에 십자가를 수행하는 방법 강아지풀, 새로운 모델 시스템

이 절차의 전반적인 목표는 잔디에 대한 새로운 모델 시스템인 cter verus에 대한 십자가를 수행하는 방법을 보여주는 것입니다. 이것은 먼저 정점을 선택하고, 다듬고, 레이블을 지정하여 수행됩니다. 두 번째 단계는 다듬어진 원추를 섭씨 48도의 수조에 담가 매료시키는 것입니다.

다음으로, 손질된 첨탑은 꽃가루를 흘리는 첨탑에 의해 수분을 위해 암컷으로 사용됩니다. 마지막 단계는 교잡 수분 후 2주 후에 씨앗을 수확하는 것입니다. 궁극적으로, 추정되는 잡종 종자의 거스 염색은 기술의 효과를 보여주기 위해 사용됩니다.

물리적 거세와 같은 기존 방법에 비해 이 기술의 주요 장점은 덜 침습적이고 실험실에서 비교적 쉽게 설정할 수 있다는 것입니다. 이 방법은 교배를 더 쉽게 수행할 수 있도록 하여 cter verus를 유전자 모델로 채택하는 데 도움이 될 것입니다. 시작하려면 물을 주기 위해 하나의 셀을 제거한 다음 트레이에 4 x 9개의 셀을 채웁니다.

다음으로 세포에 가볍게 분무하고 세포 당 하나의 씨앗을 토양 표면에 뿌립니다. 그런 다음 씨앗을 흙 층으로 덮고 0.5cm 두께로 토양 표면에 미스트를 뿌려 적신 다음 바닥에서 평지에 물을 줍니다. 씨앗 파종 후 하루에 1-2회 바닥에서 세포에 물을 계속 주고 물을 과도하게 주지 않도록 주의하십시오.

오전 8:30부터 오전 9:00까지 섭씨 15도의 프레다 처리로 성장 챔버 조건을 낮에는 31도, 밤에는 섭씨 22도로 설정합니다. 또한 이러한 조건에서 12시간 밝고 어두운 일정을 유지하고 상대 습도를 50%로 설정하십시오. Satter verus a 10.1은 종자 파종 후 21-22일 동안 꽃을 피웁니다. 이상적으로 거세는 오후나 저녁에 수행됩니다.

1개에서 5개의 꽃이 피는 각 식물에서 기본 펜타클을 선택합니다. 그런 다음 펜타클의 끝을 자르고 미세한 집게를 사용하여 근위 중간 및 기저 부분의 아래쪽 부분에 있는 모든 꽃을 제거합니다. 꽃이 피는 꽃의 10분의 1에서 5분의 1까지만 있는 경우.

추가 트리밍을 위해 근위 중간의 원위부, 중간 및 위쪽 부분을 유지하려면 끝을 자르고 원추 바닥에서 꽃을 다듬습니다. 원추리에 꽃의 1/4에서 1/2이 피는 경우 추가 트리밍을 위해 근위 중간 부분을 유지하고 원위 중간 부분을 잘라냅니다. 펜타클을 자르면 수술용 가위를 사용하여 칫솔모를 가볍게 다듬습니다.

가능한 열 손상으로부터 작은 꽃을 보호하기 위해 수분될 부위에 강모를 유지하도록 주의하십시오. 각 이삭에 대해 가장 높은 성숙한 작은 꽃을 유지하십시오. 가장 위쪽에 있는 작은 꽃은 수분 시 꽃가루가 생길 확률이 더 높습니다.

그런 다음 꽃이 핀 모든 꽃과 모든 미성숙 꽃을 제거하고 깃털 당 약 20-30 개의 꽃을 고르게 분포시킵니다. 다음으로, 각 꽃의 한쪽면에 빨간색 영구 마커로 표시하십시오. 그리고 첨탑 플래그에 있는 작은 꽃의 수를 다음 정보와 함께 정점에 기록하고, 거세를 하는 날짜, 기간 및 거세가 수행되는 온도를 기록합니다.

원추형이 다듬어지면 각 식물의 모든 경운기를 제거하여 주요 정점의 개발에 더 많은 자원을 재할당하십시오. 거세하기 1시간 전에 열처리를 위해 수조를 섭씨 48도로 설정하십시오. 예열이 끝나면 손질한 펜타클을 부드럽게 구부리고 한 번에 3-4개를 따뜻한 물에 3-6분 동안 담근다.

펜타클의 줄기가 부러지지 않도록 주의하십시오. 펜타클보다 10배 이하인 깃대 잎은 따뜻한 물과 접촉해서는 안 됩니다. 이것은 잎 조직에 대한 열 손상을 방지하기 위한 것입니다.

