Name: 유전자 탐구하는 종피 침구 분석 체외 어떻게 배젖 컨트롤 종자 발아에 애기 장대 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-11-09T21:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 52 s
Description: 배우세요 Arabidopsis thaliana 종자를 이용한 종피 침구 분석법으로 배젖이 종자 발아를 조절하는 메커니즘을 연구하는 방법입니다. 이 기술은 식물 유전학 및 발달 생물학 연구에 활용됩니다.

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이 작품은 스위스 국립 과학 재단 (National Science Foundation)에서 교부금에 의해 제네바의 국가에 의해 지원되었다.

SCBA가 조립되면, 배아의 성장은 며칠에 걸쳐 모니터링된다. 따라서 SCBA의 시드 절개 과정과 조립하기 전에, 하나는 배아 성장 종피 물질의 효과의 적절한 평가를 방지 할 수있는 미래의 오염을 피하기 위하여 종자를 살균 할 필요가있다. 1. 종자 소독 <ol><li> 1.5 ML의 microcentrifuge 관에서 성숙하고 건조 애기 씨의 50 μl를 넣고 70 % 에탄올 용액을 제조. </li><li> 종자를 함유하는 마이크로 원심 분리 튜브에 70 % 에탄올 용액 1 ㎖를 추가하고 vortexer를 1,200 rpm에서 10 분 동안 실온에서 흔들. </li><li> 3 초 동안 원심 분리기의 microcentrifuge 관은 4,000 XG에서 튜브의 바닥에 씨앗을 집중한다. </li><li> 정중 microcentrifuge 관의 하단에 씨앗을 떠나기 진공 흡인 팁을 이용하여 70 % 에탄올 용액을 대기음. </li><li> t에 멸균 증류수 1 ㎖를 추가<html> 그는 microcentrifuge 관은 여전히​​ 씨앗을 포함. </li><li> 1,200 rpm에서 10 분 동안 상온에서 흔들어. </li><li> 3 초 동안 원심 분리기의 microcentrifuge 관은 4,000 XG에서 튜브의 바닥에 씨앗을 집중한다. 조심스럽게 튜브의 하단에 씨앗을 떠나기 진공 흡인 팁을 사용하여 물에 뜨는 기음. </li><li> 아직도 씨앗을 포함하는 microcentrifuge 관에 멸균 증류수 1 ㎖를 추가합니다. 물의 흐름을 균일하게 튜브 안에 씨앗을 일시 중단되었는지 확인합니다. 여기서의 목표는 씨앗의 무결성을 보존하도록 상기 흔들림이다. </li><li> 씨앗은 30 초 동안 계속 튜브를 남겨 튜브의 바닥에 중력에 의해 아래로 정착하자. 조심스럽게 튜브의 하단에 씨앗을 떠나기 진공 흡인 팁을 사용하여 물에 뜨는 기음. </li><li> 1.9 - 1.8 단계를 네 번 반복합니다. 전체 살균하는 데 약 30 분 소요됩니다. </li></ol> 2. 씨 도금 &quot;ontent&gt; 모든 후속 단계는 멸균 조건을 보존하기 위해 층류 캐비닛 내부에서 수행된다. <ol><li> (N-모르 폴리 노) 에탄 술폰산 (MES-KOH - 페트리 접시 플레이트 2.5 mM의 2에서 8.6 g / L 무라 시게 및 스쿡 배지를 함유하는 용액을 오토 클레이브에 의해 제조 발아 배지 30 ㎖를 함유하는 (100mm 직경, 20mm의 높이)를 준비 , 산도 5.7) 및 0.8 g / L 한천. 이 솔루션은 페트리 접시 접시에 붓는 전에 50 ° C의 물을 욕조에 진정하자. </li><li> 씨앗이 들어있는 튜브에 멸균 증류수 200 μl를 추가합니다. 