카르 복실 산, 붕소 산, 그리고 아민의 정성 식별 십자형 형광체를 사용하여

이 절차의 전반적인 목표는 소위 십자형 기하학을 기반으로 하는 저분자 플로라 4를 사용하여 여러 화합물 부류의 분석물을 분석하고 정성적으로 구별하는 것입니다. 이는 먼저 여러 가지 다른 용매에서 이러한 십자형 센서의 용액을 준비하여 수행되며, 따라서 용매에 대한 의존성이 높은 방출을 활용합니다. 두 번째 단계는 이러한 용액을 카르복실산, 오닌산 또는 유기 아민을 포함한 관심 분석물에 노출시키는 것이며, 이는 고체 또는 용액으로 첨가될 수 있습니다.

다음으로, 결합된 센서 분석물 용액을 365나노미터 자외선 아래에서 조사하여 가시 영역에서 빛을 방출합니다. 이러한 발광 색상은 표준 디지털 사진 설정을 사용하여 촬영됩니다. 마지막 단계는 서로 다른 분석물 용액의 방출에서 정성적 차이를 감지하는 데 사용되는 방출 색상 패널을 생성하는 것입니다.

궁극적으로 이 형광 방법은 제약 및 식품 산업에서 일반적인 분석물을 신속하게 식별하는 데 유용할 것입니다. 크로마토그래피와 같은 기존 방법에 비해 이 기술의 주요 장점은 유도체 결정 없이 고극성 분석물을 직접 분석할 수 있다는 것입니다. 이 방법은 잘 정의된 조성이 진짜인지 또는 손상되었는지 여부를 신속하게 결정하는 데 사용할 수 있는 일상적인 품질 관리 분야에서 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다.

이 방법의 시각적 시연은 방법 자체가 광학 감지를 사용하고 궁극적인 적용으로 인해 비전문 작업자가 포함되기 때문에 매우 중요합니다. 이 절차를 시연하는 사람은 하이델베르크에 있는 Buns Laboratory의 Abel과 휴스턴 대학의 제 실험실의 Rio Color Lire입니다. 두 대학원생은 먼저 10밀리리터당 50밀리그램의 농도로 십자형 1부터 3까지의 신선한 원액, 디클로로 메탄을 준비하고 따로 보관합니다.

6개의 16ml DR 바이알에 500mg의 카르복실산 분석물을 넣고 16ml의 디클로로, 메탄, 에틸 아세테이트, 아세토니트릴 nn, 디메틸포름아미드, 이소프로필 알코올 또는 메탄올을 추가합니다. 다음으로, 각 바이알에 20마이크로리터의 십자형 스톡 용액을 추가하고 이질인 경우 바이알을 흔들어 해당 용액이 침전되도록 합니다. 뚜껑이 없는 바이알을 UV 램프 아래의 유리판에 놓고 카메라 렌즈와 샘플 바이알 사이의 거리를 60cm로 둡니다.

UV 램프를 켜고 실내 조명을 끕니다. 각 용액에 대해 0.25초에서 15초까지 노출 시간을 변경하여 사진을 촬영하여 반사 색상을 반영하는 이미지를 생성합니다. 그 후, 디 클로로 메탄에서 십자형 4의 음의 네 번째 어금니 용액에 1.0 곱하기 10을 준비하고 따로 보관합니다.

다음으로, 50mg의 분석물을 각각 3ml의 아세토니트릴에 용해시켜 각 오연산 분석물에 대해 5개의 개별 용액을 준비합니다. 1, 2, 4, 트리클로로, 벤진, 디클로로, 메탄, 시클로하이네, 클로로벤진. 각 분석물 용액 1.8ml를 5개의 10 x 10mm 석영 큐벳으로 옮깁니다.

그런 다음 미리 준비된 십자형 용액 20마이크로리터를 5개의 큐벳 각각에 추가하고 두 용액을 교반하여 균질화합니다. 강수량이 관찰되면 해당 용액이 가라앉도록 합니다. Q 수의사 5명을 모두 유리판에 놓고 위에서부터 조사합니다.

