December 14th, 2013
야생 동물은 일반적으로 다양한 기생충에 의해 기생합니다. 기생충의 네 가지 주요 유형은 "회충"(선충), "가시 머리 벌레"(acanthocephalans), "흡충"(trematodes) 및 "촌충"(cestodes)입니다. 여기에서는 척추 동물에서 기생충을 수집하는 방법과 그들이 어떻게 보존되고 분류학적으로 식별되는지에 대해 설명합니다.
이 절차의 전반적인 목표는 야생 동물로부터 헬멧을 수집, 보존 및 식별하는 것입니다. 이것은 야생 동물인 첫 번째 부검에 의해 이루어집니다. 다음으로 헬멧은 다른 장기에서 수집 된 다음 나중에 식별 할 수 있도록 다양한 기술을 사용하여 헬멧을 보존합니다.
마지막으로, 투구를 지우고, 염색하고, 장착하고, 종을 식별합니다. 궁극적으로, 종 식별에 큰 도움이 될 수 있는 클리어링 및/또는 염색 기술을 통해 특정 헬멧 구조를 보여주는 결과를 얻을 수 있습니다. 이 방법은 포유류, 조류, 파충류 및 양서류의 헬멧을 식별하는 데 적용될 수 있습니다.
물고기와 같은 다른 유기체에도 적용할 수 있습니다. 먼저 동물을 평평한 표면에 놓고 돋보기를 사용하여 귀, 구강 및 눈을 포함한 모든 외부 개구부에 선충, CSE, 발가락 및 견인 동물의 존재 여부를 검사합니다. 날카로운 칼날이나 칼과 한 쌍의 해부 집게를 사용합니다.
복강을 절개하고 장기가 파열되지 않도록 주의합니다. 그런 다음 필요한 경우 뼈 절단기나 작은 휴대용 톱을 사용하여 흉강을 엽니다. 두 충치에 fal, 회충 및 큰 trematodes가 있는지 검사합니다.
그런 다음 식도의 시작 부분에 실을 묶고 대장 끝에 다른 실을 묶어 검사를 위해 합니다. 실체 현미경으로 심장과 주요 혈관, 기관 및 폐를 개별 페트리 접시로 분리합니다. 간, 담낭, 췌관, 비장, 신장, 방광을 제거하고 실체 현미경으로 검사합니다.
그런 다음 전체 소화 기관을 제거하고 각 부분을 유리 접시에 담습니다. 장기를 제거한 후 0.9% 식염수로 채워진 호스나 분무기를 사용하여 체강을 세척하고 106마이크로미터 메쉬 체를 통해 걸러낼 수 있습니다. 체의 내용물을 페트리 접시에 역세척하고 실체 현미경으로 내용물을 검사합니다.가위를 사용하여 Fal 벌레 또는 혈액 trematodes의 경우 각 소화관 섹션을 엽니다.
점막을 긁어내고 큰 기생충이 있는지 주의 깊게 검사하십시오. 엔칸토 세파스의 psci는 종종 장의 벽에 깊숙이 박혀 있습니다. 따라서 필요한 경우 집게 또는 작은 가위를 사용하여 조직에서 조심스럽게 놀립니다.
열린 각 부분을 흐르는 물에 놓고 내용물을 106마이크로미터 체로 씻습니다. 그런 다음 심장과 주요 혈관, 기관, 요로 및 담낭을 열고 내용물을 검사합니다.같은 방법으로 날카로운 칼날과 집게를 사용하여 간, 폐, 신장, 비장, 췌장 등 단단한 장기를 잘라내고 췌한 다음 내용물을 씻고 검사합니다. 기생충의 종류를 기록하십시오.
각 유형의 수와 그들이 발견되는 기관을 찾았습니다. 나중에 유전 연구를 위해 헬멧을 보존하기 위해 연필로 표시된 일반 색인 카드의 작은 조각을 넣어 바이알 또는 항아리에 라벨을 붙입니다. 먼저 에탄올에 직접 넣으십시오.
샘플을 하루에서 며칠 동안 고정한 후 장기 보관을 위해 70% 에탄올로 채워진 5ml 유리 바이알로 옮깁니다. Trematodes를 보존하려면 살아있는 표본을 유리 현미경에 놓고 식염수 한 방울을 밀어 넣고 유리 덮개 슬립을 바르고 식염수를 끓이지 않고 슬라이드를 화염 위로 통과시킵니다. 그런 다음 알코올, 포르민 아세트산 또는 FA가 들어 있는 페트리 접시에 슬라이드를 떨어뜨리고 덮개를 띄우십시오.
