Name: 양에서 비정형 및 고전적인 스크레이키를 감지하는 임상 시험 프로토콜 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-01-19T14:00:00.000+00:00
Duration: 13 min 42 s
Description: 학습하세요 양과 염소의 비정형 및 고전적 스크레이피를 임상 검사 프로토콜로 감지하는 방법입니다. 이 방법은 행동 평가와 신경학적 검사를 통해 조기 발견에 도움을 줍니다.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

동물을 제공하는 연구는 식품, 환경 및 농촌 부와 유럽 연합 (EU TSE 참조 실험실의 자금 지원을 통해)에 의해 지원되었다. 우리는 프로젝트 관리자, 박사 .M 시몬스와 박사 .M 제프리의 지원을 인정합니다.

1. 자세 평가
<ol><li>방해받지 않고 동물의 자세를 평가합니다.</li>
	<li>TSEs에 의해 영향을 받는 동물 은 넓은 기반 사지와 함께 서 있을 수 있습니다., 구부러진 나타날 수 있습니다., 또는 낮은 머리 마차와 함께 서 있을 수 있습니다.</li>
</ol>2. 행동 평가
<ol><li>동물의 행동, 혼자 남겨둘 때, 접근했을 때, 그리고 처리될 때를 연구한다.</li>
	<li>TSE에 영향을 받는 동물은 다른 양과 별도로 서 있거나 다른 양을 즉시 따르지 않음으로써 변경된 메지먼트를 표시할 수 있습니다.</li>
	<li>동물이 접근하면 도망치고 붕괴되거나 처리 시 바닥으로 붕괴될 수 있습니다. 반박 시계 방향 또는 시계 반대 방향으로 순환 비정형 스크레이피와 양에서 볼 수 있습니다.</li>
</ol>3. 위협 대응 테스트
<ol><li>위협 반응의 테스트를 위해 동물의 머리를 잡고 : 손이나 여러 손가락을 동물의 각 눈으로 여러 번 움직여 깜박임 반응을 유도하지만 얼굴 털을 만지거나 동물이 깜박일 수있는 공기 난류를 만들지 않도록주의하십시오.</li>
	<li>위협 반응은 스크레이피에 감염된 동물, 특히 비정형 스크레이피가 있는 양에 없을 수 있습니다. 위협 반응의 시험은 프로토콜의 일부로 사용되는 유일한 두개골 신경 테스트이지만,이 절차 동안 얼굴의 육안 검사는 일반적으로 스크레이피에서 볼 수없는 신경 학적 적자의 다른 징후를 공개 할 수있다, 예를 들어 안면 마비. 동물이 위협에 반응하여 깜박이지 않으면 눈꺼풀을 만져서 동물의 깜박임 무능력이 안면 마비로 인한 것이 아니라는 것을 확인하여 팔페브랄 반사를 테스트하는 것이 좋습니다.</li>
</ol>4. 스크래치 응답 테스트
<ol><li>시험이 어려움을 겪고있는 동물에서 해석 될 수 없기 때문에이 절차 중에 동물이 진정되었는지 확인하십시오.</li>
	<li>흉부, 요추 및 천정 부위의 뒤쪽의 스크래치 영역이 각 긁힘 에피소드 사이에 일시 중지됩니다.</li>
	<li>동물이 리듬 헤드 또는 신체 움직임으로 반응하거나 특정 영역의 긁힘 시 입술을 움직이거나 핥는 경우 스크래치 검사를 반복하여 스크래치 반응의 재현성을 확인합니다.</li>
	<li>반복 가능한 반응은 일반적으로 스크레이피의 소뇨 형태를 가진 고전적인 스크레이피 또는 염소를 가진 양을 포함하는 소뇨되는 동물에서 유도됩니다, 그러나 그밖 소뇨성 피부 조건 또는 자궁 내학이 존재하지 않는 한 비정형 스크레이피를 가진 양에 일반적으로 아무 반응이 없습니다.</li>
</ol>5. 양모 손실 및 피부 병변 검사
<ol><li>피부를 검사합니다.</li>
	<li>스크레이피에 의한 소양증은 일반적으로 근본적인 피부가 정상으로 나타나는 과도한 마찰 또는 긁힘으로 인해 투표, 등, 엉덩이, 가슴 또는 복부의 측면에있을 수 있습니다 탈모를 일으킨다.</li>
	<li>동물이 날카로운 물체를 문질 기회가 있는 경우 나중에 찰과상이 나타날 수 있습니다. 물린 상처는 사지의 과도한 니블링으로 인해 특히 사지에 나타날 수 있습니다.</li>
</ol>6. 신체 상태 채점
<ol><li>요추 척추의 등및 횡방향 과정을 만지작으로써 동물의 신체 상태를 평가합니다.</li>
	<li>스크레이피는 요추 척추의 횡방향 과정이 개별적으로 쉽게 느낄 수 있고, 공정의 끝이 날카로운 것처럼 보이는 신체 상태의 점진적 인 손실을 일으킬 수 있습니다.</li>
</ol>7. 동물을 눈가리개로
<ol><li>동물의 눈을 후드로 덮어, 한쪽 모서리가 잘려동물의 호흡을 허용하기 위해 잘리는 무견가방을 사용하여 만들 수 있습니다.</li>
	<li>안전 문제가 없는 경우에만 동물을 풀어 놓고, 당황하는 동물로 인한 부상의 위험이 없는 경우; 그렇지 않으면 양을 붙잡고 동물의 움직임을 연구하면서 동물을 통제할 수 있습니다.</li>
	<li>눈가리개를 하면 전정 시스템 이나 소뇌 기능 장애의 징후를 악화시킬 수 있습니다., 비전을 통해 보상 하는 동물의 능력에 의해 가려질 수 있습니다. 균형의 손실, 협응, 또는 순환 유도 될 수 있습니다., 그렇지 않으면 비정형 스크레이피와 임상적으로 주목할 만한 양에서.</li>
</ol>8. 동물의 운동 평가
<ol><li>동물의 걸음걸이와 근육 움직임을 자유롭게 움직이면 공부하십시오.</li>
	<li>조정은 뒷사지의 넓은 기반 움직임, 뒷두다리로 호핑 또는 뒷골목에서 과도하게 흔들리는 것이 특징일 수 있으며, 이는 비틀거리거나 잠시 앉을 수 있습니다.</li>
	<li>머리 떨림의 존재는 동물이 방해받지 않을 때 종종 미묘하지만 임상 검사를 완료하는 동안 또는 후에 더 두드러질 수 있습니다.</li>
</ol>9. 해석
<ol><li>스크레이피에 관한 연구 결과의 중요성을 고려하십시오.</li>
	<li>긁힘, 떨림, 비정상적인 행동, 순환, 붕괴 에피소드, 실조, 또는 결석한 위협에 대한 반복반응과 같은 개별 징후의 존재는 다양한 원인이 있을 수 있지만, 이러한 징후의 2개 이상의 결합된 발생은 양이나 염소에 있는 스크레이피의 암시를 매우 암시한다.</li>
</ol>

