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DOI: 10.3791/50214-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
뇌 관류 모니터링은 허혈성 뇌졸중 모델의 정확성을 향상시키기 위해 입증되었습니다. 기술적 인 문제는 종종 뇌 혈관 연구에 대해이 필수적 도구의 사용을 제한 할 수 있습니다. 이 비디오에서는 최적화 된 시스템은 쥐의 intraluminal 중간 대뇌 동맥 폐색 동안 단일 또는 다중 사이트 hemodynamic 모니터링을 얻기 위해 표시됩니다.
대뇌 관류 모니터링은 실험적 뇌졸중 모델의 정확도를 높이고 변동성을 줄이는 데 매우 중요합니다. 레이저 도플러 기술은 특히 심층유입 프로브를 사용하는 경우 생쥐와 쥐의 손상되지 않은 두개골을 통해 대뇌 미세혈관 관류를 쉽게 감지할 수 있습니다. 여기서 중요한 문제는 수술 절차 중에 레이저 도플러 프로브를 두개골 좌표에 고정하기 위한 신뢰할 수 있는 시스템을 찾는 것입니다.
이 비디오에서는 자체 개발한 시스템을 보여드리겠습니다. 당사는 단일 부위 및 다중 부위 대뇌 혈류역학 모니터링에 사용할 수 있습니다. 이 비디오에 표시된 랙 스트로크 모델은 외부 경동맥에 내강 간 필라멘트를 삽입하여 얻은 것입니다.
그런 다음 필라멘트는 중간 ceal artery의 기원을 막기 위해 내부 경동맥을 통해 전진하여 일시적인 국소 ceal 허혈을 생성합니다. 절차에 대한 자세한 내용은 아래 링크를 참조하십시오. 단일 다중 사이트 모니터링을 위한 두개골 좌표는 젤라틴 잉크 관류를 사용한 예비 실험 후에 선택되었으며, 이는 단일 사이트 모니터링을 위한 중간 세포 동맥 폐색 중 과잉 관류 영역을 명확하게 묘사했습니다.
레이저 도플러 프로브 1은 다중 사이트 모니터링을 위해 중간 ceal artery에서 공급하는 중앙 영역에 배치됩니다. 레이저 도플러 프로브 2는 중간 동맥과 전방 ceal artery 사이의 영역에서 주변 경계에 배치됩니다. 두개간 측부 흐름을 연구하기 위해 레이저 도플러 프로브의 위치는 각 개별 연구자의 실험적 필요에 따라 달라질 수 있습니다.
필요한 재료는 천연 고무, 작은 플라스틱 튜브 및 금속 탐침입니다. prope holder는 동물의 크기, 레이저 도플러 프로브의 수와 크기, 모니터링해야 하는 담비 혈관 영역에 맞게 사용자 정의할 수 있습니다. 프로브와 브레이크 마운드의 위치를 표시하십시오.
천연 고무는 중간 ceal artery 폐색에 대한 원하는 입체 좌표에 따라, 허혈성 코어에 대한 일반적인 좌표는 Bgma에서 1mm를 뺀 값, 정중선 옆으로 5mm로 예상됩니다. 말초 허혈성 경계 영역 영역의 경우 예상 좌표는 bgma에 2mm를 더한 정중선 옆으로 2mm로 설정할 수 있습니다. X로 bgma의 위치를 매우 명확하게 표시하십시오.이것은 소품 홀더를 두개골에 부착하기 위한 랜드마크입니다.
작은 플라스틱 튜브에 탐침을 삽입합니다. 크기는 프로브의 크기와 일치해야 합니다. 프로브를 배치해야 하는 지점의 천연 고무에 탐침을 삽입합니다.
플라스틱 튜브가 고무에 삽입될 때까지 스타일을 고무에 밀어 넣습니다. 여러 프로브가 필요한 경우 스타일을 철회합니다. 프로브가 안정적으로 유지되도록 다른 프로브 위치에 대해 동일한 단계를 반복합니다.
플라스틱 튜브 주위의 빠른 테이프, 단일 프로프 홀더는 하나의 튜브로만 동일한 절차에 따라 얻을 수 있습니다. 향후 사용을 위해 여러 prope holder의 화학적 멸균을 수행할 수 있습니다. 쥐의 머리를 부드럽게 면도하고 거즈 패드에 베타 다임을 바르고 피부를 소독하십시오.
