Name: 혈관 질병의 연구에 대한 마우스의 Orthotopic 대동맥 이식 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-11-28T12:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 6 s
Description: 배우세요 마우스 복부 대동맥의 정위 이식술을 통해 혈관 질병 연구 방법을 익히세요. 이 기술은 동종 이식 후 혈관 병증 발달을 연구하는 데 유용하며, 균일한 이식편 크기로 실험의 일관성을 높입니다.

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이 작품은 NIH P30 오브라이언 센터 (DK 079337)의 핵심 자원의 지원을받는되었다.

1. Presurgical 준비 <ol><li> 수술 절차,주의 깊게 수행 방법에 상관없이, 중요한 스트레스의 결과. 이러한 스트레스의 영향을 최소화하고 매장량을 극대화하기 위해 동물을 사용 10,11 전에 최소 72 시간 동안 동식물 사육장에서 유지되어야한다. </li><li> 수술 도구, 거즈, 그리고 면봉은 살균해야합니다. 이 악기 터치 봉합이나 수술 분야의 만 팁을 제공하는 멸균 장갑을 사용할 필요가 없습니다. </li><li> 지혈를 들어, 클램핑 압력이 최소가 필요하다고 필수적입니다. 과도한 압력이나 거친 취급으로 인해 혈관에 손상은 24 시간 이내에 엉덩이 - 다리 마비, 장 국소 빈혈, 죽음의 결과로, 혈전증을 일으킬 것입니다. 우리는 더 이상 2보다 GM / cm 2의 압력으로 클램프를 사용하여 문제를 제거하는 것으로 확인되었습니다. 이 클램프는 표 1에 설명되어 있습니다. 클램프 압력은 높은 품질의 외과 instrumen에 의한 클램프의 사양에 표시되어 있습니다t 제조업체. 우리는 저렴한 클램프 또는 일회용 클램프가 보편적 너무 많은 압력을 발휘하는 것으로 확인되었습니다. </li><li> 담보 선박뿐만 아니라 복부 대동맥의 상대적 위치와 아래 대정맥 (IVC)의 위치는 변형에 따라 달라집니다. 당신은 또한 특히 부수적 인 선박의 위치에서 각각의 생쥐 사이의 작은 차이를 발견하실 수 있습니다. </li></ol> 2. 기부자 운영 <ol><li> 마우스는 isoflurane (1.5-2.5 %의 유도, 공기의 1.0 % 유지 보수) 또는 (55-65 밀리그램 / kg) pentobarbital과 anesthetized 수 있습니다. Pentobarbital는 시간 제한 (최대 1.5 시간) 부과하지만, 원하는 경우 더 나은 액세스를 위해 동물을 회전 할 수있는 옵션과 함께 외과 의사를 제공합니다. 마취 시간은 수술 중 소장이나 간에 필요로 할 때 마취로부터 2-3 방울을 넣어 2까지 시간까지 연장 할 수 있습니다. 케타민 / xylazine (케타민과 Xylazine, IP 7 MG / kg 100 밀리그램 / kg 체중)도 잘 훈련 외과 의사 인증 기관 (CA)에서 사용할 수 있습니다N 1-1.5 시간 내에 절차를 완료하지만, 좁은 금고 선량 범위를 갖는다. 미국에서는 pentobarbital의 사용 때문에 짧은 공급의 최근 몇 년 동안 더 많은 문제가되고 있습니다. 그것은 마취의 깊이가이 충분한 지 확신 할 수 모니터링하는 것이 필수적입니다. 발가락 - 핀치 반사는 적절한 깊이의 가장 지표 하나는 또한뿐만 아니라 호흡 속도와 다른 움직임을 유의해야합니다. </li><li> 마취 유도 후, 복부 복부에 머리를 제거하는 탈모 젤이나 면도기를 사용합니다. </li><li> 확산 eagled 위치에 고정 실험실 테이프를 사용하여 운영 보드에 동물을 탑재합니다. 