Name: 인간의 기본 섬유 아세포 배양에서 순진 성인 줄기 세포 분리 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-05-03T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 39 s
Description: 배우세요 인간 기본 섬유 아세포 배양에서 스트레스 저항성을 이용해 순진 다능성 피부 유래 전구 세포(SKP)를 분리하는 방법입니다. 이 기법은 재생 의학 및 줄기세포 연구에 활용됩니다.

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이 작품은 알렉산더 폰 훔볼트 재단 (5090371), 알레르기 연구 및 교육을위한 크리스틴 KUHNE 센터 (CK-CARE) 및 Bayerischen Staatsministerium (KD까지)에 의해 지원되었다.

1. 차 섬유 아세포 배양에서 SKP 분리 <ol><li> 세포 은행에서 직접 피부 생검에서 얻은 하나 섬유 아세포 배양 섬유 모세포 성장 배지 DMEM 15 % 태아 송아지 혈청, 2 MM의 글루타민, 10 MG / ML 페니실린, 10 MG / ML 스트렙토 마이신을 포함의 문화에 유지됩니다. </li></ol> 인간 섬유 아세포 GMO3349C 및 GMO8398A는 의료 연구를위한 Coriell 연구소 (캠든, NJ)에서 얻은 본 연구에 사용 하였다. <ol start="2"><li> 인구 계대에서 배양 (PPD가) 20 35 80 %의 confluency에에 SKP 문화를 위해 사용되었다. 한 10cm 조직 문화 접시 (BD 팔콘)는 약 1.5x10 6 셀이 포함되어 있습니다. </li><li> 37 1 시간 2 ML 트립신 용액 (0.25 %, Invitrogen 사) ° C.와 PBS와 부화와 세포를 씻으 </li><li> 5 ML PBS와 함께 접시에에서 세포를 수집하고 15 ML 팔콘 튜브에 세포 현탁액을 전송합니다. </li><li> 24 시간 동안 4 ° C에서 세포를 품어. </li><li> DMEM-F12 3:1 (V / V) 40 NG / ML FGF2 (BD Biosciences는, 20 NG / ML EGF (BD Biosciences의), B27 혈청 보충 2 % (Invitrogen 사), 1 μg으로 구성된 SKP 성장 매체를 준비합니다 / ㎖ Fungizone (Invitrogen 사) 및 25 μm의 / ㎖ 젠타 마이신 (Invitrogen 사). </li><li> 펠릿 5 분 동안 1,200 rpm으로 세포와 4 ML SKP 성장 매체에서 직접 세포 펠렛을 resuspend을. 25cm 2 조직 문화 플라스크 (BD 팔콘)에 세포 현탁액을 전송합니다. </li><li> 37 ° C에서 플라스크 배양하여 3 4 주 동안 매일 구체 형성의 문화를 모니터링합니다. </li></ol> 2. 구 배양 조건 <ol><li> 37 ° C, 5 % CO 2에서 25cm 2 플라스크 (BD 팔콘)에서 배양 세포. </li><li> 플라스크의 바닥에 부착하는 세포를 방지하기 위해 적극적으로 매일 플라스크를 흔들어. 필요한 경우, 자기편 세포를 분리하고 새 플라스크에 문화를 전송하는 2 ㎖ 멸균 피펫 아래로 피펫. </li><li> 첫 번째 분야는 3t에서 구축 시작오 사일. </li><li> 매체 매 3 일마다의 플라스크 변화의 절반 아래로 분야 침전물을 할 수 있습니다. 성장 인자의 동일한 최종 농도를 유지하려면 갓 준비 SKP 성장 매체에 배 성장 인자를 추가합니다. </li><li> 4 ML 최대 볼륨을 일정하게 유지. </li><li> 분야는 ~ 200mm의 크기에 도달하면 그들은 활발한는 2 ㎖ 피펫 아래로 피펫에 의해 작은 크기로 분야를 세분화하여 계대해야합니다. </li><li> 문화는 2.4 단계)에 설명 된대로 사료 두 25cm 2 플라스크 (BD 팔콘)와 분야 ​​문화로 분할됩니다. </li><li> 분야는 21 일 (16)에 의해 심사 줄기 세포 마커를 수집하고 있습니다. </li></ol> 2.6) 및 2.7)의 절차에 분야의 전파를 설명하는 것은 (1) SKP 매체에 포함 된 영양소와 성장 인자는 각 영역 내의 모든 셀에 액세스 할 수 있습니다 (2) 사전을 사용 SKP 구 문화를 확장 할 수 있습니다. 우리의 세제곱에 따라 일반적으로 구 문화lture 조건은 3 개월 기간을 통해 성장하는 능력을 유지하고 3 - 4 시간 사이 계대 있습니다. 3. 