씨앗을 재현 탁하고 1 ㎖ 팁과 표준 피펫을 이용하여 발아 매체의 표면에 그들을 전송. </li><li> 진공 흡인 팁을 이용하여 발아 매체의 표면에 씨앗을 둘러싼 물을 제거한다. </li><li> 추가 건조를 위해 2 시간 동안 층류 캐비닛 내부의 뚜껑없이 씨앗을 포함하는 페트리 접시를 남겨주세요. 뚜껑을 페트리 접시를 닫고이 층류에서 서있게약 4 시간이 종자 소독 절차 (단계 1.2)의 개시 이후 통과되도록 약 90 분 동안 캐비닛 흐름. </li></ol> 3. 종자 해부 다음 단계는 층류 후드 캐비닛 내부에 배치 실체 작업 필요로. 뒤몽의 포셉 # 5립니다 (즉, 무딘) 팁을 크게 씨앗의 처리 (그림 1A)을 용이하게한다. <ol><li> 발아 배지 30 ㎖를 포함하는 새로운 배양 접시 접시를 준비합니다. 매체에 두 개의 병렬 직사각형 멸균 왓트 3MM 논문 (; 그림 1B, 1 단계 1.5 cm × 1.0 cm)의 표면에 장소. 와트 만 3MM 종이는 오토 클레이브 멸균된다. </li><li> 멸균 포셉 (그림 1B, 2 단계)를 사용하여 와트 만 3MM 논문에 씨앗을 전송합니다. </li><li> 부드럽게 절단 집게의 병렬 뭉툭한 팁을 (사용하여 종자를 눌러 와트 만 3MM 종이에 대한 개별 씨앗을 잡고 <st룽&gt; 그림 1B, 3 단계). </li><li> (12.7 mm하기 x 예 : U100 인슐린 주사기 + 1 ML의 주사기, 0.33 mm (29 G)) 주사기 바늘을 사용하여 종자의 종피 (종피와 배유를) 잘라 (그림 1B, 4 단계). 애기 장대 종자의 모양은 타원형이며 그것은 자엽 (즉 멀리 급진적 끝에서) 작은 뿌리에 가입하는 장소에 가능한 한 가까운 긴 반 주축을 따라 종피를 절단하는 것이 좋습니다. 이는 절개 과정의 다음 단계에서 배아의 안전 방출을 돕는다. </li><li> 절단 집게 (그림 1B, 5 단계)의 병렬 무딘 팁을 사용하여 와트 만 3MM 종이에 씨앗을 밀어 넣습니다. 이 단계는 3.4 단계 (그림 1B, 6 단계)에서 만든 구멍을 통해 종피 밖으로 배아를 해제합니다. 그것은 자엽의 끝이 작은 뿌리의 끝 부분에 가까운있는 씨앗 (즉, 멀리 FR의 강요를 적용하는 것이 좋습니다톰 개방). </li></ol> 4. 조립 종피 침구 분석 (SCBA) 종자 코트와 배아의 수의 적절한 선택을위한 설명을 참조하십시오. <ol><li> 발아 배지 30 ㎖를 포함하는 새로운 배양 접시 접시를 준비합니다. 매체의 표면에 놓으 나일론 메쉬의 멸균 사각형 조각 (3.5 cm x 5.0 cm) (그림 2, 1 단계). </li><li> 손상을 피하기 위하여, 태아와 시드 코트 부드럽게 주사기 바늘 (도 2, 단계 2)를 사용하여 밀어 포셉 금속 가장자리의 표면으로 이동 될 수있다. 이식란과 나일론 메쉬 (그림 2, 3 단계)에 씨앗 코트. </li><li> 씨앗 코트 최대한 근접하여 (그림 2, 4 단계)에 있는지 확인하고 무딘 집게와 바늘을 사용하여 종자 코트의 원형 단일 층을 조립합니다. 가능한 한 많이 노출하는 시​​도에 의해 생성 종피 개구위쪽 바늘. 이 단계는 체계적으로 테스트되지 않았습니다. 배아의 성장을 억제하는 확산 성 물질이 직접적으로 멀리에서 배아를 향해 확산 아닌 것으로 예상되기 때문에 그러나, SCBA의 효율을 높일 수있다. </li><li> 4.3 단계에서 조립 종피 침대의 중앙에 원형의 단일 층 (그림 2, 5 단계)로 배아를 놓습니다. 배아 최대한 근접하게되어 있는지 확인합니다. </li><li> 20 ~ 21 ℃에서 연속 광 (40 μmol / ㎡의 EC)에서 SCBAs을 품어 FR 펄스, 발아 체포 일반 조명 아래 SCBA 조립 한 바와 같이 FR 펄스 (9)을 적용하고 어둠 속에서 배양 접시를두고하는 데 사용되는 경우. </li></ol>