금속 운영위원회는 수술 중에 온도 지원을 제공하기 위해 그 아래에는 난방 패드의 사용을 허용합니다. 우리는 수동으로 집에서 사용하기 위해 소비자 학년 단위 난로의 온도를 제어합니다. 온도는 35-38 ° 사이에 유지됩니다. 금속 운영위원회는 절차를 사이에 소독하기에 용이합니다. </li><li>chlorhexidine 같은 살균제를 사용하여 영역을 소독, 에탄올 세척이 나타납니다. 적절한 소독을 확보하기 위해이 절차를 세 번을 반복합니다. 만약 존재한다면이 또한 머리카락의 잔류 컷 조각을 제거합니다. </li><li> 사용 가위는 복부 내장을 노출하는 몸의 벽을 통해 절개를합니다. </li><li> 복부의 큰 혈관을 노출 옆에 내장 밀어, 면봉을 사용합니다. 내장은이 촉촉한 유지 따뜻한 식염수에 침수되어 거즈의 한 부분에 표시됩니다. </li><li> 무딘 절개를 사용하여 매우 신중하게 떨어져 주변 조직에서 복부 대동맥을 해부. 아래 대정맥에서 떨어져 혈관을 해부 매우주의해야합니다. 조심스럽게 올려 코를해야 같은 허리 동맥과 같은 하나 이상의 지점,있을 것입니다. 해부하는 대동맥의 섹션은 신장 혈관 아래에서 대퇴 동맥에 대동맥의 분기 이상이어야합니다. 이 섹션에서는 많은에 기증 소재로 제공 할 수혈관이 존재 분기 및 기증 동물의 크기 얼마나 많은에 따라 두사람 수신자. </li><li> 방금 분기 위의 신장 동맥과 다른 아래 봉합사를 묶어주세요. 사용 가위는 대동맥을 나눈 완전히 200 U / ML의 헤파린을 포함 식염수에 이식을 씻어. 매우 조심스럽게 용기의 한쪽 끝을 잡고 중력에 의해 혈관을 실행하도록 생리 식염수를 똑. 기포가 혈관을 실행하게하지 마십시오. 그렇지 않으면 intima 나중에 혈전증의 결과로 손상 될 수 있습니다 가능한 한 작은으로 혈관의 끝을 처리합니다. 현장에서 제거하고 즉시 얼음처럼 차가운 생리의 컨테이너에 배치합니다. 기증 동물이 ...에게서 피를 뽑다 할 수 있습니다. </li></ol> 3. 받는 운영 <ol><li> 위의 동물을 마취하고 탈모 젤을 적용하거나 복부에 머리를 제거하는 면도기를 사용합니다. 우리가 0.1 밀리그램 / 진통제를 구축 할 kg에 피하 buprenorphine의 복용량을 관리 절개하기 전에. </li><li> 엠실험실 테이프를 사용하여 운영 분야에 ount는 동물. 동물은 수술하는 동안 체온을 유지 도움이 될 것입니다 따뜻한 운영 단계에 장착해야합니다. </li><li> 그는 말리는 것을 방지하기 위해 눈에 gentamycin의 안과 연고를 적용합니다. </li><li> 에탄올 세척 한 다음 복부를 소독. 적절한 소독을 확보하기 위해이 절차를 세 번을 반복합니다. </li><li> 다음 단계로 이동하기 전에 다시 한 번 마취의 적절성을 확인합니다. </li><li> 아래에있는 조직에 가해진하지 않도록주의하는 것 두 개의 스테이지에서 피부와 바디 벽을 통해 중간 선 절개를합니다. </li><li> 복부 절개가 열려 개최 확장기를 삽입합니다. 방식의 클램프의 대부분을 유지하는 뒷다리 끝 부분 나사 어셈블리를 가리 킵니다. </li><li> 식염수 멸균 거즈의 광장을 습식 및 장내 이상을 배치합니다. 거즈에 부드럽게 손가락으로 장내에서 면봉을 삽입하고 부드럽게 s (으)로 창자를 통해 반영IDE는 그래서 그들은 거즈의 꼭대기에 앉아있다. 거즈의 또 다른 조각을 가지고, 장내에 넣고 식염수 었죠. </li><li> 대동맥과 아래 대정맥 (IVC)를 다루는 모든 지방 조직을 제거합니다. 