줄기 세포 마커에 대한 면역 세포 화학 <ol><li> 구 문화는 하루에 16 21에 PBS에 수확된다. 문화는 5 분 1,000 rpm으로 펠렛입니다. </li><li> 분야는 PBS의 작은 볼륨 현탁되어 있습니다. </li><li> 현미경 슬라이드 (피셔 브랜드)에 직경 약 0.5 ㎛의 DAKO 펜으로 두 개의 원을 그립니다. </li><li> 원에 구 현탁액의 50 μl를 추가합니다. </li><li> 각 드롭 분야의 존재를 광학 현미경으로 확인합니다. </li><li> 후드 방울 건조 시키십시오. </li><li> 어느 -80 ° C에서 슬라이드를 정지 또는 immunofluoresence 염색 프로토콜로 진행합니다. </li><li> 면역 염색에 대해, 10 분 -20 ° C에서 미리 냉각 메탄올 (100 %)로 슬라이드를 고정합니다. </li><li> PBS로 슬라이드를 씻으십시오. </li><li> PBS/10 % 태아 소 혈청 / 0.02 % 트리톤의 X100과 함께 슬라이드를 차단최소 1 시간 동안. </li><li> PBS/10 % 4에서 2 상온에서 시간 또는 밤새 FBS ° C. : 버퍼를 차단에 희석 일차 항체 (예 : 안티 스틴, 안티 OCT4, 안티 TG30, 반대로 나노 항체, 표 3)를 품다 </li><li> 차단 버퍼로 3 회 세척하고 실온에서 1 시간 동안 차 항체와 함께 배양한다. </li><li> PBS로 버퍼와 3 회를 차단로 3 번 씻으십시오. </li><li> Vectashield 장착 매체 (벡터 주식 회사)와 마운트 슬라이드. </li><li> 면역 형광 현미경으로 줄기 세포 마커의 발현에 대한 샘플을 분석합니다. </li></ol> 4. 줄기 세포 마커의 발현 수준의 실시간 PCR 분석 <ol><li> 21 일부터 18 약 2-3 ML 구 문화를 가져 가라. </li><li> 펠릿 5 분 동안 1,200 rpm에서 분야와 모든 매체를 대기음. </li><li> RNeasy Minikit (Qiagen의, 발렌시아, CA)를 사용하여 분야에서 RNA를 분리합니다. </li><li> 분광 아가로 오스 겔에 의해 RNA의 순도를 평가합니다. &lt;/ 리&gt; <li> 템플릿으로 전체 세포 RN​​A를 사용하여 (Omniscript의 역전사 효소 (Qiagen의)) cDNA를 합성. </li><li> 20 μL의 각 프라이머의 375 nm의 템플릿 50 NG의 농도 전원 SYBR 녹색 PCR Mastermix (적용되는 생물계)에있는 줄기 세포 마커 (표 1 참조)에 대한 실시간-PCR 이용하여 프라이머로 줄기 세포 마커를 검증 반응 볼륨입니다. GAPDH는 내생 컨트롤로 사용됩니다. </li><li> 증폭은 20 초 동안 5 초, 60 ° C에 대한 95 40주기에 따라 2.5 분 ° C에 대해 95에서 초기 변성 ° C를 사용하십시오. </li><li> 2 (ΔΔCT) 메서드를 8로 실행을 분석합니다. </li></ol> 5. 평활근 세포로 직접 분화 <ol><li> 하루 21 ~ 26 구체 SKP 배지에서 6 잘 배양 접시 (BD 팔콘)로 도금 하였다. </li><li> 세포는 72 시간 동안 SKP 매체 분야에서 준수하고 빨리 성장하는 것이 허용되었다. </li><li> 평활근 세포 (SMCS) differentiat이온은 5 % FBS, 10 NG / ML PDGF-BB (Invitrogen 사), 2.5 ML / NG TGF-B1 (Invitrogen 사)를 포함하는 높은 포도당 Dulbecco의 수정 이글 배지 (Invitrogen 사)로 구성된 SMC 차별화 매체와 매체를 교체하여 시작 시작 . </li><li> 매체는 문화 3-4주의 기간 동안 갓 준비 SMC 분화 배지로 3 일마다 변경되었습니다. </li><li> SMC 마커에 대한 심사는 면역 조직 화학 염색으로 3으로 4 주 후에 시행 하였다. </li><li> 세포는 10 분 동안 PBS에서 4 % 파라 포름 알데히드 용액에 고정 하였다. </li><li> 세포를 PBS는 30 분 동안 0.3 % 트리톤 X-100을 함유 투과 하였다. </li><li> 세포는 실온에서 1 시간 및 추가가 같은 3.15) 3.12에 설명 된 처리)에 대한 αSMA (MO851, DAKO, 1:100) 또는 calponin (M3556, DAKO, 1:100)에 대한 항체와 함께 배양 하였다. </li></ol>

