Name: 설치류 젖을의 모델 산후 우울증에 만성 사회적 스트레스를 사용하여 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-06-10T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 30 s
Description: 학습하세요 만성 사회적 스트레스를 사용하여 수유 설치류에서 산후 우울증 및 불안을 모델링하는 방법을. 이 기법은 모성 행동과 새끼 성장에 미치는 영향을 평가하여 산후 기분 장애 연구에 활용됩니다.

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우리는 만성적 인 사회적 스트레스의 임상 관련성에 대한 피드백에 대한 사회적 스트레스의 사용에 대한 조언을, 클라우스 Miczek을 우유 섭취량을 평가에 대한 조언 찬탈 라우 감사 드리고, 그리고 셰릴 굿맨 것이다. 이 프로토콜의 개발은 BCN에 NICHD K99/R00 HDO59943에 의해 지원되었다.

성인 스프 돌리 암컷은 우리의 동물 시설에서 사육되고, 새끼는 심지어 섹스 비율로 8-10 새끼를 도태되고, 산모 관리 및 침략 시험은 쥐의 홈 케이지에서 수행됩니다. 실험 대상자들은 연구를 통해 같은 방에 남아 있습니다. 명확한 플렉시 유리로 만들어진 하나의 인치 - 높은 케이지 분리는 하루 20 임신 21 케이지에 배치됩니다. 이들은 케이지에 배치 할 때 댐에 다시 크롤링 새끼을 방지하기 위해 4 사분면에 케이지를 나눕니다. 전형적인 모성 행동은 강아지 검색의 직접 관찰을 통해 탄생의 날 (수유 1 일), 정리, 간호, 셀프 그루밍의 모든 댐 확인됩니다. 침입자 남성은 작은 또는 비슷한 크기의 Sprague Dawley 계 수컷과 암컷이 두 번 같은 남자가 표시되지 않습니다. 산모 관리 및 산모의 침략 아래에 설명 된대로 일 2, 9의 아침에 기록 된 비디오 및 수유 16입니다 <ol><li> 댐 쓰레기 제거, 남성의 무게를 여성 SE60 분 동안 깨끗한 보유 케이지 parately, 장소 전체 쓰레기. </li><li> 60 분 간격의 끝에 케이지의 3 비 둥지 사분면 사이에 새끼로 가능한 균등하게 나누어, 댐의 홈 케이지에있는 쓰레기를 교체하기 전에 별도로 남성과 여성의 새끼를 무게. 모든 강아지 검색이 기록되어 있는지 확인하기 전에 재 도입에 비디오 녹화를 시작합니다. </li><li> 30 분 동안 영상 기록 산모 관리. 댐은 또 다른 90 분 동안 자신의 새끼와 상호 작용 할 수 있습니다. 댐의 새장에 새끼를 배치 한 후 120 분 (30 분 녹음 + 추가 90 분), 2 시간 동안 우유 섭취량을 결정하기 위해 다시 무게. 강아지 하나는 위장에서 우유의 샘플을 추출하는 120 분 간호 기간에 따라 행동 테스트 일의 각 쓰레기에서 안락사됩니다. 새끼에서 우유를 수집하는 목적은 자식에 대한 만성적 인 사회적 스트레스 행동 및 / 또는 생리 효과를 중재 할 수 호르몬 및 기타 요인의 수준을 평가하는 것입니다. </리&gt; <li> 계량 후 댐 새끼를 반환하고, 산모의 침략을 테스트하는 30 분 동안 케이지에 작거나 비슷한 크기의 새로운 남성 침입자를 소개합니다. 모든 공격이 기록되었는지 확인하기 위해 도입하는 동안 비디오 녹화를 시작합니다. 대조군의 경우, 남성은 30 분 녹화 후 제거됩니다. 만성 사회적 스트레스 피사체의 남성이 또 다른 30 ​​분에 남아 있습니다. 하루에 2-16 시간 동안 비 행동 테스트 일에 새로운 침입자 남성은 비디오 녹화를하지 않고 한 시간 동안 CSS 과목의 새장에 배치됩니다. 상해가 발생하면 사회적 스트레스에 노출이 중지되고, 부상 동물 치료와 연구에서 제거됩니다. </li><li> 0.02 %의 당질을 가진 병은 오른쪽 왼쪽 번갈아 삼일 2, 9 오후 16시 댐의 홈 케이지에 추가됩니다. 일반 물과 사카린 병 모두 사카린 환경 설정을 결정하기 위해 다음날 아침 오전 8시에 다시 다음 시간은 오후 3시 무게입니다. </li><li> 강아지는 하루 23 이유, 그리고 댐입니다다시 기저 혈장을 얻고 생리학과 행동으로 관련된 표적 핵의 유전자 발현 분석을위한 두뇌를 추출하는이 시점에서 안락사. </li></ol> 모성 행동 점수 표 1과 표 2에 설명 된 산모 케어 침략 행동은 Odlog 행동 분석 소프트웨어를 사용하여 비디오에서 득점됩니다. 키는 각각의 동작에 할당하고, 각 동작은 그 행동의 지속 시간을 기록하기 위해 수행되는 동안 키를 누르고 있습니다. 주파수는 각 동작에 대한 키 스트로크의 합계입니다. 이 프로그램은 오초 빈과 30 분의 기록을 통해 정의 된 행동에 대한 총 주파수와 기간의 요약 테이블 타임 스탬프의 전체 데이터 파일을 모두 만듭니다. 남성 침입자가 케이지에있는 동안 댐 새끼를 모체 응답 않는 산모의 침략과 모성 보호 모두, 산모의 침략 비디오를 채점됩니다. </P&gt; 곧 새장에 새끼를 배치 한 후, 댐 둥지에 다​​시 각각의 강아지를 검색합니다. 모든 새끼가 둥지에있을 때 전체 검색을 한 번 득점됩니다. 전체 검색은 일반적으로 한 번만 득점하는 동안 댐 초기 전체 검색 후 새 사이트에 전체 쓰레기를 재배치하는 경우, 그것은 때로는 두 번 채점 할 수 있습니다. 둥지 재료가 그녀의 입이나 발에 댐에 의해 조작 될 때마다 중첩 동작은 채점됩니다. 강아지 그루밍는 그녀의 발에 댐 사슬 또는의 강아지 모피의 조작을 포함한다. 댐이 10 초 동안 정지 웅크 리고 나 경향 간호 자세 된 후 간호 채점이 시작됩니다. 이 새끼가 젖을 먹고 시작하는 시간을 허용하는 것입니다. 전체 산모 케어 중첩, 강아지 미용, 간호의 결합 기간이지만, 손질 및 강아지 주도적 행동에 초점을 간호에 제한 될 수 있습니다. 셀프 손질은 그녀의 입이나 발에 댐의 자신의 모피의 조작으로 정의됩니다. 활동은 지속 채점이전에 정의 된 행동과 관련되지 않은 전위의 활동을 ING. 임산부 침략, 공격 물고, 발로, 그리고 고정으로 구성되어 있습니다. 공격은 침입자 남성의 복싱이나 태클로 정의됩니다. 물고는 댐 침입자에 그녀의 이빨을 사용하고 댐 그녀의 팔다리 나 몸으로 남성을 보유 할 때 피닝가 기록 될 때 득점한다. 총 침략, 공격 물고, 차고, 및 고정의 합계입니다. 통계 모성 행동, 우유 섭취, 컨트롤 및 CSS 댐의 사카린 기본 설정은 개인의 일에 CSS의 효과를 평가하기 위해 t-테스트 단측 각 수​​유의 날에 비교 하​​였다. 일 2, 9, 수유 16 일 성장 데이터 (9 일 또는 16 중량 / 일 2 중량 X 일 2를 기준으로 하루에 2 퍼센트 성장 (그램) 무게에 T-테스트 단측과 비교 하​​였다 100). OXT 발현을위한 발현은 세 가지 결합 housek에 대한 표준화 된eeping 유전자, B-액틴, 산틴의 phosphoribosyltransferase (HPRT)과 글리 세르 알데히드 -3 - 인산 탈수소 효소 (GAPDH). 상대 OXT mRNA의 발현 수준은 각 뇌 영역의 각 펩타이드 수용체 t-테스트를​​ 각각 비교 하​​였다. 모든 그래픽 결과는 그룹 + SEM을 의미로 표시하고, 통계적 유의 수준은 p는 ≤ 0.05입니다.

