Name: 파킨슨 병에서 감수성 메커니즘을 마스크를 해제하는 유전자 환경 상호 작용 모델 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-01-07T13:45:00.000+00:00
Duration: 8 min 9 s
Description: 배우세요 파킨슨병 관련 니그로스트리아퇴행에서 리폭시게나아이소자임의 역할을 LOX 결핍 마우스와 MPTP 신경독소 모델을 사용하여. 이 방법은 도파민성 신경보호 메커니즘을 연구하는 데 도움을 줍니다.

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이 작품은 건강 NIGMS 056062의 국가 학회에 의해 투자되었다.

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이 유전자 환경 상호 작용 연구의 디자인은 우리가 nigrostriatal 통로에 있는 5-LOX isozyme의 이중 본질에 관하여 새로운 정보를 얻기 위하여 허용했습니다. 5-LOX 이소지메와 그들의 야생형 쓰레기메이트가 결핍된 형질 성 전환기에서 식염수 또는 MPTP 처리 후에 striatal monoamines를 측정하기 위하여 HPLC를 수행해서, 우리는 그것의 결핍이 독성 조건하에서 보호되는 것처럼 보인다는 것을 주의할 수 있었습니다(그림 1),그러나 일반적인 조건하에서, 효소의 부족은 striatal 도파민 수준을 감소시키고 삭제될 수 있습니다. 따라서, 우리는 5-LOX isozyme정상 조건하에서 striatal dopaminergic 음색에 기여한다는 것을 증명할 수 있습니다, 그러나 독성 도전4다음손상에 기여할 수 있습니다.
추가 평가는 NIGrostriatal 독성에서 LOX isozymes의 역할에 새로운 ...

유전자 환경 상호 작용 모델의 사용은 특발성 파킨슨 병 (PD)에 영향을 미칠 가능성이 있는 위험 요소를 모방하는 접근법을 제공하고 유전적 또는 독성 시스템만1,2를사용하여 해명될 가능성이 없는 기계론적 통찰력을 분별할 수 있는 기회를 제공한다. 여기서 우리는 이 점을 설명하고 신경염증 및독성에대한 립산소증(LOX)의 선택성을 더 잘 이해하기 위해 니그로스트리아탈 변성3의 1-메틸-4-페닐-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘(MPTP) 마우스 모델의 적용을 설명한다. LOX isozymes에 대한 역할은 뇌졸중7 및 알츠하이머 병8,9를포함한 CNS 질환뿐만 아니라 말초 장애5,6에서 널리 평가되었지만, PD와 관련된 니그로스 트리아탈 기능 및 변성에서 이소지메의 가족의 역할은 잘 이해되지 않고 연구를 보증한다. MPTP 신경독소는 니그로스트리아탈 통로의 우대변성을 입증하고 PD환자(10)의운동장애를 뒷받침하는 스트루아탈 도파민 고갈 및 니그랄 도파민 세포 손실을 재구성한다. 이 모델은 비운동 및 모터 PD 행동과 솔직한 α-synuclein 양성 Lewy 신체 병리학의 전체 간부를 재현하지는 않지만, 111에 의해 안정적으로 nigral cell death를 생산할 수 있는 최고의 특성이 있는 비침범성 모델이기 때문에 nigrostriatal 손상및초기 단계 번역 테스트에 기여하는 새로운 기계성 표적을 해명하는 데 유용했습니다. 급성, 아급성에서 만성16-18에이르기까지 패러다임으로 MPTP 마우스의 광범위한 사용은 치료요법18,21,22에따라 다른 독성 메커니즘의 활성화와 함께19,20에서 심한 nigrostriatal 손상으로 가벼운 결과를 초래하는 투약의 표준화를 허용했다. 따라서, 이는23-25를활용한 치료제 또는 형질전환 모델에 따라 개선되거나 감소된 니그로스트라탈 손상을 초래할 수 있는 '병변의 창'을 허용한다.
또한 번역 및 발견 생물학 연구 결과에 필수적인 손상을 평가하는 데 사용되는 기술과 그러한 방법이 제공하는 증거입니다. MPTP 마우스 모델의 경우, 병변을 평가하기 위한 확립된 지표는 HPLC에 의한 도파민 및 대사산물을 포함한 현트리아탈 도파민의 마커, 티로신 하이드록실라제(TH), 도파민 합성의 속도 제한 효소 및 면역학적 인 비올레를 이용한 퇴행성 발생의지표이다. 이들은 고전적인 신경 화학, 생화학적, 및 조직학적 절차이지만, 기술은 nigrostriatal dopaminergic 통로 내의 손상의 정도에 중요하고 재현 가능한 판독을 제공하고, 독성의 메커니즘을 나타내며, PD의 퇴행성 사건을 이해하는 데 중요한 도구가 입증되었습니다.

