Name: 가스 크로마토 그래피에 의한 operant 에탄올 자기 관리 및 에탄올 결정시 에탄올의 Microdialysis (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-09-05T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 11 s
Description: 학습하세요 쥐의 뇌에서 에탄올 농도를 실시간으로 모니터링하는 마이크로다이얼리스와 가스 크로마토그래피 방법을. 이 기술은 중독 연구에서 뇌 기능을 비침습적으로 분석하는 데 활용됩니다.

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이 연구는 NIH / NIAAA (AA11852과 AA007471)에서 보조금에 의해 지원되었다.

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응용 프로그램 및 제한 약물 자기 관리는 모델 약물 중독과 동물에 사용됩니다. 이 방식으로 모델 아르 학대의 많은 약물은 약물이 중앙 구획에 직접 전달되는, intravenously 관리 할 수​​ 있습니다. 이 자체 관리 세션 이상 복용의 가까이에 모니터링 할 수 있습니다. 에탄올은 구두 보통 자기 관리이기 때문에, 그것은 흡수와 신진 대사의 개별 차이로 인해 마약 수준을 모니터링하기가 훨씬 어렵습니다. 관심의 두뇌 지역에서 샘플로 microdialysis를 사용하여, 우리는이 지역에 도달 에탄올의 패턴을 모니터 할 수 없지만, 우리는 또한 동시에 각 자체 관리 단계에서 시간이 지남에 같은 지역에서 신경 전달 물질의 변화를 모니터링 할 수 있습니다. 뇌 Neurochemical 변경 및 약물 유발 반응은 약물 남용과 의존과 연결되어, 따라서 동시에 MEA 할 수있는 능력을특정 자기 관리 단계 동안 확인 neurochemical 및 약물 농도는 매우 강력하고 독특한 도구를 제공합니다. 행동과 analytes의 dialysate 농도를 상호 연관에 대해 유의해야 할 하나의 문제는 microdialysis의 배관의 물리적 특성입니다. 특히,이 수집 관에 microdialysis 프로브의 루멘에서 전달되는 유체에 대해 걸리는 시간은 매우 중요하며, 짧은 시간이 더 있습니다. 시간이 90 초 정도입니다 수 있도록 우리가 실험실에서, 우리는 프로브를 구성합니다. 이러한 조건에 사용, 우리는 dialysate 에탄올 농도 증가로 음료 및 사후 음료 기간에 걸쳐 감소 에탄올 소비의 개시에서 accumbal 도파민 증가가 나타났습니다. 2,3,8,9 이러한 실험 , 약리 연구의 데이터와 결합 할 때, 우리 채널에서 에탄올과 자기 관리 관련 환경 단서의 엄격 약리 효과를 분석 할 수있다신경 전달 물질 농도에 anges. 그것은 결합 동작 - microdialysis 기술의 특정 응용 프로그램이 저희 연구실의 현재 연구 관심 분야에 적합한 것을 주목해야한다. 그것은 우리가 동기 자기 관리 행동에 이러한 조치를 관련 수 있도록, 같은 지역에서 신경 전달 물질의 변화 패턴에 비해 뇌에 도달 에탄올의 시간 패턴을 평가하기 위해 설계되었습니다. 파생 dialysate의 에탄올 농도는 생체 프로브 복구에 대한 수정 및 뇌 에탄올 조직 농도의 일부분 일 뿐인 걸까되지 않습니다. 에탄올의 정량 microdialysis가 필요한 경우 프로브에 세포 우주에서 diffuses하는 에탄올의 추출 분율은 실험적으로 결정해야합니다. 방법과 자세한 설명을 위해 저희 연구실에서 이전 출판물을 참조하십시오. 10,11,12 이 프로토콜 가스 채널의 사용을 보여줍니다 있지만microdialysis 샘플의 천정 공간에서 에탄올의 견고한 위상 microextraction와 함께 romatography는 microdialysis 샘플의 에탄올 내용의 분석을위한 다른 방법을 사용할 수 있습니다. 