Name: 엔지니어링 섬유소 기반 조직의 면역 조직 및 제약 조건의 적용에서 생성하고 세포와 콜라겐 (재) 조직을 유도하는 스트레인 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-10-28T21:45:00.000+00:00
Duration: 12 min 13 s
Description: 배우세요 섬유소 기반 조직 공학 모델에서 실시간 콜라겐 재조직을 연구하는 방법을 인간 정맥 대은정 세포를 이용하여. 이 기법은 조직 수복과 섬유증 연구에 활용됩니다.

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본 연구는 생물 의학 재료 (BMM) 연구소의 연구 프로그램에서 수행되었다. BMM은 경제 업무, 농업 혁신의 네덜란드 교육부에 의해 cofunded 있습니다. Nederlandse의 Hartstichting의 재정적 기여 기꺼이 인정 받고 있습니다.

1. 인간 베나 Saphena 세포의 배양 <ol><li> SCHNELL 등으로 프로토콜에 따라 보조 자료를 사용하는 지침에 따라 기증자로부터 얻은 베나 saphena 마그나, 9.에서 세포를 분리하고 액체 질소에 이러한 저장합니다. 여섯 잘 플레이트 문화에 2 × 2 ㎜의 한 기증자 컷 조각의 대정 saphena 마그나의 부분에서. 잘 당 2 개를 사용합니다. 일반적으로 충분한 세포는 액체 질소 0.25 X 10 6 세포와 약 3 병을 채우기 위해 얻을 수 있습니다. HVSCs는 vimentin에, 최근 desmin의 어떤 표현 α 평활근 액틴 10을 표현하는 모집단의 표현을 표시하여, 면역 조직으로 특징입니다. 다음 세포의 수를 증가 액체 질소에서 세포를 해동 프로토콜을 시작합니다. </li><li> T75 조직 문화 플라스크에 한 병에서 세포를 배치하고 고급 DMEM 50 ML 태아 소 혈청 (FBS), 5 ML 페니실린 / 미팅 성장 매체 (GM)를 추가스트렙토 마이신 5 ML L-glutamax. 2~3일 모든 매체를 변경합니다. </li><li> 세포는 약 14 일 후에 합류 성장. 스토어 0.5 액체 질소에 한 병에서 x 10 6 세포는 통로 1이라고합니다. </li></ol> 참고 : 세포의 냉동 HVSCs을 수확 할 때 필요하지 않습니다,하지만 전적으로 저장하는 데 사용됩니다. <ol start="4"><li> T175 조직 배양 플라스크에 한 병에서 HVSCs를 놓고 GM을 추가합니다. 2~3일 모든 매체를 변경합니다. 세포는 약 7 일 이후에 합류 성장. 상점 3 액체 질소에 한 병에서 x 10 6 세포는 통과 2라고도합니다. </li><li> rollerbottle에 한 병에서 세포를 배치하고 GM을 추가합니다. 2~3일 모든 매체를 변경합니다. 세포는 대략 8 일 후에 합류 성장. 하나 rollerbottle은 약 20 ~ 30 × 10 6 세포를 포함하고 있습니다. 통과 6 문화 세포집니다. 세포의 표현형이 변경 될 수 있기 때문에, 통과 9보다 높은 통로의 셀을 사용하지 마십시오. </li></oL&gt; 2. 섬유소 기반 조직 구문 공학 <ol><li> 경화제 (10시 1분)와 탄성 중합체를 혼합하여 실리콘 접착제를 준비합니다. 벨크로의 7 개의 x 3mm 직사각형 세그먼트를 잘라. 