<table><tbody><tr><td>1-메틸-4-페닐-1,2,3,6-테트라-하이드로피리딘 하이드로클로라이드(MPTP-HCL)</td><td>PD 모델링용</td> <td>시그마-알드리치</td><td>M0896</td></tr><tr><td>4% 포름알데히드(파라포름알데히드) 용액, 인산염 완충(PFA)</td><td>침지 고정을 위한</td> <td>American MasterTech Scientific</td><td>BUP0157</td></tr><tr><td>과염소산 ACS 시약, 70%(PCA)</td><td>HPLC 산 추출</td><td></td><td></td></tr><tr><td>을 위한 시그마-알드리치 244252조직</td><td>균질화를 위한</td>트리스 베이스 <td>시그마-알드리치</td><td>T1503</td></tr><tr><td>에틸렌디아미노테트라아세트산이나트륨염 이수화물(EDTA)</td><td>조직 균질화를 위한</td> <td>시그마-알드리치</td><td>E1644</td></tr><tr><td>프로테아제 억제제 칵테일</td> 조직 <td>균질화를 위한</td><td>시그마-알드리치</td><td>P8340</td></tr><tr><td>인산가수분해효소 억제제 칵테일</td><td>시그마-알드리치</td><td>P5726</td> 조직 <td>균질화를 위한</td></tr><tr><td>수산화나트륨(NaOH)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S5881</td><td>Lowry 단백질 분석용</td></tr><tr><td>자당, 분자 생물학, &ge; 99.5%(GC)&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S0389</td><td>동결 보호</td></tr><tr><td>인산염 완충 식염수, 분말, pH 7.4 (0.01 M PBS의 경우)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P3813</td><td>IHC</td></tr><tr><td>BCA 단백질 분석 키트</td><td>Pierce/Thermo</td><td>23225</td><td>단백질 측정용</td></tr><tr><td>Novex 12% Tris-Glycine Mini Gels 1.0 mm, 12-well</td><td>Invitrogen/Life Technologies</td><td>EC60052BOX</td><td>SDS-PAGE</td></tr><tr><td>NuPAGE LDS 시료 </td><td>SDS-PAGE</td>Novex Sharp Prestained Protein Standard용 버퍼 (4x)<td>Invitrogen/Life Technologies</td><td>NP0007</td></tr><tr><td>&nbsp;</td><td>Invitrogen/Life Technologies</td><td>LC5800</td><td>단백질 사다리</td></tr><tr><td>글리신</td><td>시그마-알드리치</td><td>G7126</td><td>SDS-PAGE</td></tr><tr><td>소듐 도데실 설페이트, 전기영동, 98.5% (SDS)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>L3771</td><td>SDS-PAGE</td></tr><tr><td>메틸 알코올, 무수, 시약&nbsp;</td><td>American MasterTech Scientific</td><td>SPM1057C</td> 염화나트륨 (NaCl) <td>전달용 메탄올</td></tr><tr><td>, ACS 시약</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S9888</td><td>식염수 및 완충액</td></tr><tr><td>무지방 분유 분말</td><td>Carnation</td><td>n/a</td><td>면역 블로팅</td></tr><tr><td>Ponceau S 용액 5% 아세트산&nbsp;</td>면역 <td>블로팅을 위한</td> <td>Sigma-Aldrich</td><td>P7170</td></tr><tr><td>Anti-Tyrosine Hydroxylase (TH), 양 polyclonal</td><td>Chemicon/Millipore</td><td>AB1542</td><td>를 위한 면역형광&nbsp;</td></tr><tr><td>안티-티로신 하이드록실라제(TH), 토끼 다클론</td><td>Pel-Freez Biologicals</td><td>P40101-0</td>, <td>면역 블로팅</td></tr><tr><td>항-&베타; Actin, 면역</td><td>블로팅</td>Anti-Glial Fibrillary Acidic Protein(GFAP)용 토끼 <td>Sigma-Aldrich</td><td>A2066</td></tr>, 면역형광 Anti-Glial Fibrillary Acidic Protein(GFAP)<tr><td>용</td><td>토끼 다클론</td><td>Chemicon/Millipore</td><td>AB5804</td></tr><tr><td>, 마우스 단클론</td><td>Covance Inc.