Name: 에서 항 정신병 약물의 작용 메커니즘을 공부하는 방법 예쁜 꼬마 선충 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-02-04T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 35 s
Description: 학습하세요 항정신병 약물이 Caenorhabditis elegans의 발달과 인두 펌핑에 미치는 영향을 평가하는 방법을. 동기화된 애벌레를 약물 처리 배지에 배양하여 발달 지연과 행동 변화를 관찰합니다. 이 기법은 약물 작용 기전 연구와 약리학적 선별에 활용됩니다.

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작품은 NIH 임상 과학자 개발 수상 K08NS002083, Shervert 프레이 연구소 그랜트, 에드거 A. Buttner에 NARSAD 젊은 탐정 수상에 의해 지원되었다.

1. 발달 지연 / 치사율 분석 : 야생형 (N2)와 두 개의 돌연변이 (Mut1 및 Mut2) 균주가 12 - 웰 플레이트에 세 클로자핀 농도 테스트 <ol><li> 1 일에 (2cm 직경 아니라 각) 12 - 웰 플레이트의 각 웰에 2 ㎖ NGM 매체 (10)을 부어 하룻밤 실온 (RT)에 벤치에 강화 할 수 있습니다. 같은 날, 하룻밤 220 rpm으로 회전에서 대장균 OP50 박테리아의 식민지를 선택 50 ㎖ LB 솔루션의 병을 감염, 그리고 37 ° C 통 문화를. </li><li> 2 일에, 각 웰 NGM의 중심에 20 μL OP50 박테리아 문화를 전송할 수 있습니다. 37 ° C 배양기에서 접시를 품어 또는 세균 잔디가 두껍게 성장 할 수 있도록 실온에서 밤새을 둡니다. </li><li> DMSO (디메틸 설폭 사이드) 용매에 클로자핀을 용해하여 80 mM의 클로자핀 주식 솔루션을 확인합니다. 그 후 1.7 mM의 아세트산 B에게 희석 원액과 80 ㎕의 작업 솔루션을표 1에 ased. 참고 : 관심의 특정 약물에 대한 작업 솔루션은 돌연변이 체에서 야생 유형을 구별하기위한 가장 적절한 농도를 찾기 위해 예비 농도 일련의 테스트를 수행하여 결정해야합니다. </li><li> 전송 80 μL 클로자핀 잘 시드 NGM 판에 솔루션을 작동 액이 표면에 균등하게 분배 할 수 있도록 판을 소용돌이 친다. 플레이트가 마를 때까지 기다립니다. 같은 날에 분석을 위해 플레이트를 사용하거나 다음 날 사용할 수 있도록 20 ° C의 배양기에 배치합니다. 참고 : 작업 솔루션은 특히 높은 농도로 인해 클로자핀의 낮은 용해도에 약 서스펜션입니다. 따라서, 약물 농도가 정확하다는 것을 보장하기 위해 약물 플레이트 용액을 전송하기 전에 튜브를 소용돌이. </li><li> M9 버퍼 많은 임신하는 성인을 포함하는 3.5 cm 플레이트 웜을 세척 한 다음 15 ㎖의 튜브를 스핀 다운1 분 동안 2,000 rpm에서. </li><li> 뜨는을 대기음. 5 ㎖ 표백제 용액 (: 차아 염소산 : NaOH를 4시 1분 5초에서 DDH 2 O)를 추가하고 부드럽게 튜브를 반전하여 선충을 방해. </li><li> 그 중 절반이 약 5 분에서 용해 될 때까지 동물을 관찰한다. 1 분 동안 2,000 rpm에서 계란을 스핀 다운. </li><li> 뜨는을 대기음 빠르게 14 ㎖의 M9 버퍼를 추가합니다. </li><li> 1 분 동안 2,000 rpm에서 계란을 회전 약 100 ㎕의 솔루션을 남겨 뜨는을 대기음. 계란을 일시 중단 소용돌이. </li><li> 전송 2 μL 달걀 전송 얼마나 많은 계란을 테스트 할 수있는 정기적 인 NGM 플레이트에 M9에서 일시 중단. 약 30 ~ 35 알을 각 전송에 있다는 것을 확인하기 위해 일시​​ 중단 된 계란의 볼륨을 조정합니다. 분석 플레이트의 각 웰에 30 ~ 35 알을 전송 한 후 24 시간 동안 20 ° C 배양기에서 배양한다. </li><li> 검정 첫날, 부화 계란의 개수 점수. picki에 의해 25/well에 부화 동물의 총 수를 조정필요한 경우 별도의 벌레를 겨. </li><li> 다음과 같은 일에, 동물을 관찰하고 그들에게 매 24 시간을 점수. 발달 단계는 동물의 크기 및 외음부 (11)의 형상에 기초하여 획득된다. 실험은 일반적으로 세 번째 또는 네 번째 날에 본 가장 강력한 효과 5-6 일을 지속. </li><li> Excel 파일에 입력 데이터와 실험의 매일 각 발달 단계에서 동물의 비율을 계산합니다. &#39;100 % 메뉴 &#39;&#39;2-D 열에서&#39;열 스택 기능을 그래프를 생성합니다. </li></ol> 2. 인두 양수 분석 : 야생형과 돌연변이 균주에 대한 젊은 성인 동물은 클로자핀 분석 플레이트에 채점 <ol><li> 분석 플레이트가 발달 지연 / 사멸 분석에 사용되는 동일한 프로토콜 뒤에 이루어진다. </li><li> 24 시간 분석하기 전에 시드 NGM 플레이트에 각 변형 50 L4 동물을 선택하고 20 ℃에서 벌레를 품어 </li><li> ASSA에 10 마리를 선택Y는 잘 접시. 그런 다음 잘 때마다 15 ~ 20 분에 10 마리를 선택합니다. </li><li> 첫 번째 잘 동물이 30 분 동안 약물에 노출 된 후, 해부 현미경으로 인두 펌프를 관찰하여 분석을 시작하고 20 초 9의 펌프를 점수. 인두 펌핑이 득점되면, 플레이트 떨어져 웜을 선택합니다. </li></ol>

