 두 개의 미니 불독 클램프가 제거됩니다. 먼저 원위부, 그 다음 근위부. 마지막으로, 동맥 누워 정맥 삽입 이식편이 제자리에 있습니다.
맥동은 일반적인 카트 동맥과 정맥 이식편에서 볼 수 있습니다. 상처 봉합을 위한 클램프를 제거한 후, 4개의 비드릴(Vicryl)을 피하 봉합사에 적용하고, 3개의 비드릴 봉합사를 사용하여 피부 달리기 봉합사를 사용합니다. 동물들은 적외선 보온 램프 아래 평평한 종이 침구 위에서 구조되었습니다.
동물은 수술 후 이틀 동안 8-12시간마다 체중 1kg당 0.03-0.05mg의 농도로 염수 노르핀을 주입했으며, 희생 시점에 동물의 100%가 생존했습니다. 또한, 이식 개통률은 처음 수술한 10마리의 동물에 대해 60%, 나머지 11마리에 대해 82%였습니다. 제물을 바칠 당시의 혈류는 분당 8 플러스 마이너스 3 밀리리터였다.
커프 기술을 사용하면 내강 직경이 다른 혈관이 문합될 수 있습니다. 재관류 후 출혈을 피하기 위해 커프와 TED 혈관의 전체 둘레를 접합하는 것이 중요합니다. 혈전 형성을 예방하기 위해서는, 특히 원위 문합에서 혈전 형성을 막기 위해서는, 혈액이 동맥을 제자리에 고정시키고 있는 넥타이에 닿지 않도록 정맥 이식 타이를 커프 가장자리에 매우 가깝게 고정하는 것이 필수적입니다.
이 모델은 높은 혈액 속도와 낮은 전단 응력의 혈류역학을 시뮬레이션하고 신생강 증식증의 발달에 영향을 미치는 메커니즘을 연구하는 데 매우 적합합니다. 기혈맥을 이식편으로 사용하는 절차와 달리, 외부 경정맥을 이식편으로 사용하는 이 자동 이식은 필요한 실험 동물의 수를 절반으로 줄입니다. 궁극적으로, 총각질 동맥에 외부 경정맥 이식편을 삽입하는 것은 정교한 미세수술 기법입니다.
이 동영상은 소나타 외과의가 실험 동물의 폐기물을 줄이면서 최소한의 시간 내에 이 문제를 해결하는 데 도움이 됩니다. 이 모델은 초보 외과 의사가 현재 작은 동물의 고형 장기 이식에 사용되는 커프 기술을 연습 할 수있는 훌륭한 수단입니다.
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개요
본 연구는 Sprague Dawley 쥐의 공동 경동맥에 커프 기법을 사용하여 오른쪽 외경정맥 이식을 위한 새로운 프로토콜을 제시합니다. 이 접근법은 수술 절차를 단순화하고 동맥화된 정맥의 협착증의 주요 원인인 신내막 증식과 관련된 결과를 개선하는 것을 목표로 합니다.
주요 연구 구성 요소
과학 분야
- 신경과학
- 혈관 수술
- 동물 모델
배경
- 신내막 증식은 동맥화된 정맥의 협착증에 기여합니다.
- 현재의 미세 수술 기술은 복잡하고 상당한 동물 희생을 필요로 합니다.
- 신내막 증식의 병인을 이해하는 것은 치료 전략을 개발하는 데 중요합니다.
- 공동 경동맥에 대한 개재는 다양한 연구에서 탐구되었습니다.
연구 목적
- 정맥 이식을 위한 간소화된 수술 프로토콜을 시연합니다.
- 쥐 모델에서 이식된 정맥의 생존율을 향상시킵니다.
- 초보 수술의에게 자세한 교육용 비디오를 제공합니다.
사용된 방법
- Sprague Dawley 쥐에서 문합에 커프 기법을 사용했습니다.
- 플렉시글라스 상자를 마취 기계에 연결하여 전반적인 마취를 시행했습니다.
