2013년 6월 10일
이 문서에서는 모델 산후 우울증과 설치류 수유 불안에 ethologically 관련 패러다임과 같은 만성 주민 침입자 사회적 스트레스의 사용에 대해 설명합니다.
다음 실험의 전반적인 목표는 산후 기분 장애를 연구하기 위해 생태학적으로 관련된 설치류 모델을 만드는 것입니다. 첫째, 새끼는 모성 분리 기간을 거칩니다. 그런 다음 새끼는 집 우리로 돌아가고 모성 보육 행동을 기록하여 사회적 스트레스를 유발합니다.
참신한 남성 침입자가 등장합니다. 모성의 공격성은 만성적인 사회적 스트레스를 유발하기 위해 30분 이상 기록된다. 본 연구의 결과는 만성적인 사회적 스트레스가 우울증 산모 돌봄에 효과적이고 신뢰할 수 있는 패러다임임을 시사한다.
무작위로 다양한 스트레스 요인을 사용하는 반복적인 억제, 사회적 패배 또는 만성 경미한 스트레스 패러다임과 같은 기존 스트레스 유발 우울증 모델에 비해 이 기술의 또 다른 장점은 사회적 스트레스가 주요 물류 및/또는 생리학적 혼란을 일으키지 않는다는 것입니다. 만성적인 사회적 스트레스 패러다임의 사용은 산모와 태아의 기분 장애에 대한 개선된 예방 조치와 치료법의 확인으로 이어질 수 있습니다. 성체는 돌리 암컷을 자랑하며 연구는 연구 내내 같은 방에 위치한 가정용 케이지에서 수행됩니다.
임신 20일 또는 21일째에는 투명 플렉시 유리로 만든 1인치 높이의 케이지 분리기를 가정용 케이지에 넣습니다. 이것은 새장을 4개의 사분면으로 나누어 테스트 중에 새끼가 댐으로 다시 기어 들어가는 것을 방지합니다. 전형적인 모성 행동은 출생 당일에 모든 댐에서 확인됩니다.
강아지 회수, 그루밍, 수유 및 자체 그루밍에 대한 직접적인 관찰을 통해. 이 연구에 사용된 침입자 수컷은 더 작거나 비슷한 크기입니다. Sprague Dolly, 수컷과 암컷은 같은 수컷을 두 번 제시하지 않습니다.
댐과 비슷한 크기의 수컷을 사용하면 영아 살해를 예방하는 데 도움이 됩니다. 테스트 중에 동작을 기록할 수 있도록 케이지 근처에 비디오 카메라가 장착되어 있습니다. 시작하려면 댐에서 깔짚을 제거하고 수컷과 암컷 새끼의 무게를 따로 잰 다음 깨끗한 케이지에 60분 동안 넣습니다.
이 60분 간격이 끝나면 새끼의 무게를 다시 잰다. 새끼를 집 우리로 다시 데려오기 전에 비디오 녹화를 시작하여 모든 새끼 회수 행동이 캡처되었는지 확인하십시오. 새장의 테스트되지 않은 세 사분면 사이에 강아지를 가능한 한 균등하게 나눕니다.
이 재도입 후 30분 동안 산모 돌봄 행동을 기록합니다. 모성 보살핌 행동에는 일반적으로 새끼를 둥지로 다시 데려오는 것, 둥지 짓는 행동, 새끼 또는 자가 손질, 수유가 포함됩니다. 댐이 총 120분 동안 새끼와 상호 작용하면 새끼의 무게를 한 번 더 측정하여 우유 섭취량을 결정합니다.
2시간 동안 이 수유 기간 이후 행동 테스트 날에 각 새끼에서 한 마리의 강아지를 안락사시킵니다. 위에서 우유 샘플을 추출하기 위해 우리는 새끼를 댐으로 돌립니다. 체중을 잰 후, 비디오 녹화를 시작한 후, 더 작거나 비슷한 크기의 새로운 수컷 침입자를 30분 동안 우리에 들여보내 모성의 공격성을 테스트합니다.
모성의 공격적 행동에는 일반적으로 모계 암컷이 침입자 수컷을 공격하거나, 물거나, 발로 차거나, 고정하는 것이 포함됩니다. 대조군의 경우, 수컷은 수유 2일, 9일, 16일에 30분 동안 모성 공격성 비디오를 녹화한 후 제거되며, 만성 사회적 스트레스 피험자의 경우 수컷은 매일 60분 동안 댐에 남겨집니다. 수유 2일차와 16일차 사이의 15일 동안, 2일차, 9일차, 16일차 동안 처음 30분은 대조군과 유사하게 기록되며, 0.02%의 사카린이 함유된 병을 오후 3:00에 오른쪽과 왼쪽을 번갈아 가며 댐 홈 케이지에 추가합니다.