</td><td>SMI-22R</td><td></td>은</tr><tr><td>Tween-20</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P1379</td><td>를 면역 블로팅하는</td></tr><tr><td>염소 Anti-Rabbit IgG (H+L), Peroxidase Conjugated를</td> 위한 것입니다.<td>Fisher Scientific</td><td>31462</td> 면역<td>형</td></tr>광 <tr><td>염소 항양, 과산화효소 접합</td><td>Pierce/Thermo</td><td>31480</td><td>면역</td></tr>형광 <tr><td>염소 항마우스, 과산화효소 접합</td><td>Pierce/Thermo</td><td>31430</td> 면역<td>형광</td></tr><tr><td>SuperSignal West Pico 화학발광 기판</td><td>Pierce/Thermo</td><td>34078</td> 면역<td>블로팅</td></tr><tr><td>CL-XPosure 필름 7 인치 x 9.5 인치&nbsp;</td><td>면역 블로팅을 위한</td> <td>Pierce/Thermo</td><td>34089</td></tr><tr><td>복원 웨스턴 블롯 스트리핑 버퍼&nbsp;</td>면역 <td>블로팅을 위한</td> <td>Pierce/Thermo</td><td>21059</td></tr><tr><td>구연산 일수화물, ACS 시약, &ge; 99.0%&nbsp;</td>시<td>그마-알드리치</td><td>C1909</td><td>IHC</td></tr><tr><td>노멀 당나귀 혈청</td><td>밀리포어</td><td>S30-100ML</td><td></td></tr><tr><td>IHC 폴리비닐피롤리돈(PVP)</td>용 <td>시그마-알드리치</td><td>P5288</td><td>IHC</td></tr><tr><td>소 혈청 알부민(BSA), 동결건조</td><td>시그마-알드리치</td><td>A3294</td><td>IHC</td></tr><tr><td>트리톤 X-100</td><td>피셔 사이언티픽</td><td>BP151-01</td><td>IHC</td></tr><tr><td>당나귀 안티-래빗 IgG, 알렉사 플루오르 568-라벨;</td><td>Invitrogen/Life Technologies</td><td>A10042</td><td>IHC</td></tr><tr><td>당나귀 안티-양 IgG (H+L), FITC&nbsp;</td><td>Jackson ImmunoResearch</td><td>713-095-147</td><td>for IHC</td></tr><tr><td>VECTASHIELD 하드-세트 마운팅 미디엄 DAPI</td><td>Vector Laboratories</td><td>H-1500</td><td>for IHC</td></tr><tr><td>Normal Goat Serum</td><td>Millipore</td><td>S26-100ML</td><td>for IHC</td></tr><tr><td>VECTASTAIN ABC Kit (Rabbit IgG )&nbsp;</td><td>IHC용 Vector Laboratories</td><td>PK-4001</td><td>; 10 &마이크로; l 1ml PBS 당 용액 A 및 B (지침 당)</td></tr> <tr><td>DAB Peroxidase Substrate Kit, IHC 용 3,3'-diaminobenzidine</td><td>Vector Laboratories</td><td>SK-4100</td><td>; 5ml 콜드 ddH2O 당 2 방울 버퍼 스톡 용액, 2 방울 DAB 및 1 드롭 H2O2 (H2 O2 사용 직전에 바로 추가)</td></tr><tr><td>과산화수소, 30%</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>216763</td><td>IHC</td></tr><tr><td>Rabbit anti-Iba1</td><td>Biocare Medicals</td><td>CP290A</td><td>에서</td></tr> 담금질 단계를 위한 IHC <tr><td>Cresyl Violet Solution, Regular Strength&nbsp;</td><td>FD Neurotechnologies</td><td>PS102-01</td><td>Iba1 IHC</td></tr><tr><td>95% 에탄올, 시약 알코올</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>R8382</td><td>IHC</td></tr><tr><td>100% 절대 에탄올</td> 탈수 <td>Mallinckrodt</td><td>7019-10</td><td>IHC</td></tr><tr><td>아세트산</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A6283</td><td>탈수 IHC</td></tr><tr><td>Xylene</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>534056</td><td>투명화 IHC</td></tr><tr><td>DPX 마운트</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>06522</td><td>마운팅 매체, DAB IHC</td></tr><tr><td>O.C.T. 