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저자는 아무런 재정적 이익을 경쟁 없다.

CSS 패러다임에서 얻은 데이터는 안정된 행동 연구 환경에서 일관되고 반복 될 가능성이 높습니다. 그것은 실험실 동물의 하우징과 축산, 특히 행동 연구 더 신중하게 연구의 모든 유형을 고려해야하는 구성 요소입니다 있다고 주장한다. 혼동을 소개 할 수 있습니다 주택 및 사육 방법은 다음과 같습니다 : 업체에서 배송 임신 한 어미로 시작하는 행동 테스트 하루의 시간에 행동 테스트, 변화를위한 매일 객실 사이에 댐을 이동, 새로운 명소, 소리, 또는 냄새에 댐의 과도한 노출 , 행동 테스트의 부족이나 일관성이 중첩 소재, 가난한 일상적인 동물 관리 (습식 및 더러운 침대에 예를 들어 노출)에 대한 가정 케이지를 사용하지. 또한, 수유하는 동안 다른 행동 검사를 포함 (예를 들어, 테스트 또는 고가 플러스 미로 수영 강제)은 혼동을 소개 할 수 있습니다. 그러나 소설 케이지 환경이나 기타의 사용급성 스트레스는 만성 스트레스, 급성 스트레스와 행동 사이의 잠재적 인 상호 작용에 의해 홈 케이지 테스트를 명확하지 행동의 차이를 공개하는 것이 유용 할 수 있습니다. 현재 설명한 프로토콜은 스프 돌리 쥐에 효과적이지만, 프로토콜의 수정은 다른 변종과 종 필요할 수 있습니다. 예를 들어, 새끼는 부상을 방지하기 위해 매우 공격적인 롱 에반스 남성의 장벽으로 보호해야합니다. 사회적 스트레스 관리를위한 중요한 사례가 작거나 비슷한 크기의 남성의 사용을 포함하고 패배 남성에서 지속적으로 복종하는 동작을 보장하기 위해 매우 공격적 일 2 댐 남성 침입자의 첫 번째 상호 작용을하는 데. 남성은 쓰레기를 공격하는 경우 그것은 그들이 후속 새끼를 공격 할 가능성이 높습니다, 그들은이 연구에서 제거해야합니다. 지나치게 공격적인 수컷의 가능성을 줄이기위한 하나의 옵션은 이전에 생의 시작에 큰 남성에 의해 그들을 패배하는 것입니다UDY. 행동 기록, 주파수, 대부분의 행동의 지속 시간 모두의 기록 및 분석은 행동의 완전한 그림을 제공 할 필요가있다, 그리고 짧은 기록 간격 또는 현장 검사의 사용을 철저하게 테스트 할 충분한 데이터가 수집 될 수 있습니다 가설. 득점의 철저하고 일관성있는 교육 이전에 행동 동영상을 득점 사용하여 수행 할 수 있습니다. CSS 모델의 주요 응용 프로그램은 산후 우울증과 불안에 대한 현재 및 새로운 약물 치료의 테스트입니다. 이 모델의 추가 사용은 일반적인 관행과 같은 제왕 절개 출생, 유도 노동, 각종 수유 스케줄 등 모성 보호에 관한 절차의 효과를 조사하는 것입니다. 모유 수유에 대한 스트레스의 잠재적 영향의 추가 조사는이 주제에 대한 연구의 부족으로 주어진 가치가있을 것입니다. 댐에서 우유 샘플, 마취 및 외래 OXT에 대한 필요성 유용 할 수 있지만이 샘플의 컬렉션에서 몇 가지 행동 및 생리적 혼동을 소개하므로 수유에 대한 스트레스의 영향에 대한 연구는 동시 행동 분석에 도움이되지 않을 수 있습니다. CSS 모델 transgenerational 연구에 대한 가능성이 큰이며, 이러한 조사는 초기 생활 스트레스와 나중에 스트레스에 노출 간의 잠재적 인 상호 작용을 조사하기 위해 성인 자손의 다양한 스트레스 치료를 포함 할 수 있습니다. CSS 모델의 의미와 ethological 및 번역 관련에 관련된 행동 테스트 센터. 그것은 우울증과 불안에 대한 현재의 치료의 효과의 부족은 동물과 인간의 연구 사이 ethological 중복의 부족 때문이라고 가정합니다. 우울증과 불안의 동물 모델은 종종 강력한 물리적 스트레스 또는 현재 항우울제 치료는 심한 우울증에 가장 효과적이라는 연구 결과를 설명 할 수있는 고도의 선택 종자에 의존하고 있습니다. PH<html> 이러한 억제 및 무작위 스트레스의 다양한 노출로 ysical 스트레스는 일반적인 인간의 경험을 시뮬레이션하지 않습니다. 만성 가벼운 스트레스 패러다임에 사용되는 무작위 노출에 대한 근거는 적응을 방지하기위한 것입니다. 이것은 중요한 문제이지만, 이상적인 상황은 더 밀접하게 사회적 스트레스 인간의 우울증과 불안의 원인과 유사한에 적응하지 않는 동물 프로토콜을 사용하도록 할 수 있습니다. 더 ethological 스트레스의 사용을 촉진하는 것 외에도, CSS 모델의 또 다른 장점은 무 쾌감 증, 모성 행동의 관련 조치를 사용하는 것입니다. 이 직접 자식에 대한 어머니의 우울증 악영향을 중재 강력한 보상 중재 동작입니다. ethological 스트레스와 우울증과 불안 연구에서 무 쾌감 증의 측정의 조합 설립은 안전하고 효과적인 예방 조치와 치료의 식별 특히 도움이 될 것입니다. &quot;&gt; 사회 응력은 몇 년 동안 남성과 미산 여성에서 성공적으로 사용하고, 산모의 여성에이 작품의 확장은 남성 모두에서 산후 우울증에 대한 새로운 데이터를 부를뿐만 아니라 생애 초기 스트레스 관련 질환을 일으킬 가능성이하고있다 여성. 그것은 우울증과 불안 연구 ethological 동물 모델의 사용 증가가 ethologically 및 translationally, 관련 적은 변수, 그리고 더 반복입니다 행동 데이터 수집으로 인해 더 효과적인 치료법으로 이어질 것으로 가정합니다.

