Name: 후 병변 호흡 신경 가소성을 연구하기 위해 자궁 경부 척수 손상의 생쥐 모델 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-05-28T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 9 s
Description: 배우세요 자궁 경부 척수 손상으로 인한 호흡 부전의 생쥐 모델을 통해 신경 가소성과 회복 메커니즘을 연구하는 방법을. 이 기법은 척수 손상 후 치료 전략을 테스트하는 데 활용됩니다.

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이 작품은 부여 계약 번호 246556 (유럽 프로젝트 RBUCE-UP)에서 유럽 연합의 일곱 번째 프레임 워크 프로그램 (FP7/2007-2013)에서 자금이 지원되고, HandiMedEx 프랑스의 공공 투자위원회에 의해 할당. 마르셀 Bonay는 Chancellerie 데 Universités 드 파리 (다리 Poix), 상테 Respiratoire EN 퐁 드 Dotation 공들인 및 센터 디부 지원 Respiratoire à 소재지 일드 프랑스 (CARDIF)에 의해 지원되었다

이 프로토콜은 우수 (파리 수드, 보조금 협정 제 246556 대학)와 Université 드 베르사유 생 캉탱 앙 이블린의 RBUCE-UP 의자의 윤리위원회의 승인을 받았다. 살균 수술 도구의 1. 준비 <ol><li> 실험실 세제로 수술 도구를 청소합니다. </li><li> 수술 전에 악기를 압력솥. </li><li> 수술 세션에서,이 수술 사이에 180 ° C에서 10 분 동안 뜨거운 구슬 살균기에 팁을 배치하여 도구를 소독. </li></ol> 약의 2. 준비 <ol><li> 사전 마취제 칵테일 및 수술 후 약물 x 1 2 ㎖ 주사기를 준비합니다. </li><li> Carprofen (5 ㎎ / ㎏), 부 프레 놀핀 (50 ㎍ / kg), Baytril (5 ㎎ / ㎏)과 Dexmedetomidine (0.5 ㎎ / ㎏) : 쥐의 무게에 따라, 사전 마취제와 주사기를 준비합니다. 락 테이트 화 링거 1 ML에 볼륨을 완료합니다. </li><li> 의 준비다른 주사기 사전 마취제의 반전 : Atipamezole (500 ㎍ / kg). </li></ol> 쥐 3. 마취 <ol><li> 동물에 2.2 단계에서 설명한 사전 마취 약물의 용액을 피하을 관리 할 수​​ 있습니다. 그런 다음, 새장에 다시 동물을 넣어 진정 효과가 나타날 때까지 기다립니다. </li><li> 100 % O 2 5 %의 이소 플루 란으로 채워 밀폐 된 챔버에 쥐를 놓고 호흡 리듬 (30 초 정도) 속도가 느려집니다 때까지 기다립니다. 그런 다음, 챔버에서 쥐를 제거하고 삽관 테이블에 배치합니다. </li></ol> 4. Orotracheal 삽관 <ol><li> 그의 뒤쪽에 동물을 거짓말, 다음 표에 자신의 앞니에 부착 된 스트랩을 배치하여 머리를 고정합니다. </li><li> 광섬유의 빛으로, 가슴 공간을 빛. 그런 다음, 동물의 입에 후두경 (또는 하나를 만들어 사용자 정의, 자세한 내용은 JOU 등. 20)를 배치합니다. 성대를 시각화. </li><li> 하락전자와 (성대 사이의) 기관에 orotracheal 가이드를 배치합니다. 