컴파운드 - 냉동 섹션 임베딩 매체용&nbsp;</td><td>American MasterTech Scientific</td><td>EMOCTCS</td><td>저온 유지 절단 용 EMOCTCS embeddium 배지</td></tr><tr><td>과망간산 칼륨 과망간산 칼</td>륨 오염 제거 시<td>그마-알드리치</td><td>223468</td><td>DAB 용액</td></tr><tr><td>도파민 염산염</td><td>시그마 알드리치</td><td>H8502</td><td>HPLC</td></tr><tr><td>3,4-디하이드록시페닐아세트산(DOPAC)</td>용 <td>시그마-알드리치</td><td>850217</td><td></td></tr><tr><td>HPLC 호모바닐산(HVA)</td><td>용 시그마-알드리치</td><td>HPLC</td>과염소산(PCA)용 시그마-알드리치 <td>H1252</td></tr><tr><td>- 70%</td><td>HPLC</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>나트륨 인산이수소 일수화물</td>용 <td>시그마-알드리치 244252 HPLC</td><td></td>구연산 일수화물용 시그마-알드리치 <td>71504</td></tr><tr><td>HPLC용</td><td></td><td>시그마-알드리치</td><td>C1909</td></tr><tr><td>1-옥탄술폰산 나트륨 염(OSA)</td><td>HPLC용</td> <td>시그마-알드리치</td><td>O8380</td></tr><tr><td>EDTA</td><td>시그마-알드리치</td><td>E1644</td><td></td></tr><tr><td>HPLC 아세토니트릴</td><td>EMD</td><td>AX0145-1</td><td>HPLC</td></tr><tr><td>등급 탈이온수(ddH2O)</td><td>HPLC 0.22</td>&micro용 <td>밀리포어</td><td></td></tr><tr><td>; m GSTF 멤브레인</td><td>Millipore</td><td></td><td>여과용</td></tr><tr><td>Corning Netwells</td><td>Sigma-Aldrich CLS3477</td><td></td><td>폴리스티렌 인서트와 폴리에스터 메시 바닥, IHC</td></tr><tr><td>초음파 세포 파괴자용 (Soniprep 150)</td><td>MSE</td><td>MSE.41371.274</td><td></td></tr><tr><td>마이크로 원심분리기</td><td>Eppendorf</td><td>5414R</td><td></td></tr><tr><td>ESA MD-150 역상 컬럼&nbsp;</td><td>ESA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>HPLC 펌프(Ultimate 3000)</td><td>Dionex</td><td>ISO-3100BM</td><td></td></tr><tr><td>HPLC 자동시료주입기(Ultimate 3000)</td><td>Dionex</td><td>WPS-3000TSL</td><td></td></tr><tr><td>전기화학 검출기</td>, <td>ESA</td><td>Coulochem III</td><td></td></tr><tr><td>Guard Cell</td><td>ESA</td><td>5020</td><td></td></tr><tr><td>Analytical Cell</td><td>, ESA</td><td>5011A,</td><td></td></tr><tr><td>Chromeleon 소프트웨어</td><td>Dionex</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Eclipse E400</td><td>Nikon</td><td>E400</td><td>광/형광 현미경</td></tr><tr><td>일회용 마우스 케이지</td><td>Ancare</td><td>N10HT</td><td></td></tr><tr><td>마이크로 필터 상단</td><td>Ancare</td><td>N10MBT</td><td></td></tr><tr><td>5-LOX 결핍 마우스</td><td>The Jackson Laboratory</td><td>004155</td><td></td></tr><tr><td>12/15-LOX 결핍 마우스</td><td>The Jackson Laboratory</td><td>002778</td><td></td></tr></tbody></table>