<ol><li>Benestad, S. L., Arsac, J. N., Goldmann, W., Nöremark, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atypical%2FNor98+scrapie%3A+properties+of+the+agent%2C+genetics%2C+and+epidemiology%5BTitle%5D)+AND+%22Vet+Res.%22%5BJournal%5D)">Atypical/Nor98 scrapie: properties of the agent, genetics, and epidemiology.</a> Vet Res.. 39 (4), 19 (2008).</li>
<li>D'Angelo, A., Maurella, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+clinical+criteria+to+diagnose+scrapie+in+Italy%5BTitle%5D)+AND+%22Vet.+J%22%5BJournal%5D)">Assessment of clinical criteria to diagnose scrapie in Italy.</a> Vet. J. 174 (1), 106-112 (2007).</li>
<li>Eloit, M., Adjou, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((BSE+agent+signatures+in+a+goat%5BTitle%5D)+AND+%22Vet.+Rec%22%5BJournal%5D)">BSE agent signatures in a goat.</a> Vet. Rec. 156 (16), 523-524 (2005).</li>
<li>Fediaevsky, A., Maurella, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+prevalence+of+atypical+scrapie+in+sheep+from+positive+flocks+is+not+higher+than+in+the+general+sheep+population+in+11+European+countries%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Vet.+Res%22%5BJournal%5D)">The prevalence of atypical scrapie in sheep from positive flocks is not higher than in the general sheep population in 11 European countries.</a> BMC Vet. Res. 6, 9 (2010).</li>
<li>Healy, A. M., Weavers, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+clinical+neurology+of+scrapie+in+Irish+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vet.+Intern.+Med%22%5BJournal%5D)">The clinical neurology of scrapie in Irish sheep.</a> J. Vet. Intern. Med. 17 (6), 908-916 (2003).</li>
<li>Houston, E. F., Gravenor, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+signs+in+sheep+experimentally+infected+with+scrapie+and+BSE%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Clinical signs in sheep experimentally infected with scrapie and BSE.</a> 152 (11), 333-334 (2003).</li>
<li>Kittelberger, R., Chaplin, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atypical+scrapie%2FNor98+in+a+sheep+from+New+Zealand%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vet.+Diagn.+Invest%22%5BJournal%5D)">Atypical scrapie/Nor98 in a sheep from New Zealand.</a> J. Vet. Diagn. Invest. 22 (6), 863-875 (2010).</li>
<li>Konold, T., Bone, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Associations+of+clinical+signs+and+prion+protein+genotypes+in+British+sheep+with+scrapie%5BTitle%5D)+AND+%22Dtsch.+Tier%C3%A4rztl.+Wochenschr%22%5BJournal%5D)">Associations of clinical signs and prion protein genotypes in British sheep with scrapie.</a> Dtsch. Tierärztl. Wochenschr. 116 (11), 380-388 (2009).</li>
<li>Konold, T., Bone, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scrapie+in+goats%5BTitle%5D)+AND+%22Vet.+Rec%22%5BJournal%5D)">Scrapie in goats.</a> Vet. Rec. 161 (11), 395-396 (2007).</li>
<li>Konold, T., Bone, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pruritus+is+a+common+feature+in+sheep+infected+with+the+BSE+agent%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Vet.+Res%22%5BJournal%5D)">Pruritus is a common feature in sheep infected with the BSE agent.</a> BMC Vet. Res. 4, 16 (2008).</li>
<li>Konold, T., Bone, G. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monitoring+of+clinical+signs+in+goats+with+transmissible+spongiform+encephalopathies%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Vet.+Res%22%5BJournal%5D)">Monitoring of clinical signs in goats with transmissible spongiform encephalopathies.</a> BMC Vet. Res. 6, 13 (2010).</li>
<li>Konold, T., Davis, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+findings+in+two+cases+of+atypical+scrapie+in+sheep%3A+a+case+report%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Vet.+Res%22%5BJournal%5D)">Clinical findings in two cases of atypical scrapie in sheep: a case report.</a> BMC Vet. Res. 3, 1 (2007).</li>
<li>Passler, T., Walz, P. H., Pugh, D. G. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPassler%2C+T+%22Diseases+of+the+Neurologic+System.+In%3A+Sheep+and+Goat+Medicine%22">Diseases of the Neurologic System. In: Sheep and Goat Medicine</a>. Pugh, D. G., Baird, A. N. , 2, W.B.Saunders. Saint Louis. 361-405 (2012).</li>
<li>Russel, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Body+condition+scoring+of+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22In+Pract%22%5BJournal%5D)">Body condition scoring of sheep.</a> In Pract. 6 (3), 91-93 (1984).</li>
<li>Simmons, H. A., Simmons, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atypical+scrapie+in+sheep+from+a+UK+research+flock+which+is+free+from+classical+scrapie%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Vet.+Res%22%5BJournal%5D)">Atypical scrapie in sheep from a UK research flock which is free from classical scrapie.</a> BMC Vet. Res. 5, 8 (2009).</li>
<li>Simmons, M. M., Konold, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+natural+atypical+scrapie+phenotype+is+preserved+on+experimental+transmission+and+sub-passage+in+PRNP+homologous+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Vet.+Res%22%5BJournal%5D)">The natural atypical scrapie phenotype is preserved on experimental transmission and sub-passage in PRNP homologous sheep.</a> BMC Vet. Res. 6, 14 (2010).</li>
<li>Spiropoulos, J., Lockey, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+prion+with+BSE+properties+from+farmed+goat%5BTitle%5D)+AND+%22Emerg.+Infect.+Dis%22%5BJournal%5D)">Isolation of prion with BSE properties from farmed goat.</a> Emerg. Infect. Dis. 17 (12), 2253-2261 (2011).</li>
<li>Ulvund, M. J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aUlvund%2C+MJ+%22Clinical+Findings+in+Scrapie.+In%3A+Prions+in+humans+and+animals%22">Clinical Findings in Scrapie. In: Prions in humans and animals</a>. Hörnlimann, B., Riesner, D., Kretzschmar, H. , de Gruyter. Berlin. 398-407 (2006).</li>
</ol>

