Name: 마우스 좌골 신경에 생체 전기 생리 측정에서 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-04-13T14:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 7 s
Description: 학습하세요 마우스 좌골 신경의 생체 전기 생리 측정 방법을 통해 신경전도 속도와 복합근육운동전위를 정확히 측정하는 기술을. 이 프로토콜은 신경근육 질환 연구에 필수적인 도구를 제공합니다.

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이 작품은 SFB (604), DFG MO 1421/2-1 및 Krebshilfe 107089 (HM까지)에 의해 지원되었다. 아이들의 종양 재단 (뉴욕, 미국)에서 젊은 연구자 상을받는 사람이 때문이다.

본 연구는 독일 연방 공화국 (Tierschutzgesetz 데르 Bundesrepublik Deutschland의)의 동물 보호법에 따라 수행하고, 식품 안전과 소비자 보호 (링거 Landesamt FÜR Lebensmittelsicherheit 싶게 Verbraucherschutz)의 튀 링겐 주 사무소에 의해 승인되었습니다. 1. 측정 설정 <ol><li> 이소 플루 란 / O 2 흡입 쥐를 마취 - 마취 3 %의 개시를 위해, 100 % 산소의 유지 보수 2 % 이소 플루 란 (그림 1)를 참조하십시오. 이러한 운동 반사와 낮은 수준의 통증에 대한 민감도 테스트와 같은 간단한 반사 신경을 테스트하여 충분한 마취를 확인합니다. 절차는 일반적으로 총 약 30 분 / 동물 걸리기 때문에 마취 동안 건조를 방지하기 위해 눈에 연고의 사용을 권장하지만 필수되지 않습니다. 생존 실험의 경우, 수술 후 통증 관리를 위해 적시 이상 작용하는 진통제를 투여. </li><li> 전기 면도기로 두 다리를 덮고있는 털을 면도하고 동물이 마취에서 이미 동안 시중에서 판매하는 제모 크림으로 제모를 수행합니다. 절차를 통해 무균 상태를 유지하기 위해, 무균 장갑을 착용하고 항상 조심스럽게 70 % 에탄올로 세척 장비를 사용합니다. </li><li> 피드백 제어 가열 플레이트와 직장 열 프로브 (그림 2)에 의한 제어 체온 안정성. 필요한 경우, 멸균 실험 환경을 유지하기 위해 동물들 사이 가열판을 덮 멸균 드레이프 사용해주세요. 더욱이, 전자적으로 조직 손상을 방지하기 위해 40 ° C ≤를 위해 가열 온도를 제한하는 통합 된 센서를 통해 제어되는 가열판을 사용하는 것이 추천된다. <img alt="그림 1" fo:content-width="4in" fo:src="/files/ftp_upload/51181/51181fig1highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51181/51181fig1.jpg" /> 그림 1. 전문가에게면도 뒷다리로 마취 된 쥐를 보여주는 erimental 설치. </li><li> (ECG) 레코딩 중요한 매개 변수로 심장 박동을 모니터링하는 심전도를 가져 가라. 목 부분의 피부 아래의 각 앞다리와 하나의 전극의 피부 아래에 하나의 전극을 다음과 같이 ECG 녹음을 세 전극을 설치합니다. </li><li> 최적의 전도도 / 전사 저항 접촉 겔을 사용하는 장소 링 전극. (블랙 표시)에 감지 전극은 비복근이 최대 직경을 갖는 위치에 배치된다. (빨간색으로 표시됨) 기준 전극은 단지 감지 전극 아래에 배치된다. 참고 : 장비에 대한 자세한 내용은 &#39;자료 표&#39;를 참조하십시오. </li><li> 근위 및 원위 좌골 신경의 자극과 리드 전극 사이에 미리 정해진하지만 일관된 거리와 측정의 정확한 위치를 표시합니다. 실험 계획안 : 감지 전극 내지 4 ㎜의 거리에서, 원위 자극이 열린다.감지 전극에 16mm의 거리에서, 인접한 자극 (도 2)을 실시한다. </li></ol><img alt="그림 2" fo:content-width="6in" fo:src="/files/ftp_upload/51181/51181fig2highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51181/51181fig2.jpg" /> 도 2. 직전 측정의 시작 실험 상황을 도시 대표 화면. 흰색 화살표는 감지 (블랙) 및 참조 (레드) 왼쪽 뒷다리의 비복근에서 전극의 위치를 나타낸다. 니들 전극에 의해 자극 검정 감지 전극과 관련하여 정의 된 위치에서 수행 될 것이다. 말초 자극의 포인트는 (왼쪽 뒷다리에서 &quot;DS&quot;블랙 마크) 감지 전극에서 4mm의 거리가; 근위 자극 ( &quot;PS&quot;블랙 마크)의 장소는 거리 16mm입니다. 오른쪽 뒷다리에 빨간색 라인은 약을 보여줍니다<html> 좌골 신경의 해부학 적 과정으로 iMate. 또한, 관련 뒷다리 근육의 거친 위치는 관광 명소로 표시됩니다. 별표는 직장 온도 프로브를 나타냅니다. 2. 측정 <ol><li> 원리 : 모노 일회용 28 G 바늘 전극 0.1 밀리 기간 반복적으로 생성 된 하나의 구형파 펄스와 신경 자극의 일련의 수행 (반복 속도 200 밀리 초를, 그림 3A 참조). 