원하는 기간 동안 거세가 수행되면 수조에서 원추를 제거하고 원추에서 물을 부드럽게 털어냅니다. 그런 다음 거세된 원추를 맞춤형 마이크로 천공 빵 가방으로 완전히 덮고 트위스트 타이로 고정합니다. 마이크로 천공된 빵 가방은 원추의 크기에 따라 사용자 정의할 수 있습니다.

마지막으로, 다음 날까지 식물을 성장 챔버에 다시 놓습니다. 둘째 날과 셋째 날 오전 9:00에, 거세된 암컷과 거세되지 않은 수컷 부모를 성장실에서 실험실로 옮겨 교배를 수행하고, 관찰하고, 또 다른 적색을 추가합니다. 꽃이 피었거나 피고 있는 꽃에.

빨간색 영구 마커를 사용하여 원추 당 개화 한 꽃의 총 수를 기록하십시오. 그런 다음 수분 날짜와 수컷 부모의 이름을 태그에 기록하여 어떤 교배가 수행되었는지 추적하십시오. 우리의 실험실 조건에서 남성 부모의 안티테제의 피크 시간을 관찰하고, 남성 부모의 펜타클에 있는 꽃은 오전 10시 10분경에 동시에 열리기 시작합니다. 일단 열리면 꽃밥의 완전한 노력과 꽃가루의 방출은 20분 후에 발생합니다.

노랗게 변하면 즉시 수분을 시작하십시오. 흰 꽃밥은 수컷 부모의 꽃에서 볼 수 있습니다. 수분은 2일차와 3일차에 원추를 사용하여 원추 수분을 하거나 꽃밥을 사용하여 암술머리 수분을 수행하여 수행됩니다.

수컷이 수분을 촉진하기 위해 거세된 원추와 함께 원추를 부드럽게 문지르고 오염을 피하기 위해 수컷 원추를 버리고 분리된 원추 하나를 사용하여 각 거세된 정점이 2-3개의 펜타클에 의해 수분될 때까지 수분 과정을 반복합니다. 가장 효과적인 방법은 겸자를 사용하여 암술머리 수분을 하는 것입니다. 황백색 꽃밥으로 피는 꽃을 고르거나 꽃밥을 골라 암컷 부모에게 꽃의 암술머리를 물리적으로 만집니다.

수컷 부모의 꽃 한 송이를 사용하여 다른 수컷 부모의 수분 사이에 거세된 원추에 한 송이의 꽃을 수분합니다. 집게를 95% 에탄올에 담근 다음 Kim 물티슈로 닦아 다른 십자가 사이의 꽃가루 운반으로 인한 오염을 방지합니다. 수분이 수행되면 암컷 부모의 원추를 맞춤형 마이크로 천공 빵 가방으로 덮고 트위스트 타이를 사용하여 바닥에 고정합니다.

수분 후 종자 수확까지 수분일 후 14-16일 후에 종자를 수확하고 씨앗과 같은 봉투에 태그를 넣습니다. 양쪽에 빨간색 표시가 있는 씨앗은 통제된 유전적 교배의 결과인 씨앗을 나타냅니다. 빨간색 표시가 없는 씨앗은 새로 자란 꽃에서 비롯된 씨앗을 나타내므로 버리십시오.

빨간색 표시가 있는 거세 씨앗 후에는 한쪽 면만 자가 수분으로 인한 씨앗을 나타낼 가능성이 높습니다. 마지막으로 씨앗을 섭씨 30도에서 이틀 동안 건조시킵니다. 건조된 씨앗은 실험실에 보관하거나 이상적으로는 씨앗 챔버에 보관하십시오.

추가 분석이 준비되면 필요한 경우 physes를 제거합니다. 이 비디오에 설명된 방법은 거세 과정을 최적화하기 위해 다양한 온도와 치료 시간을 사용하여 수많은 시도의 결과입니다. 이 과정의 성공은 얻어진 잡종 종자의 수로 측정되었습니다.

남자 부모가 기자를 데리고 갔던 시험 건널목 중 하나에서 나온 6개의 씨앗. 베타 글루쿠로니다아제에 대한 유전자 암호화는 다음과 같습니다. 리포터 유전자는 염색될 때 씨앗이 파랗게 변하게 하여 잡종 씨앗의 수를 쉽게 셀 수 있도록 합니다.일단 마스터하면 절차가 제대로 수행되면 하루에 최대 15개의 펜타클을 교차할 수 있습니다.

이 비디오를 시청한 후에는 Aria verus에서 십자가를 수행하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다.