부드러운합니다. IVC는 매우 약한 것입니다. </li><li> 부드럽게 IVC에서 infrarenal 대동맥을 해부하기 위해 집게를 사용합니다. 그들 사이의 충분한 용기있는 두 개의 클램프을위한 공간을 제공 할 수있을만큼 넓은 지역에 이러한 구분하면, 이식은 봉합 할 수있는 충분한 용기가있을 것입니다, 그런.의 선택을 해제합니다 해부 할 때, 선박 지점을 찾습니다. 필요한 경우는 낮은 온도 cauterizer로를 부식. </li><li> 방금 분기 위의 신장 동맥과 또 하나 아래 혈관 클램프를 삽입합니다. </li><li> 대동맥을 잘라 요. 대동맥의 끝은 보통 5 mm의 공간을 남겨두고 취소됩니다. 지혈를 확인합니다. 클램프가 올바르게 작동하는 경우, 혈액 만 작은 금액은 절단 후 탈출해야합니다. 출혈이 계속되면, 물론 아무 것도 할 수 없습니다하도록 클램프를 확인하는 것은 interfer입니다그들과 들죠. 대동맥의 아무도가 제거되지 않습니다. 그것은 단지 나눈 값입니다. </li><li> heparinized 생리와 컷이 종료 (200 U / ML)를 헹굼 후 면봉으로 추가 솔루션을 제거합니다. </li><li> 각 끝에서 세 불연속 봉합을 사용하여 장소에 압정으로 고정 그라프 트합니다. 그냥 각 끝에서 문합의 한쪽면을 봉합 한 후 연속 실행 봉합 이상의 불연속 봉합과 나머지 입력하십시오. 7 ~ 8 불연속 봉합은 충분합니다. 당신은 실행 봉합를 사용하는 경우, 혈관 벽이 편안한 상태로 유지하고 문합에 협착증의 원인이하지 않는 것이 있는지 확인하십시오. </li><li> 조심스럽게 두개골 끝에서 클램프를 제거하고 봉합 라인에 누출이 있는지 확인하십시오. 삼투의 작은 금액은 OK는 약 1 분 이내에 정차 제공하고 있습니다. 그것보다 더이 있다면, 그것은 출혈을 멈추게하기 위해 하나의 바늘을 사용할 수 있습니다. </li><li> 부드럽게 침수면 작은 주걱으로 문합 사이트 위의 대동맥에 키를 누른 다음 두 번째 클램프를 제거합니다. 부드럽게 눌러몇 번을 해제하고 대동맥이 특허가 나타납니다 있는지 확인합니다. 이식은 즉시 perfused되고 맥박이 표시됩니다. </li><li> 장내를 덮고있는 거즈를 제거 장소로 다시 이동합니다. 소장의 트위스트를 방지하고 정상적인 해부학 적 방향을 유지하고 있습니다. </li><li> 5-0 Vicryl을 사용하여 근육 층을 닫습니다. </li><li> 5-0 또는 6-0 prolene을 사용하여 피부를 닫습니다. </li><li> 5 MG / 마취를 종료하기 전에 진통제를 증가시키기 위해 kg에 carprophen로 피하에 마우스를 취급합니다. </li><li> 마우스 0.5-0.8 ML의 생리에게 피하을 제공합니다. </li><li> 복구 할 수있는 온수 새장에 마우스를 놓습니다. 가 정상적으로 회복되고 있는지 확인하기 위해 복구하는 동안주의 깊게 모니터링 할 수 있습니다. 수술 후 2-3 시간은 마우스가 비교적 정상적으로 작동해야합니다. 12 시간 후 조합에서 진통제를위한 2 밀리그램 / kg에서 피하 buprenorphine과 동물을 취급합니다. 언제든지 동물이 hunched되어있는 경우, 소음을 만들거나 운동의 제한된 범위를 전시, 문제를 조사합니다. 면최종 원인이 설립 고정 할 수없는, 동물 기관 프로토콜에 따라 euthanized해야합니다. 24 시간에있는 동물은 5 밀리그램 / kg에서 피하 carprophen의 다른 복용량을 받으실 수 있습니다. 뒷다리 마비는 실패 문합이나 혈전을 나타냅니다. 이런 상황에서, 동물은 euthanized해야합니다. </li></ol>