산후 우울증 등 기분 장애,의 원인은 종종 만성 스트레스 1,2에 노출을 포함한다. 어머니의 우울증은 부모 3 자손 4 심리적 발달에 모두 부정적인 영향을 가지고 있지만, 우울증, 남성 동물과 인간에 대한 불안 초점에 대한 연구의 대부분. 만성 스트레스를 사용하여 변경된 모성 행동의 몇 가지 동물 모델이 있지만, 대부분은 일반적으로 인간에 의해 경험 만성 심리적 스트레스에 관련된 또는 분만 전 기간에 주로 초점을 맞출 수 있습니다 상당한 생리적 구성 요소가 있습니다. 쥐의 임신 중에 만성 구속 스트레스는 산모 관리 및 불안을 증가시키고 일부 연구 5 산모의 침략을 감소하지만 다른 6 모성 보호 줄어 듭니다. 구속 스트레스는 강력한 물리적 스트레스 7이며, 일부 보고서는 인간의 경구에서 관찰 된 감쇠 임산부 배려와 일치합니다산후 우울증 4 그녀. 태아 ultramild 스트레스는 강아지 치료에 영향을주지 않지만, 산모의 침략에게 8을 줄일 않습니다. Ultramild 스트레스 패러다임은 몇 일 동안 무작위 스트레스의 다양한 (예 : 30도 케이지 경사 등, 라이트 사이클, 감금, 야간 조명, 그리고 오염 케이지를 반전)을 사용하고, 개별 구성 요소의 효과는 종종 명확하지 않다. 그런 반전 빛을주기 야간 조명으로 ultramild 스트레스 패러다임에 사용되는 몇 가지 스트레스가 직접 쥐에서 산모 관리로주기 리듬을 가지고, 어떤 스트레스 효과를 독립적으로 모성 보호에 영향을 미칠 가능성이 높습니다. 젖은 침구에 노출 새끼에 큰 열 응력, 그리고 젊은 새끼 (개인 관찰) 이하 24 시간에서 강아지 사망을 초래할 수 있습니다. 최근 설치류 연구는 오프에 스트레스의 효과 연구에서 만성 사회적 스트레스 (CSS)와 같은 ethologically 관련 스트레스의 사용에 초점을 맞추고있다행동 및 기분 장애 9-13 프링. 산후 우울증에 대한 ethological 모델을 개발 사용되는 스트레스의 생리적 요소를 줄이고, 일관된 행동 및 생리적 결과를 생성하기위한 노력의 일환으로, 우리 연구소는 사회적 스트레스의 사용에 초점을 맞추고있다. 만성 사회적 패배를 효과적으로 남성 설치류 14 사회적 스트레스로 인한 우울증에 대한 모델로 사용되는 동안 남성 침입자을 사용하는 경우,이 산모 설치류의 하나의 사회적 패배 일반적으로 결과로, 많은 산모 설치류에 대한 생태 학적으로 중요한 행동 모델이 아닙니다 남성 침입자에 의한 쓰레기의 식인합니다. 그러나 댐의 사회적 패배하지 않고 새로운 남성 침입자 급성 노출, 여성에게 15-18 수유에 강력한 행동 및 내분비 스트레스 반응을 이끌어. 수유하는 동안 만성 스트레스, 남성 침입자에 노출을 포함하여, 직접 강아지의 성장에 영향을 미칠 수있는 우유 생산 19,20을 저해한다는 증거가있다.산모 쥐에서의 이러한 결과는 만성 사회적 불안정 (격리 및 군집의 변화) 시상 하부 - 뇌하수체 - 부신 축 활동 11,21을 증가 처녀 여성, 바꾼다 체온 조절에 연구에 의해 지원되는 것은 자당과 음식 섭취를 줄이고, 제안 된 여성 우울증 11 동물 모델로. 자기 정리, 불안 22,23의 측정은 사회적 스트레스 조작 24,25에 민감합니다. 수유하는 동안 만성 사회적 스트레스 (CSS)는 모성 행동을 중단하고 댐과 자손의 성장을 약하게 할 수 있습니다. 수유하는 동안 새로운 남성 침입자의 일상 프레 젠 테이션, 임산부 배려를 감소 소설 남성 침입자, 셀프 그루밍으로 산모의 공격성을 증가시키고, 댐와 그녀의 자손 10 두의 성장을 억제. 이러한 효과는 CSS가 포함 기분 장애에 대한 ethologically 적절하고 효과적인 모델을 나타냅니다이러한 산후 우울증 산모 관리, 무 쾌감 증, 높은 불안 및 감쇠 자식의 성장에 장애. 모성 행동에 만성 스트레스의 효과 (Murgatroyd과 조카 2,012 호르몬 매개 것을 모성 보호와 자식 데이터를 모두 CSS는 미래 세대에 지속적인 영향을 미칠 수 있다는 것을 표시하고 산모의 행동에 만성 스트레스의 영향에 대한 연구는 가설을지지 ). 또한, 스트레스 댐의 성인 여성의 자손에서 최근의 데이터는 초기 생활 스트레스의 형태로 CSS 중앙 옥시토신 (OXT)와 비효율적 인 간호 행위 12과 관련된 프로락틴 (PRL)의 변화를 일으키는 원인이 있다는 가설을 지원합니다. CSS 모델은 재료를 중첩 26,27 산모 분리 28,29을 제한하는 등, 모성 행동에 스트레스를 유발 중단의 다른 효과적인 모델을 보완합니다. CSS 모델의 독특한 측면은, 그것은 설치류 동물과 인간 모두 ethologically 관련이 있다고합니다비교적 작은 생리적 요소를 가지고 있으며, 다른 생활 단계 (사회 패배, 만성 사회적 불안)에서 유사한 스트레스와 결합 할 수 있습니다. CSS 패러다임을 개발의 기본 목표는 무 쾌감 증 (같은 산모 관리 및 사카린 환경에 의해 측정), 불안의 증가 행동 조치를 유도하고, 강아지, 생리적 행동하고, 또는 내분비 발전을 저해, ethologically 및 임상 관련 스트레스 요인을 사용했다. 모델의 목적은 현재 및 새로운 치료와 산후 우울증과 불안에 대한 사례를 테스트하는 것입니다.