십자가를 형성하고, 벨크로 스트립 사이에 3mm의 제곱 공간을 남겨 유연한 막과 6 잘 문화 판에 접착제 벨크로. </li></ol> 주 : 만 벨크로의 부드러운면을 사용하고이 쪽을 위쪽으로 직면하고 있습니다. 때 접착 벨크로 만 실리콘 접착제 벨크로 커버, 잘 걸쳐 접착제를 전파하지 않는다. 문화 플레이트 실리콘 막 바닥을 가지고 있기 때문에, 플레이트에 쉽게 접착을 보장하기 위해 유연한 세포막을 보강 웰 플레이트 아래에 뭔가를 사용합니다. <ol start="2"><li> 접착제의 경화을 보장하기 위해 60 ° C의 오븐에서 하룻밤 실리콘 접착제를 건조. 30 분 동안 우물과 부화에 70 % 에탄올을 첨가하여 살균. PBS로 3 배 씻어 아에서 모든 PBS를 제거LS와 벨크로. 30 분 동안 UV 밑에두고 사용할 때까지 멸균 유지합니다. </li><li> 조직 공학 GM으로 구성된 중간 (TM) 및 L-아스 코르 빈산 2 - 인산의 130 밀리그램을 준비합니다. </li><li> TM에 1 밀리그램 / ML ε-아미노 카프로 산 (ACA)를 추가합니다. ACA는 굴욕 (11)로부터 섬유소를 방지하기 위해 문화의 첫번째 7 일에 사용됩니다. 또한, aprotinin을 사용할 수 있습니다. </li><li> 덩어리 형성을 방지하기 위해, 피브리노겐은 오픈 전에 실내 온도에 도달 할 수 있습니다. 수풀 피브리노겐없이 더 쉽게 용해됩니다. ACA와 보충 10 ㎎ 실제 단백질 / ㎖ TM 7의 농도 섬유소를 용해. 살균 필터 피브리노겐 용액은 여러 개의 필터가 필요할 수 있습니다. 사용할 때까지 얼음에 저장합니다. </li></ol> 참고 : 너무 많은 거품 형성을 방지하기 위해 부드럽게 피브리노겐 혼합 용해. <ol start="6"><li> ACA와 보충 10 IU / ㎖ TM 7의 농도에 트롬빈을 녹입니다. 사용할 때까지 얼음에 저장합니다. </li> &lt;/ OL&gt; 참고 : 얼음 저장은 트롬빈과 섬유소의 조기 겔화를 방지하기 위해 필요합니다. <ol start="7"><li> GM과 개수에 resuspend을 세포를 Trypsinize. </li><li> 섬유소 기반의 조직 구조 (조직 공학 심장 판막 7 방법에 따라 농도) 시드 15 X 10 6 세포 / ML을 사용합니다. 단일 젤 100 μL GOF 엘, 따라서 1.5 X 10 6 세포로 구성되어 있습니다. 될 것입니다 젤의 수만큼 원심 분리기 튜브의 결과로, 하나의 원심 분리 관에 1.5 X 10 6 세포를 넣습니다. </li><li> 7 분 350 XG에서 세포를 원심 분리하고 상층 액을 버린다. 50 μl의 트롬빈에있는 세포를 resuspend을. 이 현탁액에 파란색 형광 폴리스티렌 마이크로 4 μl를 추가합니다. 유리 병에 피브리노겐의 50 μl를 넣습니다. 세포를 50 μL 트롬빈을 차지하기 위해 피펫을 사용합니다. 100 μL에 피펫의 볼륨을 높입니다. 트롬빈의 50 μL 솔루션을 피펫피브리노겐을 유리 병에 세포는 트롬빈과 섬유소를 혼합하고, 100 ㎕의 혼합물을 차지합니다. </li></ol> 참고 : 형광 폴리스티렌 마이크로는 이미지 분석을위한 내부 기준 마커로 사용됩니다. 혼합 트롬빈과 피브리노겐은 신중 혼합물을 pipetting하여 기포의 형성을 방지합니다. 기포는 섬유소 젤에 구멍 발생합니다. <ol start="10"><li> 에와 벨크로 스트립 사이에 젤 혼합물을 피펫. 