그러나, 다른 방법은 몇 가지 단점으로 고생 할 수 있습니다. 예를 들어, 덜 민감 분석 방법은 여기에 도시 된 5-7 분보다 샘플링 시간 더 필요로 큰 샘플 볼륨이 필요할 수 있습니다. 여기에 설명 시스템의 유형은 유리 병의 천정 공간에 배치 섬유에 흡수함으로써 밀봉 된 샘플 병에 증기 단계에서 에탄올을 집중 견고한 위상 microextraction을 사용합니다. 이것은 일반적으로 증기의 50-100 microliters을 주입 할 수 있습니다 직접 헤드 스페이스 샘플링에 비해 검출 한계를 향상시킵니다. 헤드 스페이스 방법의 또 다른 주요 장점은 분석을 위해 주입 된 샘플은 매우 깨끗하고 소금은 무료입니다 것입니다. 액체 microdialysis 샘플의 직접 분사도 높은 sensit와 함께 사용할 수 있습니다ivity하지만,이 주입 된 소금을 청소하는 데 필요한 정기적 인 유지 관리 작업으로 인해 시간 다운 더 많은 악기를 필요합니다. 문제 해결 및 기타 사항 <ol><li> 실험이 시작하기 전에 microdialysis 세트 업이 제대로 작동하는지 확인하고 문제를 고장 쏘 자신에게 충분한 시간을 제공합니다. 우리는 당신이 밖으로 전환 할 준비, ACSF와 perfused, 설정 추가를하는 것이 좋습니다 가장 operant 세션을 매일 특정 시간에 발생하는 경향이로, 자신에게 시간을 절약 할 설정 오작동. </li><li> microdialysis 프로브는 프로브의 뇌를 침투로 조직의 전단에 의해 생성 된 조직의 손상을 최소화하기 위해 약 5 분에 걸쳐 삽입되어 있는지 확인하십시오. </li><li> operant 챔버에 쥐를 전송하는 경우는 두 번째 사람이 operant 프로그램을 초기화 할 수 있도록 전송 라인 (microdialysis 설정의 일부) 얽힌되고하지 않도록 지원하고있는 것이 유용합니다시간에 iated. </li><li> 당신은 적절한 온도에 도달하는 시간의 autosampler 물 목욕을 충분히 제공해야합니다. Google 시스템은 일반적으로 두 시간 밖에 50 ° C.에 도달해야합니다 또한 샘플이 완전히 샘플을 분석하기 전에 기화 있으니 안심하십시오. 우리는 일반적으로 시각이 샘플 분석을 시작하기 전에 발생했음을 확인합니다. </li><li> 표준 좋은 분석 화학 관행을 준수해야합니다. 여기에는 있지만, 개인, 장비 및 절차의 검증에 제한되지 않습니다. 간단한에서, 우리는 다음과 같은 가이드 라인을 고용 : 개인 사용자는 여러 일에 걸쳐 표준 농도 및 선형 표준 곡선 (R2 ≥ 0.99)을 재현 피크 높이 값을 생성 할 수있는 능력을 입증해야합니다. GC-FID 시스템이 제대로 작동하는지 확인하기 위해, 표준은 dialysate 샘플을 주입하기 전에 분석 할 항상 있어야합니다. 생성 된 표준 곡선 R2 ≥ 0.99이 있어야합니다. </li><li> 우리가 사용하는 장비의 대부분은2010 년 애질런트 테크놀로지스 인수 한 Varian 주식회사를 통해 구입했습니다. 현재 Bruker 과학 인스트루먼트는 Varian의 실험실 가스 크로마토 그래피 기기 사업을 획득하였습니다. 향후 구매를 들어, 두 회사를 참조하십시오. </li><li> 현재 프로토콜은 쥐와 operant 동작을 보여 주지만 뷰어는 행동의 더 많은 혼란이 작은 마우스 모델에서 발생할 가능성이 있다는 것을 알고 있어야한다. 인식해야 할 또 다른 문제는 중간 전두엽 피질 또는 핵 accumbens는 여기에 표시된 것보다 더 큰 정도 operant 동작을 방해 할 수 있습니다 이외의 다른 뇌 영역에 microdialysis 프로브의 게재 위치가 있습니다. 그것은 밀접하게 프로브 배치로 인한 손상이 행동의 심각한 변화를 초래 여부를 결정하는 여러 행동 매개 변수를 검사하는 것이 중요합니다. </li></ol>