오프라인 데이터 분석을 위해, 그것은 동시에 인한 신경 자극에 신경근 함수 응답 곡선 (도 3b)와 함께 자극 신호를 획득하도록 권장한다. 후속 데이터 분석을위한 최대 응답의 시리즈 ( &quot;대표 신경근 함수 응답을&quot;) 보통. 신뢰할 수있는 데이터 기록 및 자극 사이트 및 동물 당 저장 보통​​ 적어도 세 독립적 최적 반응 곡선을 생성하기 위해. p_upload/51181/51181fig3highres.jpg &quot;SRC =&quot;/ files/ftp_upload/51181/51181fig3.jpg &quot;/&gt; 데이터 수집 및 분석 (개략적으로 표현) 그림 3. 절차는. 반복적으로 생성 된 펄스는 바늘 전극 (그림 3a에 상단 행)를 통해 좌골 신경에 적용됩니다. 동시에 여러 대응하는 신경 근육 학 반응 곡선은 (그림 3A 낮은 행)가 기록되어있다. 신호 응답의 지연뿐만 아니라, 재생 시간과 신호의 진폭을 표시 할 수있다 : 평균 및 확대하면 인해 자극 펄스 (도 3b에 위쪽 열)에 신경근 반응 곡선은 다음과 같은 특징적인 특성 (도 3b에 아래쪽 열)를 보여주는 이후의 계산 및 통계를 얻을 수. 불규칙한 신호 전도 및 / 또는 차선의 기록은 보통 하나의 긍정적와 음수 편향 또는 신호 변형보다 더 다양한 신호 변형을 초래할감소 된 진폭 (그림 3C)와 (바이 모달 모양). </li><li> 결정된 위치에 바늘 전극 (그림 2의 &quot;PS&quot;)와 근위 자극을 수행합니다. <ol><li> 최대 진폭 최상의 촬영 조건을 달성하기 위해, 자극 프로세스 동시 실제 응답 곡선을 시각화. 이렇게함으로써, 실험자 즉시 반응 곡선의 형상뿐만 아니라 진폭의 크기를 평가할 수있다. </li><li> 필요하다면, 약간 조심스럽게 위치 및 / 또는 좌골 신경에 대한 자극 바늘의 각도를 조작. 자극 조건이 부드러운 최적화는 최대 값과 전형적인 바이 페이 모양의 응답 곡선 (그림 4)와 일정한 진폭에 도달 할 수 있습니다. </li></ol></li><li> 결정된 위치 (그림 2에서 &quot;DS&quot;)에서 바늘 전극과 말초 자극을 수행합니다. </li><li> completio 후이 흉골 드러 누움을 유지하기 위해 충분한 의식을 회복 할 때까지 N 측정, 별도의 케이지에 테스트 마우스를 전송합니다. 완전히 마취에서 회복 될 때까지 무인과 다른 동물의 회사에서 동물을 방치하지 마십시오. 수술 후 통증 관리를위한 적절한 행동을 더 이상 진통제를 관리 할 수​​ 있습니다. 비 스테로이드 성 항 염증성 약물 (NSAIDs)와 아편의 전신 투여는 1-3 일을 권장합니다. </li><li> 또한, 목 탈구에 의해 예를 들어 동물에 대한 더 이상의 고통없이 신속하고 인도적인 방식으로 여전히 마취 마우스를 희생. </li></ol><img alt="그림 4" fo:content-width="6in" fo:src="/files/ftp_upload/51181/51181fig4highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51181/51181fig4.jpg" /> 그림 4. 최대 진폭 CMAP 녹음을 결정하는 그림. 전체 등록 시리즈가 제공됩니다. ( </st최소한의 CMAP의 응답 룽&gt;) 삽입 포인트. 최대 진폭 CMAP 녹화에서 (B) 약간의 자극 바늘 운동의 결과. (C) 바늘 위치의 추가 변경은 거의 최대 진폭 등 다양한 진폭 CMAP 녹음을 생산하고 있습니다. 가까운 최대 진폭의 시리얼 CMAP 녹화와 (d)에 자극 바늘 교체. 참고 : CMAP 진폭의 일반적인 감소는 최적의 자극 사이트 (12, 13)에 반복적 인 자극하는 동안 발생할 수 있습니다. 별표는 평균에 묘사 된 최대 진폭과 CMAP 녹음을 나타냅니다. 3. 분석 <ol><li> 적절한 소프트웨어 패키지 (예 AtisaPro)를 사용하여 대표적인 신경 근육 기능 응답 데이터 세트에 기초하여 신경 전도 파라미터를 추출한다. 참고 : 특별한주의 시간 관련 데이터의 결정을 처리하십시오 때문에 화합물 모터 동작 냄비의 변곡점 결정ential (CMAP) 개시 및 종료가 어려울 수 있습니다. 확인 재현성 절차 개시 후 및 종료하기 전에 신호 편향에 접선을 사용하는 그림 (b)에서 제공됩니다. </li><li> &#39;신호 대기&#39;와 &#39;CMAP&#39;값을 계산합니다. <ol><li> CMAP 기간 &#39;대기 시간&#39;초기 부정적인 편향의 CAMP 발병 사이의 시간 간격이 기준이 호출로 돌아 최초 반면, 자극과 CMAP의 발병 사이의 시간 지연을 나타내는 &#39;. 원위 및 근위 자극 위치 사이의 거리와 함께 전도 속도를 계산하는 근위 지연 사이의 차이를 사용한다. 자극 사이트 간의 전도 속도 = 지연 시간 / 거리 </li><li> CMAP &#39;(복합 운동 활동 전위) 진폭 (MV에 주어진) CMAP 신호의 최대 양 및 음의 턴어라운드 시점 사이의 크기를 나타냅니다. CMAP = 값 &#39;긍정적 인 턴어라운드 시점&#39;- 값 &#39;부정적인 소요 포INT &#39; </li></ol></li></ol>

