합성 및 크로마토 그래피에 대한 최적의 고정상의 양이 선택의 참여 Iodoaziridines의 정화

이 절차의 전반적인 목표는 최종 toal I oto 요오드를 준비하고 정제하는 것입니다. 이것은 먼저 저온에서 디 이토 메탄의 탈양성자화에 의해 디 이토 메틸 리튬을 생성하고 면역과 반응함으로써 달성됩니다. 두 번째 단계는 반응 혼합물을 빠르게 가온하여 원하는 I oto uridine 생성물에 대한 이요오드화 중간체의 고리화를 촉진하는 것입니다.

다음으로, 크로마토그래피에 사용되는 다양한 고정상에 대한 I oto Uridine 제품의 안정성을 평가하여 정제에 가장 적합한 것을 결정합니다. 마지막 단계는 I oto a 요오드를 정제하고 양성자 NMR 분석을 수행하는 것입니다. 궁극적으로, 크로마토그래피를 위한 이 고정상(stationary phases) 스크리닝은 활성 4로 변형된 염기성 일루미나(Illumina)가 IDO 오딘(odine)의 정제에 가장 적합하다는 것을 보여주기 위해 사용됩니다.

새로운 IDO 요오드 제품이 실리카겔 크로마토그래피에 불안정하여 대체 정제가 필요하다는 것을 발견했을 때 이 방법에 대한 아이디어를 처음 떠올렸습니다. 여기에서 우리는 크로마토그래피를 위한 고정상을 배열하기 위해 IO odine의 안정성을 평가하는 절차를 설계했으며, 이는 잠재적으로 민감한 다른 화합물에도 적용될 수 있습니다. 이 절차를 시연할 사람은 Tom과 Dom인데, 둘 다 제 연구 그룹의 박사 과정 학생입니다.

첫 번째 화염 건조, 교반 막대가 들어 있고 아르곤 스트림 아래에 격막이 장착된 100밀리리터 둥근 바닥 플라스크. 플라스크로 실내 온도를 식힌 후 주사기를 통해 5.7ml의 무수 사면체와 2.7ml의 무수 에틸 에테르를 추가하고 마이크로 주사기를 통해 갓 증류된 315마이크로리터의 헥사 에틸 딜란을 추가합니다. 플라스크가 잘 잠길 수 있는 적절한 크기의 doer에 플라스크를 놓습니다.

교반이 시작된 후 드라이 아이스와 아세톤을 doer에 첨가하여 용액을 섭씨 영하 78도까지 냉각시킵니다. 그런 다음 반응 용기의 노출을 최소화하기 위해 알루미늄 호일로 doer를 덮습니다. 그 후 0.6 밀리리터의 2.5 몰과 부틸 리튬을 2-3 분에 걸쳐 주사기를 통해 헥산에 적가합니다.

혼합물을 섭씨 영하 78도에서 30분 동안 저어준 후. 리튬 헥사 에틸 딜란 용액을 형성하려면 주사기를 통해 화염 건조된 10밀리리터 원형 바닥 플라스크에 무수 테라 하이드로 페란 1ml를 추가합니다. 그런 다음 마이크로 주사기를 통해 135마이크로리터의 디 ITOM 메탄을 추가하고 플라스크를 부드럽게 휘젓어 용액이 잘 혼합되었는지 확인합니다.

다음으로, 용액을 섭씨 영하 78도에서 리튬 헥사 에틸 딜란 용액에 2분에 걸쳐 적가하면서 용액을 20분 동안 교반합니다. 135mg의 아민을 다른 화염 건조 10 밀리리터의 둥근 바닥 플라스크에 넣고 2 밀리리터의 무수 테트라 하이드로 페란에 용해시킵니다. 20분의 탈양성자화 시간 후, 섭씨 영하 78도에서 5분 이상 디이토 메틸 리튬 용액에 면역 용액을 적가합니다.

dropwise edition이 완료된 직후 드라이아이스 수조에서 반응 용기를 들어 올립니다. 알루미늄 호일로 플라스크를 회수하고 섭씨 0도의 얼음물 수조로 옮깁니다. 용액을 섭씨 0도에서 15분 동안 저어줍니다.

그 후, 30 밀리리터의 포화 중탄산 나트륨 수용액을 첨가하여 반응을 냉각시킨다. 혼합물을 분리 깔때기로 옮기고 30ml의 디클로로 메탄을 추가합니다. 혼합물을 흔들고 깔때기를 환기시키고 하부 유기 층을 제거합니다.

추출을 두 번 반복한 후 결합된 유기층에 황산나트륨을 첨가하여 용액에 존재하는 수분을 제거합니다. 그런 다음 면 플러그가 있는 유리 깔때기를 사용하여 진공 여과 상태에서 황산나트륨을 여과하고 250밀리리터 원형 바닥 플라스크에 여과액을 수집하고 회전 증발기에서 감압 하에서 용매를 제거합니다. 원하는 ITO uridine 제품의 불순한 샘플을 제공합니다.

1 3 5 TRIMETH 옥시 벤젠을 원유 식사에 내부 표준물질로 첨가하고 원유 식사 샘플을 디 클로로 메탄에 용해시킵니다. 이것이 완전히 용해되었는지 확인합니다. 이 혼합물에서 부분 표본을 취한 다음 감소된 압력에서 용매를 제거합니다.

완료되면 양성자 NMR 분광법으로 샘플을 분석합니다. NMR 분석 후 마스트 노바와 같은 표준 NMR 처리 소프트웨어를 사용하여 기록된 양성자 NMR 스펙트럼을 엽니다. 스펙트럼을 마우스 오른쪽 버튼으로 클릭하고 통합을 선택합니다.