섬유소 젤의 일반적인 겔화 시간은 한 구성 요소가 혼합되어, 20 초 순서입니다. </li></ol> 주 : 혼합물이 잘 판에 피펫되기 전에 겔화를 방지하기 위해 가능한 한 빨리이 작업을 수행합니다. 세포와 구슬을 사용하기 전에 연습합니다. <ol start="11"><li> ACA와 문화의 TM을 추가하기 전에 겔화 할 수 있도록 가습 95 % 공기 / 5 % CO 2 배양기에서 37 ° C에서 30 분 동안 현탁액을 품어. </li><li> 최초 7 일 ACA 2-3일 모든과 TM을 대체합니다. 일주가 ACA없이 배양 할 수 후 젤은 충분히 안정적이다. 첫 주 후 2-3 일마다 TM을 대체합니다. 잘 당 TM 6 ML을 추가합니다. 하루에 12 세포는 시각화를위한 충분한 콜라겐을 생산했다. </li></ol> 3. 스트레인 및 제약 조건의 적용 변형 유도를 변경 <ol><li> 정적 변형은 세포 견인 및 압축 12에 의한 직접 세포에 의해 적용됩니다. 콜라겐 조직 개편을 유도하기 위해, 조직이 한 방향으로 두 개의 벨크로 스트립에서 느슨한 구성 잘라. 단방향 제약 (그림 1A)이 발생합니다. 구조는 다음 안정 충분하고 콜라겐이 입금 된 이후, 12 일에이 문제를 수행합니다. </li><li> FlexCell의 FX4000T 시스템의 사용과 유연한 막과 문화 접시의 바닥에 진공을 적용하여주기적인 변형을 적용합니다. 로드 포스트 위에 (이는 일의 한 부분에베이스 플레이트에 플레이트를 놓고전자 주기적 로딩 장치). 펌프는 멤브레인 위에 진공을 적용하여 아래 누워 사각형 포스트에 막 가져옵니다. 조직의 십자가 모양의 첨부 파일로 인해 막 (벨크로 통해) 생성하고 직사각형 게시물 적용주기 변형 (그림 1B) 단축됩니다. </li><li> 처음에는 순환 변형 응용 프로그램이 6 일째에 시작하기 전에, 초기 기계적인 무결성을 달성하기 위하여 5 일 동안 정적 문화를 사용합니다. 진공 펌프 컨트롤러에 프로그램은 주기적 얼룩 프로토콜입니다. 예를 들어 일축 방향으로 13로, 이전에 설정된 간헐적으로 순환 변형 프로토콜을 사용합니다. 이 3 시간 휴식 기간과 교대로 3 시간의 기간 0 ~ 5 % 변형에 긴장 1 Hz에서와 사인파의 간헐적 인 긴장으로 구성되어 있습니다. 정렬 콜라겐 조직을 유도 7 일이주기적인 변형 프로토콜을 수행합니다. </li><li> 일반적으로 십이일 후 HVSCs은 정렬 된 콜라겐의 조직을 생산N. 정렬 콜라겐 조직에 도달하면, 원래의 변형 방향에 수직으로, 단축 주기적 변형 방향을 변경합니다. 90 ° 직사각형 게시물을 설정하여이 작업을 수행합니다. </li></ol> 4. 시각화 세포와 콜라겐 <ol><li> 세포 생존이나 콜라겐 형성을 방해하지 않는 프로브를 활성화 실시간 콜라겐 리모델링, 라벨 샘플을 시각화합니다. 찬란 세포의 세포질과 콜라겐 얼룩 프로브를 사용합니다. </li><li> 공 촛점 레이저 스캐닝 현미경을 사용하여 또는 차 고조파 세대 780 nm의 500-550 nm의 사이의 감지에 여기에자가 형광 14을 사용하여 콜라겐 구조를 시각화하는 데 사용할 수 있습니다. </li><li> 3 시간의 휴식 기간 동안 주기적으로 긴장 샘플, 설치 및 인큐베이터에서 배양 접시를 제거하고 세포와 콜라겐을 시각화하기 위해 공 촛점 레이저 스캐닝 현미경에 그 (것)들을 수송한다. </li></ol>

