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DOI: 10.3791/50322-v
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내피 내피 / glycocalyx 표면 층은 이상적인 intravital 현미경을 사용하여 공부하고 있습니다. Intravital 현미경은 기술적 같은 폐 등 움직이는 장기에 도전하고 있습니다. 우리는 동시 brightfield 및 형광 현미경은 자유롭게 - 이동에 내피 표면 층의 두께를 추정하는 데 사용할 수 있습니다 방법을 보여줍니다
다음 실험의 전반적인 목표는 혈관 표면에서 형광 표지된 중량 덱스트린의 배제를 측정하여 폐 미세혈관 내피 표면층 또는 ESL의 너비를 측정하는 것입니다. 이는 움직이는 쥐의 폐 내에서 흉막하 미세 혈관의 내피 세포막을 확인하기 위해 먼저 생체 내 DIC 현미경 검사를 수행함으로써 달성됩니다. 다음으로, 마우스에 고분자량 형광 표지된 덱스트린을 주입하는데, 이 덱스트린은 그렇지 않으면 보이지 않는 내피 표면층에 의해 혈관 벽에서 제외됩니다.
그런 다음 단일 초점이 맞는 프레임에서 동시 DIC 및 형광 이미지를 캡처하여 ESL 두께를 각각 포함하거나 제외한 혈관 폭을 측정할 수 있습니다. DIC와 형광 혈관 너비의 차이는 흉막하 미세혈관 ESL의 두께를 추론하는 데 사용됩니다. 미세입자 속도 대칭과 같은 기존 방법에 비해 이 기술의 주요 장점은 폐와 같은 움직이는 기관에서 정확하게 수행할 수 있다는 것입니다.이 절차를 시연하는 것은 내 실험실의 선임 연구원인 Dr.IMU Yang이 마우스 흉강절개술을 위해 튜브를 준비할 것입니다.
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