Generation of Recombinant Arenavirus for Vaccine Development in FDA-Approved Vero Cells

Benson Y.H. Cheng; Emilio Ortiz-Ria&#241;o; Juan Carlos de la Torre; Luis Mart&#237;nez-Sobrido

doi:10.3791/50662

FDA 승인 베로 세포 백신 개발을위한 재조합 Arenavirus의 생성

JoVE Journal
Immunology and Infection

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Immunology and Infection

Generation of Recombinant Arenavirus for Vaccine Development in FDA-Approved Vero Cells

FDA 승인 베로 세포 백신 개발을위한 재조합 Arenavirus의 생성

Full Text

17,679 Views

10:03 min

August 1, 2013

DOI: 10.3791/50662-v

Benson Y.H. Cheng*¹, Emilio Ortiz-Riaño*¹, Juan Carlos de la Torre², Luis Martínez-Sobrido¹

¹Department of Microbiology and Immunology,University of Rochester School of Medicine and Dentistry, ²Departments of Immunology and Microbial Sciences,The Scripps Research Institute

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

복제 cDNA를 같은 유전자를 역 참조 방식에서 재조합 arenaviruses의 구조는 연구자 arenavirus의 생물학의 다양한 측면, 특정 바이러스 유전자 산물의 역할뿐만 아니라, 서로 다른 특정 도메인 및 잔류의 기여를 조사 할 수 있습니다 . 마찬가지로, 인간의 병원성 arenaviruses을 방지하기 위해 효과적이고 안전한 백신의 생성에 새로운 가능성을 제공하는 백신 개발을위한 FDA 승인 세포주 (베로)의 유전학 기술을 역으로 수행합니다.

이 절차의 전반적인 목표는 잠재적인 백신 또는 백신 벡터 시드 개발을 위해 FDA가 승인한 Vero 세포에서 재조합 아레나 바이러스 생성을 위한 간단하고 재현성이 높은 프로토콜을 입증하는 것입니다. 이는 먼저 플라스미드 DNA transfection 혼합물을 조심스럽게 준비함으로써 달성됩니다. 두 번째 단계는 plasmid DNA transfection 혼합물로 Vero 세포를 transfection

다음으로, 형질 주입된 세포를 100mm 접시로 확장해야 합니다. 최종적으로 마지막 단계는 야생형 바이러스 또는 바이형광 현미경을 이용한 면역형광과 트리스 분절 바이러스를 이용한 GIA 루시퍼라아제 발현을 통해 구조 및 린세포주와 같은 기존 방법과 비교하여 성공적인 바이러스 구제를 확인하는 것입니다. 이 프로토콜은 Vero 세포에서 신장 바이러스를 생성하며, 이는 FDA의 백신 개발 승인을 받았습니다.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos