에 대한 성별 감정 - 키토산 하이드로 겔의 개발 체외 에나멜 재성장

이 절차의 전반적인 목표는 표재성 법랑질 재건을 위한 AMLO 및 키토산 하이드로겔을 제조하기 위한 프로토콜을 개발하는 것입니다. 이것은 먼저 에칭된 치아 조각을 준비함으로써 수행됩니다. 두 번째 단계에서는 신선한 AMLO와 키탄 하이드로겔을 준비합니다.

다음으로, AMLO와 키탄 하이드로겔을 치아 슬라이스 표면에 도포합니다. 마지막으로, 치아 법랑질은 인공 타액에서 AMLO chizen 하이드로겔로 다시 자랍니다. 궁극적으로, 초음파 처리와 나노 압입은 새로 형성된 층의 기계적 강도와 천연 법랑질에 대한 결합을 평가하는 데 사용할 수 있습니다.

이 기술의 의미는 성인과 어린이 모두에서 영향을 받은 치아 법랑질에 적용하고, 조기 충치 병변을 중단하고, 충치로 인한 손실 법랑질을 재건하고, 치아 구조를 보존하고, 충치의 진행을 방지하는 기술을 개발하는 것으로 확장됩니다. 이 절차를 시연하는 것은 제 연구실의 박사후 연구원인 Chittar one 박사가 맡을 것입니다. 복원된 충치가 없는 인간 제3대구치를 선택하는 것으로 시작합니다.

수냉식 저속 다이아몬드 톱을 사용하여 크라운을 세로로 2mm 두께의 조각으로 자른 다음 어금니의 뿌리 부분을 초음파로 제거합니다. 2분 동안 조각을 세척한 다음 이온수로 세 번 헹구어 부식성 병변을 시뮬레이션합니다. 두 조각을 30% 인산으로 30초 동안 에칭합니다.

그런 다음 즉시 이온수로 헹굽니다. 그런 다음 초음파로. 에칭된 조각을 다시 2분 동안 세척하고 이온수로 헹굽니다.

세 번 더. Kazan 재고 솔루션을 준비합니다. 먼저 부피 당 1 % 중량, 카잔을 부피 당 1 % 부피의 아세트산 용액에 용해 한 다음 밤새 섭씨 80도에서 교반합니다.

용액을 실온으로 냉각한 후 0.45마이크로미터 필터를 통해 에산을 걸러낸 다음 1몰 수산화나트륨을 첨가하여 pH를 5.0으로 조정합니다. 칼슘 및 인산염 원액을 준비하려면 염화칼슘의 무게를 측정하고 0.1 몰 용액을 혼합합니다. 다음으로, 용액이 제거될 때까지 용액을 와류로 가열하고 1몰 수산화나트륨으로 pH 값을 11로 조정합니다.

그런 다음 diba sodium phosphate의 무게를 잰다. 용액이 투명해질 때까지 0.1 몰 용액과 와류를 혼합합니다. AMLO Genin kaizan 하이드로겔을 준비하려면 200마이크로그램의 재조합 돼지 AMLO 게닌이 들어 있는 튜브에 갓 준비된 960%esan 용액을 추가합니다.

그런 다음 깨끗해질 때까지 용액을 와류로 만듭니다. 이제 25 마이크로 리터의 0.1 몰 염화칼슘 용액을 첨가 한 다음 15 마이크로 리터의 0.1 몰 인산나트륨 디바 용액을 오잔 용액을 함유 한 AMLO에 추가합니다. 5분 동안 솔루션을 소용돌이치십시오.

그런 다음 AMLO 및 오잔 용액의 pH를 6.5 AMLO로 조정하기 위해 1 몰 수산화물을 조심스럽게 첨가하고 pH 값이 6.5에 도달하면 오잔 하이드로겔이 형성되어 하이드로 겔 인 AMLO andaz에서 법랑질 재성장을 시작합니다. 먼저 수산화나트륨 1몰로 인공 타액액의 pH를 7.0으로 조정하고 용액을 섭씨 4도에서 보관합니다. 그런 다음 주사기를 사용하여 약 20마이크로리터의 AMLO와 키젠 하이드로겔을 가장자리 치아 조각에 바르고 실온의 건조제에 넣습니다.

2시간 후 타액액에 300ppm의 불화나트륨을 첨가한 다음 치아 조각을 30ml의 용액이 들어 있는 비이커에 옮깁니다. 비커를 알루미늄 호일로 덮고 비커를 섭씨 37도의 오븐에 넣습니다. 마지막으로, 3-7일 후에 치아 조각을 제거하고 AMLO와 치젠 하이드로겔로 수리한 후 건조될 때까지 실온의 건조제에 7일 동안 놓으면 에칭된 법랑질 표면에 15마이크로미터 두께의 법랑질과 같은 층이 형성됩니다.

새로 자란 층은 직경이 약 50나노미터인 고도로 정렬된 결정 배열로 만들어지며 표면에 수직인 바다 축을 따라 우선적으로 자랍니다. 이 바늘 모양의 결정은 천연 법랑질의 기본 단위와 유사한 다발로 구성되어 있습니다. 수리된 층의 선택된 영역 전자 회절 이미지는 새로 성장한 결정의 계층적 정렬을 나타내는 호 모양의 패턴을 나타냅니다.

0 0 2 방향 X선 회절 분석을 통해 새로 성장한 층이 식욕으로 구성되어 있음을 확인할 수 있으며, 이 이미지는 주사 전자 현미경 및 선택한 영역 전자 회절 관찰에 따라 결정학적 C축을 따라 정렬되어 있으며, 새로 성장한 층과 자연 법랑질 사이의 계면의 미세 구조가 표시됩니다. 새로 성장한 결정은 원래의 법랑질 결정체와 같은 방향으로 성장하지 않았으며, 단백질에 의한 식욕 성장은 자연 법랑질 결정에 비해 새로 성장한 결정의 수직 방향을 초래합니다. 새로 성장한 층과 법랑질 기판 사이의 계면에는 명백한 갭이 없습니다.

나노 스케일에서 법랑질과 재성장된 결정은 함께 융합되어 이음매 없는 계면을 형성했습니다. 초음파 처리 10분 후, AMLO Genin 키토 하이드로겔에 형성된 새로 성장한 층은 여전히 법랑질 표면에 단단히 결합되어 있으며 조직화된 구조는 암 몰로겐 없이 타이젠 하이드로겔로 처리된 샘플에 대해 보존됩니다. 그러나 법랑질과 수리된 층 사이의 큰 틈이 관찰되어 새로 자란 층과 자연 법랑질을 명확하게 구별할 수 있습니다.

이 실험에서, 새로 성장한 층의 AMLO 게닌은 면역 형광 표지된 후 AMLO 게닌의 존재를 새로 성장한 층 내의 녹색 형광에 의해 확인되었습니다. 산 에칭 후 그래프에서 볼 수 있듯이 에나멜 표면의 경도와 탄성률은 각각 거의 98 및 88 % 감소합니다. AMLO 게닌이 없는 오잔 하이드로겔로 처리된 대조군은 경도와 탄성률 모두에서 제한된 개선만 보여줍니다.

대조적으로, AMLO 및 오잔 하이드로겔의 광물화 후 개발 후 모듈러스에서 거의 4배, 경도에서 9배의 증가가 관찰됩니다. VI 및 모델에 대한 추가 평가에서 이 프로토콜은 조기 충치 거리 및 침식과 같은 enam 결함을 치료하기 위한 기술을 설계하기 위해 확장될 수 있습니다. 에나.