헤로인은 절제 쥐의 추구에 장시간 음식 제한의 효과를 연구하기위한 절차

음식 제한 쥐에서 추구하는 약물의 강력한 확대의 데모를 허용하는 절차가 설명되어 있습니다. 헤로인 자기 관리 교육에 이어, 쥐들은 약간 제한하는 음식이 기간 동안, 마약없는 환경에서, 금욕 기간을 통해 이동합니다. 약물 추구는 다음 약물 관련 환경에서 테스트됩니다.

이 절차의 전반적인 목표는 금단 상태에서 실험실 랩에서 헤로인을 찾는 재발에 대한 만성 식품 제한과 같은 환경 조작의 영향을 연구하는 것입니다. 이것은 먼저 쥐의 경정맥에 정맥 주사 카테터를 외과적으로 삽입하여 회복 기간 후에 헤로인이 자가 투여될 수 있도록 함으로써 달성됩니다. 쥐는 10일 동안 조작 조절실에서 헤로인을 자가 투여하도록 훈련받는다.

절차의 다음 단계는 쥐를 동물 시설로 이송하고 음식에 대한 제한적 또는 무제한적인 접근을 받는 금욕 단계입니다. 마지막으로, 쥐는 조작 조절실로 되돌아가 헤로인 추적 테스트를 받는데, 여기서 헤로인 손상 레버에 대한 반응은 헤로인 전달이 없을 때 신호, 빛 및 톤의 활성화를 초래합니다. 궁극적으로, 만성적으로 음식을 제한하는 쥐 헤로인의 병력이 있는 자가 투여는 약물 복용 환경 및 약물 관련 단서에 대한 재노출로 인해 금단 조건에서 헤로인 추구가 크게 증가할 것입니다.

복원 절차와 같은 기존 방법에 비해 이 기술의 주요 장점은 인간 조건에서 관찰되지 않는 명시적 조작적 소멸이 없다는 것입니다. 더욱이, 만성 대 급성 조작의 사용은 인간 조건과 관련하여 더 큰 구성적 타당성을 허용합니다. 이 방법은 약물 및 음식 추구 행동의 기저에 있는 일반적인 신경학적 메커니즘과 같은 약물 중독 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다.

카테터는 대량으로 준비되며 장기간 사용하기 위해 멸균된 오토클레이브입니다. 카테터를 만들려면 먼저 탄성 튜브를 12cm 길이의 조각으로 자릅니다. 이쑤시개나 18게이지 바늘을 사용하여 카테터 끝에서 3cm 떨어진 곳에 작은 실리콘 한 방울을 떨어뜨립니다.

고압증기멸균하기 전에 실리콘을 24시간 동안 건조시키십시오., 고압증기멸균하기 전에 플라스틱 받침대에 직각으로 커넥터 역할을 할 5개의 위로 캐뉼라의 긴 튜브를 구부립니다. 수술 당일에 카테터를 조립하려면 스콜라스틱 튜브의 긴 쪽을 플라스틱 받침대의 절반 정도 떨어진 5개의 위로 캐뉼라의 구부러진 금속 튜브 위로 밀어 넣습니다. tigon 튜브와 혼합된 22게이지 바늘을 통해 5개의 업 튜브를 멸균 식염수로 채워진 1ml 주사기에 연결합니다.

막히지 않는 흐름을 보장하기 위해 카테터를 통해 식염수를 씻어냅니다. 먼저 면도를 하기 전에 동물을 마취하고 알코올과 수술용 스크럽으로 오른쪽 어깨와 머리 부위를 청소합니다. 건조를 방지하기 위해 눈에 젤을 바른 후 페니실린과 식염수를 주입하여 감염과 탈수를 예방합니다.

표준 기술을 사용하여 주변 조직과 분리된 외부 경정맥을 노출시킵니다. 정맥 아래에 구부러진 집게를 삽입하여 정맥을 들어 올리고 약간 늘리십시오. 정맥에 작은 V자 모양의 절단을 만들고 절단면을 열린 상태로 유지합니다.

혈관 확장기를 사용하여 카테터의 짧은 3cm 끝을 실리콘 방울이 절개 지점에 올 때까지 심장 쪽의 정맥으로 전진시킵니다. 세 개의 봉합사로 카테터를 정맥에 묶되 하나는 가능한 한 멀리 묶습니다. 하나는 실리콘 드롭으로 로스트레이트하고 세 번째는 가능한 한 멀리 로스트럴합니다.

카테터에 식염수를 통과시켜 막혀 있고 봉합사가 너무 꽉 조이지 않도록 합니다. 다음으로 쥐의 복부 쪽을 아래로 향하게 놓습니다. 머리를 절개하고 지혈제를 삽입하여 기저 조직에서 피부를 분리하고 피하 주머니를 만듭니다.

피부 아래의 지혈을 카테터가 삽입된 어깨의 개구부로 안내합니다. 결합 조직을 뚫고 5개의 위쪽 기저부 아래 가장 위쪽 지점에 카테터를 단단히 조입니다. 5개를 분리하고 카테터의 긴 끝을 피부 아래에 끼우고 머리 꼭대기에 있는 절개 부위를 빼냅니다.