파킨슨 병에서 감수성 메커니즘을 마스크를 해제하는 유전자 환경 상호 작용 모델

Gene-environment Interaction Models to Unmask Susceptibility Mechanisms in Parkinson's Disease

Lipoxygenase (LOX) 활동은 알츠하이머 병과 같은 신경 퇴행성 질환에 연루되었지만 파킨슨 병 (PD) 병기 발생에 미치는 영향은 덜 이해됩니다. 유전자 환경 상호 작용 모델은 단독으로 유전 적 또는 독성 질병 모델을 사용하여 관찰되지 않을 수 있는 독성에 있는 특정 세포 통로의 충격을 마스킹해제에 있는 유틸리티가 있습니다. 뚜렷한 LOX 이소지메스가 PD 관련 신경변성에 선택적으로 기여하는지 평가하기 위해,형질전환(즉, 5-LOX 및 12/15-LOX 결핍) 마우스는 장애에서 세포 손상과 사망을 모방한 독소로 도전할 수 있다. 여기서 우리는 PD와 관련된 신경 변성에 LOX isozymes의 뚜렷한 기여를 해명하기 위해 nigrostriatal 병변을 생성하는 신경 독소, 1-메틸-4-페닐-1,2,3,6 테트라 하이드로피리딘 (MPTP)의 사용을 설명합니다. 마우스에 MPTP의 사용, 비 인간 영장류, PD의 nigrostriatal 손상을 재현하기 위해 잘 설립된다. MPTP 유도 병변의 정도는 도파민의 HPLC 분석과 대사산물 및 티로신 하이드록실라제(TH)에 대한 스트리에이텀의 반정성 서양 얼룩 분석에 의해 측정되며, 도파민합성을 위한 속도 제한 효소이다. LOX 이소지메 선택적 감도를 입증할 수 있는 염증성 마커를 평가하기 위해, 글리아 세동 산성 단백질(GFAP) 및 이바-1 면역조직화학은 실질적인 니그라를 함유하는 뇌 단면에서 수행되며, GFAP 웨스턴 블롯 분석은 현저균질상에서 수행된다. 이 실험적인 접근은 nigrostriatal 변성 및 PD의 근본적인 유전자 환경 상호 작용에 새로운 통찰력을 제공할 수 있습니다.

이 독소 노출 패러다임은 MPTP- 대 식염수 주입 동물에서 중요하고 검출 가능한 20% 현저도 도파민 고갈을 생성할 수 있습니다. MPTP의 다른 제비는 약간 더 많거나 적은 병변을 얻을 수 있다는 것을 주의하는 것이 중요합니다; 따라서, 더 나은 정밀도를 위해, 신경 독소의 새로운 제비가 이용될 때 형질전환에서 사용하기 전에 야생형 마우스에 있는 예비 실험은 추천됩니다. 온화한 병변의 사용은 간질이 관찰될 수 있는 질유전자의 충격을 허용합니다; 심한 병변은 해로운 유전 적 변화의 효과를 가리기 위해 감쇠 또는 너무 손상에 너무 강력한 부상으로 '바닥 효과'를 생성 할 수 있습니다. TTP가 현저도 도파민에 미치는 영향은 5-LOX 이소지메 결핍 마우스에서 크게 달랐지만, 12/15-LOX 이소지메-결핍마우스(도 1)는아니었다. 더욱이, 이러한 방법으로, 우리는 식염수 처리 마우스의 5-LOX 결핍으로 인해 도파민 수준에 상당한 차이를 분별 할 수 있었다(도 1).<...