<ol><li>Donohoe, D. R., Jarvis, R. A., Weeks, K., Aamodt, E. J., Dwyer, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+adaptation+in+C.+elegans+produced+by+antipsychotic+drugs+requires+serotonin+and+is+associated+with+calcium+signaling+and+calcineurin+inhibition%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci.+Res%22%5BJournal%5D)">Behavioral adaptation in C. elegans produced by antipsychotic drugs requires serotonin and is associated with calcium signaling and calcineurin inhibition.</a> Neurosci. Res. 64, 280-289 (2009).</li>
<li>Karmacharya, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clozapine+interaction+with+phosphatidyl+inositol+3-kinase+%28PI3K%29%2Finsulin-signaling+pathway+in+Caenorhabditis+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Clozapine interaction with phosphatidyl inositol 3-kinase (PI3K)/insulin-signaling pathway in Caenorhabditis elegans.</a> Neuropsychopharmacology. 34, 1968-1978 (2009).</li>
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<li>Kwok, T. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+small-molecule+screen+in+C.+elegans+yields+a+new+calcium+channel+antagonist%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A small-molecule screen in C. elegans yields a new calcium channel antagonist.</a> Nature. 441, 91-95 (2006).</li>
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<li>Karmacharya, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+effects+of+clozapine%3A+involvement+of+trace+amine+pathways+in+C.+elegans+and+M.+musculus%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Behavioral effects of clozapine: involvement of trace amine pathways in C. elegans and M. musculus.</a> Brain Res. 1393, 91-99 (2011).</li>
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</ol>

저자는 참여 관심 충돌이없는 것을 선언합니다.