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<li>Alonso, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genome-wide+insertional+mutagenesis+of+Arabidopsis+thaliana%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Genome-wide insertional mutagenesis of Arabidopsis thaliana.</a> Science. 301, 653-657 (2003).</li>
<li>Rook, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+sucrose-induction+mutants+reveal+the+modulation+of+sugar-induced+starch+biosynthetic+gene+expression+by+abscisic+acid+signalling%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+J%22%5BJournal%5D)">Impaired sucrose-induction mutants reveal the modulation of sugar-induced starch biosynthetic gene expression by abscisic acid signalling.</a> Plant J. 26, 421-433 (2001).</li>
</ol>

저자는 더 경쟁 재정적 이익이 없다는 것을 선언합니다.

여기에 설명 된 씨앗 코트 침구 분석 (SCBA) 절차는 원칙적으로 애기 장대 종자 발아가 차단 (또는 지연)와 배젖이 체포를 구현하기 위해 의심되는 모든 상황에 적용 할 수있다. 후자 종피 (종피 및 배유)를 제거하고 배아 종피 둘러싸여 때 상대 속도 배아 성장이 진행이 관찰한다는 관찰에 의해 입증 될 수있다. 발아는 특정 환경 물리적 매개 변수 (예를 들면 물 전위 또는 가벼운 질) 또는 특정 유전 적 배경에서 (GA1 돌연변이와 같이 GA 합성의 예 부재, 그림 3 참조)에 대한 응답으로 차단 될 수 있습니다. 씨앗 코트와 SCBA에 사용되는 배아의 수에 관한 더 일반적인 규칙은 없습니다. 이것은 시드 배치 (및 특히 그것의 선도)에 따라 실험의 분류가 수행 될. 그것은 adjus하는 것이 중요합니다매일 시드 코트의 침대에 배아의 성장을 모니터링하여 각각의 특정한 경우에 대한 ...