Lipoxygenase (LOX) isozymes 증가 또는 증가 시킬 수 있는 제품을 생성할 수 있습니다 또는 신경 염증 및 신경 변성. 유전자 환경 상호 작용 연구 LOX isozyme 특이적 효과 식별할 수 있습니다. 두 개의 LOX isozyme-결핍 형 형질 라인에서 니그로스트리아탈 손상의 1-메틸-4-페닐-1,2,3,6,6-테트라하이드로피리딘(MPTP) 모델을 사용하면 도파미너기크 및 염증에 대한 LOX 이소지메의 기여도를 비교할 수 있습니다.

Lipoxygenase (LOX) activity has been implicated in neurodegenerative disorders such as Alzheimer&#39;s disease, but its effects in Parkinson&#39;s disease ...

다음 실험의 전반적인 목표는 파킨슨병과 관련된 흑질선조체 퇴행에서 리폭시게나제 ISO 효소의 역할을 이해하는 것입니다. 이를 위해 흑질선조체(Nigro SAL) 병변을 유발하는 신경독소를 정밀하게 준비합니다. 그다음, 녹아웃 결핍 마우스에 MPTP 용액을 4일 연속 매일 주입하며, 마지막 주입 후 7일이 지난 시점에 관찰합니다.시료를 수집하여 생화학 또는 면역조직화학 분석에 사용합니다. 결과에 따르면 1215 locks는 흑질선조체 MPTP 독성에 영향을 미치지 않는 것으로 나타났습니다. 그러나 다섯 개의 locks는 독성 조건 하에서 손상에 기여합니다.TS 방법은 파킨슨병 분야의 핵심 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 유전자-환경 상호작용이 nistri 취약성에 미치는 영향이 무엇인지 제안하십시오. 유전자-환경 모델을 사용하여 ISO 선택적 기능을 식별할 수 있었으며 5가지 lipes의 이중성에 대한 통찰을 얻을 수 있었습니다.적절히 교육받은 인력은 다음 절차 전반에 걸쳐 적합한 개인 보호 장구를 착용해야 합니다. 먼저 신경독 솔루션 준비에 필요한 모든 계산을 수행하십시오. 다음으로, 필요한 모든 장비, 소모품 및 시약을 준비하십시오.또한, 잠재적인 유출 사고에 대비할 수 있는 재료를 준비하십시오. 저울 주변 영역을 패드나 종이 타월로 덮으십시오. 유출된 분말로 인한 위험을 줄이기 위해 10% bleach solution으로 적신 티슈와 10% bleach solution을 예방 차원에서 근처에 두십시오.준비가 되면 적절한 보관 장소에서 원료 바이알을 꺼내십시오. 유리 바이알에 MPTP, 농도 및 날짜를 기입하여 라벨을 붙이십시오. 흄 후드 내에 위치한 분석 저울을 사용하여 10% 표백제에 적신 티슈가 들어 있는 2차 밀폐 용기 내의 유리 바이알에 MPTP 50 milligrams를 정량하십시오.다음으로, 원액 바이알을 닫고 외부를 10% bleach로 천천히 닦아냅니다. 바이알에 13.763 milliliters의 멸균 식염수를 넣고 닫은 후, 후드 내에서 완전히 혼합합니다. MPTP 용액을 10% bleach에 적신 티슈가 들어 있는 2차 용기 내의 라벨이 부착된 주사 바이알에 조심스럽게 여과 및 멸균하여 옮깁니다.압력을 낮추기 위해 MPTP 여과 용액이 들어 있는 바이알의 캡을 약간 풉니다. 흘린 액체는 표백제에 적신 티슈로 닦아내고, 사용한 재료는 적절하게 라벨이 부착된 생물학적 위험 폐기물

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Research

연구

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Medicine

의학

일반적으로 파킨슨 병 및 운동 장애에 민감하고 안정적​​인 행동 분석은 새로운 잠재적 인 치료를 테스트하기 위해 필수적입니다. 여기, 우리는 흑질 선조체 시스템에 손상의 정도를 변화와 전임상 연구에 유용에 민감한 쥐를위한 감각 테스트의 관리 배터리를 설명합니다.