<table><tbody><tr><td>ODlog 비디오 분석 </td><td>Macropod 소프트웨어</td><td>버전 2.7.2</td><td>PC 또는 Mac에서 사용 가능 </td></tr><tr><td>비디오 레코더 </td><td>Sony</td><td>HDR-CX130</td><td></td></tr></tbody></table>

설치류 젖을의 모델 산후 우울증에 만성 사회적 스트레스를 사용하여

Using Chronic Social Stress to Model Postpartum Depression in Lactating Rodents

만성 스트레스에 노출 우울 장애의 신뢰성 예측이다, 사회적 스트레스는 동물과 인간 모두에서 공통 ethologically 관련 스트레스 요인이다. 그러나 우울증의 여러 동물 모델은 남성에서 개발하고 적용 또는 산후 여성의 연구에 효과적이지 하였다. 최근의 연구는 모성 행동, 성장, 행동 신경 내분비학에, 수유, ethologically 적절하고 효과적인 스트레스 동안 만성적 인 사회적 스트레스가 상당한 효과를보고있다. 이 원고는 반복 소설 남성 침입자 수유 댐의 노출이 모델의 행동, 생리적, 그리고 신경 내분비 효과의 평가를 사용하여이 만성 사회적 스트레스 패러다임을 설명합니다. 만성 사회적 스트레스 (CSS)는 댐뿐만 아니라 그녀의 자손과 미래 세대의 행동과 생리학에 스트레스의 효과를 연구하기위한 귀중한 모델입니다. CSS에 새끼의 노출도 조기로 사용할 수 있습니다행동, 생리학 및 신경 내분비학에 대한 장기적인 효과를 가지고 생활 스트레스.

CSS에 젖을 댐을 노출하는 것은 수유 9 일 (조카와 교량 2011 년 그림 2)에 30 분 비디오 녹화 중에 강아지 미용 및 전체 산모의 치료 기간을 억제한다. 수유, 공격성과 자기 정리의 날 16 일에, 불안의 측정 (조카와 교량 2011 년 그림 3) 증가. CSS 댐의 새끼로 우유 섭취는 일 9 수유 (그림 4)의 16 제어 댐 40 % 미만이며, 강아지의 성장이 일의 양 (조카와 교량 2011 년 그림 5)에 감쇠됩니다. 사카린 선호 CSS 처리 댐 (그림 6)에서 하루 16 낮습니다. 의 성인 F1 여성의 자손의 CSS 처리 댐, 우유 섭취량 (그림 7)과 사카린 환경 (그림 8) 일 2 월 16 일에 우울합니다. supraoptic 핵 옥시토신의 유전자 발현 (그림 9이 댐 낮은 </str사연&gt;)과 유사한 결과가 paraventricular 핵, 중앙 편도체와 내측 편도체 (Murgatroyd과 조카, 2012)에서보고되었다. <table border="1"><tbody><tr><td> 행동 </td><td> 설명 </td></tr><tr><td> 검색 </td><td> 둥지로 새끼를 휴대 </td></tr><tr><td> 전체 검색 </td><td> 시간은 모두 8 새끼를 검색하는 데 필요한 </td></tr><tr><td> 중첩 </td><td> 입이나 발에 둥지 지역에있는 침구 조작 </td></tr><tr><td> 강아지 미용 </td><td> 발에 사슬 또는의 강아지 모피의 조작 </td></tr><tr><td> 간호 </td><td> 댐 웅크 리고 나 경향 간호 자세에있을 때 </td></tr><tr><td> 전체 산모 케어 </td><td> 총 DURA중첩, 강아지 미용의 변주, 그리고 간호 </td></tr><tr><td> 셀프 미용 </td><td> 입이나 발에 댐의 조작은 자신의 모피 </td></tr><tr><td> 활동 </td><td> 이상 행동과 관련되지 않은 전위의 활동 </td></tr></tbody></table> 표 1. 산모 관리. <table border="1"><tbody><tr><td> 행동 </td><td> 설명 </td></tr><tr><td> 공격 </td><td> 침입자 남성의 권투이나 태클 </td></tr><tr><td> 물어 뜯는 </td><td> 침입자 남성을 공격하는 치아의 사용 </td></tr><tr><td> 발로 </td><td> 발로 토끼와 유사, 침입자가 남성 파업 미터의 사용 </td></tr><tr><td> 고정 </td><td> 임산부 여성 팔다리 나 몸으로 남성을 누른 </td></tr><tr><td> 에탈 침략 </td><td> , 공격의 기간으로, 물고 추방, 및 고정 합 </td></tr></tbody></table> 표 2. 임산부 침략. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig1.jpg" alt="그림 1" /> 그림 1. 