휴대용 365나노미터 UV 램프를 사용하여 방이 어둡고 카메라 렌즈와 큐벳 사이의 거리가 45cm이고 셔터 속도가 0.5초인 상태에서 용액의 발광 색상의 디지털 사진을 즉시 촬영합니다. 다음으로, 아세토니트릴 1 2 4, 트리클로로벤젠, 시클로헥산, 디클로로메탄 및 클로로포름에서 십자형 4의 음의 6몰 용액에 각각 80 밀리리터 이상을 준비하고, 각 십자형 용액 40 밀리리터에 2개의 6 DI 클로로필 온산 152.6 밀리그램을 용해시킨다. 각 십자형 용액 40 밀리리터에 97.6 밀리그램의 페닐 온산을 별도로 용해시킵니다.

그런 다음 원하는 아민 분석물 40mg을 각 오연산 십자형 용액 2밀리리터에 용해시킵니다. 각 아민 분석물에 대해 2개의 6 디 클로로필 온산이 포함된 5개의 용액과 페닐 온산을 첨가제로 사용하는 5개의 용액을 준비합니다. 10개의 준비된 용액의 부분 표본을 10개의 개별 석영 큐벳으로 옮깁니다.

두 개의 5개의 베트 세트를 유리판에 놓고 휴대용 UV로 365나노미터를 조사한 다음 이미지 처리 프로그램을 사용하여 앞에서 설명한 설정을 사용하여 즉시 사진을 찍습니다. 촬영된 각 바이알의 발광 색상의 디지털 사진에서 대표적인 정사각형 세그먼트를 잘라냅니다. 그런 다음 이러한 컷아웃을 여기에 표시된 것과 유사한 패널로 구성합니다.

방출 색상의 차이를 정량화하려는 경우, 패널에서 적색, 녹색, 청색 값을 추출한 다음 통계적으로 처리하여 한 분석물의 방출 색상이 다른 분석물에 비해 상대적으로 표준 편차를 얻을 수 있습니다. 다음 방정식을 사용합니다. 마지막으로, 방정식을 사용하여 미지의 카르복실산 분석물을 식별하고 6개의 서로 다른 용매에서 십자형 Fluor 1부터 3까지 사용하여 보정 데이터 세트의 모든 물질에 대한 미지의 분석물 간의 편차를 결정하기 위해 형광 반응은 그림에 표시된 카르복실산의 농도와 구조적 동일성에 따라 달라지는 것으로 나타났습니다.

다음은 모든 플로라 4 가지 용매 카르 복실 산 조합의 디지털 방식으로 기록 된 방출 색상입니다. 이 어레이는 분석물당 18가지 특징적인 방출 색상을 나타내며, 이는 방출 색상의 적록색, 청색 값을 사용하여 특성을 고유하게 분석하고 분석하는 데 사용할 수 있습니다. 모든 분석물은 카르복실산(1에서 10까지)을 기준으로 식별할 수 있으며 완전히 유사한 절차를 사용하여 여기의 자동 상관 관계 플롯에 표시된 대로 식별할 수 있습니다.

Onic acids B 1에서 B nine은 여기에 표시된 방출 색상 패널과 상관 관계 그래프에서 알 수 있듯이 십자형 4를 사용하여 서로 쉽게 구별됩니다. 아민의 분석은 과량의 오연산성 첨가제, 2 개의 6 디 클로로필 온산 및 페닐 온산을 함유 한 십자형 4의 2 개 형성 복합체를 사용하여 수행됩니다. 방출 색상이 순수한 십자형과 다른 이러한 복합체는 두 가지 방식으로 아민 분석물에 반응할 수 있습니다.

퓨린보다 더 기본적인 수단은 온산 첨가제로 십자형 4를 복합체에서 대체하여 순수하고 복잡하지 않은 십자형 4의 방출 색상을 재생합니다. 반면에, 덜 염기성 종은 십자형 오연산 복합체를 파괴하지 않고 결합하는 것으로 보이며, 이 사건은 복합체 형광 방출의 조절을 초래합니다. 따라서 대리 감지 방법론은 특정 임계값 이상의 분석물이 더 이상 서로 구별되지 않는 레벨링 효과를 특징으로 합니다.일단 마스터하면 이 기술을 제대로 수행하면 몇 시간 내에 완료할 수 있습니다.

이 동영상을 시청한 후에는 카르복실산, 바로니산 및 여러 가지 용매 세트에서 십자형 독감 force를 사용하는 간단한 설정을 사용하여 분석하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다. 유기 용제 및 UV 램프로 작업하는 것은 위험할 수 있으므로 항상 이 절차를 수행하여 환기가 잘 되는 방과 고글을 사용하는 등의 예방 조치를 취해야 한다는 것을 잊지 마십시오.