여기, 우리는 C의 개발 및 행동에 APDS의 효과를 테스트하는 방법을 설명합니다 엘레. 약이 물에 상대적으로 불용성이기 때문에 DMSO 또는 에탄올, 클로자핀을 용해하는 데 사용됩니다. 용매는 C. 영향을 미치는 것으로보고되었다 있으므로 엘레 생물학 (12), DMSO 형 또는 에탄올 형 제어 그룹은 필수적이다. 우리의 분석에 사용 된 DMSO의 높은 농도는 C.에 명백한 영향을주지 않습니다 최대 3 %이며, 개발 엘레 간스. DMSO 심지어 많은 작은 분자, 또는 큰 분자, 예를 들면 지질 류에 사용될 수있다. 이러한 분석에 사용 된 APD 농도는 인간에게 주어진 것보다 더 높다. 이것은 C에서 가장 작은 분자 연구에 일반적입니다 elegans의 높은 농도는 C의 침투에 필요하기 때문에 표피 <...

예쁜 꼬마 선충은 대규모의 순방향 및 역방향 유전자 화면과 화학 유전 화면에 순종 간단한 유전 유기체이다. C. elegans의 생리 활성 화합물의 광범위에 민감하고, 따라서 이러한 화합물의 여러 가지의 작용 메커니즘을 정의하는 데 성공적으로 사용되어왔다. 예를 들어, 생체 활성 화합물은 웜 약물 유전학은 아세틸 콜린 수용체 작용제 (예를 들어 레바 미솔, 니코틴, morantel 및 pyrantel), 마취제 (예 : 할로 탄), 카페인, 콜린 에스 테라 제 억제제 (예 알디 카르 브, lannate 및 trichlorfon), 플루오 라이드, GABA-관련을 포함하여 연구 화합물 (예를 들어, GABA 및 muscimol), 이버 멕틴, 파라콰트, 포르 볼 에스테르, 세로토닌 관련 약물 (예, 세로토닌과 imiprimine) 3. 또한, C. 엘레하므로 대규모 저분자 스크린에 사용 된 새로운 생리 활성 화합물의 발견s 및 새로운 유전자 표적 4의 식별. C. elegans의 게놈은 신경 전달 물질의 합성과 시냅스의 구조와 기능 5에 필요한 단백질을 코딩하는 유전자를 포함하여 잠재적 인 항 정신병 약물 (APD) 인간의 보존 목표를 포함한다. 따라서, C. 엘레 neurogenetics와 APDS의 행동의 새로운 분자 메커니즘을 발견하기위한 신경 생물학 제공 방법. 선충에서 APD 노출은 개발 초기 발달 지연, 그리고 더 높은 농도에서 치사 2,6를 생성합니다. 성인기 동안 APD 노출 행동 표현형을 생산하고 있습니다. 예를 들어, 클로자핀 노출은 운동과 인두 펌프를 억제하고 1,2,7 누워 계란을 향상시킵니다. APD 유도 발달 지연 및 치사율은 대규모 화학 유전 스크린에 대한 강력한 표현형이다. 그들은 아마도 더 이상의 세포 및 유전자 BASI이 이러한 표현형은 지금까지의 복잡의. 따라서, 이러한 유전 스크린은 간접 약물 표적의 다양성을 수득 할 것으로 예상된다. 그러나, 우리의 실험실은 후보 유전자 화면과 APD 유도 발달 지연과 치사율의 억제를위한 게놈 전체의 RNAi 화면을 수행하고 성공적으로 가능성이 도파민, 인슐린 및 니코틴 아세틸 콜린 수용체 2,8 등의 직접적인 목표를 인코딩 유전자를 회복했다. 성인의 APD-유도 행동에 따라 유전 스크린은 새로운 APD 목표의 식별을 이끌고있다, 우리는 지금 포유류 7 발달과 행동 두 화면에서 대상의 유효성을 검사합니다. 따라서, APDS의 행동의 새로운 분자 메커니즘을 발견하는 무척추 화학 물질의 유전 방식은 5,8 가능한 것으로 보인다. C. elegans의 인두 (20) 신경 (20) 근육 세포 및 기저막에 의해 래핑 (20) 액세서리 세포를 포함하는 기관이다. 포유 동물의 심장과 유사하게, 인두는 자율입니다ND 지속적으로 외부 환경 9에서 음식을 펌프. 인두 펌핑 속도의 억제는 음식의 흡수를 저해하고, 따라서 돌연변이 또는 약물 인두 펌핑 원인 발달 지연을 억제하거나 9를 체포하는. APDS 개발과 생존의 1,2에 미치는 영향에 대한 부분에서 회계, 인두 펌핑 속도를 억제한다. 여기, 우리는 선충 개발 및 인두 펌핑 약물 분석을 설명하기 위해 예를 들어 전형적인 APD의 클로자핀을 사용합니다.

