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DOI: 10.3791/50466-v
Midhat H. Abdulreda1,2, Alejandro Caicedo1,3,4, Per-Olof Berggren1,5
1Diabetes Research Institute,University of Miami Miller School of Medicine, 2Department of Surgery,University of Miami Miller School of Medicine, 3Department of Medicine,University of Miami Miller School of Medicine, 4Department of Physiology & Biophysics,University of Miami Miller School of Medicine, 5The Rolf Luft Research Center for Diabetes and Endocrinology,Karolinska Institutet
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
안구 이식 및 공 촛점 현미경을 결합 새로운 접근 방식은 이식 조직 내에서 단일 셀 해상도 세로, 비 침습적 실시간 이미징을 가능하게
안녕하세요, 저는 마이애미 대학교 밀러 의과대학 당뇨병 연구소의 도레타입니다. 이 비디오에서는 췌장 구멍을 쥐의 눈 내실에 이식하는 방법을 보여 드리겠습니다. 이 절차는 두 단계로 구성됩니다.
첫 번째 단계는 분리된 췌장 구멍을 캐뉼라에 로드하는 것이고 두 번째 단계는 실제 이식 절차입니다. 기기 및 시약에 대한 자세한 내용은 함께 제공되는 텍스트를 참조하십시오. 여기서는 주사기가 장착된 전동 주사기 드라이버와 저장소 및 캐뉼라 부착물을 강조하며, 다음 비디오에서는 이에 중점을 둘 것입니다.
우리는 구멍을 캐뉼라에 로드하는 것으로 시작합니다. 모든 절차는 입체경 아래에서 수행됩니다. 접시를 원을 그리며 회전하거나 회전시켜 구멍을 중앙에 배치하는 것으로 시작합니다.
중앙에 배치되면 저장소에서 캐뉼라를 분리하고 전동 주사기 드라이버를 앞으로 밀어 기포를 씻어냅니다. 그리고 그것은 앞으로 발을 밟음으로써 이루어집니다. 준비가 되면 이제 전동 주사기 드라이버를 뒤쪽 방향으로 구동하여 구멍을 저장소로 흡입하기 시작합니다.
그리고 다시 말하지만, 그것은 뒤로 가는 발 페달을 밟음으로써 이루어집니다. 구멍이 저장소 바닥에 어떻게 쌓이는 경향이 있는지 확인하십시오. 그런 다음 캐뉼라를 저장소에 다시 연결하고 저장소에서 구멍을 빼냅니다.
그런 다음 튜브를 캐뉼라에 삽입하여 저장소에서 구멍을 제거하고 튜브에 꽉 찬 상태를 유지하도록 합니다. 전동 주사기 드라이버를 앞으로 구동할 때 저장소를 두드리십시오. 구멍이 캐뉼라 뒤쪽으로 들어가기 시작할 때 튜브에 얼마나 포장되어 있는지 확인하십시오.
지금쯤이면 구멍을 이식할 준비가 되었을 것입니다. NS 크기의 마우스를 패드에 놓고 검지와 엄지로 머리, 피부를 잡아당겨 이식할 눈을 노출시키거나 팝니다. 새 바늘을 메스로 사용합니다.
홍채의 접촉 및 부상을 방지하기 위해 경사진 끝이 아래를 향하도록 눈에 접근하십시오. 바늘 끝을 각막에 관통하고 측면 절개를 만듭니다. 다음으로, 절개 부위를 통해 눈꺼풀이 미리 로드된 캐뉼라를 내부 챔버에 삽입하고 전동 주사기 드라이버를 앞으로 밀어 구멍을 챔버에 다시 주입하기 시작합니다.
캐뉼러 내부에 갇힐 수 있는 기포는 나중에 소멸되므로 걱정하지 마십시오. 그리고 그들은 눈꺼풀이 챔버 밖으로 역류하는 것을 최소화하거나 예방하는 자연 장벽으로 작용할 것입니다. 천천히 조심스럽게 캐뉼러를 내부 챔버에서 빼냅니다.
이제 멸균 PBS로 눈을 씻으십시오. 선호하는 진통제를 주사하고 마지막으로 안과용 항생제 연고를 바릅니다. 이식이 완료되었습니다.
이제 췌장 눈꺼풀을 안구 내실에 이식한 대표적인 결과를 보여줍니다. 7일째에 개별 구멍의 종단 이미징 연구를 위해. 이식 후, 구멍은 28일째까지 홍채 위에 명확하게 생착됩니다.
구멍은 이식 후 42일 후에 이전에 본 것과 동일한 위치에 있습니다. 구멍은 같은 위치에서 명확하게 볼 수 있습니다. 또한 절개 부위가 얼마나 잘 치유되어 개별 구멍의 이미징을 방해할 가능성을 배제하는지 확인하십시오.
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