동물과 관련된 모든 절차는 영국 정부 본부의 허가하에 동물 (과학 절차) 법 1986에 따라 수행되었습니다. 저자는 경쟁적인 재정적 이익이 없다고 선언합니다.

스크레이피는 세계동물보건기구(OIE)에 의한 등재된 질병으로, 신속하고 신뢰할 수 있는 안테 모템 검사가 없는 경우 농부 나 수의사가 이 질병과 관련된 임상 징후를 인식하는 능력에 의존합니다. 대부분의 스크레이피 케이스, 특히 비정형 스크레이피 케이스는, 그러나, 표적으로 한 TSE 감시에 의해, 즉, 도살 또는 낙하된 주식 동물에 의하여 작은 반추의 두뇌 검사에 의해, 현재 발견됩니다. 고전적인 스크레이피에 대한 저항을 위해 양을 사육, 이는 고전적인 스크레이피 케이스의 수를 감소, 가장 가능성이 덜 자주 양신경 질환의 차동 진단에서 고려되도록 질병에 대한 사람들의 인식을 감소. 비정형 스크레이피는 또한 유럽4에서시험된 10,000개 당 약 5건의 경우, 8건의 하락 주식으로 낮은 유병률을 가지고 있다. 또한, 일반적으로 외피성, 또는 excoriation없이 탈모증으로 분명, 종종 스크레이피13의특징 징후로 간주됩니다. 따라서, 비정형스크레이피(12) 또는 비거성 형태의 카프리(11)에서 관찰된 바와 같이 수반되는 소양증이 없는 신경질환은 스크레이피의 의심을 제기하지 않을 수 있다.
이 검사 프로토콜은 다양한 유형의 스크레이피 (비정형 및 고전적인 스크레이피,고전적인 BSE 접종 양으로 표현 되는 후자, 고전적인 스크레이피 같은 징후로 제시)와 관련된 특정 임상 징후를 평가하여 양에서 TSE의 임상 징후를 식별하도록 설계되었습니다. 고전 스크레이피에서, 긍정적 인 스크래치 반응을 표시 한 경우의 비율 ("니블 반사") 이상에서 50-77 에서 100 양 연구5,8. 운동 장애는 다양한 연구에 기초하여 고전적인 스크레이피 케이스의 최대 81%에서 관찰될 수 있다18. 비협화도는 또한 비정형 스크레이피의 다양한 자연 발생 사례에 주요 징후이며, 종종 행동 변화1을동반하지만 자연적으로 감염된 비정형 스크레이피 양 둘 다에 보고된 추가 징후는 순환하고 시각 장애12,15,16으로,눈가리개와 위협 반응의 테스트가 검사 프로토콜에 포함되어 있는 이유입니다. 신체 상태를 채점하는 것은 예를 들어 6점 채점시스템(14)을사용하여, 스크레이피 에이치양5에서관찰될 수 있는 에맥화를 평가할 수 있다. 양에서 스크레이피의 검출을 돕는 임상 기준이 이전에 제안되었지만2,이들은 단지 고전 스크레이피의 검출과 관련이 있으며, 동물이 아바토이르에서 제시되는 경우 사용할 수없는 것으로 임상 역사를 고려했다.
현재 프로토콜은 짧은 기간 내에 스크레이피의 흔적에 대한 많은 동물의 검사를 허용합니다. 또한, 시험 프로토콜은 임상 발병, 진행 및 엔드 포인트를 모니터링하기 위해 양과 염소의 스크레이피 실험 연구에 적용 될 수 있습니다. 그러나, 그것은 임상 사례 역사의 적절 한 기록으로 더 상세한 신체 및 신경 검사를 대체 하지 않습니다., 아마도 보조 진단 테스트 (혈액 및 뇌척수액의 검사; 적절 한 경우 보다 정교한 이미징 기술), 비슷한 징후와 함께 존재 하는 작은 반추에서 다양 한 다른 조건을 배제 하는 데 필요한 수 있습니다. 대사 또는 염증 성 신경 질환, 뇌 농양 또는 종양과 같은.
임상 검사는 일반적으로 프리온 단백질2,11의검출에 근거를 둔 사후 사후 시험 보다는 TSE 영향 받은 동물을 검출에 일반적으로 보다 적게 민감하지만, 특히 잠복기의 초기 단계에서, 이것은 현재 살아있는 동물에 있는 유일한 탐지 방법 및 TSE 영향을 받은 작은 루빈을 확인하기 위하여 장소에 표적으로 한 감시 체계가 없는 그 국가에 가장 관련있는 그 국가에.