만성 사회적 스트레스 프로토콜을 예약 할 수 있습니다. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig2.jpg" alt="그림 2" /> 그림 2. 만성 사회적 스트레스 수유 9 일에 임산부 배려를 감소 7. 일 하루에 한 시간 동안 새로운 남성 침입자 수유 댐 노출 시간 강아지 미용, 간호, 그리고 중첩 행동을 포함 강아지 미용 및 전체 산모 케어, 소비 감소 30 분 이상 산모의 동작을 비디오 녹화 (조카와 교량, 2011). * 제어 및 스트레스 G 사이에 유의 한 차이를 나타냅니다roups, p &lt;0.05, N의 = 9-10. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig3.jpg" alt="그림 3" /> 그림 3. 만성 사회적 스트레스의 지속 시간을 증가 (A)와 (B) 손질 침략과 자기의 주파수를 14 일 동안 하루에 한 시간 동안 새로운 남성 침입자 수유 댐 노출. 수유의 날 16 산모의 침략과 불안을 증가시키고 전위의 감소 30 분 산모의 침략 비디오 녹화 (조카와 교량, 2011)을 통해 활동. * 제어 및 스트레스 그룹 사이에 유의 한 차이를 나타냅니다, p &lt;0.05, N의 = 9-10. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig4.jpg" alt="그림 4" /> 그림 4. 만성 사회적 스트레스 자손으로 우유 섭취를 감소시킨다. 2 시간 간호 간격으로 8-10 새끼 새끼로 총 우유 섭취는 감소 하였다일 9 수유 16 스트레스 댐합니다. * 제어 및 스트레스 그룹, p &lt;0.05, n은의이 = 12-14 사이에 유의 한 차이를 나타냅니다. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig5.jpg" alt="그림 5" /> 그림 5. 만성 사회적 스트레스 일 9 수유 16 강아지 성장을 감쇠. 감쇠 강아지의 성장 (조카와 교량 2011) 수유 결과 중 15 일 동안 만성적 인 사회적 스트레스에 댐을 노출. * 제어 및 스트레스 그룹 사이에 유의 한 차이를 나타냅니다, p &lt;0.05, N의 = 9-10. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig6.jpg" alt="그림 6" /> 그림 6. 만성 사회적 스트레스 수유 하루 16 감소 사카린 섭취량을 유도합니다. 사회적 스트레스의 다섯 일 17 시간에 걸쳐 물에 사카린 상대의 비율 섭취량을 감소시킨다. * 중요한 DIF를 나타냅니다제어 및 스트레스 그룹 간의 간섭, p &lt;0.05, N의 = 9-10. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig7.jpg" alt="그림 7" /> 그림 7. 만성 어릴 사회적 스트레스 F1 댐의 자손으로 우유 섭취를 감소시킨다. 2 시간 간호 간격 동안 F1 댐 (8-10 새끼의 새끼)의 자손에 의하여 총 우유 섭취는 일 2, 수유의 16 감소되었다. * 제어 및 스트레스 그룹, p &lt;0.05, n은의이 = 12-14 사이에 유의 한 차이를 나타냅니다. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig8.jpg" alt="그림 8" /> 그림 8. 만성 어릴 사회적 스트레스 비유 일 2 월 16 일에 감소 사카린 섭취량을 유도합니다. 사회적 스트레스의 다섯 일 17 시간에 걸쳐 물에 사카린 상대의 비율 섭취량을 감소시킨다. * 제어 및 스트레스 사이에 유의 한 차이를 나타냅니다그룹, p &lt;0.05, N의 = 12-14. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig9.jpg" alt="그림 9" /> 그림 9. 만성 어릴 사회적 스트레스 supraoptic 핵에 옥시토신의 발현을 감소시킨다. 만성 사회적 스트레스에 노출 댐의 성인 여성 자손은 감소 간호 효율 (Murgatroyd과 조카, 2012)와 연결되어 감쇠 중앙 옥시토신 활동을해야합니다. OXT 발현을위한 발현은 B-액틴, 산틴의 phosphoribosyltransferase (HPRT)과 글리 세르 알데히드 -3 - 인산 탈수소 효소 (GAPDH), 세 가지 결합 하우스 키핑 유전자에 정상화되었다. *는 제어 및 스트레스 그룹 사이에 유의 한 차이를 나타냅니다, p &lt;0.05, N의 = 16-18.