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<li>Vleggeert-Lankamp, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrophysiology+and+morphometry+of+the+alpha-+and+beta-fiber+populations+in+the+normal+and+regenerating+rat+sciatic+nerve%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Neurol%22%5BJournal%5D)">Electrophysiology and morphometry of the alpha- and beta-fiber populations in the normal and regenerating rat sciatic nerve.</a> Exp. Neurol. 187, 337-349 (2004).</li>
</ol>

저자가 공개하는 게 없다.

설명 프로토콜은 관심의 신경을 노출 할 필요없이 마취 된 쥐의 좌골 신경의 전도 특성을 측정 할 수있는 쉽고 신뢰할 수있는 방법을 제공합니다. 그럼에도 불구하고,이 실험 과정은 바늘 구멍에 의해 조직 손상의 원인이됩니다. 따라서 녹음을 마친 후 동물을 희생 할 수있는 합리적인 선택이 될 것입니다. 그러나, 이전에 녹음 신경의 노출을 필요로하는 다른 추가 침습 절차에 비해 조직 손상은 3,14 비교적 작다. 따라서, 반복 측정이 가능하며, 각각의 연구의 디자인에 따라 달라집니다. 그러나 특정 지점은 일관된 결과를 보장하기 위해 고려되어야한다. 최적 기록 조건을 수행하기 위해서는, 완전한 제모 광범위한 피부 세정에 의해 MEA 중에 적절 저소음 / 오염 허용 모두에게 젤을 사용하여 피부 저항을 감소하는 것이 중요숏. 도 3b에 도시 된 바와 같이 또한, 검출 된 신호의 최적의 이...

전기 생리학 측정은 임상 및 실험실 환경 모두에서 말초 신경의 기능 무결성을 조사를위한 필수 도구입니다. 인간에서는, 신경근 장애 및 신경 병증의 다수 진단 학적 측정 전기 생리에 의존한다. 전도 속도 또는 신호의 전위 진폭 같이 신경 특성을 측정함으로써, 말초 신경 질환의 거친 원점을 특성화 할 수있다. 신경 전도 속도는 수초에 의해 활성화 빠른 신호 전달에 매우 의존적이다. 따라서 탈수 초성 프로세스는 일반적으로 전도 속도 4 감소합니다. 복합 운동 활동 전위 (CMAP) - 기능 축삭의 수와의 상관 관계는 - 크게 5 감소 축삭 손상에 대한 지표이다. 따라서, 전기 생리 방법에 의한 말초 신경 손상의 병인이러한 유전성 신경 병증 6,7, 당뇨병 성 신경 병증 8,9, 만성 염증성 탈수 초성 다발성 신경 병증 (CIDP) 10, 또는 신진 대사 신경 병증 11로 구별 할 수 있습니다. 일반적으로 인간의 응용 프로그램에서 수랄 또는 척골 신경에 비 침습적 녹음이 바람직하다. 및 행등 및 감각계의 소 구경 축삭 - 생쥐에서는, 좌골 신경의 신경 속성, 대용량을 모두 포함하는 말초 신경계 (PNS)의 규모 신경을 분석하기 쉽다. 여기에 설명 된대로 절차는 그대로 쥐의 말초 신경에 전기 생리학에 대한 관련 모든 표준 값을 측정 할 수있는, 쉽고 빠르고 안정적​​인 방법입니다. 보존 유기체에서 녹음을 복용함으로써, 신경 환경의 생리적 조건은 보장된다.

<table><tbody><tr><td>동심 바늘 전극 (자극)</td><td>Natus Medical Incorporated, San Carlos, CA, USA</td><td>9013S0901</td><td></td></tr><tr><td>디지털 링 전극 (녹음)</td><td>Natus Medical Incorporated, San Carlos, CA, USA</td><td>9013S0302</td><td></td></tr><tr><td>ToM - Tower of Measurement (A/D converter)</td><td>GJB Datentechnik GmbH, Langewiesen, Germany</td><td></td><td></td></tr><tr><td>AtisaPro, 데이터 수집 및 분석 소프트웨어</td><td>GJB Datentechnik GmbH, Langewiesen, 독일</td><td></td><td></td></tr><tr><td>HSE-Stimulator T</td><td>Hugo Sachs Elektronik, Hugstetten, Germany</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