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</ol>

저자는 그들이 더 경쟁 재정적 이익이 없다는 것을 선언합니다.

세포 인구 섬유소 구조의 설명 모델 시스템은 세포와 콜라겐의 연구에 큰 잠재력을 가지고 (재) 조직 (드 Jonge 등. 15), 조직 공학의 목적으로 사용될 예. 초기 세포 캐리어로 섬유소를 사용하여 섬유소 분해 한 후, 조직은 세포와 내생 매트릭스에서만 생성됩니다. 이러한 방법으로, 세포 경계 강성 12 감지, 또는 변형 방지를 표시 수축력에게 16, 17을 적용하여, 자연, 정적 또는 주기적 중 하나를 변형에 반응하는 자극한다. 의의 : 콜라겐 (재) 조직 18 공부하기 전에 섬유소 구조가 사용되었습니다 있지만, 주기적 변형 및 / 적용하거나이 제시 방법으로 가능하다 둘 다 시간 경과 방식에서 구조를 공부하는 능력. 이 모델 시스템에 대한 제약 조건을 제공 벨크로 스트립, 19 전에 사용 된하지만이 기술 유연한 멤브레인 문화 ...

심장 혈관 조직은 탁월한 하중 기능을 가지고 있습니다. 세포 외 기질의 콜라겐 섬유의 특정 내용과 조직의 하중 특성에 기여하고 전체 조직의 힘 1을 지배. 조직 공학 구조물의 기계적 조절이 사용됩니다 - 일반적으로 (주기적) 긴장 요법으로 구성 - 조직의 조직과 기계적 성질 2,3을 향상 할 수 있습니다. 미리 정의 된 콜라겐 구조를 가진 조직을 만드는 복잡한 조직 형상의 변형에 의한 콜라겐 조직의 완전한 이해는 아직 달성되었다 아닙니다. 이 개발 조직에 콜라겐 리모델링 우리의 제한된 지식에 주로 때문입니다. 기존 모델은 주로 정적 변형률 4-6의 사용과 콜라겐 리모델링의 최종 그물 결과에 대한 정보를 제공합니다. 여기에 우리가 영향을 받아 3D로, 실시간 방식으로 콜라겐 (재) 조직의 연구를 할 수있는 고도 조정 가능한 모델 시스템을 제공정적 또는 주기적 변형. 조직 구조는 구조의 모든 콜라겐 내생 것을 보장 섬유소 기반으로하고 있습니다. 구조의 셀 콜라겐 조직은 시각, 그리고 내부 참조 시스템은 우리가 시간 경과 분석을위한 세포와​​ 콜라겐 구조를 재배치 할 수 있습니다. 이러한 세포는 기초하여 향상된 여분의 세포 매트릭스 생산 및 엔지니어링 심장 혈관 조직 7 매트릭스와 우리의 설립을 사용 개조 할 수있는 능력에 대한 알려져 있기 때문에이 프로토콜에서 우리는, 인간 베나 Saphena 세포 (HVSCs)를위한 모델 시스템의 사용을 설명합니다 드 Jonge 등. 8 일에

<table><tbody><tr><td>배양 플라스틱</td><td>Greiner</td><td></td><td>배양 플라스크 및 피펫 포함</td></tr><tr><td>Advanced DMEM</td><td>Gibco</td><td>12491</td><td></td></tr><tr><td>소 태아 혈청</td><td>Greiner</td><td>758075</td><td></td></tr><tr><td>페니실린/스트렙토마이신</td><td>Gibco</td><td>10378016</td><td></td></tr><tr><td>GlutaMax</td><td>Gibco</td><td>35050-079</td><td></td></tr><tr><td>엘라스토머 및 경화제</td><td>Dow 코닝 코퍼레이션</td><td>3097358-1004</td><td>실라스틱 MDX 4-4210#</td></tr><tr><td>벨크로</td><td>정규점</td><td></td><td>당신은 일반 상점에서 살 수 있으며, 부드러운 쪽만 사용하십시오.</td></tr><tr><td>Bioflex 배양 플레이트</td><td>Flexcell Int</td><td>BF-3001U</td><td>미처리</td></tr><tr><td>L-아스코르빈산 2-인산분해효소</td><td>시그마</td><td>A8960</td><td></td></tr><tr><td>&엡실론;-아미노 카프로산</td><td>시그마-알드리치</td><td>D7754</td><td></td></tr><tr><td>소 트롬빈</td><td>시그마</td><td>T4648</td><td></td></tr><tr><td>소 피브리노겐</td><td>시그마</td><td>F8630</td><td></td></tr><tr><td>0.45 주사기 필터</td><td>Whatmann (Schleicher and Scheul)</td><td>10462100</td><td></td></tr><tr><td>폴리스티렌 미세구</td><td>Invitrogen</td><td>F-8829</td><td>블루 형광, 10 &mu; m 직경</td></tr><tr><td>Flexcell FX-4000T</td><td>Flexcell Int</td><td></td><td>직사각형 로딩 포스트 포함</td></tr><tr><td>Cell Tracker Orange</td><td>Invitrogen Molecular Probes</td><td>C2927</td><td></td></tr><tr><td>CNA35-OG488</td><td></td><td></td><td>Eindhoven University of Technology 생물의학공학과 고분자 및 유기 화학 연구소에서 정심으로 제공</td></tr><tr><td>컨포칼 레이저 스캐닝 현미경</td><td>Carl Zeiss</td><td></td><td>LSM 510 Meta 레이저 스캐닝 현미경 및 이광자-LSM 모드</td></tr><tr><td>Amphotericin</td><td>Gibco</td><td>15290-018</td><td>세포 분리에 필요</td></tr></tbody></table>