이 문서에서는 모델 산후 우울증과 설치류 수유 불안에 ethologically 관련 패러다임과 같은 만성 주민 침입자 사회적 스트레스의 사용에 대해 설명합니다.

Exposure to chronic stress is a reliable predictor of depressive disorders, and social stress is a common ethologically relevant stressor in both animals ...

다음 실험의 전반적인 목적은 산후 기분 장애를 연구하기 위해 생태학적으로 유의미한 설치류 모델을 구축하는 것입니다. 먼저, 새끼 쥐에게 모성 분리 기간을 거치게 합니다. 그 후 새끼 쥐를 홈 케이지로 돌려보내고, 사회적 스트레스를 유도하기 위해 모성 돌봄 행동을 기록합니다.새로운 수컷 침입자를 도입합니다. 만성적 사회적 스트레스를 유도하기 위해 30분 또는 그 이상 동안 어미의 공격성을 기록합니다. 본 연구 결과는 만성적 사회적 스트레스가 어미의 돌봄 행동을 감소시키는 효과적이고 신뢰할 수 있는 패러다임임을 나타냅니다.반복적 구속, 사회적 패배 또는 무작위의 다양한 스트레스 요인을 사용하는 만성 가벼운 스트레스 패러다임과 같은 기존의 스트레스 유발 우울증 모델과 비교했을 때 이 기술이 갖는 또 다른 장점은, 사회적 스트레스가 주요한 물류적 또는 생리학적 혼란 변수를 유발하지 않는다는 점입니다. 만성 사회적 스트레스 패러다임의 활용은 어미와 그 자손의 기분 장애에 대한 개선된 예방 조치 및 치료법의 발견으로 이어질 수 있습니다. 성체 dolly 암컷은 내부적으로 번식시키며, 테스트는 연구 전 기간 동안 동일한 방에 위치한 홈 케이지 내에서 수행됩니다.임신 20일 또는 21일에 투명 플렉시글라스로 제작된 1인치 높이의 케이지 분리대를 홈 케이지에 배치합니다. 이는 테스트 중에 새끼들이 어미에게 다시 기어가는 것을 방지하기 위해 케이지를 4개의 구역으로 나누는 역할을 합니다. 출산 당일, 모든 어미 쥐에 대해 전형적인 모성 행동이 나타나는지 확인합니다.새끼 회수, 그루밍, 포유 및 자기 그루밍의 직접 관찰을 통해 수행되었습니다. 본 연구에 사용된 침입 수컷은 크기가 더 작거나 비슷합니다. Sprague Dawley 수컷과 암컷에게 동일한 수컷을 두 번 제시하지 않았습니다.어미와 크기가 비슷한 수컷을 사용하면 영아 살해를 방지하는 데 도움이 됩니다. 테스트 중에 행동을 기록할 수 있도록 케이지 근처에 비디오 카메라를 설치합니다. 우선, 어미로부터 새끼들을 분리하고, 수컷과 암컷 새끼의 무게를 각각 측정한 후, 깨끗한 보관 케이지에 60분 동안 둡니다.60분간의 분리가 끝난 후, 새끼 쥐의 무게를 다시 측정합니다. 새끼 쥐들을 다시 홈 케이지로 넣기 전에, 모든 새끼 쥐 회수 행동이 포착될 수 있도록 비디오 녹화를 시작하십시오. 새끼 쥐들을 케이지의 테스트 구역이 아닌 세 개의 구역에 가능한 한 균등하게 나누어 배치합니다.재합사 후 30분 동안 모성 돌봄 행동을 기록합니다. 모성 돌봄 행동에는 일반적으로 새끼를 둥지로 다시 데려오는 행동, 둥지 만들기 행동, 새끼 또는 자신의 그루밍, 또는 수유가 포함됩니다. 어미 쥐가 새끼들과 상호작용한 총 시간이 120분이 되면, 새끼들의 체중을 다시 측정하여 우유 섭취량을 결정합니다.2시간의 기간 동안, 해당 수유 기간 이후 행동 테스트일에 각 리터(litter)에서 새끼 한 마리를 안락사시킵니다. 위에서 우유 샘플을 추출하기 위해, 새끼를 어미 쪽으로 돌려놓습니다. 