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DOI: 10.3791/51643-v
Insaf Salem Fourati1, Anne-Julie Grenier1, Élyse Jolette1, Natacha Merindol1, Philippe Ovetchkine2,3, Hugo Soudeyns1,3
1Unité d'Immunopathologie Virale, Centre de Recherche du CHU Sainte-Justine, Department of Microbiology, Infectiology & Immunology, Faculty of Medicine,Université de Montréal, 2Infectious Diseases Service, CHU Sainte-Justine, Faculty of Medicine,Université de Montréal, 3Department of Paediatrics,Université de Montréal
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This article presents a novel functional assay utilizing gamma interferon (IFN-纬) ELISpot to detect cytokine production at the single cell level. The method allows for both quantitative and qualitative characterization of T cell responses against varicella zoster virus (VZV).
이러한 단일 세포 수준에서 사이토 카인 생성을 감지하고 T 세포 반응의 양적 및 질적 인 특성을 제공하는 감마 인터페론 (IFN-γ) ELISPOT 등 기능적 분석법 비발 세대 수두 대상 포진 향한 세포 매개 성 면역 반응을 평가하기 위해 사용될 수있다 바이러스 (VZV).
다음 절차의 전반적인 목표는 수두 대상포진 바이러스 또는 VZV에 대한 세포 매개 면역 반응을 평가하기 위해 단일 세포 수준에서 IFN 감마 생성을 감지하는 것입니다. 이는 먼저 96웰 골목 스폿 플레이트의 웰을 IFN 감마 포획 단클론 항체로 코팅하여 수행됩니다. 두 번째 단계에서는 세포를 VZV 항원으로 도금하고 자극합니다.
다음으로, 세포를 제거하고 포획된 IFN 감마를 검출 항체로 표지하여 궁극적으로 IFN 감마 생산과 BZV에 대한 세포 매개 면역 반응의 크기 및 품질을 정량화할 수 있습니다. PMHC, 떨림 및 세포 내 사이토카인 염색과 같은 기존 방법에 비해 이 기술의 주요 장점은 인터페론 감마라는 것입니다. 스팟은 인큐베이터, 원심분리기 및 해부 현미경과 같은 상대적으로 낮은 기술 장비를 사용하여 정맥혈 샘플에 대해 수행할 수 있는 강력하고 재현 가능하며 유익한 분석입니다.
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