애기 성숙한 종자, 종피가 종피, 산모 원 죽은 조직의 외부 층과, 배유, 직접 한 배아를 둘러싸고 살아있는 조직의 단일 셀 층으로 구성된다. 배유 및 배아는 별도의 수정 이벤트에서 파생 된 : 배아는 하나의 임산부와 한 아버지의 게놈 2 배체 조직 반면 배유는 임산부와 한 아버지의 게놈 2 개 배체 조직이다. 전통적 배유에 할당 된 주 기능은 영양 조직의 점이다. 그러나, 배유 또한 종자 발아를 제어하기위한 중심적인 역할을하는 것이 점차 명백 해지고있다. 이 개념은, 수면의 경우 새로 생성 된 씨앗에 의해 전시 특성 첫 번째 명백하게되었다. 휴면 종자 발아 유리한 조건의 존재에도 불​​구하고 발아하지 못한다. 씨앗은 숙성 기간 후 자신의 수면을 잃고 nondorman가유리한 발아 조건에 노출되었을 때 t, 즉, 그들은 발아합니다. 이 모델 식물 애기 장대를 포함한 많은 식물 종에서, 종피는 절대적으로 종피 제거 배아의 성장과 3,4 녹색화를 트리거 이후 휴면 종자의 발아를 방지하기 위해 필요합니다. 애기 장대에서 Bethke는 외. 발아 배유 5를 둘러싼 배젖을 유지하면서 종피를 제거한 후 남아 억압 된 것을 관찰했다. 이러한 관측은 강하게 배유 배아에 억압적인 활동을 발휘 종피 내에서 조직이라고 지적했다. 그러나, 시드 코트 제거 실험 반드시 종피 제공 발아 억압 활동의 본질을 명확히 않으며 구현 유전자를 식별하는 데 도움이되지 않는다. 우리는 최근에 씨앗 코트와 태아가 물리적으로 분리하지만 가까운 proxi에 보관 종피 침구 분석 (SCBA)를 도입Science AG로서는 배유 제공 억압 발아 활성은 6 유지되도록. SCBA는 휴면 nondormant 및 유전자 변형 종자 코트와 배아 재료의 조합 사용할 수 있습니다. 그 결과, 발아 구체적 배유 및 배아에서 동작을 제어하는​​ 유전자 경로는 해부 될 수있다. SCBA는 배유 6의 성장을 억제하기 위해 배아으로 식물 호르몬 아브 산 (ABA)를 출시 것을 보여주기 위해 수면 상태의 맥락에서 사용되었다. 또한 우리는 수면을 촉진하는 신호 배유에서 작동 경로와 배아 조직을 식별 할 SCBA를 사용할 수 있습니다. 발아를 제어하는​​ 배유의 역할은 더욱 작게 레드 (FR) 광의 펄스에 노출 nondormant 씨의 경우를 고려하여 강화 하였다. 초기 시드 imbibition에 FR 광 펄스는 발아 7,8을 억제하는 것으로 알려져있다. 종자 코트는 씨앗에서 FR 빛의 펄스를 제거 할 때강하게 배유도 nondormant 씨 (9)의 발아를 억제 할 수있는 제안, 발아를 억제 할 수 없습니다. 현저하게, SCBA는 발아의 FR-의존적 억제를 요점을 되풀이하는 데 사용할 수 있습니다. 이 종자 발아의 FR 의존 억제는 또한 배유 9 ABA 자료를 포함하는 과정입니다 것을 보여주기 위해 허용했다. 또한, SCBA는 배유 및 광 신호 9,10에 응답 nondormant 종자 발아를 제어하는 배아에서 동작 다른 광 신호 전달 경로를 식별 허용. SCBA 종자 발아의 제어의 맥락에서 배유의 기능을 탐구 확실한 기술 할 수에 따라서 나타난다. 또한 발아를 제어하기 위해 의심되는 유전자가 배유, 배아 또는 두 조직에서 작동 여부를 시험 관내에서 평가하는 강력한 도구입니다. 여기에 디테일이 SCBA를 조립하는 데 필요한 여러 단계를 우리는.

<table><tbody><tr><td>Thermomixer Comfort</td><td>Eppendorf AG</td><td>5355 000.011</td><td>Eppendorf AG, Hamburg, Germany</td></tr><tr><td>Vacusafe Comfort</td><td>INTEGRA Biosciences AG</td><td>158 310</td><td>Integra Biosciences AG, Zizers, Switzerland</td></tr><tr><td>Petri dish plate (100 mm x 20 mm)</td><td>Greiner Bio-One GmbH</td><td>664 102</td><td>Greiner Bio-One GmbH, Frickenhausen, Germany</td></tr><tr><td>Murashige and Skoog</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M5524</td><td>Sigma-Aldrich, St Louis, MO, 미국</td></tr><tr><td>MES</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M3671</td><td>Sigma-Aldrich, St Louis, MO, USA</td></tr><tr><td>한천 (식물 한천)</td><td>Duchefa Biochemie BV</td><td>P1001</td><td>Duchefa Biochemie, 하를렘, 네덜란드</td></tr><tr><td>Dumont 집게 #5</td><td>Fine Science Tools GmbH</td><td>11251-10</td><td>Fine Science Tools GmbH, 하이델베르크 독일</td></tr><tr><td>주사기 바늘</td><td>BD Micro-Fine</td><td>324827</td><td>BD, Franklin Lakes, NJ USA</td></tr><tr><td>나일론 메쉬(SEFAR NYTEX)</td><td>SEFAR AG</td><td>03-50/31</td><td>Sefar AG, 하이덴, 스위스</td></tr><tr><td>성장 챔버</td><td>CLF 식물 기후</td><td>Percival I-30BLLX</td><td>CLF plant Climatics, Wertingen,</td></tr><tr><td>GermanyPaclobutrazol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>46046</td><td>Sigma-Aldrich, St Louis, MO, 미국</td></tr></tbody></table>