체중 측정 후 비디오 녹화를 시작하고, 모성 공격성을 테스트하기 위해 더 작거나 비슷한 크기의 낯선 수컷 침입자를 케이지에 30분 동안 투입합니다.모성 공격 행동은 일반적으로 어미 암컷이 침입한 수컷을 공격하거나, 물거나, 발로 차거나, 누르는 행동을 포함합니다. 대조군 피험자의 경우, 수유 2일, 9일 및 16일째에 30분간 모성 공격 영상을 녹화한 후 수컷을 제거합니다. 만성 사회적 스트레스 피험자의 경우, 수컷을 어미와 함께 매일 60분 동안 둡니다. 수유 2일째부터 16일째까지의 15일 기간 중, 2일, 9일 및 16일째의 처음 30분은 대조군 피험자와 유사하게 녹화하며, 테스트 2일, 9일 및 16일째 오후 3시에 0.02% Saccharin이 든 병을 어미의 홈 케이지 내 오른쪽과 왼쪽 방향을 번갈아 가며 추가합니다.이후 병의 무게를 측정하여 사카린 선호도를 결정합니다. 새끼 쥐들은 23일째에 이유시키고, 어미 쥐들은 추가 분석을 위한 샘플 확보를 위해 안락사시킵니다. 만성 사회적 스트레스를 받은 어미의 성체 암컷 자손들은 이후 직접 새끼를 낳습니다.추가 연구를 위해, 연구 기간 동안 기록된 모성 행동을 점수화하는 odd log 행동 분석 소프트웨어를 사용합니다. 모든 모성 공격성 비디오에 대해 모성 공격성과 모성 돌봄 행동을 모두 점수화합니다. 이 프로그램은 타임스탬프가 찍힌 5초 단위의 빈(bin)으로 구성된 전체 데이터 파일과, 30분간의 기록 동안 선택된 행동들의 총 빈도 및 지속 시간이 포함된 요약 표를 모두 생성합니다.수유 중인 어미 쥐를 하루 1시간씩 15일 동안 수컷 침입자에게 노출시켜 유도한 만성적 사회적 스트레스는 새끼 그루밍 지속 시간과 전체적인 모성 돌봄의 감소를 초래했습니다. 수유 9일째와 16일째에 어미 쥐는 불안과 공격적 행동의 척도인 셀프 그루밍의 증가를 보였습니다. 이에 따라 새끼들의 우유 섭취량은 대조군에 비해 수유 9일 및 16일째에 감소했으며, 두 날 모두 새끼의 성장이 유의미하게 저해되었습니다.사회적 스트레스는 또한 성체 암컷의 새끼들이 우유 섭취를 테스트하는 맛 테스트 16에서 사카린 선호도와 쾌락의 지표를 감소시켰습니다. 사회적 스트레스를 받은 어미의 자손은 수유 2일 및 16일에 사카린 선호도가 감소했으며, 생애 초기 만성 사회적 스트레스를 받은 F1 어미의 사카린 선호도 또한 더 낮았습니다. 수유 2일 및 16일에, 생애 초기 스트레스를 받은 F1 어미의 시삭상핵에서 옥시토신 mRNA 발현이 약화되었으며, 시상하부 파라벤트리큘러 핵에서도 유사한 효과가 발견되었습니다.만성 사회적 스트레스 프로토콜을 수립할 때, 모체와 새끼들의 이동, 과도한 인간의 간섭, 오염된 케이지 및 기타 혐오적인 청각, 구강, 후각 자극과 같은 추가적인 스트레스 요인으로의 노출을 최소화하는 것이 중요합니다. 안정적인 사육 시설과 일관된 동물 사육 관리는 가장 일관된 데이터를 생성할 것입니다. 이 절차를 통해, 다양한 조직을 여러 시점에서 샘플링하여 만성 사회적 스트레스가 다른 기관 계통에 미치는 영향을 조사할 수 있습니다.또한, 스트레스 유발 질환에 대한 감수성과 회복력을 모두 조사하기 위해 생애 주기 내 여러 단계에서 사회적 스트레스 요인을 적용할 수 있습니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Behavior

행동

여기서, 아 만성 경증 패배 사회적 스트레스의 마우스 모델을 개발하기위한 방법을 설명하고 hyperphagia- 및 체중 증가 조갈증 다음과 같은 증상을 포함한 우울증 병원성 특징을 조사하기 위해 사용된다.