병은 나중에 사카린 선호도를 결정하기 위해 무게를 잰다. 새끼들은 23일째에 젖을 떼고 댐은 추가 분석을 위한 샘플을 얻기 위해 안락사됩니다. 만성적인 사회적 스트레스 댐의 성인 암컷 자손은 나중에 자신의 새끼를 낳습니다.
추가 연구를 위해 홀수 로그 행동 분석 소프트웨어를 사용하여 연구 중에 기록된 모성 행동에 점수를 매깁니다. 모성 공격성과 모성 보살핌 모두 모든 모성 공격성 비디오에 대해 점수가 매겨집니다. 이 프로그램은 타임스탬프가 지정된 5초 빈의 전체 데이터 파일과 30분 기록 동안 선택한 동작에 대한 총 빈도 및 지속 시간이 포함된 요약 테이블을 모두 생성합니다.
수유댐을 수컷 침입자에게 15일 동안 하루 한 시간씩 노출시킴으로써 발생하는 만성적인 사회적 스트레스는 강아지 손질과 전체적인 모성 보살핌 기간을 감소시키는 결과를 낳았습니다. 수유 9일째, 수유 16일째가 되자, 댐은 불안과 공격적인 행동의 척도인 자기 그루밍이 증가한 것으로 나타났다. 이에 따라 수유 9일과 16일째에 대조군에 비해 새끼의 우유 섭취량이 감소했으며, 이 두 날 모두 새끼의 성장이 현저히 약화되었습니다.
사회적 스트레스는 또한 사카린 선호도를 감소시켰고, 성인 암컷의 새끼에 의한 우유 섭취량을 시험하는 맛 16에 의한 쾌락증의 지표를 감소시켰다. 사회적 스트레스 댐의 자손은 수유 2일째에 감소했으며 16개의 사카린 선호도는 초기 생애 만성 사회적 스트레스 F1 댐의 선호도도 낮았습니다. 수유 2일차와 16일째에 옥시토신 mRNA 발현은 초기 생명 스트레스 F1 댐의 상시핵에서 약화되었으며 유사한 효과가 뇌실주위핵에서 발견되었습니다.
만성적인 사회적 스트레스 프로토콜을 수립할 때는 댐을 깔짚으로 운반하는 것, 과도한 인체 방해, 더러워진 케이지 및 기타 혐오스러운 음향 구강 공장 자극과 같은 추가 스트레스 요인에 대한 노출을 최소화하는 것이 중요합니다. 안정적인 사육 시설과 일관된 축산업은 가장 일관된 데이터를 생산할 것입니다. 이 절차에 따라 여러 시점에서 다양한 조직을 샘플링하여 만성적인 사회적 스트레스가 다른 장기 시스템에 미치는 영향을 조사할 수 있습니다.
또한 사회적 스트레스 요인을 여러 생활사 단계에 적용하여 스트레스 유발 장애에 대한 감수성과 회복력을 모두 조사할 수 있습니다.
본 논문은 수유 중인 설치류에서 산후 우울증 및 불안을 모델링하기 위해 행동학적으로 적절한 패러다임인 만성 거주 침입자 사회적 스트레스(chronic resident intruder social stress)의 사용법을 설명합니다. 이 연구의 목적은 산후 기분 장애를 조사하기 위한 신뢰할 수 있는 설치류 모델을 구축하는 것입니다.
수유 중인 설치류에서 산후 우울증을 모델링하는 것은 대부분의 스트레스 모델이 수컷을 대상으로 개발되어 모성 정신 건강에 대한 중개 연구적 관련성이 부족한 전임상 연구의 중대한 공백을 메워줍니다. 이 만성 사회적 스트레스 패러다임은 어미와 새끼에게서 행동학적으로 유의미한 행동적, 생리학적 및 신경내분비적 변화를 포착함으로써 치료 표적의 기전적 리스크를 감소시킬 수 있게 합니다. 이 모델은 모성 돌봄 중단 및 초기 생애 스트레스 프로그래밍에 대한 예측 가치를 지닌 질환 관련 시스템을 제공함으로써, CNS 활성 화합물의 표적 검증 및 분석법 개발을 지원합니다.
본 방법은 표적 가설 검증부터 전임상 검증에 이르는 발견 연속체 내에 부합하며, 모체 및 자손과 관련된 CNS 조절제를 평가하기 위한 재현 가능한 플랫폼을 제공합니다.