유전자 탐구하는 종피 침구 분석<em&gt; 체외</em&gt; 어떻게 배젖 컨트롤 종자 발아에<em&gt; 애기 장대</em

A Seed Coat Bedding Assay to Genetically Explore In Vitro How the Endosperm Controls Seed Germination in Arabidopsis thaliana

애기 장대의 배유는 성숙한 배아를 둘러싸고 휴면 종자의 발아 또는 (FR)까지 붉은 빛 펄스에 의해 조사 nondormant 씨의 방지에 필수적인 역할을하는 하나의 세포 층으로 구성되어 있습니다. 더 배유에 의해 가해지는 발아 억압적인 활동의 기초가되는 분자 유전 학적 메커니즘에 대한 통찰력을 얻기 위해, &quot;종피 침구&quot;분석 (SCBA)를 고안했다. SCBA 물리적 씨앗 코트의 기본 레이어에 태아의 성장을 확인할 수 있도록 해줍니다 씨앗에서 씨앗 코트와 배아를 분리하는 절개 절차입니다. 현저하게, SCBA 종자 휴면 종자 발아의 FR 의존 제어의 맥락에서 종피의 발아 억압 활동을 재구성한다. SCBA는 휴면 nondormant 및 유전자 변형 종자 코트와 배아 재료, 발아를 제어하는​​ 유전자 경로의 조합 사용이 가능하며 특히 영업 이익 때문에배유 및 배아 erating 해부 할 수 있습니다. 여기서 세부 SCBA 조립 절차를 우리.

이전 작업은 GA를 합성 할 수없는 돌연변이 종자 씨앗 (11, 12)에서 높은 ABA 축적의 결과로 발아 할 수 없음을 보여 주었다. 그것의 제거가 배아의 성장 (13)을 트리거하기 때문에, 발아 할 수없는이 씨 외투가 필요합니다. 이 강력 GA를 합성 할 수없는 종자의 배유가 배아의 성장을 차단하는 ABA를 발표합니다 지적했다. 따라서 우리는 GA와 ABA를 합성 할 수없는 씨앗 코트와 달리 SCBA에서 배아의 성장을 차단하는 GA를 합성 할 씨앗 코트가없는 것으로 예상된다. 여기에 우리가 사용 GA1-21 (솔크 삽입 라인 Salk_109115) GA 생합성 14 GA1에서 (SALK_109115 삽입 라인 (필수적이다 ENT-copalyl 인산 합성 효소를 코딩하는 GA1 유전자 (가입시 AT4G02780을) 중단 T-DNA 삽입을 들고 돌연변이 종자 골 생태형)는 솔크 신호 데이터베이스 ...

우리는 애기 장대 씨앗에서 씨앗 코트 침구 분석 (SCBA)를 조립하는 절차를 제시한다. SCBA는 유전자와 체외에서 탐색 할 수있는 강력한 도구가 될 수 있도록 표시 방식 휴면 종자의 빛 신호에 대한 응답으로 배유 컨트롤 종자 발아. SCBA는 배유가 배아의 성장에 영향을 미칠 것으로 의심되는 모든 상황에서 적용 할 수있는 원리입니다.

The Arabidopsis endosperm consists of a single cell layer surrounding the mature embryo and playing an essential role to prevent the germination of ...