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</ol>

관심 없음 충돌이 선언 없습니다.

마우스가 잘 immunogenetically 9,12,13 정의되어 있으며, 원하는 경우들이 쉽게 특정 유전자의 표현을 변경하기 위해 조작 할 수 있기 때문에 대동맥 이식의 마우스 모델은 많은 장점을 제공합니다. 도입에 명시된 바와 같이 마우스에 혈관 수술 때문에 선박의 크기 대부분의 모델보다 더 어렵습니다. 같은 대동맥 등의 큰 동맥, 보통 내부 직경 100-200 μm보다 더하지 않습니다, 때문에 이러한 혈관을 조작하는 것은 기술과 민첩성 8,14 상당한 양의가 필요합니다. 단지 시스템을 구현하기 시작 자에 의해이 수술에서 관찰하는 가장 일반적인 합병증은 일반적으로 거친 핸들링 또는 클램핑의 intima의 부상으로 인한 혈전증으로 인한, 엉덩이 - 다리 마비입니다. 미세을위한 도구가 적절한 판매 회사가 판매 클램프의 대부분은 25 GM / cm 2보다 일반적으로 더 큰 압력으로, 마우스에 사용되는 너무 많은 압력을 만들 수 있습니다. CIA에서우리가 사용하는 의원은...

<table border="1"><tbody><tr><td> 항목 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 번호 </td></tr><tr><td> 혈관 클램프 </td><td> 정밀 과학 도구 </td><td> 00396-01 (크기 B-1) </td></tr><tr><td> 뒤몽 집게 </td><td> 정밀 과학 도구 </td><td> 11293-00 </td></tr><tr><td> 10-0은 microsuture을 Needled </td><td> AROSurgical </td><td> TK-107038 </td></tr><tr><td> 스트레이트 가위 </td><td> Roboz 외과 악기 (주) </td><td> RS-5620 </td></tr><tr><td> 낮은 온도 cauterizer </td><td> 비버 - Visitec 국제 </td><td> 8441000 </td></tr><tr><td> 자체 유지 트렉터 </td><td> 세계 정밀 계측기 </td><td> 14,240 </td></tr></tbody></table>

혈관 질병의 연구에 대한 마우스의 orthotopic 대동맥 이식

Orthotopic Aortic Transplantation in Mice for the Study of Vascular Disease

마우스의 문합을 포함하는 혈관 절차는 일반적으로 어렵고 개별 외과 의사의 기술에 크게 의존 할 것으로 생각됩니다. 이 대부분 사실이지만, 이러한 절차의 어려움을 줄이고 재현성을 향상시킬 수 있습니다 중요한 원칙에는 여러가지가 있습니다. Orthotopic 대동맥 이식은 두 엔드 - 투 - 엔드 문합을 포함하기 때문에 이러한 원칙을 배울 수있는 훌륭한 절차이지만, 일관된 성공을위한 좋은 suturing 기술과 선박의 취급이 필요합니다. 이 절차는받는 사람의 기본 대동맥의 분단 다음 기증자 동물의 복부 대동맥의 길이의 조달과 함께 시작합니다. 조달 대동맥은 다음받는 사람 대동맥의 구분 끝 사이에 위치하여 엔드 - 투 - 엔드 문합을 사용하는 곳으로 봉합되어 있습니다. 이 목표를 성공적으로 농도의 높은 수준, 좋은 도구, 침착, 그리고 감사를 필요로 수행하는 방법을 쉽게마우스 vasculature는 혈전증의 결과로 손상 될 수 있습니다. 이러한 중요한 원칙을 배우는 것은 작은 설치류에 미세을 배우고 대부분의 초보자의 시간을 차지하고이야. 이 프로토콜 전반에 걸쳐, 우리는 다음과 같은 중요한 사항을 참조하십시오. 이 모델은 다른 실험 시스템 1-8의 다양한 혈관 질환을 연구하는 데 사용할 수 있습니다. 여기에 표시된 맥락에서,이 가장 많이 후 이식 혈관 질환, 내막 증식증이 allograft 내에서 발생하는 고체 장기 이식의 일반적인 장기 합병증의 연구에 사용됩니다. 모델의 주요 장점은 양적 morphometric 분석을 용이하게하고 이식 혈관은 추가 제어 구 역할을 할 수있는 내생 선박에 인접 자리 잡고 있다는 것입니다. 여기에 표시된 기술은 가장 자주 18~25g 무게 마우스에 사용됩니다. 우리는 C57BL/6J, BALB / CJ, 그리고 C3H/HeJ의 변종을 사용하여 우리의 경험의 대부분을 축적하고 있습니다.