가이드에 orotracheal 관 (16 G 카테터 크기)를 밀어 넣습니다. </li><li> 가이드를 제거하고 기관지 및하지 식도 관의 적절한 위치를 확인하고, 수분의 존재를 orotracheal 튜브의 끝에 배치 후두 미러와 검사. </li><li> (683 설치류 호흡기, 하버드 장치) 설치류 인공 호흡기에 튜브를 연결하고 (100 % O 2) 2 %에 이소 플루 란의 농도를 조정합니다. </li><li> 수술 테이프로 orotracheal 튜브를 고정합니다. </li></ol> 5. 척추 수술 <ol><li> 외과 의사 90 ° 각도에서 가리키는 코, 가열 수술 접시에 복부 욕창 위치에 동물을 배치합니다. 수술 전반에 걸쳐 37.5 ° C의 주위에 체온을 유지한다. </li><li> scapulas 사이 가위로 머리를 면도하고 거즈로 머리를 제거합니다. </li><li> 다음 7, 베타 딘으로 피부를 청소0 %의 알코올. 이 단계의 3 배를 반복합니다. </li><li> 발가락 핀치는 적절한 마취 깊이를 확인하기 위해 수술을 시작하기 전에 수행됩니다. &#160; 그런 다음, scapulas 사이 가위로 옆 피부 절개 rostro - 꼬리 쪽을 수행합니다. </li><li> 출혈을 방지하기 위해 건에 따라 acromiotrapezius 근육 rostro - 꼬리 쪽을 잘라. 다음 (척추 주변) spinalis 근육에 액세스 할 수 능형 근육을 떼어 놓다. </li><li> C3 척추에 C1에서 spinalis 근육을 철회. C2의 척추는 눈에 띄는 융기와 하나입니다. </li><li> 멸균 면봉을 사용하여 척추의 등 부분의 주위에 근육을 청소합니다. </li><li> rongeur으로 조심스럽게 C2의 융기를 제거하기 시작합니다. 등의 척수가 노출 될 때까지, 꼼꼼하게 계속합니다. 그 후궁 절제술는 등의 헤미의 후궁 절제술 있는지 확인하십시오. 이 지역의 주변에있는 척수 및 동맥을 둘러싸는 경질에주의를 기울이십시오. </li><li> # 55 포셉, ROS를 해부접근 금지 - 꼬리 쪽 C2 따라 두라는 다음 각 주동이와 꼬리쪽에 옆으로 계속합니다. </li><li> 뇌척수액을 스폰지. </li><li> microscissors와 자궁 경부 후근 2 번 아래 측면 부분을 확인합니다. 병변의 정도는 척수 (부상 등의보기에 대한 그림 2A 참조)의 중간 선에 도달 할만큼 가까이하는 마이크로 메스 확인합니다. 그렇지 않다면, 다른 컷 부상을 완료 할 수 있었다. 출혈의 경우, 멸균 면봉을 사용합니다. 그렇지 않으면, 동물이 부상에서 회복되지 않고 호흡을해야합니다, 반대쪽으로 이동하지 않도록주의하십시오. </li><li> 보호 층으로 근육을 봉합하고, 피부를 봉합 확대. 베타 딘 포화 멸균 거즈로 상처를 청소합니다. </li><li> 이소 플루 란 기화기을 끄고 반전 약물 주입 (Atipamezole을 [500 ㎍ / kg, IM), 체온을 확인합니다. </li><li> 동물은 인공 호흡기에 호흡을 시작하면,인공 호흡기에서 기관 튜브를 분리 한 다음 orotracheal 튜브를 제거합니다. 복구를위한 가열 새장에 동물을 배치합니다. </li></ol> 6. 수술 후 관리 수술 후, 동물은 복구를위한 최상의 환경을 보장하기 위해 지속적으로 모니터링됩니다. 항생제 (Baytril, 5 ㎎ / ㎏), 항 염증 (Carprofen, 5 ㎎ / ㎏)와 프레 놀핀은 (50 ㎍ / kg) 약은 감염을 방지하고 발생을 줄이기 위해 처음 2 일째에 수술마다 12 시간을 부여 수술 후 통증. 쥐 부드러운 음식과 물 (또는 1 차 수술 후 하루 jellified 물)에 대한 액세스 임의로있다. 피하 유체는 처음 몇 수술 일에 탈수를 방지하기 위해 사용될 수있다. 체중 및 음식 섭취량은 매일 모니터링된다. 이들의 환경은 실험 시간 후 상해 (자신의 새장 이중 주택, 튜브)에 걸쳐 충실.