엔지니어링 섬유소 기반 조직의 면역 조직 및 제약 조건의 적용에서 생성하고 세포와 콜라겐 (재) 조직을 유도하는 스트레인

Engineering Fibrin-based Tissue Constructs from Myofibroblasts and Application of Constraints and Strain to Induce Cell and Collagen Reorganization

콜라겐 함량과 콜라겐 조직 개발 조직은 지방 조직의 긴장과 조직의 제약 조건에 의해 영향을받을 수있다. 조직 엔지니어는 미리 정의 된 콜라겐 구조와 조직을 만들려면 다음 원칙을 사용하는 것을 목표로하고 있습니다. 최종 조직 구조를 제어하는​​ 콜라겐 리모델링의 정확한 기본 프로세스의 완전한 이해는, 그러나, 부족이다. 특히, 약간은 조직의 기계적 부하 조건 변화에 따라 콜라겐 섬유의 (재) 방향에 대한 알려져있다. 우리는 더 콜라겐을 명료하게, 이축이 제한된 근섬유-시드 섬유소 구조로 구성된 체외 모델 시스템을 개발 I 님의 질문에 (재) 방향) 단축 정적 하중 조건 및 II에 이축 복귀) 이축 - 제약의주기 단축 하중은 FlexCell의 FX4000T 로딩 장치의 사용과, 방향로드의 변화 전후의 구조. 시간 경과 공 촛점 이미징은 vi를하는 데 사용됩니다비파괴 방식으로 콜라겐 (재) 방향을 sualize. 구조의 셀 콜라겐 조직은 실시간으로 시각화 할 수 있으며, 내부 참조 시스템은 우리가 시간 경과 분석을위한 세포와​​ 콜라겐 구조를 재배치 할 수 있습니다. 모델 시스템의 다양한 측면은 세포의 소스 또는 건강하고 병에 걸린 세포의 사용과 같이 조정할 수 있습니다. 첨가물 예를 MMPs를 추가 또는 인테그린을 ​​차단하는으로, 더 메커니즘을 기본 콜라겐 리모델링을 명료하게 할 수 있습니다. 구조의 모양과 크기는 쉽게 세포와 콜라겐 (재) 조직을 연구하는 고도 조정 가능한 모델 시스템의 결과로, 특정 요구에 적용 할 수 있습니다.

이 모델 시스템은 배양 근섬유 - 시드 섬유소 젤 수 있습니다. 그림 1A 정적 이축 제약 조건 첫 번째 배양 조직을 보여줍니다. 조직의 제약 단축 정적 제약 조건을 만들려면 두 가지 조건에서 섬유소 젤을 절단하여 발표 및 조직 압축 및 후 개조 (그림 1A)입니다. 주기적인 변형의 경우, 조직은뿐만 아니라 정적 이축 제약 조건 하에서 배양한다. 후에 5 일주기 단축 스트레인은 (그림 1B) 적용 할 수 있습니다. 콜라겐 방향 전환을 유도하기 위해 일축 변형 방향은 수직 방향 (그림 1B)로 변경 될 수 있습니다. 젤 혼합물 마이크로 시드 (그림 2) 시간 경과 영상에 대해 미리 정의 된 위치를 재배치하는 데 사용되는 임의의 패턴을 표시합니다. 그림이 2A와 2C 세포, 콜라겐과 구슬의 이미지를 보여줍니다. 이와 같은 이미지는 3 일을 <stron...