그림 1은 대동맥 이식을 보여줍니다. 흰색 화살표는 봉합 라인을 나타냅니다. 특허 수술이 볼 수 펄스를 표시합니다. 그림 2는받는 사람의 생존은 56일 기간 동안 다음에 한에서 전형적인 실험을 나타냅니다. 한 그룹은 BALB / C 대동맥으로 이식 (C57BL / 6 X FVB) 야생 - 타입받는 마우스로 구성. &quot;KO&quot;지정 다른 그룹은, 24 시간 이내에 이식의 혈전증에 결과 헴 oxygenase-1, 표현의 결함 수신자 (C57BL / 6 X FVB)로 구성되어 있습니다. 특히, 모든받는 사람의 죽음이 결과는 그림과 같이. 그림 3 쇼 에코 IVC와 일반 동물과 이식받는 사람의 복부 대동맥의 측정. 이식은 특허 및 비 이식 대동맥 모양과 비슷합니다. <img alt="그림 1" src="/files/...

우리는 마우스의 복부 대동맥의 한 부분이 단지 allogeneic 또는 syngeneic받는 사람의 신장 동맥 아래에 orthotopically 이식되는 기술을 설명합니다. 이 기술은 균일 한 크기의 큰 동맥의 이식이 유리한 것으로 간주되는 연구에 유용 할 수 있습니다.

혈관 질병의 연구에 대한 마우스의 Orthotopic 대동맥 이식

마우스의 문합을 포함한 혈관 시술은 일반적으로 어렵고 개별 외과의의 숙련도에 크게 의존하는 것으로 생각됩니다. ...