스크레이피는 소의 소 해면형성 뇌병증(BSE), 사슴의 만성 낭비 질환, 인간에서 크로이츠펠트-야콥 병 과 같은 단백질 오접기 질환 그룹에 속하는 양과 염소의 양도 가능한 해면형 뇌병증(TSE)입니다. 진단은 단백질에 저항하는 프리온 단백질의 이상한 양식을 검출하여 사후 mortem, 일반적으로 두뇌에서 만들어집니다. 두 가지 주요 자연 발생 스크레이피 형태는 역학적으로, 병리학적으로, 그리고 생화학적으로 다른 구별될 수 있습니다: 고전적인 스크레이피와 비정형 스크레이피. 또한, 고전적인 스크레이피와 같은 임상 징후를 가진 신경질환은 BSE 제제6,10-11을실험적으로 감염시킴으로써 양과 염소에서 유도될 수 있다. 사실, 자연적으로 발생하는 BSE는 염소3,17에서진단되었습니다. 고전 스크레이피 (및 자연적으로 발생 하는 경우 양에 BSE) 프리온 단백질 유전자를 대상으로 하는 유전자 저항에 대 한 사육에 의해 달성 되었습니다., 하지만 이것은 산발성 질병으로 추정 되 고 고전 스크레이피에서 무료로 간주 하는 국가에서 진단 되었습니다 비정형 스크레이피에 대 한 더 어렵다, 예를 들어 뉴질랜드7.
스크레이피는 성인 양과 염소의 신경질환으로 행동, 감각, 움직임이 변화하지만, 질병은 서서히 진행적이고, 동물 사육사 나 수의외과 의사가 임상 징후를 잘 모르거나, 스크레이피는 작은 반추에서 신경질환의 차동 진단에서 전혀 고려되지 않기 때문에 임상 징후가 인식되지 않는다.
제안된 시험 프로토콜은 두 가지 목적을 염두에 두고 스크레이피의 임상 진단을 돕기 위해 고안되었습니다: 짧은 기간 내에 많은 동물을 스캔할 수 있도록 상당히 간략해야 하지만 스크레이피에 감염된 동물의 검출을 허용할 수 있을 만큼 구체적이어야 하며, 이는 스크레이피에 감염된 동물들이 자주 발생하는 임상 징후의 존재를 평가함으로써 달성됩니다. 이 프로토콜은 고전적인 스크레이피(11)의 징후염소를 모니터링하는 데 사용되는 것에서 약간의 수정이며 일반적으로 스크레이피9와관련이없는 임상 징후를 악화 시킬 수있는 동물의 눈가리개를 포함한다.