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저자는 더 경쟁 재정적 이익이 없다는 것을 선언합니다.

C2 상해 모델을 만들기의 기술적 인 문제 C2 손상 쥐 모델은 호흡 후 병변 신경 가소성을 연구하는 재미있는 도구입니다. 그러나, 재현성 및 신뢰성있는 모델을 생성하기 위해 필요한 단계는 다수이고 각 하나 연구의 결과에 영향을 미칠 수있다. 예를 들어, 삽관 과정에서 극도의주의가 orotracheal 튜브 등으로 인해 부상 자체 초기 호흡 부전 이외에 폐쇄성 호흡기 장애 등 다양한 합병증을 초래할 수있는 기관지의 염증을 생산할 수 있기 때문에 수행 될 . 또한, 수술 절차 동안 척수에 대한 액세스는 동물의 복구를 위해 중요 할 수있다. 모든 단계 (근육의 해부 / 후퇴, 지느러미 후궁 절제술, durotomy, 부상 자체) 때문에 수술 사이트 주위 척추에 다양한 동맥의 존재에 매우주의 수행해야코드. 광범위한 출혈은 수술 후 회복이 혈액 손실에 의해 방해 될 수 있고, 척수 허혈 손상 외에 발생할 수 있기 때문에 피해야한다. <p clas...

척수 외상은 영구적 인 마비와 같은 극적인 발생률과 인구에서 관찰 된 일반적인 부상입니다. 그러나 부상의 심각성은 초기 외상의 수준과 정도에 따라 달라집니다. 호흡 부전은 상부 경추 척수 손상 (SCI) 1 다음과 사망의 주요 원인이다. 현재 유일한 치료 치료는 인공 호흡기의 도움하에 환자를 배치하는 것입니다. 소수의 환자로 인해 포스트 병변 지연 발생 자발적 회복, 환기 지원 2를 투약 할 수 있기 때문에, 새로운 혁신적인 비 침습 치료를 개발할 필요가 긴급 3입니다. , 상상 속 치료 전략의 응용 프로그램을 공부하고, 따라서 호흡 부전에 자궁 SCI의 효과를 조사하는 것이 표준화 된 전 임상 모델을 갖는 것은 필수적이다. 이 기술 문서에서는, 우리는 특정 전임상 쥐 모델 (을)를 설명F 호흡 장애는 C2 수준에서 부분 자궁 SCI에 의해 유도. 이 모델은 현재 (: 4-13 후기) 세계의 여러 실험실에서 사용됩니다. 그러나, 수술 과정에서 약간의 차이가 특정 경추 부상 뮤린 모델을 생성하기 위해 다른 연구자간에 관찰 될 수있다. 호흡 출력에 C2 SCI의 효과는 첫 번째 포터 (14)에 의해 1895 년에 설명했다. 자궁 hemisection 침묵 횡격막 신경의 활동과 이후의 다이어프램 마비로 이어지는, 부상의 동측에 (뇌간, 그림 1A에 rVRG에 위치) 중앙 드라이브에서 횡격막 운동 신경원의 deafferentation을 유도한다. 반대쪽은 그대로 유지하고 동물이 생존 할 수 있습니다. 낮은 척추 세그먼트 (C4 레벨 15에서 예를 들어 contusive 부상)에있는 다른 SCI는 달리, 양측 횡격막 motoneuron 핵의 무결성이 유지됩니다. cerv 후iCal의 C2 부상, 일부 자발적인 활동으로 인해 분절 수준 C3-C6 (교차 횡격막 경로, CPP, 그림 1B)에서 척추 중앙선을 넘어 반대편 침묵 시냅스 경로의 활성화에 (횡격막과 다이어프램) 동측에 관찰 할 수있다 . 인 CPP의 활성화는, 정의에 의해, 동측 부분 횡격막 신경의 회복을 유도 반대측 phrenicotomy와 결합 된 C2의 hemisection은 시간에서 주 후 부상 16-18로 발생할 수 있습니다. 호흡 회복이 CPP 통로의 실제의 유익한 효과는 (19)를 한정하고 추가 조사와 치료는 자발적 회복 (3)의 크기를 향상시키기 위해 개발되어야한다. 이 프로토콜은 (이전과 횡격막 운동 신경원의 interneurons, 분자 및 cellula에서 호흡 생리학 다양한 수준에서 호흡 후 병변 가소성을 연구하는 전 임상 쥐 모델의 강력한 유형을 제공R, 예컨대 앞다리)의 운동뿐만 아니라 C2 부분 경추 척수 손상 후 호흡기 및 전위의 회복을 개선하는 목적 침습 및 비 침습성 치료 전략을 시험하는 모델.