이 절차의 목적은 공여마우스의 복부 대동맥을 동종 수용마우스에 이식하는 것입니다. 먼저 공여 대동맥을 적출한 후, 수용 동물에 이식 부위를 조성함으로써 이를 수행합니다.그 다음 수혜 동물의 자생 대동맥을 박리하여 절단합니다. 마지막 단계로, 두 곳의 단단 문합술(end-to-end vascular anastomosis)을 통해 공여자 대동맥을 이식합니다. 궁극적으로, 이 절차는 동종 계통 조합에서 이식 후 혈관 질환의 발달을 연구하는 데 사용될 수 있습니다.이 방법이 예를 들어 이소성 심장 이식보다 유리한 점은 혈관의 크기가 일정하여 형태측정학적 분석이 더 쉽다는 것입니다. 또한 혈관이 실질 조직으로 둘러싸여 있지 않으므로, 데이터 분석을 복잡하게 만들 수 있는 세포 침윤물 및 기타 요소들의 영향을 받지 않습니다. 이 기술을 사용하면 인간의 임상 이식에서 난제로 남아 있는 이식 후 혈관 질환에 관여하는 기전을 설명하는 데 특히 유용할 수 있습니다.스트레스 영향을 최소화하고 에너지 비축량을 최대화하기 위해, 수술 전 최소 72시간 동안 동물을 생물 보관실(vivarium)에서 유지하십시오. 수술 당일, 35~38°C로 설정된 가열 패드 위에 금속 수술대를 놓으십시오. 그 후 마취가 완료되면 동물의 복부 하단 털을 제거하십시오.실험실용 테이프를 사용하여 동물을 수술대 위에 대자로 뻗은 자세로 고정시킨 후, 멸균 가위와 소독제 및 에탄올을 사용하여 제모된 부위 전체를 3회 소독합니다. 다음으로, 체벽을 절개하여 복부 내장을 노출시킵니다. 그 후 멸균 면봉을 사용하여 내장을 따뜻한 식염수에 적신 멸균 거즈 위로 옆으로 밀어내어 복부의 주요 혈관을 노출시킵니다.이제 매우 조심스럽게 둔성 박리를 통해 하대정맥을 포함한 주변 조직으로부터 복부 대동맥을 분리한 다음, 요동맥을 조심스럽게 들어 올려 소작합니다. 박리를 위한 대동맥 구간은 신혈관 아래쪽이자 대동맥이 대퇴동맥으로 분지되는 지점의 위쪽이어야 합니다. 해당 영역을 확인한 후, 신동맥 바로 아래쪽에 봉합사를 묶고 분지 지점 바로 위쪽에 또 다른 봉합사를 묶습니다.다음으로, 가위를 사용하여 대동맥을 절단한 후 혈관의 한쪽 끝을 매우 조심스럽게 잡고 헤파린 처리된 식염수를 떨어뜨려 중력에 의해 혈관 내부로 흐르게 합니다. 그 후 혈관 끝부분을 최대한 적게 만지도록 주의하며, 이식편을 제거하여 즉시 얼음처럼 차가운 식염수가 담긴 용기에 넣습니다.수혜 동물에게 마취제와 진통제를 투여한 후, 방금 보여드린 것과 같이 복부의 배면을 제모합니다. 안구 건조를 방지하기 위해 눈에 젠타마이신 안연고를 도포하고, 충분한 소독이 이루어지도록 시연한 바와 같이 복부를 소독합니다. 이제 피부와 체벽을 통해 중앙선을 따라 단계적으로 절개합니다.그런 다음 복부 절개 부위를 열어두기 위해 스프레더를 삽입하며, 클램프의 본체가 방해되지 않도록 나사 조립체가 동물의 뒷부분을 향하게 합니다. 다음으로 식염수에 적신 멸균 거즈를 장 위에 올립니다. 그런 다음 손가락으로 거즈를 가볍게 눌러 고정합니다.멸균 면봉을 장 하단에 삽입하고 장을 조심스럽게 젖혀 거즈 위에 놓이게 합니다. 또 다른 멸균 거즈 조각을 장 위에 얹고 식염수를 적십니다. ATA와 하대정맥을 덮고 있는 지방 조직을 조심스럽게 제거한 후, 포셉을 사용하여 신하대동맥을 하대정맥으로부터 세심히 박리합니다.이제 클램프 두 개를 배치할 수 있을 만큼 충분한 공간을 확보하고, 분리했을 때 이식편을 봉합할 수 있는 혈관의 길이가 충분하도록 주변을 정리하십시오. 