<table><tbody><tr><td>Clozapine</td><td>Sigma</td><td>C6305</td><td></td></tr><tr><td>Dimethyl sulfoxide (DMSO)</td><td>Sigma</td><td>D8418</td><td></td></tr><tr><td>Acetic acid (HAC)</td><td>Fisher</td><td>BP2401</td><td></td></tr><tr><td>Sodium hydroxide (NaOH)</td><td>EMD</td><td>SX0590-13</td><td></td></tr><tr><td>Hypochlorite</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>425044</td><td></td></tr><tr><td>Centrifuge 5810</td><td>Eppendorf</td><td>5810 000.017</td><td></td></tr><tr><td>인큐베이터 쉐이커</td><td>New Brunswick Scientific</td><td>M1246-0006</td><td></td></tr><tr><td>저온 인큐베이터 815</td><td>Precision Scientific</td><td>J1790-1B</td><td></td></tr><tr><td>실체현미경</td><td>Olympus</td><td>SZX12</td><td></td></tr><tr><td>페트리 접시 35 x 10 mm</td><td>Fisher Scientific</td><td>NC9434271</td><td></td></tr><tr><td>12-well Tissue Culture plate</td><td>BD Falcon</td><td>REF 353043</td><td></td></tr></tbody></table>

에서 항 정신병 약물의 작용 메커니즘을 공부하는 방법<em&gt; 예쁜 꼬마 선충</em

Methods for Studying the Mechanisms of Action of Antipsychotic Drugs in Caenorhabditis elegans

예쁜 꼬마 선충은 앞으로 대규모의 의무와 유전 화면과 화학 유전 화면을 반전 간단한 유전 유기체이다. C. elegans의 게놈은 신경 전달 물질의 합성과 시냅스의 구조와 기능에 필요한 단백질을 코딩하는 유전자를 포함하여 잠재적 인 항 정신병 약물 (APD) 인간의 보존 목표를 포함한다. APD 노출은 농도 의존적​​으로 발달 지연 및 / 또는 선충의 치사율을 생성한다. 이러한 표현형 1,2 펌핑 인두의 APD 유발 억제에 의해 부분적으로 발생합니다. 따라서, 개발 표현형 진통제의 약물 유전 학적 연구에 유용하고, 신경 근육 학 기초를 가지고 있습니다. 여기에서 우리는 선충 개발 및 인두 펌핑에 APD의 효과를 시험하기위한 세부 절차를 보여줍니다. 개발 분석의 경우, 동기화 된 배아는 선충의 성장 매체 APDS를 포함 (NGM) 접시, 및 애니을 개발하는 단계에 배치됩니다MALS 그런 다음 매일 채점됩니다. 인두 펌핑 속도 분석을 위해, 젊은 성인 동물 APDS를 포함 NGM 플레이트에 시험 무대. 단위 시간당 인두 펌프의 개수가 기록되고, 펌핑 속도가 계산된다. 이러한 분석법은 작은 분자 또는 큰 분자의 다른 많은 유형을 연구를 위해 사용될 수있다.

1. 발달 지연 / 주죠 분석 결과 발달 지연 / 주죠 분석의 전형적인 결과는도 1a에서 설명하고 1B된다. 컨트롤 그룹에있는 야생 형 동물이 임신하는 성인 단계 (그림 1a)로 성장했을 때, 클로자핀에 노출 된 야생 형 동물은 죽은 (그림 1b). 그림 1C는 비교 대표적인 결과를 보여줍니다 젊은 유생 단계에 아직도 또는이다 억제 돌연변이 (Mut1)와 세 가지 클로자핀 농도에서 야생 유형 증강 돌연변이 (Mut2). 세 클로자핀 농도에서, Mut1의 치사율은 야생형보다 낮은와 Mut2의 치사율은 높다. 생존 Mut2 동물 야생형에 비해 발달 지연을 표시하면서 생존 Mut1 동물, 야생 타입보다 더 진보 된 애벌레 단계로 진행. &lt;/ P&gt; <p class...