<table><tbody><tr><td colspan="4">Animal</td></tr><tr><td>Male Sprague Dawley Rat</td><td>Janvier</td><td></td><td>225-250 g</td></tr><tr><td colspan="4">Surgical Instruments</td></tr><tr><td>Student Dumont #5 펜치</td><td>파인 사이언스 도구</td><td>91150-20</td><td></td></tr><tr><td>학생 표준 패턴 펜치</td><td>파인 사이언스 도구</td><td>91100-12</td><td></td></tr><tr><td>Mayo-Stille 가위</td><td>Fine Science Tool</td><td>14013-15</td><td>곡선</td></tr><tr><td>학생 Vannas Spring Scissors</td><td>Fine Science Tool</td><td>91500-09</td><td>스트레이트</td></tr><tr><td>스프링 가위 - 8mm 블레이드</td><td>Fine Science Tool</td><td>15025-10</td><td>스트레이트 블런트/블런트</td></tr><tr><td>Friedman Pearson Rongeur</td><td>Fine Science Tool</td><td>16121-14</td><td>곡선</td></tr><tr><td>해부 칼 - 파인 팁</td><td>파인 사이언스 도구</td><td>10055-12</td><td>스트레이트</td></tr><tr><td>Olsen-Hegar 바늘 홀더</td><td>파인 사이언스 도구</td><td>12002-14</td><td>톱니 모양</td></tr><tr><td>Weitlaner-Locktite 견인기</td><td>파인 사이언스 도구</td><td>17012-11</td><td>2x3 무딘</td></tr><tr><td>흡수성 수술용 봉합사</td><td>Centravet</td><td>BYO001</td><td>봉합사 크기 4-0</td></tr><tr><td colspan="4">Equipment</td></tr><tr><td>Hot Bead Steriliser</td><td>Fine Science 도구</td><td>18000-45</td><td></td></tr><tr><td>카테터&nbsp;</td><td>Centravet</td><td>CAT188</td><td>16 G</td></tr><tr><td>후두경</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>가이드 와이어</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>후두 거울</td><td>Centravet</td><td>MIR011</td><td></td></tr><tr><td>젖 종소리</td><td>Centravet</td><td>RIN020</td><td></td></tr><tr><td>주사기</td><td>Centravet</td><td></td><td></td></tr><tr><td>바늘</td><td>Centravet</td><td></td><td></td></tr><tr><td>O2</td><td>Air Liquid</td><td>I1001M20R2A001</td><td></td></tr><tr><td>683 RodentT 인공호흡기 115/230V</td><td>Harvard Apparatus</td><td>55-0000</td><td></td></tr><tr><td>독립형 기화기</td><td>WPI</td><td>EZ-155</td><td></td></tr><tr><td>얇은 선 가열판</td><td>WPI</td><td>EZ-211</td><td></td></tr><tr><td>공기통</td><td>WPI</td><td>EZ-258</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">Drugs</td></tr><tr><td>카르프로펜</td><td>센트라벳</td><td></td><td></td></tr>, <tr><td>리마딜</td><td>센트라벳,</td><td>RIM011</td><td></td></tr>, <tr><td>부프레노르핀</td><td>센트라벳,</td><td>BUP001</td><td></td></tr>, <tr><td>베이트릴</td><td>센트라벳</td>, <td>BAY001</td><td></td></tr>, <tr><td>덱스메데토미딘</td><td>센트라벳,</td><td>DEX010</td><td></td></tr>, <tr><td>아티파메졸</td>, <td>센트라벳</td>, <td>ANT201</td><td></td></tr>, <tr><td>베타딘 용액</td><td>센트라벳</td><td>VET002</td><td></td></tr><tr><td>이소플루란</td><td>센트라벳</td><td>VET066</td><td></td></tr></tbody></table>