가위를 사용하여 지혈이 고정된 곳 아래의 카테터를 자르고 5개의 위쪽 카테터의 긴 끝을 다시 부착합니다. 카테터를 5개의 금속 샤프트를 따라 플라스틱 받침대 통과 식염수까지 끝까지 당겨 자유로운 흐름을 보장합니다. 봉합사로 상처를 봉합한 후 쥐를 정위 기구에 넣는다.

노출된 두개골이 깨끗하고 건조되면 수동 드릴 비트를 사용하여 표면에 4-5개의 구멍을 뚫습니다. 그런 다음 기계 나사를 구멍에 삽입하여 헤드 캡의 비계 역할을 합니다. 나사 사이에 5개의 상향 커넥터를 끼우고 여분의 카테터 길이를 앞서 만든 피하 포켓에 밀어 넣습니다.

마지막으로 치과용 시멘트를 사용하여 두개골 상단까지 5개를 부착합니다. 시멘트가 완전히 건조된 후 입체 장치에서 쥐를 제거하고 완전히 회복될 때까지 모니터링합니다. 쥐는 조작 조절실에 개별적으로 수용됩니다.

선풍기가 장착된 소음 감쇠 칸으로 둘러싸여 있습니다. 두 개의 개폐식 레버는 오른쪽 측벽 바닥에서 9cm 위에 장착되며 각 레버 위에 큐 라이트가 있습니다. 톤 모듈은 액티브 레버 위에 배치되고 빨간색 하우스 라이트는 왼쪽 측벽의 상단 중앙에 배치됩니다.

음식과 물은 libitum에서 구할 수 있습니다. 약물 펌프는 금속 스프링으로 보호되는 액체 스위블과 타이곤 튜브를 통해 카테터에 부착됩니다. 헤로인 자가 투여는 수술 후 회복과 24시간 습관화 기간 후에 시작됩니다.

시작하려면 카테터를 헤파린 겐타마이신 용액으로 세척합니다. 다음으로 5 개의 업 커넥터를 Tigon 튜브에 연결하고 금속 스프링을 부착합니다. 암흑 단계가 시작될 때 활성 및 비활성 레버의 확장, 하우스 조명의 조명 및 Q 라이트 톤 콤플렉스의 활성화로 각 세션을 시작합니다.

30초 동안, 쥐들은 3시간 간격으로 나누어 3회 세션 동안 10일 동안 헤로인을 자가 투여할 수 있다. 활성 레버에 대한 응답으로 약물 펌프가 활성화되고 22번째 타임아웃 기간이 시작되며, 이 기간 동안 집 조명이 꺼지고 활성 레버 위의 Q 라이트 톤 콤플렉스가 활성화됩니다. 비활성 레버 응답이 기록되지만 프로그래밍 가능한 결과는 없습니다.

자가 관리 훈련 후, 조작 조절실에서 쥐를 제거하고 음식과 물에 대한 제한 없는 접근이 가능한 동물 시설에 개별적으로 수용합니다. 다음날 하루 동안 약물 세척 하루 동안, 포만감을 느낀 그룹에서 음식에 대한 무제한 접근을 유지하면서 금욕 기간을 시작하기 위해 식품 제한 그룹의 음식량을 줄입니다. 금욕 아침에 약물 추적 테스트를 수행합니다.

14일째, 쥐를 조작 조절 챔버로 되돌려 금속 스프링에 부착합니다. 1시간 또는 3시간 동안 활성 및 비활성 레버 반응이 약물의 가용성을 제외하고 자가 투여 교육과 동일한 결과를 갖는 세션을 허용합니다. 이러한 결과는 체중이 헤로인 전반에 걸쳐 안정적으로 유지된다는 것을 보여줍니다.

자가 관리 훈련 금욕 기간 동안 차우에 대한 접근이 제한없는 쥐는 체중이 증가하는 반면 음식이 제한된 쥐는 체중이 약 10-15 % 감소합니다.여기에서 볼 수 있듯이 주입 및 활성 레버 반응은 훈련 일 동안 증가한 반면 비활성 레버 반응은 그렇지 않았습니다. 금욕 기간 이후, 음식이 제한된 쥐에 대한 능동적 레버 반응은 포만감을 느낀 쥐에 비해 유의하게 증가했다. 비활성 레버 응답은 최소한이며 그룹 간에 비교할 수 있는 반면, 이 절차를 따릅니다.

두개내 주사, 미세 투석, 웨스턴 블로팅 및 면역조직화학 기술과 같은 다른 방법을 사용하여 특정 신경 화학 및 약리학적 시스템을 표적으로 삼을 수 있습니다. 이 비디오를 시청한 후에는 쥐의 경정맥에 정맥 카테터를 외과적으로 이식하는 방법과 표준 조작 조절 챔버에서 헤로인 자가 투여 절차를 수행하는 방법에 대해 명확하게 이해할 수 있을 것입니다.