본 실험 절차의 전반적인 목표는 다양한 환경 조건에서 배유가 rabbit opsis의 종자 발아를 어떻게 조절하는지 유전적 수준과 in vitro 수준 모두에서 탐구하기 위한 종피 베딩 분석(seed coat bedding assay)을 구성하는 것입니다. 이는 먼저 주사바늘과 절단된 포셉을 사용하여 Arab Opsis 종자에서 종피와 배를 조심스럽게 분리함으로써 수행됩니다. 두 번째 단계에서는 분리된 종피를 발아 배지로 조심스럽게 옮깁니다.다음으로, 종피를 하나의 원형 층으로 조립합니다. 마지막 단계에서는 배를 조립된 종피 층의 중앙에 배치합니다. 이 또한 하나의 원형 층으로 구성합니다.배젖은 아라비돕시스 씨앗의 종자 발아를 조절하는 데 필수적인 역할을 합니다. 종자 외피 굴곡 분석(seed coat bending assay)은 종자 발아 조절을 위해 배젖에서 작동하는 신호 전달 경로의 분자 유전학적 구성 요소를 식별하기 위한 인 비트로(in vitro) 유전 시스템 절차입니다. 일반적으로 배아를 손상시키지 않고 빠르게 분리해 내는 것이 어렵기 때문에, 이 방법이 처음인 사람들은 어려움을 겪습니다.재료의 연령 또한 고려하는 것이 중요한데, 이는 재료가 노화됨에 따라 세포 결정 능력을 상실하기 때문입니다. 먼저 성숙한 건조 상태의 Arabidopsis 종자 50~60 $\mu\text{L}$를 1.5 $\text{mL}$ 마이크로 원심분리 튜브에 붓습니다. 그런 다음 튜브에 70% 에탄올 1 $\text{mL}$를 넣고, 보텍스 믹서(vortex mixer)를 사용하여 상온에서 1,200 $\text{RPM}$으로 종자를 흔들어 줍니다. 10분 후, 4,000 $\text{G}$에서 3초 동안 튜브를 원심분리하여 종자가 튜브 바닥에 모이도록 합니다.그런 다음 진공 흡입 팁을 사용하여 에탄올을 조심스럽게 흡입하고, 튜브 바닥에 씨앗만 남깁니다. 이제 씨앗에 멸균 증류수 1 mL를 첨가하고, 다시 10분 동안 씨앗을 흔들어 줍니다. 씨앗을 다시 원심 분리하여 가라앉힌 후, 상층액을 흡입하고 튜브에 멸균 증류수 1 mL를 추가로 첨가하여 물의 흐름에 의해 씨앗이 튜브 전체에 균일하게 부유하도록 합니다.그 후 튜브를 랙에 세워 씨앗이 튜브 바닥으로 가라앉도록 합니다. 약 30초 후에, 씨앗을 플레이팅하기 위해 물을 조심스럽게 흡입하여 제거합니다. 먼저, 새로 조제한 50 °C의 발아 배지 30 mL를 100 mm 페트

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연구

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Biology

생물학

우리는 stomatal 차별화를 문서화, 개발 며칠 동안 표피의 공 촛점 이미징을위한 식물 cotyledons를 고정하기 위해 챔버 슬라이드 및 미디어를 사용하여 프로토콜을 설명합니다. 형광 태그 단백질은 세포 분열과 세포 형 차별화 중에 가능한 역할의 이해를 증가 표현과 subcellular 지방화에 의해 동적으로 추적 할 수 있습니다.

의 장기, 고해상도 공 촛점 시간 경과 영상<em&gt; Arabidopsis 떡잎</em발아시&gt; 표피

이 비디오는 애기장대 탈리아나 식물의 묘목 성장 억제 분석을 보여줍니다. 면역 펩타이드 유도체의 농도 증가가 묘목 성장에 미치는 영향이 결정됩니다.

묘목 성장의 면역 유도 억제 측정

우리의 개발 초기 단계에서 배아를 분리하는 효율적이고 간단한...

에서 초기 단계의 배아의 효율적이고 신속한 분리<em&gt; 애기 장대</em&gt; 씨앗

이 문서에서는 열대 응답 중 plasmodesmal 투과성 때문에 옥신 기울기를 제어하는​​ 유전자를 선별하기위한 방법을 설명합니다. 이것은 배축 트로픽 반응의 정도의 측정을 포함   애기 장대와 8-hydroxypyrene-1,3,6- trisulfonic 산 (HPTS)로드 그리고 마지막으로 callose 수준의 평가에 의해 plasmodesmal 투과성을 체크.