후 병변 호흡 신경 가소성을 연구하기 위해 자궁 경부 척수 손상의 생쥐 모델

A Murine Model of Cervical Spinal Cord Injury to Study Post-lesional Respiratory Neuroplasticity

자궁 경부 척수 손상은 영구적 인 마비를 유도하고, 종종 호흡 곤란에 이르게한다. 지금까지, 더 효율적인 치료제가 높은 자궁 경부 척수 손상 (SCI) 다음 호흡 부전을 개선 / 향상을 위해 개발되지 않았습니다. 여기에서 우리는 다양한 사후 병변 호흡 신경 가소성을 연구하는 자궁 경부 2 (C2) metameric 수준 높은 SCI의 쥐의 전 임상 모델을 제안한다. 이 기술로 인해 뇌간에있는 호흡 센터에서 횡격막 운동 신경원의 deafferentation에 다이어프램의 hemiparalysis을 유도 할 것이다 C2 수준의 수술 부분 부상으로 구성되어 있습니다. 부상의 반대쪽은 그대로 유지하고 동물 복구를 할 수 있습니다. (흉추 및 요추 수준에서) 전위의 기능에 영향을 미치는 다른 SCIS는 달리, 호흡 기능 동물 동기 부여를 필요로하지 않고, 적자 / 복구의 정량화 쉽게 (다이어프램 횡격막 신경 녹음을 수행 할 수 있습니다의, 몸 전체 환기). 이 전 임상 C2 SCI 모델은 서로 다른 수준 (생리학 분자)에서 다양한 호흡 및 비 호흡 신경 가소성 이벤트를 공부하고있는 호흡을 향상시킬 다양한 상상 속 치료 전략을 테스트하기 위해 강력하고 유용하고 신뢰할 수있는 전임상 모델 SCI 환자.

부상의 정도 성공이 특정 실험 모델의 재현성 각 조작 / 외과 의사의 경험에 따라 달라집니다. 나머지 ventrolateral는 흰색 물질 21을 아끼지과 C2 부상 다음 호흡 복구 (횡격막 신경 활동과 다이어프램 활동)의 연속적인 양의 상관 관계가있다. 부상은 &quot;핸드 메이드&quot;이고 외과에서 연습을 필요로하기 때문에, 각 부상의 정도는 정확한 크기를 결정하기 위해 조직 학적 기술 (파라 포름 알데히드와 조직 4 %, 냉동 조직 슬라이스, 크레 실 바이올렛 염색 고정)에 의해 확인되어야한다 의 손상된 조직 (그림 2B). 전기 생리학 녹음 C2 SCI 후, 동측의 횡격막 신경의 활동이 폐지된다 (그림 3A, VINIT <...

호흡 장애는 경추 척수 손상 후 사망의 주요 원인이다. 부분 자궁 경부 손상에 의해 유도 된 호흡의, 재생 가능한 정량화하고, 신뢰할 수있는 전임상 동물 모델을 갖는 것은 이후 호흡 및 비 호흡 신경 가소성을 이해하는 데 도움이 및 추정 복구 전략을 테스트 할 수 있습니다.

A cervical spinal cord injury induces permanent paralysis, and often leads to respiratory distress. To date, no efficient therapeutics have been developed ...