<table border="1"><tbody><tr><td> 시약의 이름 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 번호 </td></tr><tr><td> 95 % 에탄올 </td><td> AAPER 알코올 및 화학 Shelbyville, KY </td><td> E190, 111,000,190 </td></tr><tr><td> 울트라 순수 자당 </td><td> MP Biomedicals, LLC, 솔론, OH </td><td> 821721 </td></tr><tr><td> 울트라 고순도 헬륨 </td><td> 공기 가스 </td><td> HE UHP300 </td></tr><tr><td> 공기 </td><td> 공기 가스 </td><td> AIZ300 </td></tr><tr><td> 수소 </td><td> 공기 가스 </td><td> AIZ300 </td></tr><tr><td> GC 2 ML 병 </td><td> 애질런트 </td><td> # 8010-0015 </td></tr><tr><td> PTFE / 실리콘 septa와 GC의 유리 병 캡 </td><td> 애질런트 </td><td> # 8010-0084 </td></tr></tbody></table> 표 1. 특정 시약

가스 크로마토 그래피에 의한 operant 에탄올 자기 관리 및 에탄올 결정시 에탄올의 microdialysis

Microdialysis of Ethanol During Operant Ethanol Self-administration and Ethanol Determination by Gas Chromatography

Operant 자기 관리 방법은 일반적으로 에탄올 등의 학대의 많은 약물의 행동 및 약리 효과를 연구하는 데 사용됩니다. 그러나 에탄올은 일반적으로 오히려 남용의 많은 다른 약물과 같은 intravenously보다 구두 자기 관리입니다. 구두 관리 약물의 pharmacokinetics은 intravenously 관리 마약보다 더 복잡합니다. 에탄올의 약리 및 행동 효과 사이의 관계를 이해하는 것은 음주 중이나 후에 뇌에 도달 에탄올의 시간 코스에 대한 지식이 필요하기 때문에, 우리는 시간이 지남에 따라 뇌 dialysate의 에탄올 농도를 모니터링하는 불꽃 이온화 감지 생체의 microdialysis 및 가스 크로마토 그래피에 사용합니다. 결합 microdialysis - 행동 실험은 여러 기술의 사용을 포함한다. 의 자기 관리 및 neu 수많은 테스트하도록 구성 할 수있다이 문서, stereotaxic 수술, 행동 교육 및 microdialysis,rochemical 중심 가설은 단지 그들이 샘플 수집 및 dialysate의 에탄올 분석의 후속 단계에 관한 방법을 설명하기위한 포함되어 있습니다. 에탄올 연구에 따라 달라집니다 불꽃 - 이온화 감지,와 가스 크로마토 그래피를 통해 에탄올 농도 분석을 Dialysate이 자세히 설명되어 있습니다. 이러한 방법에 의해 생산 데이터는 자체 관리 절차를 수행하는 동안 뇌에 도달 에탄올의 패턴을 보여, 같은 dialysate 샘플 neurochemical 분석과 결합하여, 결론은 에탄올의 약리 및 행동 효과에 관한 한 할 수 있습니다.

operant 에탄올 동안 쥐의 뇌에 에탄올 농도의 시간 코스를 결정하는 방법은 자기 관리가 설명되어 있습니다. 가 생성되는 작은 볼륨에 필요한 감도를 가지고 있기 때문에 불꽃 이온화 검출과 가스 크로마토 그래피는, dialysate 샘플에 에탄올을 수량화하는 데 사용됩니다.

가스 크로마토 그래피에 의한 operant 에탄올 자기 관리 및 에탄올 결정시 에탄올의 Microdialysis

조작적 자가투여법은 에탄올을 포함한 많은 남용 약물의 행동학적 및 약리학적 효과를 연구하는 데 흔히 사용됩니다.