쥐는 ISO 염소 마취 하에 수술대의 무도회 위치에 놓고 두개골 부위에 리도카인 2%5mg을 킬로당 5밀리그램으로 투여해야 합니다. 우측 시멘트 동맥 폐색을 위해 우측 응급의학적 피부 절개를 하고, 두개골 근막에 도달하기 위해 피하 조직을 절개합니다. 두개골 근막을 우측 구급대원으로 절개하고 둔기 절개를 수행합니다.
스킬 본에 도달하려면 프로브 홀더를 적용할 수 있을 만큼 충분히 큰 스킬 영역을 준비합니다. 다음을 주지하십시오: 교련 또는 뼈를 엷게 하기를 위한 아무 필요도 없고, 두개골 표면을 소독하고 말리기 위하여 저에게 broman를 적용하십시오. 두개골 표면의 건조를 가속화하기 위해 차가운 공기가 들어가는 헤어 드라이어 세트를 사용하십시오.
이 시점에서 두개골 봉합사와 bgma가 명확하게 보입니다. 멸균 가위로 가장자리를 절단하여 프로브 홀더를 사용자 정의하십시오. 프로브 홀더 아래 표면에 승인된 소량의 수술용 접착제 시아노아크릴레이트 수의사를 플라스틱 튜브의 아래쪽 개구부를 조심스럽게 피하면서 적용합니다.
프로브의 광학 표면과 스킬 사이에 상당한 양의 접착제가 남아 있으면 신호가 낮아지고 프로브가 손상될 수 있습니다. 여러 용도로 사용할 수 있습니다. 프로브 홀더를 기술 표면에 적용하고 BMA와 S 지뢰를 조심스럽게 일치시킵니다.
프로프 홀더에 부드러운 압력을 가합니다. 수술용 접착제의 건조를 가속화하기 위해 찬 공기가 필요한 헤어 드라이어 세트를 사용하십시오. 프로프 홀더와 동물의 머리 주위에 수술 실을 묶어 프로프 홀더를 고정합니다.
턱밑 부위와 목을 피하고 하악 위에 수술 실을 조심스럽게 배치하십시오. 프로브 홀더의 플라스틱 튜브를 광학 젤로 채웁니다. 예를 들어, 일반적인 초음파 젤이 있습니다.
이것은 레이저 도플러 신호의 품질을 향상시킵니다. 프로브 홀더에 소품을 놓고 레이저 도플러 유량계의 실제 판독값을 확인합니다. 동물의 머리에 프로브를 묶어 고정합니다.
턱밑 부위를 피하고 턱밑 부위를 피하고 CBR 관류를 위한 다중 사이트 시스템을 피하면서 수술 나사산을 하악 위에 조심스럽게 배치하십시오. 모니터링이 완료되었습니다. 혈관내 필라멘트가 중부 동맥의 원점에 도달하면 중간삼동맥 폐색에 대한 수술 절차 중 풍부한 모니터링을 시작합니다. 실질 관류의 감소는 레이저 도플러 모니터링 중에 볼 수 있습니다.
다중 cy 프로브를 사용하면 동맥 영역에 따라 ceal 풍부도의 다른 변화를 볼 수 있습니다. 이러한 대표적인 관류 추적은 다중 사이트 레이저 도플러 프로브를 사용하여 celebral hemodynamics를 연구하는 방법을 보여줍니다. 총경동맥 폐색과 중부 경동맥 폐색 모두에서 프로브 1 채널에 비해 프로브 2 채널에서 적당한 관류 결손이 발생합니다.
이 혈역학적 패턴은 허혈성 상태에서 기능적으로 활성화된 두개간 간 측부를 시사합니다. 경색 부피는 4%perfor, MAGA로 고정되고 ceal 부종으로 인한 반구 간 비대칭에 대해 보정된 pre violet oh 0.1%로 염색되고 입방 밀리미터로 표시되는 19개의 연속적인 코로나 단면에서 계산됩니다. 마이크로 튜벌 관련 단백질 2 및 열 충격 단백질 70과 같은 신경 손실 및 허혈성 반그림자의 분자 마커의 면역 염색은 두개간 순환의 다중 사이트 혈역학적 모니터링과 관련하여 연구할 수 있습니다.
이 비디오에 표시된 판매 가능한 관류 모니터링에 최적화된 시스템은 실험적 뇌졸중 분야에서 판매 가능한 혈역학적 변화를 연구하는 쉽고 효과적인 방법을 제공하여 차세대 celebral collateral 치료제의 개발로 이어질 수 있습니다. 실험에 관심을 가져 주셔서 감사 드리며 행운을 빕니다.
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