이 모델 시스템은 비파괴 방식으로 내생 콜라겐 (재) 조직 리얼 타임으로 공부하는 데 사용할 수있는 근섬유 채워진 섬유소 젤에서 시작됩니다. 모델 시스템은 서로 다른 세포 소스, 중간 첨가제와 함께 사용할 수있는, 매우 조정할 수 있으며, 특정 요구에 쉽게 적용 할 수 있습니다.

Collagen content and organization in developing collagenous tissues can be influenced by local tissue strains and tissue constraint. Tissue engineers aim ...

이 절차의 전반적인 목표는 세포 및 콜라겐 재구성을 연구하는 데 사용할 수 있는 피브린 기반 구조체를 제작하는 것입니다. 이를 위해 먼저 공여 조직에서 인간 복제정맥 세포를 분리하고 배양하여 증식시킵니다. 다음 단계는 유연한 막 위에 벨크로 스트립을 부착하는 것입니다.6-웰 플레이트 바닥에 벨크로 스트립을 배치하여 중앙에 구조체가 들어갈 정사각형 공간을 만듭니다. 다음으로, 피브리노겐, 트롬빈, 세포 및 형광 표지 비드 혼합물을 벨크로 스트립 사이의 공간에 첨가하고 중합시켜 겔을 형성합니다. 마지막 단계로, 구조체에 단축 주기적 변형을 가하거나 정적 변형을 해제하여 세포를 조건화하고 정렬된 매트릭스 형성을 유도합니다.벨크로 포스트에서 피브린 겔을 한 방향으로 트리밍함으로써 작업을 수행합니다. 최종적으로, 공초점 현미경을 사용하여 시간에 따라 구조물을 모니터링함으로써 세포 및 콜라겐 재구성의 변화를 설명하는 결과를 얻을 수 있습니다. 이 방법은 서로 다른 세포 유형에 의한 콜라겐 형성 및 재배향 속도와 관련된 콜라겐 리모델링 분야의 핵심 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다.먼저, 재료의 2차 이용 지침에 따라 대정맥(venous saana magna)에서 인간 공여자 조직을 확보하십시오. 그런 다음 Schnell 등의 프로토콜에 따라 조직에서 인간 정맥 사펜스 세포(human venous saphenous cells, H VSCs)를 분리하여 액체 질소에 보관하십시오. 필요할 때, 250,000개의 급속 해동된 H VSCs가 담긴 바이알 하나를 15 milliliters의 예열된 성장 배지가 들어 있는 T 75 플라스크에 넣어 세포를 증식시키십시오.Advanced DMEM 440 mL, 소태아혈청(FBS) 50 mL, 100X Pen-Strep 5 mL, 그리고 200 mM L-glutamax 5 mL로 구성된 배지를 준비합니다. 세포가 confluent 상태가 될 때까지 약 2주 동안 2~3일마다 성장 배지를 교체합니다.세포가 완전히 confluence 상태가 되면, trypsin을 사용하여 계획된 실험에 충분한 세포 수가 확보될 때까지 계대 배양 9대까지 수확 및 분할하십시오. 각 construct 당 약 1.5 million cells가 필요합니다.충분한 수의 세포가 증식되면, 90% confluence 상태에서 수확한 후 성장 배지에 15 million cells per milliliter 농도로 현

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Bioengineering

생명공학

여기, 우리는 콜라겐 기반 조직 골격 myoblasts를 포함하는 구성의 제조를 보여줍니다. 이러한 3 - D 설계 구조는 조직을 바꾸거나 수리하는 데 사용할 수...

Myogenic 엔지니어링된 조직 구조의 제작

우리는 신생아 cardiomyocytes 및 조직 공학을위한 섬유소의 히드로겔 구조의 캡슐에 대한 세포의 준비의 절연을 설명합니다. 우리는 전기 자극 및 세포 생존과 immunohistological 얼룩에 따라 생성되는 활성 강제를 포함하여 문화 시대 이후 조직 공학 m​​yocardium을 분석하는 방법을 설명합니다.