마우스 좌골 신경에 생체 전기 생리 측정에서

In Vivo Electrophysiological Measurements on Mouse Sciatic Nerves

전기 생리학 연구는 기본 병태 생리 (1)의 이해, 함께 신경 병리학 기술과, 다양한 신경 근육 질환의 합리적인 분류를 허용하고 도움이됩니다. 여기에서 우리는 생체 내에서 마우스 좌골 신경에 전기 생리학 연구를 수행하는 방법을 설명합니다. 동물 실험군에 진통을 보장하기 위해 이소 플루 란으로 마취 약 30 분 / 동물을 측정하는 동안 작업 환경을 방해받지 않습니다. 37 ° C의 일정한 체온은 가열 플레이트에 의해 유지되고 지속적으로 직장 열 프로브 (2)에 의해 측정된다. 또한, 심전도 (ECG)를 정기적으로 계속해서 조사 동물의 생리 학적 상태를 모니터링하기 위해 측정 중에 기록된다. 전기 생리학 기록은 좌골 신경, 일의 가장 큰 신경에서 수행됩니다행등과 감각 모두 섬유 책자와 마우스의 뒷다리를 공급하는 전자 말초 신경계 (PNS). 우리의 프로토콜에서, 좌골 신경은 현장에 남아 있으므로 추출 또는 노출 할 필요가 없습니다, 실제 녹음과 함께 어떤 불리한 신경 자극없이 측정이 가능. 적절한 바늘 전극 3을 사용하여 우리는 비복근 근육에서 감지 전극과 함께 전송 된 잠재력을 등록, 근위 및 말초 신경 자극을 모두 수행합니다. 데이터 처리, 신뢰성과 신경 전도 속도 (NCV) 및 복합 모터 활동 전위 (CMAP) 고도로 일관된 값, 총 말초 신경 기능의 정량화를위한​​ 주요 파라미터가 달성 될 수 후.

<html> 각 성별의 6 동물 : 우리는이 연구를 위해 총 12 쥐의 좌골 신경에 생체 전기 생리학 일련의 측정을 실시했다. 측정은 제시된 프로토콜을 수행하고 다음과 같은 결과를 제공 하였다 : 둘 다 남성과 여성 마우스는 약 20 M / sec의 평균 좌골 신경의 전도 속도 (그림 5)를 표시합니다. 이 문헌의 다른 측정과 일치한다. 또한, 남성과 여성 사이의 신경 전도 속도에 중요한 차이가 우리의 자료에 따르면이 있는지 보여줍니다. <img alt="그림 5" fo:content-width="4in" fo:src="/files/ftp_upload/51181/51181fig5highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51181/51181fig5.jpg" /> ...

생체 내에서 신경의 전도 특성의 측정은 신경 근육 질환의 다양한 동물 모델을 특성화 할 수있는 강력한 도구를 예시. 여기서, 우리는 마취 된 쥐의 좌골 신경의 전기 생리 분석이 수행 될 수있는 간단하고 신뢰성있는 프로토콜을 제시한다.

Electrophysiological studies allow a rational classification of various neuromuscular diseases and are of help, together with neuropathological ...