이 절차의 전반적인 목표는 경추 척수 손상으로 인한 호흡 부전 및 비호흡 부전에 대한 정량화할 수 있고 신뢰할 수 있으며 재현 가능한 전임상 동물 모델을 생성하는 것입니다. 이것은 먼저 절차에 필요한 기구와 약물을 준비함으로써 달성됩니다. 두 번째 단계는 동물을 마취한 다음 삽관하고 설치류 인공호흡기에 연결하는 것입니다.다음으로, 척수를 노출시키고 경추 손상을 유도합니다. 동물을 꿰매어 만든 후 마취를 제거하고 적절한 수술 후 관리를 제공합니다. 궁극적으로, 조직학적 기법과 신경 및 근육 기록이 경추 손상의 정도와 영향을 조사하는 데 사용됩니다.패널 코드 타박상과 같은 기존 방법에 비해 이 기술의 주요 장점은 부상이 더 작고 잘 정의되어 있다는 것입니다. 절차를 시연하는 것은 제 실험실의 엔지니어가 될 것입니다.수술 준비를 위해 수술 기구를 세척하고 오토클레이브합니다. 또한 마취 전 약물로 2 x 1 밀리리터 주사기를 준비하고 젖산 링거로 볼륨을 1 밀리리터로 완성합니다 다른 주사기에서 마취 전 약물에 대한 반전을 준비합니다 피하 후 마취 전 약물 용액을 투여 한 후 동물을 케이지에 다시 넣고 진정 효과가 나타날 때까지 약 20 분 동안 기다립니다.그런 다음 쥐를 100% 산소에 5%의 불소로 채워진 밀폐된 방에 넣고 호흡 리듬이 느려질 때까지 약 30초 동안 기다립니다. 그런 다음 챔버에서 쥐를 꺼내 등에 있는 삽관 테이블에 놓습니다. 이제 앞니를 테이블에 부착하는 스트랩을 배치하여 머리를 고정합니다.광섬유 조명을 사용하여 흉부 공간을 비춥니다. 그런 다음 동물의 입에 후두경을 넣어 성대를 시각화합니다. 다음으로 성대 사이의 기관으로 또는 기관 가이드를 밀어 넣은 다음 가이드의 구강 기관관을 밀어 넣습니다.그런 다음 가이드를 제거하고 구기관관 끝에 후두 거울을 배치하여 수분이 있는지 확인하고 튜브가 기관에 배치되었는지 확인합니다. 그런 다음 튜브를 인공호흡기에 연결하고 불소 농도를 2%로 조절한 다음 수술 테이프로 구강 튜브를 동물 주둥이에 고정합니다. 수술을 위해 동물을 뒤집어 코가 외과의와 90도 각도를 향하도록 가열된 수술 플레이트에 놓습니다.수술 내내 체온을 섭씨 37.5도 안팎으로 유지하십시오. 견갑골 사이를 이발기로 면도한 후 거즈로 수염을 제거하고 피부를 청소합니다. 처음에는 베타딘으로, 그 다음에는 70%알코올로.그런 다음 가위를 사용하여 4-5cm 길이의 측면 피부를 절개합니다. Roc 견갑골 사이의 coly. 견봉 승모근을 자르고, 출혈을 방지하기 위해 힘줄을 따라 cocoly를 자릅니다.그런 다음 능형근을 해리하여 척추를 둘러싸고 있는 척추 근육에 접근합니다. 스피넬 근육의 눈에 보이는 돌기를 찾습니다. 이것은 C 두 척추뼈의 두드러진 apophysis의 위치를 표시합니다.이 랜드마크를 사용하여 척추 근육을 C 척추에서 C3 척추까지 자릅니다. 