전략은 트로픽 응답에 Callose 매개 Plasmodesmal 게이팅의 역할을 확인하려면

여기에서 우리는 장사 표시 씨 스트립 및 테트라 졸륨 클로라이드 (TZ) 생존 능력 테스트를 사용하여 필드 조건에서 종자 생존, 발아 및 휴면을 평가하기위한 프로토콜을 제시한다.

이 필드 조건에서 종자 발아, 휴면 및 사망률을 평가하기위한 신뢰할 수있는 방법

이 프로토콜 embryogenesis 애기 에 난 허가 뒤에 현미경으로 배아 패턴 형성의 검사를 통해 관찰 하는 방법을 설명 합니다.

애기 에서 Embryogenesis를 특성화 하는 방법

이 연구의 목적은 메 마른 매체에 성장 범위의 애기 genotypes의 종자 발 아에 표 백제와 염소 가스 살 균의 효과 확인 했다. 최적화 된 살 균 프로토콜 제공 만족 스러운 씨 생존 하면서 오염 물질을 미생물의 성장을 방지 하기 위해 개발 되었습니다.

애기 씨의 높은 처리 살 균에 대 한 표준화 된 방법

부드러운 터치 포스 로딩 기계는 인간의 머리 브러시, 로봇 팔 과 컨트롤러에서 내장되어 있습니다. 헤어 브러쉬는 기계에 설치된 로봇 팔에 의해 구동되며 주기적으로 이동하여 식물에 터치 포스를 가합니다. 기계 구동 헤어 터치의 강도는 수동으로 적용된 터치의 강도와 비슷합니다.

모델 식물 애기장대 의 Thigmomorphogenesis의 연구를 위한 노동 절약 및 반복 가능한 터치 포스 신호 돌연변이 스크린 프로토콜

이 논문은 기공 발달을 제어하는 유전자를 특성화하기 위해 표피 껍질을 사용하지 않는 두 가지 표현형 방법을 설명합니다. 첫 번째 방법은 톨루이딘 블루 O-염색 식물 표피를 사용하여 기공 표현형을 분석하는 방법을 보여줍니다. 두 번째 방법은 기공 리간드를 식별하고 생물학적 활성을 모니터링하는 방법을 설명합니다.

표피 표현형 점수를 통한 기공 발달에 관여하는 유전자 식별

여기에서는 애기장대 묘목 탈에티올화의 초기 단계에서 엽록소 생합성 모니터링을 위해 설계된 고급 도구에 대해 설명합니다. 이 새로운 방법론은 높은 공간 및 시간 분해능에서 비침습적 실시간 엽록소 형광 이미징을 제공합니다.

애기장대 탈에티올화의 초기 단계 동안 엽록소 생합성 역학 측정을 위한 비침습적 분석

이 프로토콜은 Arabidopsis thaliana 종자에서 배유 세포층의 온전한 샘플을 준비하는 방법을 설명합니다. 이 방법은 주사 바늘 및 정밀 겸자와 같은 일반적인 실험실 장비만 필요하며 개발 중인 종자와 성숙한 종자 모두에서 배유 세포의 고해상도 형광 라이브 셀 이미징을 가능하게 합니다.

Preparation of intact tissue for microscopic analysis of the endosperm cell layer in Developing and mature Arabidopsis seeds(개발 및 성숙한 애기장대 종자에서 배유 세포층의 현미경 분석을 위한 온전한 조직의 준비)

배우세요 Arabidopsis thaliana 종자를 이용한 종피 침구 분석법으로 배젖이 종자 발아를 조절하는 메커니즘을 연구하는 방법입니다. 이 기술은 식물 유전학 및 발달 생물학 연구에 활용됩니다.

유전자 탐구하는 종피 침구 분석

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