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</ol>

우리는 공개 아무것도 없어.

방법을 사용하여 여기에 설명, 순진 피부 줄기 세포는 기본 피부 섬유 아세포 배양에서 분리 할 수​​ 있습니다. 이 방법을 사용하여, 우리는 최근 희귀 유전 증후군, 허친슨 - 길 포드 조로증 증후군 7 명에서 유래 섬유 아세포 배양에서 성체 줄기 세포의 분리 및 특성을보고했다. 로 그 전구체 세포 표현 줄기 세포 마커 자기 갱신 할 수 있으며 (자세한 벤첼 등.에 의해 그림 4 참조, 2012) 섬유 아세포와 평활근 세포 7을 포함한 다양한 세포 계통으로 분화하도록 지시 할 수 있습니다 여기에 표시됩니다. 이 방법은 이전에 포유류의 피부 샘플 10에서 SKPs의 분리에 대해보고하는 방법에 여러 가지 이점을 제공합니다. SKP는 하나 갓 피부 생검이나 이미 존재하는 기본 섬유 모세포 배양에서 설정하는 기본 섬유 모세포 배양에서 분리 할 수​​ 있으며 얻을 수 있습니다세계의 세포 은행.에서 이 새로운 접근 방식은 피부 샘플을...

<table><tbody><tr><td>DMEM 고당</td><td>인비트로겐</td><td>31966-047</td><td></td></tr><tr><td>DMEM 저당</td><td>인비트로겐</td><td>21885-108</td><td></td></tr><tr><td>소 태아 혈청</td><td>인비트로겐</td><td>10270-106</td><td></td></tr><tr><td>L-글루타민</td><td>인비트로겐</td><td>25030-024</td><td>최종 농도: 200 mM</td></tr><tr><td>페니실린/ 스트렙토마이신</td><td>인비트로겐</td><td>15140-122</td><td>최종 농도: 10 mg/ml /10 mg /ml</td></tr><tr><td>트립신 용액 (0.25 %)</td> <td>Invitrogen</td><td>25200-056</td><td></td></tr><tr><td>F-12 영양 혼합물 (햄)</td> <td>Invitrogen</td><td>21765-029</td><td></td></tr><tr><td>FGF2</td><td>BD Biosciences</td><td>4114-TC-01M</td><td>최종 conc.: 40 ng/ml</td></tr><tr><td>EGF</td><td>BD Biosciences</td><td>236-EG-200</td><td>Final conc.: 20 ng/ml</td></tr><tr><td>PDGFBB</td><td>Invitrogen</td><td>PHG0043</td><td>Final conc.: 5 ng/ml</td></tr><tr><td>TGF-b1</td><td>Invitrogen</td><td>PHG9204</td><td>Final conc.: 2.5 ng/ml</td></tr><tr><td>25 cm2 플라스크</td><td>Omnilab</td><td>FALC353109</td><td></td></tr><tr><td>PBS w/o CaMg</td><td>Invitrogen</td><td>14190-169</td><td></td></tr><tr><td>B27</td><td>Invitrogen</td><td>17504-044</td><td></td></tr><tr><td>Methanol</td><td>Roth</td><td>8388.2</td><td></td></tr><tr><td>Vectashield 마운팅 매체</td><td>Vector Inc.</td><td>H-1200</td><td></td></tr><tr><td>RNeasy Minikit</td><td>Qiagen, Valencia, CA</td><td>74104</td><td></td></tr><tr><td>Omniscript Reverse Transcriptase</td><td>Qiagen</td><td>205113</td><td></td></tr><tr><td>SsoFast EvaGreen Supermix</td><td>BioRad</td><td>172-5201</td><td></td></tr><tr><td>Fungizone</td><td>Invitrogen</td><td>15290-018</td><td>최종 conc.:1 mg/ml</td></tr><tr><td colspan="4">표 2. 특정 시약 및 장비.</td></tr></tbody></table>