예쁜 꼬마 선충에서 항 정신병 약물 (APDS)의 효과를 테스트하기위한 접근 방법을 설명합니다. 분석법 개발과 생존에와 인두 펌핑 속도에 약물 효과를 테스트하기 위해 설명되어 있습니다. 이러한 방법은 APDS 이외의 다른 약 종류와 약물 유전 학적 실험에 적용 할 수 있습니다.

Caenorhabditis elegans is a simple genetic organism amenable to  large-scale forward and reverse genetic screens and chemical genetic screens. The C.  ...

이 절차의 전반적인 목표는 바다 엘간의 발달 및 인두 펌핑에 대한 항정신병 약물 효과를 조사하는 것입니다. 이것은 먼저 성체 선충의 개체군을 늘리고 그로부터 동기화된 동물 개체군을 생성함으로써 달성됩니다. 다음 단계는 동기화된 난자 또는 성체를 약물 레이스 분석 플레이트로 옮기는 것입니다.마지막 단계는 기생충에 대한 약물의 효과를 관찰하고 점수를 매기는 것입니다. 궁극적으로, 이 결과는 항정신병 약물이 약물에 노출된 동물의 발달을 지연시키고 인두 펌핑을 억제한다는 것을 보여줄 수 있습니다. 이 방법은 항정신병 약물의 작용 메커니즘에 대한 통찰력을 제공할 수 있지만, 다른 작은 분자 및 지질과 같은 큰 분자를 연구하는 데에도 적용할 수 있습니다.먼저 12웰 플레이트에 웰당 중간 크기의 NGM 2밀리리터를 로드합니다. 접시를 실온에서 굳히도록 따로 보관하십시오. 다음으로, OP 50 박테리아 군집을 선택하여 50ml 용량의 LB 배양액 병으로 옮깁니다.박테리아는 섭씨 37도에서 밤새 220RPM으로 흔들어 다음날 준비된 플레이트의 각 웰로 넣습니다. 박테리아 배양 20마이크로리터에서 플레이트를 다음 날 섭씨 37도에서 하룻밤 동안 배양하도록 설정합니다. 작업 농도에서 80마이크로리터의 관심 약물을 각 좌석에 잘 적재합니다.이 경우, 약물은 C 클로자핀입니다. 부분 표본을 복용하기 전에 용액을 와류로 처리하십시오. 용액을 소용돌이쳐 웰에 고르게 분포시키고 플레이트 뚜껑을 연 상태에서 실온에서 흡수되도록 합니다.그런 다음 분석을 진행하거나 플레이트를 밤새 섭씨 20도에서 보관하고 다음날 분석을 시작합니다. 관심 있는 유전자형에서 난자를 수집하는 것으로 시작합니다. GR 성인이 많은 벌레 개체군으로 시작하십시오.M nine 버퍼를 사용하여 3.5cm 접시에 기생충을 씻어냅니다. 그런 다음 15mm 튜브에서 2000RPM으로 1분 동안 스핀다운합니다. 흡인을 통해 상층액을 제거하고 5ml의 표백제로 교체하십시오.그런 다음 튜브를 뒤집어 성인을 부드럽게 방해하고 동물이 계속 용해되기 시작할 때까지 기다립니다. 스코프 아래에서 용해되는 벌레를 관찰하십시오. 벌레의 절반 정도가 녹았을 때.