검은색 봉합사를 이용하여 혈관을 따라 장력을 느끼며 확인할 수 있습니다. 박리 시 혈관 분지점을 확인하고, 필요한 경우 저온 소작기로 분지점을 소작하십시오.다음으로, 신동맥 바로 아래에 혈관 클램프 하나를 삽입하고, 분지부 바로 위에 또 다른 혈관 클램프를 삽입합니다. 그 후 대동맥을 절단합니다. 이 경우에는 두 클램프의 중간 지점 근처에서 분지 혈관을 소작했기 때문에, 해당 부위가 문합처로 부적합하여 분지부 쪽에 더 가깝게 절단하였습니다. 일반적으로 대동맥의 양 끝단은 수축하여 약 5mm 정도의 공간이 생기게 됩니다.지혈 상태를 확인하십시오. 클램프가 제대로 작동한다면, 절단 후 소량의 혈액만 유출되어야 합니다. 다음으로, 대동맥의 절단단을 헤파린 식염수로 헹군 뒤 여분의 용액을 면봉으로 닦아냅니다.이제 각 끝부분에 세 개의 결절 봉합을 사용하여 이식편을 임시 고정합니다. 그다음 각 끝부분에서 문합부의 한쪽 면을 봉합하고, 나머지 부분을 7~8개의 결절 봉합으로 채웁니다. 연속 봉합을 선호하는 경우, 혈관벽이 이완된 상태를 유지하고 문합부에서 협착이 발생하지 않도록 주의하십시오.이제 대동맥의 두측 끝에 있는 클램프를 조심스럽게 제거하고 봉합선에 누출이 있는지 확인합니다. 다음으로, 젖은 면봉으로 문합 부위 위쪽의 대동맥을 부드럽게 누르면서 두 번째 클램프를 제거합니다. 대동맥을 두어 번 가볍게 눌렀다 떼어내어 혈관의 개통성을 확인합니다. 이식편으로 즉시 혈류가 공급되며 맥박이 관찰되어야 합니다.이제 장을 덮고 있던 거즈를 제거하고, 장이 꼬이지 않도록 주의하며 정상적인 해부학적 방향을 유지한 채 다시 제자리로 옮깁니다. 5-0 Vicryl 봉합사로 근육층을 봉합한 후, 5-0 또는 6-0 proline 봉합사로 피부를 봉합합니다. 마취를 종료하기 전, 진통 효과를 높이기 위해 마우스의 피하에 carprofen을 투여하고, 동일한 경로로 식염수 0.5~0.8 mL를 투여합니다.마지막으로, 회복을 위해 마우스를 가열된 케이지에 넣고 동물을 주의 깊게 모니터링합니다. 수술 후 12시간과 24시간 후에 각각 buprenorphine과 carprofen을 동물에게 피하 투여합니다. 첫 번째 그림은 대동맥 이식편을 보여줍니다.여기의 흰색 화살표로 표시된 봉합선을 확인하십시오. 수혜자의 생존을 56일 동안 추적 관찰한 전형적인 실험이 묘사되어 있습니다. 대조군은 bowel C 대동맥을 이식받은 야생형 C 57 BL six by FVB 수혜자 생쥐로 구성되었습니다.실험군은 heme oxygenase one의 발현이 결핍된 C 57 BL six by FVB 수혜체로 구성되었습니다. 이러한 유전자 결손은 24시간 이내에 이식편의 혈전증을 유발합니다. 특히, 이로 인해 모든 수혜체가 사망하였습니다.마지막 그림은 정상 동물과 이식 수혜 동물의 하대정맥, 공동정맥 및 복부 대동맥의 에코 측정값을 보여줍니다. 이식편이 개통되어 있으며 비이식 대동맥과 외관상 유사함에 유의하십시오. 보신 바와 같이 조직이 매우 섬세하고 작으므로, 본 시술은 분명히 숙련이 필요한 기술이며, 따라서 일단 마스터하더라도 성공적으로 일상적인 수행이 가능해지기까지는 상당한 연습이 필요하다는 점을 명심해야 합니다.이 기술은 적절하게 수행될 경우 1시간 이내에 완료할 수 있습니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