이 방법의 전반적인 목표는 살아있는 생쥐의 SCIC 신경에서 주요 신경 전도 특성을 측정하는 것입니다. 테스트 대상인 생쥐를 복와위(배를 바닥에 댄 상태)로 배치합니다. 여기서 파란색으로 표시된 SCIC 신경의 해부학적 구조에 익숙해져야 하며, 검은색으로 표시된 감지 전극은 비복근(gastro muscle)의 직경이 최대인 위치에 설치해야 함을 유의하시기 바랍니다.빨간색으로 표시된 기준 전극은 감지 전극 바로 아래에 배치합니다. 이제 원위부 자극 지점을 표시해야 합니다. 여기서는 임의로 4 mm라는 정의된 일정 거리를 선택했습니다.근위부 자극 지점은 감지 전극으로부터 16mm 떨어진 곳에 위치합니다. 이는 STIC 신경의 근위부 및 원위부 자극 지점 사이에 정확히 12mm의 간격이 있음을 의미합니다. 이후 바늘 전극을 이용한 자극은 먼저 근위부 자극 지점에서 수행한 다음, 원위부 자극 위치에서 수행합니다.안녕하세요, 제 이름은 Alexander Schultz입니다. 저는 독일 Gina에 위치한 Ance Institute for H Research에서 Helen Morrison 박사님의 지도하에 연구하고 있습니다. Gina 대학교 병원 분자 세포 생물학 연구소의 Reinhard Power 교수님과의 협력을 통해, 저희는 살아있는 생쥐의 sky 신경에서 전기생리학적 측정을 수행할 수 있는 방법을 구축하였습니다.이러한 기록 방식은 신경근 질환의 마우스 모델을 특성화하는 데 사용되는 강력한 도구입니다. 그럼 시작해 보겠습니다. 다음은 측정을 수행하는 데 필요한 장비입니다.ECG 기록을 위한 바늘 전극 3개. 자극용 바늘 전극 1개, 감지용 링 전극, 그리고 기준 전극. 전기 면도기를 사용하여 크림을 제거하고, 피드백 제어 가열판, recal 온도 프로브, 마취용 마우스 피스 및 접촉 젤을 준비합니다. 마우스는 마취 시작을 위해 지속적인 isof fluorine 흡입으로 마취시킵니다.100% 산소에 3% isoflurane을 투여하였습니다. 이후 측정 과정에서는 100% 산소에 2% isoflurane을 사용하는 것으로 충분합니다. 측정 중 피부 저항을 줄이기 위해, 실험 대상 마우스의 뒷다리 털을 완전히 제거하였습니다.이는 전기 면도기를 사용하여 수행합니다. 또한, 시판되는 제모 크림을 사용합니다. 마지막으로, 크림을 완전히 제거하고 70% ethanol을 사용하여 피부를 세척합니다.다음 단계에서는 ECG 기록을 위해 세 개의 전극을 설치하며, 각 앞다리 피부 아래에 하나씩, 그리고 목 부위 피부 아래에 하나의 전극을 설치합니다. 측정 중에 ECG를 기록하면 최소 하나 이상의 생체 파라미터를 모니터링할 수 있습니다. 링 전극을 대략적으로 배치한 후, 두 뒷다리를 접착 테이프로 바닥에 고정합니다.최적의 신호 전도성을 위해, 피부와 링 전극 사이의 전달 저항을 줄여주는 접촉 젤을 사용합니다. 검은색으로 표시된 센싱 전극은 비복근의 직경이 최대인 위치에 배치합니다. 빨간색으로 표시된 기준 전극은 센싱 전극 바로 아래에 배치합니다.그 다음, 감지 전극으로부터 4 mm 떨어진 지점에 좌골 신경 자극을 위한 정확한 위치를 설정하고 표시합니다. 원위부 자극은 감지 전극으로부터 16 mm 떨어진 지점에서 수행됩니다. 