다음으로, 멸균 면봉을 사용하여 척추의 등쪽 부분 주위의 근육을 청소합니다. Ron Jour를 사용하여 C 2의 apophysis를 조심스럽게 제거합니다.그런 다음 경막과 동맥을 피하도록 주의하면서 후판 절제술을 꼼꼼하게 계속하십시오. 등쪽 반쪽 후판 절제술이 끝나면 등쪽 척수가 노출됩니다. 숫자 55 겸자로 경막을 잡습니다.마이크로 가위를 사용하여 C 2를 따라 dura ROS coly를 해부합니다. 그런 다음 각 rostral 및 coddle 쪽에서 측면으로 계속합니다. 척수 손상을 수행하기 위해 필요에 따라 대뇌 척수액을 스펀지로 펌핑합니다.먼저, 첫 번째로 보이는 경추 등쪽 뿌리가 될 두 번째 경추 등쪽 뿌리를 식별합니다. 마이크로 가위를 사용하여 두 번째 경추 등쪽 뿌리까지 측면 부분을 만듭니다. 멸균 면봉을 사용하여 필요에 따라 혈액을 제거하십시오.마이크로 메스로 병변의 정도가 척수의 정중선에 도달할 만큼 충분히 가까운지 확인합니다. 그런 다음 마이크로 메스를 사용하여 다시 절단하여 부상을 완성합니다. 부상의 정도가 등쪽에서 복부로, 측면으로 정중선으로 이어지도록 합니다.HEMI 절개가 완료되면 근육과 피부를 봉합하고 Betadine 포화 멸균 거즈로 상처를 청소합니다. 불소 기화기의 isof를 끈 후, 역전 약물을 근육 주사하고 체온을 확인하십시오. 동물이 인공호흡기에 대고 숨을 쉬기 시작하면 인공호흡기에서 기관관을 분리하고 튜브를 제거합니다.회복을 위해 동물을 가열된 우리에 눕히십시오 수술 후 첫 이틀 동안 12시간마다 항생제, 항염증제 및 진통제를 투여하고 탈수를 방지하기 위해 피하 수액을 사용합니다. 수술 후 처음 며칠 동안은 쥐가 수술 후 첫 날에는 젤리 물을 성욕적으로 섭취하고 다음 날에는 부드러운 음식과 물을 섭취하도록 허용하고 체중과 음식 섭취량을 모니터링하십시오. C 2 부상 후 척수의 횡단면은 부상의 재건을 가능하게 합니다.회색 음영은 척수 손상 이전의 부상 정도를 보여줍니다. 횡격막 신경 활동은 C 2 부분 손상 후 동물의 양쪽에서 유사합니다. 횡격막 신경 활동은 동측 쪽에서 제거되지만 반대쪽 쪽에서는 손상 후 7일이 지나면 손상되지 않습니다.교차된 횡격막 경로로 인해 동측 횡격막 신경 활동의 부분적인 회복이 있습니다. C 2 부분 손상은 동측 횡격막 활동을 폐지합니다. 부상 후 7일째 되는 시점에 경미한 활동이 나타나는데, 이는 주로 횡단 횡격막 경로의 활동으로 인한 것입니다.동측 측에서 관찰된 신호의 리드미컬한 편향은 심전도의 인공물 기록에 기인합니다. C 2 손상 후 반대쪽 횡격막 활동은 부상 전과 동일하게 유지되며 동물이 발달 후 생존할 수 있도록 합니다. 이 기술은 호흡 생리학 분야의 연구자들이 부상 후 회복을 개선하는 데 도움이 되는 새로운 치료법을 탐구할 수 있는 길을 열었습니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