인간의 기본 섬유 아세포 배양에서 순진 성인 줄기 세포 분리

Na&iuml;ve Adult Stem Cells Isolation from Primary Human Fibroblast Cultures

지난 십 년간, 여러 성체 줄기 세포 집단은 인간의 피부 1-4에서 발견되었습니다. 능성 성인 피부 전구체의 분리가 처음 밀러 F. D 연구소 5, 6에 의해보고되었다. 이러한 초기 연구는 성인 포유류의 진피 5에서 다 능성 전구 세포 인구를 설명했다. 이러한 세포 -라고 SKPs, 피부 파생 된 전구체는 - 격리와 설치류와 인간의 피부에서 확장하고 뉴런 5와 같은 피부 발견되지 않았다 세포 유형 등 신경과 중배엽 모두 자손,로 분화되었다. 배양 SKPs에 면역 세포 연구는 세포가 피브로넥틴 및 다 능성 줄기 세포 마커 6에 추가 vimentin에와 스틴, 신경과 골격 근육의 전구체로 표현 중간 필라멘트 단백질을 발현 것으로 나타났다. 지금까지 성체 줄기 세포 인구 SKPs 갓 수집 포유류의 피부 생검에서 분리되었다. ve_content는 &quot;&gt; 최근에, 우리는 설립과 피부 유래 전구 세포의 인구는 피부 생검 7에서 설정된 기본 섬유 아세포 배양에 존재 남아있을 것으로보고있다. 몇 체세포 줄기 세포가 초기 인구 계대에서 차 섬유 아세포 배양에 상주 할 수있는 가정이었다 다음과 같은 관측에 따라 : (1) SKPs 및 기본 섬유 모세포 배양 진피에서 파생 된, 그리고 SKP 세포 따라서 소수의 1 차 피부 섬유 아세포 배양에 존재 남아있을 수 있으며, (2) 주요 섬유 아세포 배양했습​​니다 냉동 분주에서 성장 7 가능한 남아 세포의 작은 숫자가 포함 된 저장 또는 전송 중에 불리한 온도에 노출.이 드문 세포는 여러 번 확장 및 계대 수있었습니다.이 관찰 제안하는 높은 확산 힘과 스트레스에 대한 저항을 가진 세포의 작은 숫자 인간 섬유 아세포 배양 7 참석했다. 우리는 전세계 조직 은행 (그림 1)에서 쉽게 사용할 수있는 기본 섬유 모세포 배양에서 성체 줄기 세포의 빠른 분리를위한 프로토콜을 설정하는 이러한 연구 결과를 이용했습니다. 피부 샘플에 액세스 할 수없는 경우 섬유 아세포 문화의 분자 희귀 유전 질환을 기본 메커니즘뿐만 아니라 모델링 질병을 해부 할 수있는 새로운 기회를 열어, 따라서, 조직 은행에서 구할 수 있지만이 전구 세포의 분리를 허용하는이 방법은 중요한 의미가있다 요리.

우리는 우리가 최근 7보고 된 선택적으로 EGF와 FGF2으로 구성된 통제 성장 조건 하에서 SKP 분야를 생성하기 위해 확장 세포의 인구는 기본 피부 섬유 아세포 배양 (그림 1)에 존재하는 것을 보여줍니다. 일반적으로 세포 은행에서 제공하는 기본 섬유 아세포의 변종에 해당하는 PPD가 15 일부터 25 일까지 섬유 아세포 배양 본 연구에 사용 하였다. 이 방법에서 설명하는 24 시간 동안 자양물 고갈과 함께 저온 처리로 구성된 이중 치료에 제출 섬유 아세포 배양 한 것과 유사한 성장 특성을 공유하는 부동 분야를 (또한 배아 몸 EB으로 함)가 포함 재현성 생성 된 문화를 직접 파생 SKPs 이전에 설명 피부 샘플 7, 9에서. 여기에서 우리는 우리가 최근 7보고 한 방법을 사용하는, 우리는 CE의 인구를 분리 표시고립 neurosph...

우리는 인간의 기본 섬유 아세포 배양에서 순진 능성 피부에서 파생 된 전구체 (SKP) 세포를 분리하는 방법을보고합니다. 우리는 섬유 아세포 문화에서 파생 된 이러한 SKPs은 인간의 피부 생검에서 직접 파생 된 것과 유사한 줄기 세포 특성을 공유하는 것을 보여줍니다. 이러한 세포는 OCT4와 나노 등 능성 마커뿐만 아니라 신경 능선 마커 스틴을 표현한다.