양에서 비정형 및 고전적인 스크레이키를 감지하는 임상 시험 프로토콜

Clinical Examination Protocol to Detect Atypical and Classical Scrapie in Sheep

양과 염소의 양도 가능한 해면형 뇌병증(TSEs)인 스크레이피의 진단은 현재 사후 검사에 의한 질병 관련 프리온 단백질의 검출에 기반을 두고 있습니다. 양이나 염소 집단의 무작위 표본이 스크레이피에 대해 적극적으로 모니터링되지 않는 한, 스크레이피 케이스의 식별은 스크레이피와 관련된 임상 징후를 인식하는 개인의 친숙성 및 능력에 의존하는 임상 용의자의 보고에 의존합니다. 스크레이피는 작은 반추제에서 신경 질환의 차동 진단에서 고려되지 않을 수 있습니다, 특히 낮은 스크레이피 보급을 가진 국가에서, 또는 비정형 스크레이피처럼 비 근동 형태로 제시하는 경우 인식되지. 임상 용의자의 식별을 돕기 위해, 짧은 검사 프로토콜은 또한 염소에 적용 될 수있는 양에 있는 TSEs의 소뇨 및 비 비 비 pristic 양식과 관련되었던 특정 임상 표시의 표시를 평가하기 위하여 제출됩니다. 여기에는 행동, 시력(위협 반응 테스트), 소양(긁는 반응 테스트) 및 운동(눈가리개를 하는 유무)에 대한 평가가 포함됩니다. 이 스크레이피 용의자로 보고 동물의 더 상세한 신경 검사로 이어질 수 있습니다. 그것은 또한 질병 진행을 평가 하거나 임상 최종 점을 식별 하기 위해 양 또는 염소의 실험 적인 TSE 연구에서 사용할 수 있습니다.

임상적으로 건강한 양. 뉴질랜드 출신의 소 뇌로 무차별 적으로 접종을 받은 스크레이피없는 무리의 투표 도싯 wether는 49 개월 후 접종을 조사했습니다. 이 양은 정상적인 자세를 가지고, 정상적으로 동작, 정상적인 위협 반응을 표시(도 1),스크래치 테스트에 반응하지 않는, 그대로 양털, 매우 좋은 신체 상태를 가지고있다. 눈가리개를 하고 운동 장애의 징후가 보이지 않는 경우 임상적으로 주목할 수 없습니다.
비정형 스크레이피 양은 양에 있는 TSEs의 비비pruritic 양식으로 제시합니다. 같은 프리온 단백질 유전자형(AHQ/AHQ)의 비정형 스크레이피 필드 케이스로부터 뇌 동형으로 무형으로 접종된 스크레이피 없는 무리의 체비엇 웨더는 36개월 후 접종 후 에서 검사하였다. 이 양은 또한 정상적인 자세를 가지고 있지만 펜과 시계 방향으로 원을 그리는 다른 양과 다르게 행동합니다. 위협 반응을 테스트할 때 깜박이지 않습니다. 긁힘은 어떤 반응을 유도하지 않으며 양털 변화는 명백하지 않지만 신체 상태는 공정합니다. 눈가리개를 하면 시계 방향으로 원을 그리며(그림2)균형을 잃는다. 걸음걸이는 탁트이며, 미세한 머리 떨림이 보입니다.
비정형 BSE 양은 양에 있는 TSEs의 소두형태로 제출하는, 이는 고전적인 스크레이피 영향 받은 양의 임상 프리젠 테이션과 임상적으로 유사합니다. 이러한 이유로, 고전적인 스크레이피 케이스는 포함되지 않습니다. 스크레이피없는 무리에서 투표 도싯 wether 는 소 비정형 (L 형) BSE 뇌 균모증으로 무형으로 접종하고 50 개월 후 접종에서 검사. 이 양은 약간 구부러진 서, 뒷다리를 넓은 기반으로 유지하는 경향이 잡힐 때 바닥에 떨어진다. 위협적인 반응은 약합니다. 등 다양한 부위의 긁힘은 머리 또는 입술 움직임을유도(도3)하고, 설문 조사에서 경미한 피부 외상으로 양모 손실이 있다. 신체 상태가 좋습니다. 눈을 가리면 움직이기를 꺼리고 균형을 유지하기 위해 장애물에 리어 엔드를 놓습니다. 양은 탈구이며 앞사지 하이퍼메트리아를 표시합니다.
<img alt="Figure 1" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51101/51101fig1highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51101/51101fig1.jpg"> 그림 1. 위협 응답 테스트. 동물의 눈을 향한 위협적인 제스처는 깜박임 반응을 유도합니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51101/51101fig1highres.jpg" target="_blank">큰 이미지를 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 2" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51101/51101fig2highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51101/51101fig2.jpg"> 그림 2. 눈가리개를 합니다. 시계 방향으로 빙빙 돌면 후드로 양을 눈가리개로 유도했다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51101/51101fig2highres.jpg" target="_blank">큰 이미지를 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 3" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51101/51101fig3highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51101/51101fig3.jpg"> 그림 3. 스크래치 응답 테스트. 뒷면의 긁힘은 머리의 측면 움직임으로 입술 핥는 입술을 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51101/51101fig3highres.jpg" target="_blank">유도하여 큰 이미지를 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>

짧은 임상 시험 프로토콜은 양과 염소에서 고전적이고 비정형 스크레이피의 검출을 돕기 위해 제시된다.

The diagnosis of scrapie, a transmissible spongiform encephalopathy (TSEs) of sheep and goats, is currently based on the detection of disease-associated ...