무한 호라이즌 임팩터를 사용하여 자궁 경부 일방적 척수 부상을 생산하기위한 안정적이고 반복 가능한 방법이 설명되어 있습니다. 방법은 사용자 정의 설계된 프레임을 활용하고 척추를 고정 클램프. 표준화된 절차와 충분하고 지속적인 부상의 biomechanical 부상 매개 변수 결과.

무한 호라이즌 임팩터을 사용하여 일방적 경부 척수의 부상의 Contusive 모델

마우스의 제어 자궁 경부 열상 상해

척수 허혈 재관류 손상의 기전 이해의 부족은 고위험 대동맥 연산 다음 마비를 방지하기 위해 상기 부속 장치를 방해했다. 따라서, 동물 모델의 개발이 필수적이다. 이 원고는 쥐 모델에서 흉부 대동맥 폐색 다음 재현 하체 마비를 보여줍니다.

척수 허혈 - 재관류의 생쥐 모델에서 흉부 대동맥 폐색에 의해 재생산 할 하반신 마비

척수 손상은 심각한 이환율과 사망률이 높은 원인 외상 조건이다. 본 연구에서 우리는 구체적으로 신경 줄기 세포를 이식 하였다 마우스 척수 손상의 타박상 모델을 설명한다.

척수 손상의 실험 Contusive 모델에서 신경 줄기 세포 이식

이 기사에서는 신생아 마우스에서 재현 가능한 척수 압박 손상(SCI)을 생성하는 방법에 대해 설명합니다. 이 모델은 자발적인 기능 회복의 기초가 되는 적응 가소성의 메커니즘을 연구하는 데 유리한 플랫폼을 제공합니다.

신생아 마우스 척수 압축 부상 모델

여기, 예비 중앙 운하 틈새 주택 내 인 성 신경 줄기 세포 (NSCs) 성인 마우스에서 최소한의 척수 상해 모델의 성능을 보여 줍니다. 우리는 활성화 및 마이그레이션 고 원시적인 NSCs 부상 다음의 척도를 neurosphere 분석 실험을 사용 하는 방법을 보여줍니다.

최소한의 척수 상해의 마우스 모델에서 내 인 성 신경 줄기 세포 활성화 평가 Neurosphere 분석 결과

쥐 흉부 척추 절제술은 운동 성 회복 및 치료 효능의 신경 메커니즘을 조사하기 위해 일방적 인 척수 손상의 귀중하고 재현 가능한 모델입니다. 이 문서에는 hemisection 절차를 수행하고 오픈 필드 경기장에서 운동 성능을 평가하기 위한 자세한 단계별 가이드가 포함되어 있습니다.

쥐의 흉척 척수 위축 수술 및 개방운동 운동 평가

최소 침습 기술과 간단한 실험실 장치는 실험 동물에 대한 수술 손상을 줄이고 해부학적 형태 유지를 허용하여 척수 손상 모델의 재현성을 향상시킵니다. 이 방법은 신뢰할 수있는 결과와 재현 가능한 절차가 질병 배상 메커니즘의 조사를 용이하게하기 때문에 가치가 있습니다.

최소 침습 기술을 기반으로 한 마우스 타박상 척수 손상 모델 설정

마우스에서 중심 탯줄 증후군(CCS)을 시뮬레이션하는 본 프로토콜은 반복성을 개선하고 실험 동물에 대한 수술 손상을 최소화하여 해부학적 구조가 과도하게 파괴되는 것을 방지했습니다. 이 연구의 전략은 일관된 결과를 도출하여 부상 메커니즘에 대한 연구를 가능하게 하기 때문에 유리합니다.

C57BL/6J 마우스의 중심삭증후군 모델 확립

호흡기 합병증은 경추 척수 손상(cSCI)이 있는 개인의 주요 사망 원인입니다. cSCI의 동물 모델은 기계론적 평가 및 전임상 연구에 필수적입니다. 여기에서는 쥐에서 편측 C2 척추 반절 (C2SH) 후 횡격막 근육 (DIAm) 활동의 기능적 회복을 평가하는 재현 가능한 방법을 소개합니다.

쥐에서 편측 경추 척수 반절개 후 완충 횡격막 활동의 기능적 회복 평가

배우세요 자궁 경부 척수 손상으로 인한 호흡 부전의 생쥐 모델을 통해 신경 가소성과 회복 메커니즘을 연구하는 방법을. 이 기법은 척수 손상 후 치료 전략을 테스트하는 데 활용됩니다.

후 병변 호흡 신경 가소성을 연구하기 위해 자궁 경부 척수 손상의 생쥐 모델

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