그런 다음 수동을 선택하여 통합 도구를 제공합니다. 클릭하고 드래그하여 6.08 PPM 및 4.87 PPM에서 피크의 너비를 덮고 내부 표준물질과 aine CHI 신호의 신호를 각각 통합합니다. 6.08 PP m에서 피크에 대한 적분을 마우스 오른쪽 버튼으로 클릭하고 edit integral을 선택하고 정규화된 값을 3.0으로 변경합니다.

다음으로, 요오드 CHI 신호에 대해 업데이트된 적분값을 사용하여 I OTO 요오드의 수율을 결정합니다. NMR 분석이 완료되면 원뿔형 플라스크에 교반 막대를 포함하는 6개의 별도 250ml 원추형 플라스크에 다음 고정상 25g을 50ml의 5%에틸 아세테이트 헥산과 혼합합니다. 대조군으로 사용할 50 밀리리터 용액, 5 % 에틸 아세테이트 heane을 준비합니다.

그런 다음 자석 교반 플레이트에 슬러리를 저어줍니다. I OTO Azarin 내부 표준물질 용액의 2밀리리터 부분 표본을 원뿔형 플라스크 설정 실온 각각에 추가합니다. 그런 다음 슬러리 혼합물을 30분 동안 저어줍니다.

30분 후 중앙 깔때기를 사용하여 진공 상태에서 각 슬러리 혼합물을 여과하고 250ml의 둥근 바닥 플라스크에 각 여과액을 수집합니다. 중앙 깔때기의 잔류물을 30ml의 디클로로 메탄으로 두 번 세척합니다. 회전 증발기를 사용하여 생성된 샘플에서 용매를 제거합니다.

그런 다음 양성자 NMR 분광법으로 샘플을 분석하여 각 사례에서 회수된 이오타 오딘의 양을 계산합니다. 앞서 설명한 대로 실험실 노트에 수율을 기록하십시오. 테스트된 각 고정상에서 얻은 I OTO Aine의 수율을 이전에 얻은 수율과 비교하여 가장 높은 수율을 제공하는 샘플을 결정합니다.

다음으로, 앞서 설명한 합성을 반복하여 미처리 IO 요오드 혼합물을 생성하여 염기성 일루미나 활성을 생성합니다. 넷, 100g의 기본 Illumina 활성을 추가하고, 1g은 500ml의 둥근 바닥 플라스크에 추가한 다음 플라스크에 10ml의 물을 추가합니다. 플라스크에 유리 마개를 끼운 후 덩어리가 보이지 않을 때까지 세게 흔들면 Illumina 전체에 물이 고르게 퍼져 있음을 나타냅니다.

Illumina가 실온으로 냉각되면 기본 Illumina 활성 4를 사용하여 컬럼 크로마토그래피로 IO 미처리 요오드를 정제합니다. 고정상으로, 5%YL 아세테이트 탁산으로 등급이 매겨지는 헥산으로 용리합니다. 둥근 바닥 플라스크에 분획이 포함된 제품을 결합하고 회전 증발기를 사용하여 용매를 제거하여 순수한 I oto 요오드를 얻습니다.

정제하기 전에, I oto a 요오드의 59% 수율은 양성자 NMR에 의해 계산되었습니다. 그러나 이 I oto a iodine은 정제가 어려웠고 염기성 Illumina에서 실리카 정제 시 상당한 분해를 겪었습니다. 활동 4는 48%의 수율로 제품을 제공했습니다.

양성자 NMR 분석은 내부 표준 기본 Illumina 활성과 관련하여 고정상에 대한 일련의 수율을 제공했으며, 4 개는 NMR 수율에 가장 가까운 53 %의 가장 높은 수율을 제공했습니다. 따라서 기본 Illumina 활성 4가 마지막에 선택되었습니다. Toal iota는 IR로 구속된 정화였습니다.

다양한 ITO aines를 높은 수율로 이용할 수 있습니다. 알 알코올과 방향족 및 토알 아민은 모두 히스테리적으로 요구하는 터트 및 오르토를 포함한 반응과 호환됩니다. 예를 들어, 반응은 deprotonation에 의해 발생하고, 그 다음에 Nucleophilic edition이 발생하는 것으로 제안됩니다.

아미노 보석 디 요오드화물에 중간 후속 온난화를 제공하면 시스 요오드를 선호하는 고도의 DIA 스테레오 선택적 고리화가 유도됩니다. 반응 최적화 중 순환 전이 상태의 미묘한 입체 상호 작용으로 인해 온도 제어 및 타이밍이 반응 결과에 필수적이었습니다. 가난화하지 않고 반응을 담금질하면 최종 toal IO 요오드와 amge di 요오드화물이 제공되었습니다.

그러나 생성물은 반응 조건에서 열화를 겪으며, 이는 반응을 가열하고 반응 시간을 줄임으로써 피할 수 있습니다. 이 동영상을 시청한 후에는 IO 이리듐 생성물을 합성하고 크로마토그래피에 의한 정제를 위해 광범위한 고정상에 대한 안정성을 평가하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다. mbu 리튬으로 작업하는 것은 매우 위험할 수 있으며 너트 환경에서 작업하고 접근을 안전하게 담금질하는 것과 같은 예방 조치를 잊지 마십시오.

이 절차를 수행하는 동안 항상 시약을 복용해야 합니다.