본 절차의 전체적인 목표는 에탄올 자가 투여 세션 동안 뇌 투석액 내의 에탄올 수치를 모니터링하는 것입니다. 이 측정값을 동시적인 자가 투여 행동과 비교하기 위해, 먼저 미세투석 가이드, 캐뉼라 및 테더 볼트를 외과적으로 이식한 다음, 쥐가 에탄올을 조작적으로 자가 투여하도록 훈련시킵니다. 두 번째 단계는 쥐를 헤드 스테이지 테더에 적응시켜 미세투석 중에 에탄올 자가 투여가 방해받지 않도록 하는 것입니다.그 다음, 에탄올 자가 투여 세션 동안 마이크로다이얼리시스를 수행하며, 분석을 위해 다이얼리세이트의 일부를 준비합니다. 이어서, 불꽃 이온화 검출기가 장착된 가스 크로마토그래피를 사용하여 다이얼리세이트 샘플의 에탄올 농도를 분석합니다. 최종적으로, 얻어진 결과는 에탄올 자가 투여 세션 중 관심 뇌 영역에 도달하는 에탄올의 시간 경과를 보여줍니다.꼬리 또는 복재정맥 천자와 같은 기존 방법과 비교했을 때 이 기술의 주요 장점은 샘플 수집 시의 방해가 최소화되며, 동물이 행동 과제를 수행하는 동안 관심 뇌 영역 내의 약물 농도를 시간에 따라 측정할 수 있다는 점입니다. 일반적으로 이 방법이 처음인 사람은 여러 가지 전문적인 기술이 필요하기 때문에 어려움을 겪을 수 있으며, 이러한 기술 중 상당수는 반복적인 연습이나 경험을 통해서만 습득할 수 있습니다. 본 절차의 시연은 저희 연구실의 학부 연구 보조원인 Jeffrey Dilley가 진행하겠습니다.제시된 모든 동물 실험 절차는 텍사스 대학교 기관동물관리사용위원회(Institutional Animal Care and Use Committee)의 승인을 받았으며, 실험동물의 관리 및 사용에 관한 모든 지침 및 규정을 준수하였습니다. 텍사스 대학교 오스틴 캠퍼스는 ALAC 인증 시설이며, 본 행동 미세투석 실험에는 관심 뇌 영역 상부에 21 gauge 캐뉼라를 외과적으로 이식한 Long Evans 쥐가 사용되었습니다. 모든 동물은 다음 절차를 시작하기 전, 최소 1주일 이상의 수술 후 관리 및 회복 기간을 거쳐 건강한 상태여야 합니다.Lichter retractable lever와 tipper tube가 장착된 Med Associates 조작 챔버에 쥐를 넣고, 10% sucrose 용액을 섭취하기 위해 레버를 누르도록 훈련시킵니다. 쥐가 sucrose 용액에 반응하도록 훈련되면, 마지막에서 두 번째 조작 세션 전날 밤부터 여러 차례의 음수 세션에 걸쳐 용액에 ethanol을 점진적으로 추가하는 적절한 훈련 스케줄을 시작합니다. 동물을 마취하고 진정 수준을 확인한 후, 균형추 레버, 암(arm), swivel tether, 스프링 및 링 스탠드로 구성된 장치에 적응시키기 위해 쥐의 헤드 스테이지에 있는 tether bolt에 tether spring을 연결합니다.마이크로다이얼리시스 실험 전날, 쥐를 홈 케이지에 넣어 먹이와 물, 그리고 ad lido와 함께 오퍼런트 룸에서 하룻밤을 보내게 한 후, 테더와 관련 장비를 장착한 상태에서 다음 날의 훈련 세션을 완료합니다. isof fluorine으로 쥐를 마취시킨 후, 발가락 꼬집기(toe pinch)를 통해 진정 상태를 확인하고 인공 뇌척수액이 관류되는 마이크로다이얼리시스 프로브를 삽입합니다. 프로브를 적절하게 고정한 다음, 프로브 유량을 0.2 microliters per minute로 조정합니다.모든 투석 장비를 설치한 상태에서 쥐를 조작실 내의 홈 케이지에 넣어 하룻밤을 보내게 하고, 먹이와 물을 자유롭게 섭취할 수 있도록 합니다. 프로브를 삽입한 다음 날, 실험 시작 최소 2시간 전에 프로브를 작동 유량으로 높입니다. Hamilton 시린지를 사용하여 프로브 유량이 일정하며 설정 유량의 최소 90%인지 확인합니다.투석 샘플에서 신경전달물질을 평가하는 경우, 실험의 모든 단계에서 샘플을 채취하십시오. 동물이 홈 케이지에 있을 때 투석 샘플을 수집하는 것부터 시작하십시오. 이후 분석을 위해 샘플을 적절한 방법으로 보관하십시오.쥐를 조작 챔버로 조심스럽게 옮기고 챔버를 제어하는 조작 프로그램을 시작합니다. 레버가 챔버 내부로 확장되기 전까지 2회 분량의 샘플을 계속 채취하며 쥐가 대기하도록 합니다. 