스크레이프(Scrape)는 양과 염소에서 발생하는 전염성 해면양뇌증으로, 감염된 동물에게 신경계 증상을 유발합니다. 질병의 확진은 사후 뇌 검사를 통해 이루어지며, 이를 통해 고전적 스크레이프, 비정형 스크레이프, 그리고 드물게는 우해면양뇌증(BSE)과 같이 타 종으로부터 전염된 다른 형태의 스크레이프로 분류할 수 있습니다. 스크레이프는 세계동물보건기구(WOAH)가 지정한 관리 대상 질병이지만, 많은 경우 해당 질병을 인식하지 못해 소반추동물이 감염된 상태로 방치되기도 합니다.본 영상은 세 마리의 양을 예시로 하여, 전염성 해면상 뇌증에 감염된 임상 사례의 검출을 돕기 위한 약 5분 소요의 짧은 임상 검사 프로토콜을 보여줍니다. 첫 번째 예시는 BSC-free 소 뇌 균질액을 뇌에 접종한 후 49개월이 지난 임상적으로 건강한 양으로, 대조군에 해당합니다.두 번째 예시는 비전형 스크래피(atypical scrapy) 양 뇌 균질물을 뇌에 접종한 후 36개월 시점에 검사하여 임상적 증상이 나타난 양으로, 비전형 스크래피 사례에 해당합니다. 세 번째 예시는 비전형 BSE(atypical BSE) 소 뇌 균질물을 재접종한 후 50개월 시점에 검사하여 임상적 증상이 나타난 양으로, 임상적으로는 전형적 스크래피(classical scrapy)와 유사하게 나타납니다. 이러한 이유로 전형적 스크래피 사례는 포함되지 않았습니다.자세 평가. 빨간색 화살표로 표시된 귀표 번호 1번의 건강한 양은 펜 안에서 방해받지 않을 때 정상적인 자세를 보입니다. 비정형 스크래피(atypical scrapy) 양의 자세 또한 정상으로 보입니다.비정형 BSC 증상을 보이는 양은 등이 약간 굽어 보이며 뒷다리를 절고 하는 경향이 있습니다. 일반적인 양에게서 기대되는 광범위한 행동 평가에서, 건강한 양은 무리 내에 머물며 검사자의 움직임을 따라옵니다. 검사자가 접근하여 양을 잡을 때도 아무런 이상 징후가 나타나지 않습니다.비정형 스크래피(atypical scrapy) 양은 우리 안의 다른 양들과 다르게 행동하며, 다른 모든 양들이 카메라를 향해 보고 있는 반면 이 양은 뒤쪽을 카메라 방향으로 두고 서 있습니다. 양은 무리를 지어 이동하는 사회적 동물임에도 불구하고, 이 양은 다른 양들을 즉시 따라가지 않으며 다른 양들이 시계 방향으로 이동했다는 사실을 깨닫는 것이 느려 보입니다. 이 양을 검사한 후 서성거림(circling) 증상이 유도됩니다.이러한 강박 행동은 양에게 다가가 양이 도망칠 때만 멈춥니다. 비정형 BSC가 있는 양은 포획 후 핸들링할 때 바닥에 쓰러집니다. 위협 반응 테스트는 안면 털을 건드리거나 바람을 일으키지 않으면서 동물의 각 눈을 향해 손이나 여러 손가락을 여러 번 움직여 수행합니다.난기류는 양쪽 눈과 건강한 양 모두에서 관찰되는 것처럼 눈깜박임을 유발해야 합니다. 비정형 스크레이피(atypical scrapy)에 걸린 양의 경우 이러한 반응이 소실되어 눈을 깜박이지 않습니다. 다만, 눈꺼풀을 만졌을 때 눈을 깜박이는 능력은 손상되지 않았습니다.비정형 BSE 양은 위협에 반응하여 눈을 깜빡이지만, 왼쪽 눈의 깜빡임 반응이 다른 쪽 눈의 반응에 비해 약합니다. 눈꺼풀을 접촉하여 긁힘 반응을 테스트하는데, 이때 양은 벽 옆에 서 있으며 검사자의 한쪽 다리로 양이 앞으로 도망가지 못하게 막습니다. 양은 테스트를 계속할 수 있을 정도로 충분히 차분한 상태입니다. 여기서는 천골 요추, 중흉추 및 두측 흉추 부위를 포함한 등 쪽의 여러 영역을 긁으며, 각 긁기 단계 사이에 휴지기를 두어 반응을 관찰합니다.이 임상적으로 건강한 양은 반복적인 정형 행동 반응을 보이지 않습니다. 마찬가지로, 비정형 스크래피(atypical scrapy)에 감염된 양은 등의 여러 부위를 긁어도 반응하지 않습니다. 그러나 비정형 BSC에 감염된 양을 긁으면 반응이 유도됩니다.긁히는 부위에 따라 입술을 씰룩거리거나 머리를 움직이는 반응을 보입니다. 이러한 반응은 벽 손실(wall loss) 및 피부 병변에 대한 양성 확인(Positive Checking)으로 간주됩니다. 피부 병변의 동반 여부와 관계없이 광범위한 벽 손실 부위는 보통 멀리서도 관찰할 수 있으나, 보정 중 양을 더 자세히 검사하면 과도한 가려움증으로 인해 발생한 더 작은 범위의 벽 손실 부위를 식별할 수 있습니다.