이 동영상은 쥐에 이식 vasculopathy (TVP)의 개발을 연구하기위한 간단한 모델로 orthotopic 대동맥 이식 모델을 보여줍니다.

Orthotopic 대동맥 이식 : 만성 Vasculopathy의 개발 연구에 생쥐 모델

이 비디오는 동종면역 유도 혈관 거부 반응을 연구하기 위해 마우스 대동맥 삽입 모델을 생성하는 방법을 보여줍니다. 마취된 기증자 마우스를 앙와위 자세로 눕힌 후, 하부 대동맥(IAA)을 주변 구조와 조심스럽게 분리합니다. 분지 혈관이 결찰되고 IAA의 양쪽 끝이 고정되어 절제 전에 혈류를 방지합니다. 그 후, 공여자의 IAA를 동종 수용 마우스에 이식하고, 문합을 통해 혈류를 회복시켜 동종면역에 의한 혈관 거부 반응을 조사합니다.

동종면역 유도 혈관 거부 반응을 연구하기 위한 마우스 대동맥 삽입 모델

우리는 우리의 마우스 이식 arteriosclerois (GA) 같은 근친 교배 균주의받는 사람에 마우스 선박 세그먼트의 개재를 포함 모델에 대한 프로토콜을 설명합니다. 용기 기증자에 추가 유전자 변화를 교잡에 의해, 모델은 GA에 특정 유전자의 효과를 평가할 수 있습니다.

이식 동맥 경화에 대한 마우스 모델

우리는 마우스의 대동맥 삽입 이식을 위한 프로토콜을 설명합니다. 이 프로토콜의 목표는 동맥의 동종면역 반응 및 그에 따른 장기 이식 실패에 기여하는 동맥 변화와 관련된 병리학적 과정 및 치료 전략을 연구할 수 있는 모델을 제공하는 것입니다.

동종 유도 혈관 거부 및 이식 동맥 경화 마우스 모델

고형 장기 및 혈관 복합 동종 이식을 결합하기 위해 경추 비봉합 커프 기술을 사용하여 마우스에서 새로운 이종성 흉벽, 흉선 및 심장 이식 모델을 설명합니다.

마우스의 소설 미세 수술 이소성 모델, 욕실 공산권 가슴 벽, 흉선, 및 심장 이식

슈퍼 미세 혈관 문합을위한 비 봉합 커프 기술을 적용 마우스에서 소성을 뒷다리 이식이 새로운 모델은, 혈관 복합 동종 이식 (VCA)에 관한 생체 역학적 면역 학적 연구를위한 강력한 도구를 제공합니다.

마우스에서 소성을 뒷다리 이식

우리는 orthotopic 대동맥 이식 모델 마우스에 슬리브 기술을 사용 하 여 현재. 혈관 질환의 연구에 사용할 수 있는 매우 빠른 문 합 방법 이다.

대동맥 이식-교육용 비디오의 마우스 모델에서 소매 기법을 사용 하 여

여기서, 우리는 자궁 경부 뮤린 모델에서 비 봉합술 커프 기술을 사용하여 마우스에서 이종성 대동맥 이식의 프로토콜을 제시한다. 이 모형은 만성 동종 이식 혈관병증 (CAV)의 근본적인 병리를 공부하기 위하여 이용될 수 있고 그것의 대형을 방지하기 위하여 새로운 치료에이전트를 평가하는 것을 도울 수 있습니다.

수정된 비봉합사 커프 기술을 사용한 뮤린 자궁 경부 대동맥 이식 모델

이성애 복부 마우스 심장 이식 모델에서 혈액 회로 재건을 위한 새로운 기술이 입증된다.

복부 마우스 심혼 이식 모형에 있는 혈액 회로 재건

마우스 심장 이식 모델은 이식 면역학을 연구하기 위한 귀중한 연구 도구입니다. 본 프로토콜은 층류 혈류를 허용하기 위해 수혜자의 총 경동맥 및 기증자의 폐동맥 트렁크에 커프를 배치하는 것을 포함하는 마우스 이종 자궁 경부 심장 이식을 자세히 설명합니다.

혈관 수갑을 이용한 마우스 이종 자궁 경부 심장 이식

이 프로토콜은 마우스 자궁경부 심장 이식을 위한 단순화된 끝 투 측면 봉합 문합 기법을 제시하여, 이식 면역학 연구를 위한 견고하고 재현 가능한 모델을 제공합니다.

종단 간 문합 기법을 이용한 경추 이종성 마우스 심장 이식 이식 면역학 연구

배우세요 마우스 복부 대동맥의 정위 이식술을 통해 혈관 질병 연구 방법을 익히세요. 이 기술은 동종 이식 후 혈관 병증 발달을 연구하는 데 유용하며, 균일한 이식편 크기로 실험의 일관성을 높입니다.

혈관 질병의 연구에 대한 마우스의 Orthotopic 대동맥 이식

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