근위부 자극은 이 지점에서 수행됩니다.여기 데이터 획득 및 분석을 위한 프로그램의 사용자 인터페이스가 나타나 있습니다. 첫 번째 행에는 ECG 기록이 시각화되어 있습니다. 두 번째 행에는자극기에서 발생하는 반복적인 펄스를 확인할 수 있습니다. 세 번째 행에서는 센싱 전극에 의해 검출된 응답 신호가 50 kilohertz의 샘플링 속도로 나타납니다. 이제 실제 기록을 시작할 수 있습니다.먼저 근위부 자극 위치에 자극 바늘을 삽입합니다. 바늘의 정확한 위치, 더 구체적으로는 STIC 신경의 적절한 자극 여부는 STIC 신경 하류의 적절한 근육 반응을 통해 모니터링할 수 있습니다. 감지 전극 영역에서는 감지 전극에 의해 검출된 신호가 사용자 인터페이스에 시각화되어 나타납니다.동시에, 일정한 최대 진폭을 갖는 명확한 이상성 반응 곡선을 얻도록 하십시오. 그 후, 원위부 자극을 동일한 방식으로 수행합니다. 사용자 인터페이스의 왼쪽 상단 모서리에서 고정 전극으로부터의 동시 기록을 확인할 수 있습니다.위쪽 행에서는 0.1 milliseconds 지속 시간의 단일 사각파 펄스의 대표 이미지를 볼 수 있으며, 이는 자극 바늘 전극에 의해 200 milliseconds마다 인가됩니다. 아래쪽 행에는 그에 상응하는 신경근 반응 곡선이 표시되어 있습니다. 데이터 분석은 기록된 신호의 잠복기와 진폭의 결정을 포함합니다. 이를 위해, 하나의 자극 지점에서 얻은 여러 개의 반응 곡선을 평균화하는 것이 권장됩니다.신호의 잠복기는 자극 시작부터 반응 곡선이 시작될 때까지의 시간입니다. 더 정확하게는 변곡점까지의 시간이며, 근위부 자극과 원위부 자극 후의 잠복기 간 시간 차이를 이용하여 신경 전도 속도를 계산할 수 있습니다. 이를 위해 근위부와 원위부 자극 지점 사이의 공간적 거리(본 사례의 경우 12 millimeters)를 알아야 합니다.또한, 소위 복합 근활동전위(compound motor action potential)를 결정하기 위해 반응 곡선의 진폭을 정량화할 수 있습니다. 이는 신호의 최대 양성 및 음성 전환점 사이의 크기를 나타냅니다. 일부 응용 분야에서는 반응 곡선의 첫 번째 변곡점부터 마지막 변곡점까지 지속되는 신호 진폭의 기간을 측정하는 것이 도움이 될 수 있습니다.신경 전도 속도는 수초화에 의해 가능해진 빠른 신호 전달에 크게 의존합니다. 따라서 탈수초 질환은 일반적으로 전도 속도의 감소를 보입니다. 기능적인 축삭 및 신경근 접합부의 수와 상관관계가 있는 복합 근활동전위는, 이것이 유의하게 감소했을 때 축삭 손상의 지표가 됩니다.지금까지 마우스의 주요 신경 전도 특성을 결정하는 쉽고 신뢰할 수 있는 방법을 살펴보았습니다. 이 절차를 수행할 때는 제모를 완전히 하고 피부를 세척하여 피부 저항을 줄이는 것이 매우 중요합니다. 그렇게 해야 최적의 신호 대 잡음비로 신호를 기록할 수 있습니다.또한, 적절한 데이터 획득을 위해 최대 자극 반응을 확인하는 것이 중요합니다. 이는 자극 바늘을 부드럽게 움직여 이상성 반응 곡선을 감지함으로써 달성할 수 있습니다. 시청해 주셔서 감사드리며, 실험에 좋은 결과가 있기를 바랍니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Neuroscience