이러한 부위는 주로 머리, 등, 엉덩이, 그리고 흉부 또는 복부의 측면에서 발견되며, 흔히 양측 대칭으로 나타납니다. 대조군 양과 비정형 스크래피(atypical scrapy)가 있는 양에서는 모실 소실이 검출되지 않았으나, 비정형 BSC가 있는 양은 등 쪽의 양모가 소실되었습니다. 피부 손상 후 형성된 작은 딱지를 제외하고는 피부가 온전한 상태입니다.이는 과도한 가려움증 점수가 신체 상태에 영향을 주었기 때문일 수 있습니다. 동물의 신체 상태 점수는 요추의 횡돌기와 극돌기를 촉진하여 측정합니다. 이는 양의 긁기 테스트 과정 중에 수행할 수도 있습니다.0점에서 5점까지의 점수를 사용할 수 있으며, 매우 비만한 양에게 5점을 부여합니다. 이는 요추 척추의 횡단면 도식화 이미지에 나타나 있습니다. 척추 돌기는 빨간색의 근육과 노란색의 지방 조직으로 덮여 있으며, 피부에 압력을 가하더라도 횡돌기의 끝부분을 채우는 것이 불가능한 상태입니다.대조적으로, 신체 조건이 불량합니다. 척추 돌기의 끝부분이 날카롭게 느껴지고, 이 이미지에서 보여주는 것처럼 압력을 가했을 때 그 위에 덮인 조직층이 느껴지지 않는다면, 이는 0점으로 평가됩니다.임상적으로 건강한 양의 신체 조건은 매우 양호하며 점수는 4점입니다. 비정형 스크레이피(atypical scrapie)가 발생한 양은 신체 조건의 손실로 인해 점수가 2점인 보통 수준으로 낮아졌습니다. 반면, 비정형 보빈 스펀지형 뇌증(atypical BSE)이 있는 양은 3점의 양호한 신체 조건 점수를 유지했습니다. 안대 착용 단계입니다. 여기서는 양의 머리를 수제 안대로 덮어주었는데, 이는 코 부분이 잘려 있어 호흡이 가능한 비-C3 재질의 가방이면 무엇이든 가능합니다. 양을 놓아주기 전에 동물이 안전한 상태인지 확인하십시오.일부 양들은 공포를 느껴 달리거나 뛰어다닐 수 있으며, 이로 인해 자신이나 타인에게 부상을 입힐 위험이 있습니다. 이러한 경우에는 양을 완전히 풀어주지 말고, 동물을 계속 붙잡은 상태에서 움직임을 관찰하십시오. 건강한 양은 안대를 쓴 채로 침착함을 유지하지만, 안대를 벗으려고 머리를 흔들 수 있습니다.이동 능력이나 균형 감각에는 이상이 없습니다. 이와 대조적으로, 비정형 스크레이피(atypical scrapie)에 감염된 양은 시계 방향으로 원을 그리며 돌기 시작합니다. 또한 균형 감각 상실이 나타납니다.비정형 BSC 증상을 보이는 양은 움직이기를 꺼리고 허들에 기대려 하지만, 그 과정에서 네 다리가 서로 꼬이며 균형 감각 상실이 분명하게 나타납니다. 동물의 움직임을 평가했을 때, 임상적으로 건강한 양의 보행은 정상으로 보입니다. 양을 방치했을 때나 앞서 핸들링을 하는 동안에도 뚜렷한 떨림 증상은 관찰되지 않았습니다.비전형적 스크래피에 걸린 양에서는 운동실조 증상이 나타납니다. 다른 양들을 따라갈 때 미끄러지며 뒷다리 움직임이 부자연스럽게 보입니다. 양이 무리 속에 서 있을 때 미세한 머리 떨림이 잠시 관찰될 수 있습니다.비정형 BSE로 표시된 양에서도 이상 징후가 나타납니다. 다리를 높게 들어 올리며 넘어지는 모습에서 알 수 있듯이, 협응 능력의 균형 상실과 고보행(hypermetria)이 관찰됩니다. 보행 해석.전염성 해면상 뇌증에 걸린 양들에게서 나타나는 임상 증상에는 이상 행동, 위협 반응 소실, 양성 긁기 반응, 탈모, 피부 손상, 눈가리개를 했을 때의 원형 보행, 운동 조절 능력 상실 및 떨림이 포함되며, 본 사례에서는 이 중 하나 이상의 증상이 나타났습니다. 이러한 징후 중 어느 하나라도 관찰된다면 검사자는 주의를 기울여야 하며, 전염성 해면상 뇌증을 원인 중 하나로 고려해야 합니다. 결론. 이 영상은 임상적으로 건강한 양을 대상으로 수행하는 임상 검사 프로토콜을 보여주며, 전염성 해면상 뇌증에 걸린 양에서 나타나는 이상 소견의 사례들을 제시합니다.본 프로토콜은 임상적으로 의심되는 사례를 검출하는 데 유용하며, 이는 유사한 임상 증상을 보이는 다른 질병을 배제하기 위해 더 자세히 조사하거나, 질병의 임상적 발병, 진행 또는 임상적 종점을 평가하는 데 사용될 수 있습니다. 소형 반추동물의 전염성 해면상뇌증에 관한 실험 연구에서 활용됩니다.