파킨슨 병의 마우스 모델에서 감각 기능의 평가

여기에서는 쥐의 증가된 크기와 무게를 수용하기 위해 MouseWalker 장치를 재설계하여 구축된 RatWalker 시스템에 대해 설명합니다. 이 시스템은 좌절된 전체 내부 반사(FTIR), 고속 비디오 캡처 및 오픈 액세스 분석 소프트웨어를 사용하여 보행 매개변수를 추적하고 정량화합니다.

파킨슨병의 유전적 쥐 모델에서 보행 분석을 위한 RatWalker 시스템 적용

이 기사에서는 7점 득점 시스템을 사용하여 C. elegans의도파민성 뉴런 원간 형태에 대한 변경 사항을 일관되게 정량화하는 방법을 소개합니다. 이 시스템은 유전, 화학 및 신경 퇴행성 질환의 노화 기반 모델을 활용한 도파민성 신경 변성 분석의 분석을 위한 것입니다.

Caenorhabditis elegans에서 도파민인체학 뉴런 형태 학적 변경 및 변성의 수준을 정량화

이 연구는 파킨슨 병의 전임상 모델에서 신경 염증, 신경 변성 및 운동 장애를 유도하는 데 필요한 벡터 용량과 노출 시간을 분석합니다. 인간 α시누클레인을 코딩하는 이들 벡터는 파킨슨병과 관련된 시누클레인 병리를 재분석하기 위해 흑질로 전달된다.

인간 α-시누클레인을 코딩하는 아데노 관련 바이러스 벡터에 의해 유도된 파킨슨병 마우스 모델 분석

이 프로토콜은 인간 중뇌 도파민 뉴런의 세포 배양에 이어 면역학적 염색 및 획득된 현미경 high-content 이미지에서 신경 세포 표현형 프로파일 생성을 설명하여 유전적 또는 화학적 조절로 인한 표현형 변이를 식별할 수 있습니다.

인간 줄기세포 유래 중뇌 도파민 뉴런의 표현형 프로파일링

이 프로토콜은 MPTP 처리된 제브라피시 유충에서 파킨슨병 유사 운동 및 비운동 결손을 평가하기 위한 행동 표현형 패러다임을 확립합니다.

행동 실험을 기반으로 한 제브라피시 유충에서 MPTP 유도 파킨슨 유사 행동 표현형의 표현형 프로파일링

생쥐의 중간 forebrain 번들의 일방적 6-OHDA의 병변을 수행하기위한 프로토콜이 설명되어 있습니다. 이 방법은 striatal 도파민과 90.63의&gt; 95 %의 손실을 보여주는 살아남은 동물의 89 %를 낮은 사망률 (13.3 %) ± -4.02 % 병변의 측면을 향해 ipsiversive 회전 편견을 가지고 있습니다.

파킨슨병의 일방적-6-OHDA lesioned 마우스 모델의 개발

L-DOPA를 사용하여 도파민 대체 약물은 파킨슨병에서 가장 일반적으로 사용되는 증상을 치료하지만, 불수의 이상 운동, 되나 운동 이상증을 포함한 부작용이...

파킨슨병의 Neuropeptides의 든 이미징 질량 분광법

인간의 피부 펀치 생검에서 섬유 아세포의 절편 배양 프로토콜은 낮은 통로 번호로 만 15-20 세포 은행을위한 4-8 주 이내에 피부 세포를 유도하기 위해 기술적으로 강력하고 간단한 방법입니다.

인간의 기본 섬유 아세포의 유도를위한 피부 펀치 생검 절편 문화

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파킨슨 병 분야에서 Mitochondrial Phenotypes을 모니터링하기위한 기본 인간 섬유 아세포의 사용

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파킨슨 병에서 감수성 메커니즘을 마스크를 해제하는 유전자 환경 상호 작용 모델

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