Over the last decade, several adult stem cell  populations have been identified in human skin 1-4.  The isolation of multipotent adult dermal precursors ...

이 절차의 전체적인 목표는 일차 인간 섬유아세포 배양물로부터 나이브 다능성 피부 유래 전구세포를 분리하는 것입니다. 먼저, 일차 섬유아세포 배양을 확립하고 온도 변화 및 영양분 고갈과 같은 스트레스 조건에 대한 내성을 바탕으로 나이브 피부 유래 전구세포를 선택합니다. 그다음, 제어된 성장 조건 하에서 세포를 배양하여 구체(sphere)를 형성하며, 수주 동안 구체 배양물을 지속적으로 성장 및 확장시켜 이러한 전구세포가 성체 줄기세포와 유사한 특성을 공유함을 입증합니다.궁극적으로, SKP 세포는 평활근 세포로 분화하도록 유도될 수 있습니다. 저는 보관 또는 운송 중 온도 변화로 인해 스트레스를 받는 일차 섬유아세포 구조의 냉동 OT에서 소수의 세포들이 여전히 분화 능력을 유지하고 있다는 점을 관찰하고 이 방법의 아이디어를 처음 얻었습니다. 이는 소수의 세포가 스트레스에 저항성이 있으며, 이들이 진피 줄기세포일 가능성이 있음을 시사하며, 결과적으로 이 절차가 유효할 것임을 보여주었습니다.인간 섬유아세포 배양으로부터 SKP 분리 방법을 개발하는 데 참여한 저희 실험실의 대학원생입니다. SKP 분리 배양을 위해, 80% 합류도(confluency)에서 20~35회의 세포 집단 배가(population doubling)를 거친 섬유아세포를 사용합니다. PBS로 세포를 한 번 세척하고 37°C에서 1시간 동안 2mL의 트립신 용액과 함께 배양합니다. 5mL의 PBS로 세포를 회수하여 세포 현탁액을 15mL 팰콘 튜브로 옮긴 후, 4°C에서 24시간 동안 배양합니다. 현탁액을 1200 RPM에서 5분 동안 원심 분리합니다.세포 펠렛을 4 mL의 SKP 성장 배지에 직접 재현탁하고, 37 °C, 5% CO2 조건에서 매일 배양합니다. 필요한 경우, 세포 부착을 방지하기 위해 플라스크를 세게 흔들어 줍니다. 2 mL 멸균 피펫을 사용하여 부착된 세포를 떼어내고 배양물을 새 플라스크로 옮깁니다.첫 번째 구체(sphere)가 형성되기 시작하는 3~4일 후, 구체를 침강시킨 다음 2배의 성장 인자가 포함된 신선하게 준비된 SKP 성장 배지로 배지의 절반을 교체합니다. 약 200 µm 크기의 구체를 계승(passage)하기 위해 3일마다 배지를 보충하며 세포를 배양합니다. 강하게 피펫팅하여 구체를 분쇄한 다음, 배양물을 2개의 25 cm² 플라스크로 나누어 담고 16~21일째에 배지를 보충합니다.줄기세포 마커 스크리닝을 위해 구체(s

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Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

이 문서는 고립과 야생 설치류 동물의 피부와 폐 조직에서 기본 fibroblast 문화의 유지 관리를위한 프로토콜을 설명합니다.

설치류에서 기본 성인 Fibroblast 문화를 구축

인간의 피부에서 가능한 성인 상피 줄기 세포를 분리의 신속하고 강력한 방법이 설명되어 있습니다. 방법은 모낭과 세포 배양에 대한 단세포 suspensions 또는 조직의 파편의 격리에 따버릴 다음 피부 콜라겐 매트릭스의 효소 소화를 활용합니다.

사람의 피부에서 성인 상피 줄기 세포의 분리 및 문화

이 문서는 인간의 모낭에서 신경 문장의 줄기 세포의 분리와 문화에 대한 강력한 프로토콜을 제공합니다.

인간의 모공에서 신경 크레스트 줄기 세포의 분리와 문화

전환 문화에 피더 - 무료 조건에 지속적인 노력에도 불구하고, 인간 배아 줄기 세포 (hESC)의 유도와 문화 마우스 배아 피더 (MEFs)와 공동 문화에 달려 남아 있습니다. 여기, 우리는 신속하게 이전 실험에 hESC 문화에서 피더를 제거 소설 방법을 보여줍니다.