약 5분 후 튜브를 돌려 난자를 채취하고 상층액을 흡인한 다음 M nine buffer로 빠르게 교체합니다. 그런 다음 이전과 같이 튜브를 다시 회전시키고 약 100마이크로리터의 M nine 상층액을 제외한 모든 것을 제거합니다. 난자를 매달아 놓으려면 튜브를 소용돌이치십시오.그런 다음 2마이크로리터의 현탁액을 NGM 플레이트로 옮기고 옮겨진 난자의 수를 계산합니다. 그런 다음 약물 처리 플레이트에 웰당 30-35개의 알을 넣고 플레이트를 섭씨 20도에서 24시간 동안 배양합니다. 24시간이 지나면 부화한 알의 수를 점수로 매깁니다.25 개 이상의 벌레가 존재하면 여분의 벌레를 잘 제거하십시오. 접시에 있는 벌레를 인큐베이터로 되돌려 놓고 매일 24시간 간격으로 나중에 관찰하고 벌레의 크기와 외음부의 모양에 따라 우물에 있는 벌레의 발달 단계에 점수를 매깁니다. 강력한 효과는 일반적으로 3일과 4일째에 나타납니다.실험은 약 일주일 동안 지속되어야 합니다. 이 프로토콜의 경우 전날 이전에 설명한 대로 약물 테스트 플레이트를 준비하고 분석을 시작합니다. 실험에서 각 유전자형에 대해 50L의 4단계 동물을 선택합니다.NGM 플레이트로 옮기고 섭씨 20도에서 24시간 동안 플레이트를 배양합니다. 다음날, 15분에서 20분마다 한 그룹이 30분 동안 약물에 노출된 후 10마리의 동물과 함께 테스트를 잘 로드합니다. 해부 현미경으로 아기의 인두 펌프를 관찰하기 시작합니다.먼저 벌레를 찾은 다음 20초 동안 인두 펌프를 세십시오. 득점이 나오면 접시에서 벌레를 집어냅니다. 같은 방법으로 우물에 있는 모든 벌레에 점수를 매깁니다.실험 지연을 수행한 예상 결과입니다. 야생형 대조군을 사용한 치사율 분석은 무덤까지의 일반적인 성장률과 달리 성체 단계, c 클로자핀에 노출된 동물이 아직 어린 애벌레 단계에 있거나 다른 클로자핀 농도에서 돌연변이를 테스트한 결과 음소거 1과 같은 억제 돌연변이와 MU 2와 같은 인핸서 돌연변이가 밝혀졌다는 것을 보여주어야 합니다. 보편적으로 벙어리 1의 치사율은 야생형보다 낮았으며, MU 2의 치사율은 벙어리 1 생존 동물이 더 발달할 수 있는 대조군에 비해 예상대로 높았던 반면, 벙어리 2 생존자는 더 지연되었다.추가 검사에서 클로자핀 노출은 농도 의존적 방식으로 인두 펌핑 속도를 감소시키는 것으로 밝혀졌습니다. 그러나 음소거 1의 감소율은 야생형보다 낮았고, 음소거 2의 감소율은 야생형보다 컸다. 이 비디오를 시청한 후에는 소규모로 항정신병 약물 분석을 수행하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다.또한 이 메시지를 확장하여 대규모 유전자 스크리닝을 수행할 수 있습니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Neuroscience