투석액의 적절한 분량을 2 mL 유리 바이알에 피펫으로 옮기고 기밀 격막으로 바이알을 밀봉하여 에탄올 분석을 위한 투석액 샘플 일부를 수집하기 시작하며, 에탄올 샘플은 신속하게 피펫팅하여 밀봉합니다.에탄올은 휘발성이고 시료의 부피가 작기 때문에, 시료 준비 과정이 일관되지 않거나 느리면 결과가 부정확해질 수 있습니다. 남은 양은 신경전달물질 분석을 위해 보관하십시오. 20분간의 음수 기간은 Med Associates 컴퓨터 프로그램이 레버를 챔버 안으로 밀어 넣고, 쥐가 이를 눌러 음용액 병에 접근했을 때부터 시작됩니다.음용 기간 내내 계속해서 시료를 채취하십시오. 음용 기간이 끝나면 컴퓨터 프로그램이 챔버에서 병을 회수합니다. 마이크로다이얼리시스 실험 종료 후, 동물은 챔버 내에서 20분 동안 추가적인 음용 후 기간(post drink period)을 갖도록 유지하십시오. 쥐를 마취시킨 후 프로브를 제거하십시오.동물을 즉시 인도적으로 안락사시키지 않는 경우, 프로브 경로의 시각화를 보장하기 위해 폐쇄기를 다시 장착하십시오. 실험 후 3일 이내에 뇌를 채취하십시오. 50 °C로 가열된 헤드스페이스 오토샘플러, 헬륨을 이동상으로 사용하는 모세관 컬럼, 그리고 불꽃 이온화 검출기가 장착된 가스크로마토그래프를 사용하여 외부 에탄올 표준물질과 함께 시료를 분석하십시오.크로마토그램을 기록하고 분석하기 위해 크로마토그래피 워크스테이션 소프트웨어를 사용하여 에탄올 분석을 위한 시스템 준비를 수행합니다. 순환 수조를 사용하여 오토샘플러 플레이트를 가열하고 공기 및 수소 탱크를 엽니다. 그다음, 시작 프로그램을 실행합니다.준비가 되면 20분간 연소시켜 파이버를 오염 제거합니다. 100 mL 부피 플라스크를 사용하여 238 µL의 95% ethanol을 물로 희석하여 최종 부피 100 mL의 표준액을 제조합니다. 1:1 연속 희석을 통해 표준액 시리즈를 만듭니다.표준물을 유리 바이알에 피펫으로 분주하고 샘플을 준비한 것과 동일하게 밀봉하십시오. 표준물과 함께 워터 블랭크(water blank)를 반드시 실행하십시오. 표준물과 샘플을 오토샘플러 트레이에 넣고, 모든 액체 분주액이 기화될 때까지 가열하십시오.표준물질과 시료를 분석하려면, 어떤 시료가 오토샘플러의 어느 슬롯에 있는지 기록하고 각 시료를 천공해야 함을 명시한 시료 목록을 작성하십시오. 데이터 파일을 지정된 폴더로 경로 설정한 후, 시료에 적합한 분석 방법을 선택하고 분석을 시작하십시오. 시스템이 모든 시료의 분석을 완료하면, 프로그램이 각 피크를 정확하게 적분했는지 확인하십시오.각 알려진 외부 표준물질의 함수로 피크 높이를 도식화하십시오. 에탄올 농도입니다. 점들로 주어진 선형 함수를 사용하여 각 투석액 샘플의 에탄올 농도를 보간하십시오.이 그림은 세 가지 농도의 에탄올 표준물질과 에탄올 자가 투여 세션 종료 시 수집한 쥐의 투석액 샘플 한 개에 대한 예시 크로마토그램을 보여줍니다. 에탄올 피크는 비교적 대칭적이어야 하며, 일관된 머무름 시간을 가져야 하고 신호 대 잡음비가 10보다 커야 합니다. 이러한 기준을 충족하지 못하는 경우 시스템 유지보수가 필요함을 의미하며, 고품질의 크로마토그래피와 정확한 표준물질은 선형 표준 곡선을 생성하여 자가 투여 과정 동안 에탄올 자가 투여 동물로부터 수집한 투석액 샘플의 에탄올 농도를 계산하는 데 사용됩니다.산출된 투석액 내 에탄올 농도는 생체 내 프로브 회수율이 보정되지 않은 값이며, 뇌 조직 내 에탄올 농도의 일부에 불과합니다. 에탄올의 정량적 미세투석이 필요한 경우, 세포외 공간에서 프로브로 확산되는 에탄올의 추출 분율을 실험적으로 결정해야 합니다. 이 기술을 숙달하면 적절히 수행했을 때 약 4~5시간 내에 완료할 수 있습니다.이는 행동 세션의 길이에 따라 달라질 수 있습니다. 실험의 마이크로다이얼리시스 단계의 성공적인 완료는 준비 단계의 품질에 크게 좌우됩니다. 이 절차를 시도하는 동안 쥐를 능숙하게 다루고, 다이얼리시스 실험 중에 발생할 수 있는 모든 주의 산만 유발 자극에 쥐를 적응시켜 동물의 자가 투여 행동이 영향을 받지 않도록 하는 것이 중요합니다.