고밀도의 인간 배아 줄기 세포 문화의 급속한 섬유 아세포 제거

이 비디오는 성인 인간 섬유아세포에서 유래한 유도 신경전구세포(iNPC)를 분리하는 기술을 보여줍니다. iNPC 군집체를 분리하고 iNPC 개체군의 지속적인 증식 및 확장을 촉진하는 적절한 배양 배지가 있는 상태에서 라미닌 코팅된 다중 웰 플레이트 웰에서 배양하는 데 관련된 단계를 간략하게 설명합니다.

성체 인간 섬유아세포에서 유래한 유도 신경전구세포 군집(Induced Neural Progenitor Cell Colonies)

유도 만능 줄기 세포의 생성은자가 이식의 유도에 대한 매혹적인 전망을 제공합니다. 그러나, 만능 상태와 힘든 다시 차별화를 통해 진행은 여전히​​ 임상 번역을 방해한다. 여기에서 우리는 성인 인간 섬유 아세포의 유도와 유도 된 신경 전구 세포에 자신의 직접 변환과 신경 계통에 후속 차별화를 설명합니다.

성인 인간 섬유 아세포의 유도 및 확장 신경 전구 세포에 자신의 직접 변환

섬유아세포 행동은 다양한 임상 개체의 기초가 되지만, 주로 내재된 이질성으로 인해 특성화가 제대로 이루어지지 않은 상태로 남아 있습니다. 전통적인 섬유아세포 연구는 체외 조작, 생체 내 섬유아세포 거동 마스킹에 의존합니다. 세포 배양이 필요하지 않은 마우스 피부 섬유아세포의 분리를 위한 FACS 기반 프로토콜에 대해 설명합니다.

FACS에 의해 쥐 피부 섬유 아세포 격리

인간 유래 다 능성 줄기 (hiPS) 세포의 강력한 유도는 피부 섬유 아세포의 비 통합 적 센다이 바이러스 (SeV) 벡터 매개 재 프로그램 화를 사용하여 달성되었다. 재조합 인간 라미닌 521 (LN-521) 매트릭스 및 필수 E8 (E8) 배지를 사용하여 제노 프리 및 화학적으로 한정된 배양 조건을 사용하여 hiPS 세포 유지 및 클론 확장을 수행 하였다.

Laminin 521 매트릭스를 이용한 인간 유래 다 능성 줄기 세포의 통합 된 자유 유도

여기 우리 재활 요인 인코딩 수정된 mRNAs를 사용 하 여 유도 만능 줄기 세포로 인간의 기본 섬유 아 세포를 재 설 정할 임상 관련, 높은 효율, 피더 무료 메서드를 설명 하 고 성숙한 예측에 관한-367/302 모방. 또한는 재활 효율성을 평가 하는 방법 클론 iPSC 식민지 확장 및 pluripotency 마커 TRA-1-60의 식을 확인 있습니다.

인간의 기본 섬유 아 세포의 유도 만능 줄기 세포로 재프로그래밍 RNA 기반

우리는 초보자 (예를 들어, 학생)에 의해 수행 할 수있는 쉽고 빠르고 신뢰할 수있는 방법으로 기본 성인 섬유 아아세포를 분리하는 프로토콜을 제시한다. 이 절차는 효소 조직 소화와 기계적 동요를 초음파와 결합하여 1 차 섬유 아아아를 얻습니다. 프로토콜은 특정 실험 요구 사항(예를 들어, 인간 조직)에 쉽게 적응될 수 있다.

초음파 증강 원발성 섬유아세포 분리

세포 재프로그래밍은 다능성 세포 상태를 조절하고 유지하는 주요 유전자의 도입을 요구합니다. 기술된 프로토콜은 바이러스/통합 방법 없이 인간 진피 섬유아세포로부터 유도된 만능 줄기 세포(iPSCs) 콜로니의 형성을 가능하게 하지만, 세포 방어 메커니즘을 감소시키는 면역 회피 인자와 결합된 비변형 RNA(NM-RNAs)를 사용한다.

비통합 방법을 사용하여 복부 피부에서 성인 인간 진피 섬유 아세포의 분리 및 유도 만능 줄기 세포의 생성

배우세요 인간 기본 섬유 아세포 배양에서 스트레스 저항성을 이용해 순진 다능성 피부 유래 전구 세포(SKP)를 분리하는 방법입니다. 이 기법은 재생 의학 및 줄기세포 연구에 활용됩니다.

인간의 기본 섬유 아세포 배양에서 순진 성인 줄기 세포 분리

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