신경과학

이 비디오는 마우스의 CMAP(Compound Muscle Action Potential)를 측정하기 위한 생체 내 기술을 보여줍니다. 전극을 설정하고, 근육 섬유에 신경을 공급하는 앞다리 뉴런을 자극하고, 근육 반응을 기록하는 단계를 간략하게 설명합니다. 이 기술은 신경 세포 탈수초화 및 기능적 뉴런 손실을 평가합니다.

Measuring Compound Muscle Action Potentials in Mouse Forelimb Muscles In Vivo(생체 내 마우스 앞근육의 복합 근육 활동 전위 측정)

이 비디오는 척골 신경에 전기 자극을 가하고, 최적의 신호를 위해 전극을 조정하고, 신경 기능을 평가하기 위해 자극을 증가시켜 쥐의 복합 근육 활동 전위(CMAP)를 기록하는 절차를 보여줍니다. 이 방법을 사용하면 신경 장애에서 말초 신경 기능에 대한 생체 내 조사를 할 수 있습니다.

쥐의 복합 근육 활동 전위의 생체 내 측정

이 비디오는 쥐의 C 섬유 신경 전도에 대한 단일 섬유 기록을 보여줍니다. 마취된 쥐는 하지에 감각 및 운동 공급을 제공하는 좌골 신경을 노출시키기 위해 절개됩니다. 그런 다음 개별 C-섬유가 노출됩니다. 발에 이식된 자극 전극을 사용하여 전기 자극이 제공되며, 단일 신경 섬유에서 반응이 기록됩니다.

쥐에서 좌골 신경 C-섬유의 생체 내 단일 섬유 기록

출처: Shannonhouse, J., et al. 생체 내 온전한 배근 신경절의 1차 감각 뉴런 네트워크에서 뉴런 앙상블의 칼슘 이미징. J. Vis. 특급 (2023). 이 비디오는 형질전환 마우스의 배측근신경절(DRG)에서 신경 세포 활동을 모니터링하기 위한 생체 내 칼슘 이미징 기술을 보여줍니다. DRG 뉴런은 칼슘에 결합할 때 형광 강도를 증가시키는 칼슘 지표를 발현합니다. 뒷발에 가해지는 기계적 또는 열적 자극은 DRG로 전파되는 활동 전위를 생성하여 뉴런에 칼슘 유입을 유도하고 형광 방출을 증가시킵니다.