심장 조직 공학을위한 섬유소 히드로겔에 Cardiomyocytes의 캡슐

이 프로토콜은 자신의 주변의 세포외 기질에서 발표가 되려면 여러 phenotypes로 차별화에 시달릴 수도 줄기 세포의 고유 기능을 활용에 초점을 맞추고 있습니다. 이 방법 원고는 동시에 지방 파생 줄기 세포를 공동으로 차별화하는 데, PEG-섬유소와 콜라겐으로 구성되어 bilayered 히드로겔을 활용 모델, 우리의 설명 및 특성을...

ASC의 분화를 제어하는​​ Bilayered 히드로겔 꾸민

시간 경과 현미경 검사법과 이미지 처리 기술은 48시간 동안 환경적으로 통제된 생물 반응기에서 섬유아세포 매개 젤 다짐 및 피브린 섬유 재정렬을 관찰하고 분석하는 데 사용되었습니다.

섬유아세포 매개 피브린 겔 다짐 관찰 및 정량화

이 연구에서는 콜라겐, 평활근 세포 및 내피 세포를 직접 배양하여 살아있는 혈관 조직을 신속하게 만드는 기술을 제시합니다. 또한 엔지니어링된 혈관 조직의 기계적 특성화를 위한 새로운 프로토콜이 설명됩니다.

혈관 조직 재생을위한 엔지니어링 3D Cellularized 콜라겐 젤

우리는 3 차원 구조물이 인간의 운동 조절 혈청으로 처리되고 콜라겐 함량, 기능 및 세포 생화학을 분석 한 인대 조직 모델을 제시합니다.

운동 조건의 혈청을 이용한 인대 구조의 치료 : Translational Tissue Engineering Model

이 백서는 전기장(EF)에 노출된 섬유성 전도성 물질의 유한 원소 모델을 구축하기 위한 전략을 제시한다. 모델은 이러한 재료에서 시드된 세포가 스캐폴드의 구성 재료 특성, 구조 또는 방향을 변경하는 영향을 수신하고 평가하는 전기 입력을 추정하는 데 사용할 수 있습니다.

셀룰러 전기 미세 환경의 유한 요소 모델링

여기에 제시된 프로토콜은 기계학 연구, 질병 모델링 및 스크리닝 애플리케이션에 적합한 이중 극이 있는 다중 우물 판에서 48개의 조직의 병렬 배양에 대한 엔지니어링 된 결합 조직을 생성하는 프로토콜입니다. 프로토콜은 다른 장기와 종에서 섬유 아세포와 호환되며 인간의 기본 심장 섬유 아세포와 함께 여기에 예시됩니다.

섬유아세포, 선별 애플리케이션을 위한 인간 공학형 결합 조직

다음 프로토콜은 광범위한 조직 공학 응용 분야에 적용할 수 있는 나노 스케일 패턴의 섬유소를 가진 콜라겐 하이드로겔 제조를 위한 전단 기반 압출 방법을 제시합니다.

조직공학을 위한 Nanofibrillar Patterned Collagen 생산

용융 전기방사 쓰기(MEW), 폴리카프로락톤(PCL) 스캐폴드 및 피브린 하이드로겔을 hiPSC 유래 심근세포 및 섬유아세포와 결합한 3D 심근 조직을 생성하기 위해 재현 가능한 방법이 제시됩니다. 이 기술은 스캐폴드 아키텍처를 정밀하게 제어하며 전임상 약물 테스트 및 심장 질환 모델링에 적용할 수 있습니다.

폴리카프로락톤 골격 및 hiPSC 유래 심장 세포의 용융 전기방사 쓰기를 사용한 3D 인간 심근 조직 생성

배우세요 섬유소 기반 조직 공학 모델에서 실시간 콜라겐 재조직을 연구하는 방법을 인간 정맥 대은정 세포를 이용하여. 이 기법은 조직 수복과 섬유증 연구에 활용됩니다.

엔지니어링 섬유소 기반 조직의 면역 조직 및 제약 조건의 적용에서 생성하고 세포와 콜라겐 (재) 조직을 유도하는 스트레인

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