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초파리에서 에탄올 민감도와 빠른 내성을 측정하기 위한 간단한 분석은 이러한 중요한 에탄올 관련 행동을 조사하기 위해 이 모델 유기체의 사용을 용이하게 합니다. 여기에서는 파리의 에탄올 감도와 빠른 내성을 측정하기 위한 비교적 간단하고 확장 가능한 분석법이 설명됩니다.

에탄올 진정 감도 및 신속한 공차 측정을위한 저렴하고 확장 가능한 행동 분석<em&gt; 초파리</em

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우리는 보람 유도 및 보상 상태의 변화에 대한 조치로 자발적인 에탄올 소비를 사용하여 초파리 (Drosophila의 melanogaster의) 경험을 nonrewarding위한 프로토콜을 설명합니다.

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알코올 중독에 대 한 Pharmacotherapies의 개발 모델을 마시는 murine: 어둡고 2 병 선택에 마시는

이 작품은 적절한 노출 방법에서 배아 처리 및 에탄올 분석에 헤드 스페이스 가스 크로마토그래피를 사용하여 제브라피쉬 배아에서 에탄올 수준을 정량화하는 프로토콜을 설명합니다.

헤드 스페이스 가스 크로마토그래피를 이용한 제브라피시 배아의 에탄올 수치 정량화

이 연구는 Progressive-Ratio 컴퓨터 보조 알코올 주입 시스템 (CAIS) 패러다임이 인간의 알코올 자체 투여와 관련된 동기 부여 특성을 조사하는 데 사용할 수있는 신뢰할 수 있고 민감한 방법임을 보여주는 것을 목표로합니다.

알코올 보상에 대한 동기 부여 : 인간의 정맥 내 알코올 자기 투여의 진행성 비율 예측 인자

여기에 제시된 것은 알코올 사용 장애를 연구하기 위한 마우스의 알코올 의존성에 대한 2BC/CIE 모델에 대한 프로토콜입니다.

만성 간헐적 에탄올 증기 노출과 알코올 사용 장애를 모델링하기 위한 2병 선택

이 프로토콜은 쥐의 알코올 소비를 모델링하기 위한 표준 간헐적 접근 2병 선택 가정용 케이지 음주 패러다임을 설명합니다. 또한 음주 행동의 미세 구조 분석을 가능하게 하는 DIY 핥기 감지 시스템으로 표준 프로토콜을 강화하기 위한 단계별 지침을 제공합니다.

Two-Bottle Choice Home Cage Drinking and Microstructural Analysis를 사용한 설치류의 알코올 소비 모델링

의약품 자기 관리 및 초음파 vocalizations는 (USV) 동물 행동 연구에 평가로 사용하지만, 거의 조합에 있습니다. 이 문서의 목적은 약물의 경험에 정서적인 반응을 평가하기 위해 약물 자기 관리 절차 도중에 녹음 USVs의 장점을 설명하는 것입니다.

쥐에서 의약품 자체 관리하는 동안 초음파 Vocalizations 평가

학습하세요 쥐의 뇌에서 에탄올 농도를 실시간으로 모니터링하는 마이크로다이얼리스와 가스 크로마토그래피 방법을. 이 기술은 중독 연구에서 뇌 기능을 비침습적으로 분석하는 데 활용됩니다.

가스 크로마토 그래피에 의한 operant 에탄올 자기 관리 및 에탄올 결정시 에탄올의 Microdialysis

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