In vivo: Calcium Imaging of the Intact Dorsal Root Ganglia of a Mouse(마우스의 온전한 등뿌리 신경절에 있는 신경 앙상블의 생체 내 칼슘 이미징)

GABA 성 시냅스 억제는 모터와 척수 네트워크에서 감각 신호 통합을위한 중요한 척수에서 강력한 억제 메커니즘입니다. 기초 기본 심성의 탈분극은 후근 전위 (DRP)의 기록에 의해 측정 할 수있다. 여기에서 우리는 생쥐의 DRP의 생체 기록하는 방법을 보여줍니다.

배근 잠재적 기록하여 생쥐의 척수 시냅스 억제를 측정<em&gt; 생체</em

장간막 구심성 신경은 위장관에서 뇌로 정상적인 항상성과 병태생리학에 관한 정보를 전달합니다. 위장 구심성 신경 활동은 구심성 신경이 부착된 분리된 장 분절을 장기 욕조에 장착하고, 신경을 분리하고, 기저 활동과 자극 활동을 평가하여 평가할 수 있습니다.

마우스 Jejunal과 대장 세그먼트에서 장간막 구 심성 신경 활동의 생체 외 녹음에서

Axonal 흥분 기법 이상 및 퇴행 성 돌이킬 수 없는 이벤트를 앞 생물 변화를 검사 하는 강력한 도구를 제공 합니다. 이 원고는 마 취 쥐의 척 골 신경에 이러한 기술의 사용을 보여줍니다.

Vivo에서 Axonal 흥분 테스트 쥐 척 골 신경의 electrophysiological 측정

신경 유도의 측정 neurodegeneration의 마우스 모델을 평가 하는 유용한 도구 이지만 그것은 자주 hindlimbs에 좌 골 신경을 자극에 적용 됩니다. 여기, 복합 근육 활동 전위 (CMAP) vivo에서 상 완 신경 총에 의해 innervated 마우스 forelimb 근육에서 측정 하는 기술을 설명 합니다.

Vivo에서 모터 신경 퇴보의 마우스 모델에서 앞 발에서 복합 근육 활동 전위의 electrophysiological 측정

단일 섬유 기록은 중추 및 말초 신경계에 적용할 수 있는 효과적인 전기 생리학적 기술입니다. 부착 된 동골 신경과 함께 손상되지 않은 DRG의 준비와 함께 전도 실패의 메커니즘을 검사합니다. 두 프로토콜 모두 말초 신경계의 통증과의 관계에 대한 이해를 향상시킵니다.

전도 실패의 메커니즘을 검사하기 위해 연결된 Sciatic 신경을 가진 생체 내 단일 섬유 기록 및 손상되지 않은 등철 루트 신경절의 사용

호프만 반사(H-반사)에 기초한 경직의 임상 평가와 말초 신경의 전기 자극을 사용하는 것은 확립된 방법입니다. 여기에서 우리는 마우스 앞발에서 H-반사 정량화를 위한 말단 및 직접적인 신경 자극을 위한 프로토콜을 제공합니다.

마우스의 말단 H-반사 측정

이 기사에서는 설치류 비복근 근육에서 생체 내 (표면 및 바늘 전극 어레이 사용) 및 생체 외 (유전체 셀 사용) 전기 임피던스 근조영술을 수행하는 방법에 대해 자세히 설명합니다. 생쥐와 쥐 모두에서 기술을 시연하고 사용 가능한 수정 (즉, 비만 동물, 새끼)을 자세히 설명합니다.

설치류에서 생체 내 및 생체 외 전기 임피던스 근전도 수행

학습하세요 마우스 좌골 신경의 생체 전기 생리 측정 방법을 통해 신경전도 속도와 복합근육운동전위를 정확히 측정하는 기술을. 이 프로토콜은 신경근육 질환 연구에 필수적인 도구를 제공합니다.

마우스 좌골 신경에 생체 전기 생리 측정에서

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