Genome-wide Gene Deletions in <em>Streptococcus sanguinis</em> by High Throughput PCR

Xiuchun Ge; Ping Xu

doi:10.3791/4356

게놈 전체 유전자 삭제할에 연쇄상 구균 sanguinis 높은 처리량 PCR에 의한

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Biology

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Genome-wide Gene Deletions in Streptococcus sanguinis by High Throughput PCR

게놈 전체 유전자 삭제할에 연쇄상 구균 sanguinis 높은 처리량 PCR에 의한

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14:07 min

November 23, 2012

DOI: 10.3791/4356-v

Xiuchun Ge¹, Ping Xu¹

¹The Philips Institute of Oral and Craniofacial Molecular Biology,Virginia Commonwealth University

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

효율적인 게놈 전체의 단일 유전자 돌연변이 방법은 사용하는 설립되었습니다

이 절차의 전반적인 목표는 고처리량 PCR을 통해 연쇄상구균에서 게놈 전체의 단일 유전자 결실을 만드는 것입니다. 이는 먼저 항생제 내성 유전자와 표적 유전자의 업스트림 및 다운스트림 DNA 염기서열을 포함한 고처리량 PCR 증폭을 통해 3개의 앰플리콘을 획득함으로써 달성됩니다. 두 번째 단계는 3개의 PCR 앰플리콘을 템플릿으로 사용하여 선형 재조합 PCR 앰플리콘을 얻는 것입니다.

다음으로, 유능한 s sanguine cell을 준비합니다. 마지막 단계는 선형 재조합 PCR 앰플리콘을 유능한 s sanguineous cell로 변환하는 것입니다. 궁극적으로 결장 A PCR 증폭 및 DNA 염기서열분석은 올바른 돌연변이를 확인하는 데 사용됩니다.

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