clinical-examination-protocol-to-detect-atypical-classical-scrapie

Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

여기 우리는 즉시 정화하여 intraperitoneal 접종 다음과 찬란 다음 주사 사이트에서 자신의 이해와 움직임을 모니터링하고 이러한 이벤트를 중재 전지 특성화 감염 두뇌 자료에서 집계 프리온 봉 라벨 면역 세포 프리온 이해와 인신 매매를 감시를위한 소설 분석을 설명합니다.

Intraperitoneal 감염 후 면역 세포의 인신 매매 형광등 프리온 로즈 시간을 모니터링

청소부는 질병이없는 지역에 자신의 배설물에 전염성 전염성 해면상 뇌증의 프리온을 이동시키다 수있는 가능성이있다. 우리 마우스 적응 스크래피 프리온은 미국의 까마귀의 소화 기관 (까마귀 brachyrhynchos), 죽은 동물의 일반적인 소비자 비록 통과 후 감염성 유지 여부를 확인하는 데 사용 세부 방법.

조류 종의 소화 기관을 통과 한 후 감염성 프리온을 확인하기위한 절차

프리온 질병의 종간 전염에 대한 장벽을 측정하는 것은 까다로우며 일반적으로 동물 챌린지 또는 생화학적 분석이 포함됩니다. 여기에서는 종 장벽을 예측할 수 있는 능력을 가진 체외 프리온 단백질 전환 분석을 제시합니다.

와 전염성 해면상 뇌증 종 장벽 평가<em&gt; 체외</em&gt; 프리온 단백질 변환 분석

여기, 우리는 간단, 신속 하 고 효율적인 프리온 증폭 기술, 실시간 떨게 유발 변환 (RT-QuIC) 메서드를 설명 하는 프로토콜을 제시.

실시간 떨게 유발 CWD Prions 지저분한 자료의 검색을 위한 변환 분석 결과

직접 급속 면역 조직 화학 검사 (DRIT)는 광견병 진단을위한 직접 형광 항체 (DFA) 테스트에 대한 인식 대안 동물 보건 및 세계 보건 기구 (OIE / WHO)에 대한 세계 기구를 제공합니다. 이 시험은 가벼운 현미경 검사법을 사용하여 두뇌 노출에 따라 대략 1 시간에서 수행 될 수있는 필드 기반 응용 프로그램을 허용합니다.

직접 신속한 면역 기능 화학 검사를 사용하여 향상된 광견병 감시

이 프로토콜의 목표는 광견병 검사를 위한 만족스러운 조직 샘플을 얻기 위해 크고 작은 동물에서 안전한 부검 기술을 입증하는 것입니다.

크고 작은 동물의 광견병 부검 기법

면역조직화학 프로토콜을 사용하여 비정상 프리온 단백질을 면역표지하려면 특정 샘플 및 항-PrP 항체 준비 방법론이 필요합니다. 본 프로토콜은 적절한 PrP 면역표지를 보장하고 비특이적 배경 염색을 최소화하기 위한 에피토프 마스킹의 주요 단계를 설명합니다. 또한, 이 접근법은 프리온 감염 조직으로 면역조직화학 연구를 수행할 때 생물학적 안전성 조치를 고려합니다.

면역조직화학에 의한 비정상적인 프리온 단백질 검출

실험적 자가면역 뇌척수염은 다발성 경화증에서 가장 널리 사용되는 쥐 모델 중 하나입니다. 현재 프로토콜에서는 남녀 모두의 C57BL/6J 마우스에 미엘린 희소돌기아교세포 당단백질 펩타이드를 면역하여 주로 꼬리와 팔다리의 상행 마비를 초래합니다. 여기서는 EAE 유도 및 평가 프로토콜에 대해 논의합니다.

두 성별의 다발성 경화증 모델링: MOG35-55-유도 실험적 자가면역 뇌척수염

이 프로토콜은 조직 채취에서 결과 해석에 이르기까지 pan-lyssavirus LN34 real-time reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR) 분석을 보여주며, 여기에는 일부 비광견병 lyssavirus 및 lagomorphs에 대한 분석 성능을 개선하기 위한 프라이머 염기서열 및 제형 업데이트가 포함됩니다. 또한 단일 웰 LN34 다중화(LN34M) 형식에 대한 분석 설정을 시연합니다.

업데이트된 멀티플렉스 LN34 Real-Time 역전사-중합효소 연쇄 반응 분석을 통한 동물 광견병의 사후 진단

실험실 환경에서 일반적으로 사용되는 영역을 프리온 오염 및 효과적인 오염 제거를 평가하는 방법은 부족합니다. 여기에 설명된 프로토콜은 특정 실험실의 개별 요구 사항을 충족하도록 쉽게 수정할 수 있는 실험실 프리온 안전 스와이프 테스트를 구현하기 위한 핵심 기본 사항을 제공합니다.

Prion 안전 연구소 스와이프 테스트

학습하세요 양과 염소의 비정형 및 고전적 스크레이피를 임상 검사 프로토콜로 감지하는 방법입니다. 이 방법은 행동 평가와 신경학적 검사를 통해 조기 발견에 도움을 줍니다.

양에서 비정형 및 고전적인 스크레이키를 감지하는 임상 시험 프로토콜

더 많은 동영상 탐색