- 외경정맥과 공동 경동맥의 준비를 포함한 상세한 수술 단계를 설명했습니다.
- 이식 생존율의 수술 후 관리 및 모니터링을 실시했습니다.
주요 결과
- 이식된 정맥의 생존율은 희생 시점에 100%였습니다.
- 커프 기법은 성공적인 문합을 촉진했습니다.
- 수술 후 공동 경동맥과 정맥 이식 모두에서 맥동이 관찰되었습니다.
- 교육 목적을 위해 수술 과정의 상세한 관찰이 문서화되었습니다.
결론
- 제안된 프로토콜은 정맥 이식 수술 절차를 간소화합니다.
- 높은 생존율은 커프 기법의 효과를 나타냅니다.
- 본 연구는 혈관 수술 초보 수술의 교육을 위한 귀중한 자료를 제공합니다.
자주 묻는 질문
Executive Industry Relevance
This microsurgical protocol addresses a key challenge in vascular research: modeling neointimal hyperplasia in arterialized vein grafts, a primary cause of stenosis in coronary and peripheral bypass surgeries and arteriovenous fistulas. By simplifying external jugular vein interposition in the rat carotid artery using the cuff technique, the method reduces animal use and improves procedural standardization. This supports preclinical target validation and mechanistic de-risking in cardiovascular therapeutic development.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Scientific Value: Enables interrogation of therapeutic hypotheses related to neointimal hyperplasia pathogenesis in arterialized grafts.
- Operational Value: Provides a reproducible rodent model for studying vascular remodeling pathways without requiring donor animals.
Screening & Assay Development
- Scientific Value: Generates quantifiable endpoints such as graft patency rate (60–82%) and blood flow (8±3 mL/min) for evaluating anti-hyperplastic compounds.
- Operational Value: Standardizes surgical preparation to improve assay reproducibility across laboratories and timepoints (day 21, 42, 84).
Translational & Preclinical Research
- Scientific Value: Mimics hemodynamics of high blood velocity and low shear stress relevant to human arterial bypass environments.
- Operational Value: Supports longitudinal assessment of graft integrity across multiple survival timepoints to inform risk-adjusted advancement decisions.
Pipeline & Workflow Integration
The method fits within the discovery-to-preclinical continuum by providing a disease-relevant system for evaluating mechanisms of neointimal hyperplasia, enabling lead identification through functional validation of vascular grafts, and supporting preclinical model refinement via standardized surgical execution.
- Discovery Biology: Facilitates hypothesis testing on molecular drivers of intimal hyperplasia in venous grafts exposed to arterial pressure.
- Screening: Delivers assay-ready grafts with measurable patency and flow metrics for compound screening campaigns.
- Analytics: Outputs include graft survival rate, patency percentage, and hemodynamic flow, enabling quantitative comparison across experimental conditions.
- Translational Research: Uses autologous rat vein grafts to model human arterialized vein pathology, enhancing translational continuity.
- Enterprise Reuse: Establishes a standardized, teachable surgical protocol that reduces inter-user variability and supports multi-site preclinical programs.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Reduces mechanistic ambiguity in vascular graft failure models by enabling precise study of neointimal hyperplasia triggers.
- Operational Value: Cuts animal use by half compared to caval vein models through auto-transplantation, improving ethical and economic efficiency.
- Strategic Value: Accelerates go/no-go decisions in cardiovascular programs by providing early predictive confidence in graft performance.
- Portfolio Impact: Enables risk-based prioritization of anti-stenotic therapies through reliable, quantifiable preclinical readouts.
Implementation Considerations
- Requires microsurgical expertise in vessel handling, anastomosis, and ligation techniques.
- Depends on specialized instruments including mini bulldog clamps, forceps, and suture materials (7-0 silk, 3-0 Vicryl).
- Necessitates standardized training to ensure consistent cuff preparation and vein graft positioning across operators.
- Adaptation to other vessel sizes or models may require recalibration of cuff dimensions and ligation tension.
- Long-term patency beyond 84 days was not assessed, limiting chronic disease modeling applications.