죽은 트레마토드를 FA 또는 10% 완충 포르민에 48시간 동안 고정한 후 장기 보관을 위해 70% 에탄올로 채워진 병에 옮깁니다. 에스토를 고치려면 페트리 접시에 살아 있는 동물을 끓는 물에 부어 이완시킨 다음 장기 보관을 위해 70% 에탄올이 채워진 병에 옮깁니다. 살아있는 엔칸토 세파를 주둥이가 완전히 사라질 때까지 1-몇 시간 동안 냉장고에 있는 수돗물이 담긴 페트리 접시에 넣어 이완시킵니다.
장기 보관을 위해 70% 에탄올로 채워진 병이나 FA로 옮깁니다. 작거나 깨지기 쉬운 선충을 죽이고 70% 에탄올을 뜨겁게 달궈 70% 에탄올과 5% 글리세린으로 채워진 항아리에 보존하여 죽입니다. 중형에서 대형 선충.
차가운 빙초산에 넣고 15분 후에 에탄올 70%와 글리세린 5%로 채워진 병에 옮깁니다. 헤마틴과 알코올을 용해하고 황산알루미늄암모늄을 물에 용해시켜 가열하여 Harris Hematin을 준비합니다. 두 용액을 섞고 끓입니다.
그런 다음 요오드산나트륨을 넣고 2-3분 동안 끓입니다. 용액이 냉각되면 5 41 여과지를 사용하여 용액을 여과하여 Harris Hematin 또는 semicon Carmine에 명백한 염색 Trematodes estos 및 디캔트 Cephas Place를 밤새 배치하여 샘플을 억류합니다. 장기가 보일 때까지 70% 산성 에탄올을 넣습니다.
des 염색을 중단하려면 검체를 최소 30분 동안 70% 염기성 에탄올로 옮깁니다. 에탄올 시리즈에서 샘플을 탈수하고 크실렌 또는 메틸 살리실레이트를 사용하여 투명하게 하여 현미경 슬라이드에 표본을 장착하고 캐나다 Bossum 한 방울과 커버 슬립을 추가합니다. 중소형 선충과 엔칸토 세파를 현미경 슬라이드에 락트 페놀 마운트에 넣고 15-30분 동안 커버 슬립으로 덮어 밤새 건조시킵니다.
80%페놀에 최대 60분 동안 둡니다. 광학 현미경으로 검사하여 culex atos를 검사하기 위해 더 작은 구조가 제거되었는지 확인합니다. 그것을 잘라 락토 페놀 양에 올려 놓으십시오.
현미경 슬라이드에서. 커버 슬립을 사용하여 culex를 스쿼시하여 rose stellar hooks를 측정하고 계산할 수 있습니다. 앞쪽 끝을 잘라내고 현미경으로 Foss에 장착합니다.
락 페놀 몇 방울 아래로 밀어 넣거나 글리세린 젤리에 넣어 영구적으로 장착하십시오. 광학 현미경으로 입 부분을 관찰하십시오. 대형 선충의 꼬리를 자르고 락토 페놀에 장착한 후 이 비디오에 설명된 방법을 사용하여 광학 현미경으로 수컷의 복부 파올리 및 스파이크 형태를 관찰합니다.
마스크 뒤쥐 삭스 시나리오의 헬멧에 대한 조사는 몬태나 주 미줄라 카운티에서 수행되었습니다. 2007년에서 2011년 사이. 총 56마리의 뒤쥐를 함정 덫에서 채취하여 죽은 후 2시간 이내에 조사했습니다.
전체 감염 유병률은 96%였으며, 두 마리의 뒤쥐만이 기생충이 없었습니다. 9종의 estos와 6종의 선충을 포함하여 15종의 투구가 확인되었습니다. Esto 속 포도상 구균 권위의 한 종은 이전에 설명되지 않았습니다.
감염된 것으로 밝혀진 장기에는 소장, 위, 폐, 방광 등이 있었다. 총 감염 강도는 감염된 숙주 당 7-234 마리의 기생충 범위였으며, 종의 풍부도 또는 감염된 숙주 당 헬멧 종의 수는 1에서 8 사이였으며 평균 4.1 일단 숙달되었습니다. 이 기술은 다람쥐와 같은 작은 포유류의 경우 1-2R, 너구리와 같은 큰 포유류의 경우 4-5R로 수행할 수 있습니다.
이 비디오를 시청한 후에는 야생 동물로부터 헬멧을 수집, 보존 및 식별하는 방법을 매우 잘 이해하게 될 것입니다.
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이 기사는 야생 동물에서 기생충을 수집, 보존, 식별하는 절차를 설명합니다. 이 과정에는 부검, 기관 샘플링, 그리고 분류학적 식별을 돕기 위한 다양한 보존 기술이 포함됩니다.