스트레스에 의한 행동 및 생리 적자를 이해 아 만성 및 온화한 사회 패배 스트레스의 마우스 모델

예측할 수 없는 만성 경미한 스트레스(UCMS) 프로토콜은 만성 스트레스 및 우울 증상과 관련된 행동 및 생리학적 변화를 연구하기 위한 검증된 방법입니다. UCMS 프로토콜의 부과 8 주간은 두 성별의 설치류에서 행동 변화와 나쁜 건강 결과를 유도합니다.

선동 우울 증상, 행동 변화 및 ​​설치류에 부정적인 건강 성과에 대한 예측할 수없는 만성 가벼운 스트레스 프로토콜

여기 쥐에서 예측할 수 없는 만성 가벼운 스트레스 프로토콜 선물이. 이 프로토콜 장기 우울증 같은 표현 형을 유도 하 고 행동 하 고 neuromolecular 우울증 같은 적자 반전에 상 상속 항우울제의 효능을 평가 하기 위해 수 있습니다.

마우스에 Anhedonia 유도 대 한 예측할 수 없는 만성 가벼운 스트레스 프로토콜

이 문서는 억제기를 사용하여 만성 적으로 고정 된 마우스에서 우울과 같은 행동의 유도에 대한 단순화 되고 표준화 된 프로토콜을 제공합니다. 또한, 우울증의 유도를 확인하는 행동과 생리 적 기술이 설명된다.

마우스에서 우울증과 같은 행동을 유도하기위한 만성 고정 스트레스 프로토콜

Y-미로 장벽 작업은 보상을 위한 노력을 소비하는 동기를 검사하는 행동 테스트입니다. 여기에서는 만성 코르티코스테론과 사회적 패배 스트레스를 비롯한 여러 가지 잘 검증된 만성 스트레스와 여성에게 효과적인 새로운 만성 비차별적 사회적 패배 스트레스(CNSDS)를 테스트하는 데 대해 논의합니다.

만성 스트레스는 마우스의 Y-미로 장벽 작업에서 노력과 관련된 선택 행동을 변화시합니다.

만성 심리사회적 스트레스(CGS) 패러다임은 임신 중 임상적으로 관련된 스트레스요인들을 고용하여 산모와 유아의 정신장애를 모델링합니다. 여기서는 CGS 패러다임 및 다운스트림 평가를 적용하여 이 모델의 유효성을 검사하는 단계별 절차를 제공합니다.

어머니와 유아에 있는 정신 장애에 대한 번역 관련 패러다임으로 임신에 있는 심리사회적 긴장의 Murine 모형을 이용하

우리는 청소년 C57BL/6 마우스를 위한 가속 사회적 패배 스트레스 모델을 개발했는데, 이는 남성과 여성 모두에게 작용하고 불연속적인 청소년 기간 동안 노출을 허용합니다. 이 모델에 대한 노출은 사회적 회피를 유발하지만, 패배한 수컷과 암컷 쥐의 하위 집합에서만 가능합니다.

청소년 C57BL/6 수컷 및 암컷 마우스에 대한 사회적 패배 스트레스 모델

이 프로토콜은 출생 후 초기에 빈곤한 환경과 예측할 수 없는 산모의 보살핌으로 인한 초기 삶의 역경이 뇌 발달과 정신 장애의 미래 위험에 어떻게 영향을 미치는지 연구하기 위한 동물 모델을 설명합니다.

제한된 침구와 둥지는 생쥐의 초기 삶의 역경에 대한 모델입니다.

이 프로토콜은 초기 사춘기 수컷 마우스에서 10일 동안 만성적인 사회적 패배 스트레스를 수행하여 마우스의 60% 이상에서 성인이 되어서도 오래 지속되는 사회적 회피를 생성하는 방법을 자세히 설명합니다.

초기 청소년기 수컷 마우스의 만성 사회적 패배 스트레스

본 연구는 매일 4가지 사회적 스트레스 요인을 통합함으로써 암컷 C57BL/6J 마우스의 정신 장애에 대한 다중 통합 사회적 스트레스(MISS) 모델을 설명합니다. 10일 동안 MISS 노출을 반복한 후, 생쥐는 우울증과 불안과 같은 표현형을 개발하여 여성 피험자의 정신 장애를 연구하기 위한 자연스러운 병인학 기반 동물 모델을 제공했습니다.

암컷 C57BL/6J 마우스의 정신 장애에 대한 다중 통합 사회적 스트레스 모델

학습하세요 만성 사회적 스트레스를 사용하여 수유 설치류에서 산후 우울증 및 불안을 모델링하는 방법을. 이 기법은 모성 행동과 새끼 성장에 미치는 영향을 평가하여 산후 기분 장애 연구에 활용됩니다.

설치류 젖을의 모델 산후 우울증에 만성 사회적 스트레스를 사용하여

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