신경과학

이 동영상은 선충류, C. 엘레간스의 신경 기능을 연구 보완 방법의 두 신경 자극, aldicarb 및 pentylenetetrazole (PTZ)을 고용하는 방법을 보여줍니다. 이 상호 보완적인 접근 방법은 또한 modulating의 연결 synchrony에 대한 evolutionarily 보존 메커니즘에 대해 설명해 주실 사용 간질과 발작에 대한 의미를 가지고있을 수 있습니다.

C. 엘레간스 시냅틱 전송 돌연변이의 약리 특성에 대한 패러다임

계란에서 웜 (EIW) 분석은 달걀 누워 행동을 정량화 할 수있는 유용한 방법입니다. 달걀 부설의 변화는 모델 유기체의 행동 반응 할 수...

에 박테리아의 효과를 측정<em&gt; C. 엘레</em계란 보존 분석을 사용하여&gt; 행동

여기에서 우리는 구리 혐오 행동의 변화와 일반적인 음식 공급원을 찾아내는 능력을 평가하기 위해 고안된 Caenorhabditis elegans 특이 적 검정법을 제시합니다. 유기체가 잘 먹는 것에서 굶주린 영양 상태로 진행되기 때문입니다.

에이<em&gt; Caenorhabditis elegans</em&gt; 영양 상태 기반 구리 혐오 검정

우리는 인구 기반 분석에서 가용성 화합물에 대한 선충류 인 Caenorhabditis elegans 의 선호도를 자동 분석 할 수있는 행동 기록 설정 및 프로토콜을 제시합니다. 이 기사에서는 비헤이비어 챔버의 구성, 동작 분석 프로토콜 및 비디오 분석 소프트웨어 사용에 대해 설명합니다.

선충 집단에 기반한 화학 감응도 선호 분석의 자동화 된 분석

C. 선 충 수 컷의 효율적인 칼슘 이미징에 대 한 적응된 "후 각 칩"를 사용 하 여 여기에 설명 되어 있습니다. 글리세롤과 페로몬에 남성 노출의 연구도 표시 됩니다.

남성 선 충 C. 머리 신경에 있는 페로몬에 대 한 응답에서 신경 활동의 이미징에 대 한 적응된 미세 후 각 칩을 사용 하 여

우리는 넓은 필드의 보기 선 충 추적 플랫폼 (WF-NTP), 꼬마 선 충의 큰 인구의 높은 처리량 phenotypic 특성을 가능 하 게를 사용 하 여 프로토콜을 설명 합니다. 이러한 프로토콜은 미묘한 행동 변화 돌연변이 체 긴장 또는 확장성 패션에서 약물 치료에 대 한 응답에서 특성을 사용할 수 있습니다.

자동화 된 행동 분석의 큰 C. 선 충 인구 넓은 시야의 사용 하 여 추적 플랫폼

이 연구는 C. elegans 복합 I 질병 가스-1(fc21)웜, 즉 ZebraLab (중간 처리량 분석) 및 WormScan (고처리량 분석)에서 두 개의 반 자동 운동 활동 분석 접근 에 대한 프로토콜을 제시하고 nematode 행동과 통합 신경 근육 기능을 정량화하는 광범위한 연구 방법 중 비교 분석을 제공합니다.

미토콘드리아 질환의 카노르하비티스 예르간 모델에서 동물 활동을 정량화하는 실험 방법의 비교 분석

여기에서, 우리는 폴리글루타민 응집, 뉴런 사멸 및 화학 회피 거동뿐만 아니라 다중 표현형의 예시적인 통합을 포함하는 예쁜꼬마선충에서 시험 화합물의 신경 보호 활성을 평가하기 위한 프로토콜을 제시한다.

Caenorhabditis elegans는 Polyglutamine-mediated Neurotoxicity에 대한 생리 활성 화합물을 발견하기위한 모델 시스템으로서의

이 기사에서는 스마트폰 및 발광 다이오드(LED) 라이트 박스와 같이 쉽게 구할 수 있는 품목을 사용하여 예쁜꼬마선충의 잔디 회피 행동을 기록하는 간단하고 저렴한 방법을 설명합니다. 또한 비디오 파일을 계산에 더 적합한 형식으로 처리하는 Python 스크립트를 제공합니다.

예쁜꼬마선충 잔디 회피 분석을 위한 스마트폰 기반 이미징 방법

개발 뇌 마우스로 유전자 전송 방법은 고유한 수술 방법과 전극의 특별한 모양을 사용하여 설명합니다. 이 독특한 기술은 두뇌 개발을 공부에 많은 도움이됩니다 neuroscientists temporally과 공간 플라스미드 DNA의 transfection 수 있습니다.

마우스 Utero에 Electroporation : 통제 Spatiotemporal 진 Transfection

학습하세요 항정신병 약물이 Caenorhabditis elegans의 발달과 인두 펌핑에 미치는 영향을 평가하는 방법을. 동기화된 애벌레를 약물 처리 배지에 배양하여 발달 지연과 행동 변화를 관찰합니다. 이 기법은 약물 작용 기전 연구와 약리학적 선별에 활용됩니다.

에서 항 정신병 약물의 작용 메커니즘을 공부하는 방법

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