에 타고난 및 시간주기 규제 Photobehavior을 공부하는 빛 환경의 분석 초파리 애벌레

다음 실험의 전반적인 목적은 밝고 어두운 선호도 테스트를 통해 초파리 용암의 선천적 및 일주기 사진 행동을 테스트하는 것입니다. 이것은 먼저 정의된 밝은 어두운 조건에서 실험용 유충을 사육하여 유충에 초기 일주기 시계를 설정함으로써 달성됩니다. 다음으로, 유충은 지속적인 어둠으로 전환되어 유충의 일주기 시계가 자유롭게 작동할 수 있습니다.

L 3 공급 단계에 이르면 용암은 그룹으로 분류되어 서로 다른 일주기 시점에서 빛 선호도를 테스트합니다. 선호도 지수를 계산하고 시점과 실험 그룹을 비교하는 것을 기반으로 선천적 및 일주기 광 선호도를 보여주는 결과를 얻었습니다. 이 방법은 빛 감지의 선천적 및 일주기 조절과 사진 행동 처리에 대한 통찰력을 제공할 수 있지만 후각, 격파, 화학, 열 택시와 같은 다른 시스템에도 적용할 수 있습니다.

마찬가지로 학습 및 기억력 테스트를 위해 수정할 수 있습니다. 이 절차를 시연하는 것은 Alina와 BMA입니다 내 실험실의 대학원생들에게 알을 채취하기 위해 짝짓기 성인 파리가 새 파일에 12시간 동안 낳도록 하고 새 바이알로 옮기도록 합니다. 12시간 조명, 12시간 다크 주기 동안 12시간마다 성인을 계속 옮기십시오.

12시간 동안 채취한 난자를 인큐베이터에 보관하세요. 실험을 위해 동물을 초기 L 3 유충 단계에서 키웁니다. 이들은 알에서 84-108 시간 동안 사용할 수있는 먹이 라에입니다.

LAE의 올바른 병기 결정은 실험의 성공에 매우 중요합니다. 3년 후반부터 LAE는 시각적 행동의 일주기 구성 요소를 테스트하기 위해 사진 행동을 변경했습니다. 테스트 48시간 전과 유충 주관적 직전인 새벽, 수집된 유충을 판지 상자에 넣습니다.

그런 다음 실험이 끝날 때까지 48 시간 동안 상자를 지속적인 어둠 인큐베이터로 옮기십시오.이 유충은 전용 공간에서 방해받지 않고 머물러야합니다. 20cm 정사각형을 4개의 사분면으로 나눈 9cm 페트리 접시의 뚜껑을 준비합니다. 가이드로.

반대쪽 사분면에 10cm 정사각형의 알루미늄 호일을 붙이고 검은 색 테이프로 덮습니다. 뚜껑의 테두리를 반드시 덮으십시오. 다음 접착제, 테이블의 광원 아래에서 4개의 사분면으로 나뉘어진 20cm 정사각형

시트에 테스트 접시의 둘레를 표시하여 일관된 변위를 위한 가이드 역할을 합니다. LED l을 설치하십시오.amp 철제 지지대를 사용하여 페트리 접시 위에 있습니다. 전체 시험판이 균일하게 조명되는 방식으로 높이를 조정합니다.

램프 높이를 추가로 조정하거나 조정 가능한 전원 공급 장치를 사용하여 테스트 사이트의 광도를 350에서 760 luxe 사이로 조정하십시오. 실험실은 적색광 조명이 필요하며 동물을 사육하는 곳과 동일한 온도를 가져야 합니다. 유리병은 이틀 동안 계속되는 어둠 속에서 자랐다.

음식의 맨 위 5mm에서 주걱으로 음식의 용암을 모으십시오. 페트리 접시 뚜껑 바깥쪽에 음식을 펴 바릅니다. 음식에 물을 약간 넣고 주걱과 부드럽게 섞습니다.

붓을 사용하여 새 접시에 수돗물 한 방울을 추가합니다. 유충을 물방울로 옮겨 씻으십시오. 그런 다음 젖은 붓을 사용하여 젖은 붓을 사용하여 유충을 수집합니다.

일찍 먹이를 주는 L 세 유충만 선택하고 늦게 돌아다니는 L 세 유충은 피하십시오. 선택한 유충을 테스트 플레이트의 중앙으로 옮깁니다. 먹이를 주는 L 세 유충은 앞쪽 구형이 열려 있고 바깥쪽으로 돌출되어 있습니다.

손가락 같은 형태로. 후방 구형에는 각각 3 개의 개구부와 4 개의 큰 분기 털 그룹이 있습니다. 타액선은 두 번째 복부 분절까지 뻗어 있습니다.

시험판 중앙에 유충 30마리를 놓았으면 준비된 뚜껑으로 덮습니다. LED 램프를 켭니다. 타이머를 시작하고 유충이 5분 동안 접시 위에서 자유롭게 움직이도록 합니다.

그런 다음 빨리 뚜껑을 제거하고 어둠과 밝은 사분면에있는 유충의 수를 세십시오. 각 용암의 위치를 표시하면 계산을 쉽게 할 수 있습니다. 빠른 사진은 또한 벽을 기어 다니는 유충이나 한천을 빌리는 것과 같이 불분명한 빛 선호도를 보여주는 유충을 중립 선호도로 계산하고 빛 선호도 지수를 계산할 때 총 유충 수에 추가해야합니다.

유충을 세고 난 후 플레이트를 버리고 다음 실험을 위해 새 테스트 플레이트를 사용하십시오. 유전체형당 10-15회의 임상시험을 수행한 후 프로토콜에 따라 분석을 진행합니다. Canton ES 용암의 밝은 어두운 선호도는 두 개의 다른 일주기 시간에 비교되었습니다.

CT 0 및 CT 12, 주관적으로 표준 조건에서 48시간 동안 새벽과 황혼 유충 또는 신음한 다음 3일 동안 지속적인 어둠으로 전환합니다. 350 luxe 이하의 밝은 어두운 색 테스트에서는 CT 0에서 테스트한 유충이 CT 12에서 테스트한 유충에 비해 빛 광감도가 더 높은 것으로 나타났습니다. 이 공식을 사용하면 CT 제로 용암의 어둡기 선호도는 0.36에 비해 0.52였습니다.

Wilcoxon 테스트를 사용하여 지수를 비교하는 CT 12 유충은 0.023의 유의한 P 값을 생성합니다. 이 비디오를 시청한 후에는 이 목표에 대한 다양한 회로와 시점에서 영양 유충의 빛 선호도를 테스트하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다. F 단계에서 3 개의 안피 유충을 훈련시켜 광 공포증 행동을 테스트하고 통계적 비교를 위해 빛 선호도 지수를 계산할 수 있어야합니다.