Name: 마우스에 동종 CD4 T 세포 반응을 연구하기 위해 테일 피부 이식 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-07-25T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 48 s
Description: 학습하세요 마우스 꼬리 피부 이식술을 통해 동종 CD4 T 세포 매개 거부 반응과 내성 유도 메커니즘을 연구하는 방법을. 이 기법은 최소 침습으로 생체 내 면역 반응을 정밀 분석할 수 있습니다.

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이 작업은 SNF 보조금 PPOOA-_119204 및 S.W.R에 대한 PPOOP3_144918의 지원을 받았습니다. 마우스와 기술적 전문성을 제공해 준 E. Palmer와 B.T.H. Hausmann에게 감사드립니다.

이 비디오 간행물 및 프로토콜, 모든 동물의 절차는 주립 기관 바젤 슈타 트, 스위스에서 승인 한 동물 프로토콜에 따라 수행 하였다. 무균 조건 가능한 모든 절차를 수행합니다. 수술 1. 준비 <ol><li> 모든 수술 도구를 압력솥 사용하기 전에 거즈. </li><li> 따뜻한 패드를 가열 테이블 (재료 / 방법의 테이블)에 수술기구를 구성 할 수 있습니다. </li><li> 손가락 스트립 붕대를 엽니 다. (가제가 완전히 포함되어 있는지 확인) 면봉으로 상처 패드에 바셀린을 적용합니다. </li><li> 쥐를 달아 진통제 프레 놀핀에게 0.05 ㎎ / ㎏ 체중을 관리 할 수​​ 있습니다. 참고 :이 즉시 이식 후 진통을 제공 할 것입니다. </li></ol> 이식의 꼬리 피부의 2. 준비 <ol><li> CO 2 질식 및 D 당 기증자 마우스 (예를 들어, IA의 BM12)를 안락사절단하기 전에 소독 용액으로 꼬리를 isinfect. </li><li> 깨끗한 플라스틱 보드에 검은 줄무늬 아래로 꼬리를 놓고 중간 라인에 걸쳐 길이 방향으로 잘라, 단지 피부 층을 포함하는 표면 절개. </li><li> 그립 집게를 사용하여 꼬리의 피부를 당겨. </li><li> 10 ㎖ HBSS로 가득 10cm의 세포 배양 접시에 꼬리 피부를 넣습니다. </li></ol> 3. 수술 <ol><li> 투명 유도 상자 3 % 이소 플루오 란 용액 흡입받는 마우스 (예, C57BL / 6)을 마취. 참고 : 마우스가 수술 비행기 마취에 도달하는 것은 3 ~ 5 분입니다. 마취 동안 건조를 방지하기 위해 눈에 수의사 연고를 사용합니다. </li><li> 따뜻한 패드에 마우스를 올려 놓고 발가락이 곤란하여 각 동물의 반사 입 마스크와 엉덩이를 통해 1.5 % 이소 플루오 란을 적용합니다. </li><li> 받는 사람 생쥐의 등쪽 사이트 (예를 들어, C57BL / 6) 면도 마른 거즈 SW를 사용하여 오염 머리카락을 제거AB. </li><li> 무균 용액으로 면도 이식 사이트를 소독. </li><li> 배부의 오른쪽 / 중앙 사이트의 집게로 피부를 조이고 약 1 × 0.6 cm의 원형 절개를 만들기 위해 곡선 가위를 사용합니다. </li><li> 출혈이 발생하는 경우, 멸균 면봉으로 상처를 청소. </li><li> 절개의 크기를 평가하고 메스를 사용하여 꼬리 피부에서 예상 크기의 이식을 잘라. </li><li> 이식을 반올림 모서리를 낸다. </li><li> 멸균 면봉에 메스, HBSS의 건조 초과에 이식을로드하고받는 사람 마우스의 이식 침대에 배치합니다. </li><li> 기증자와 호스트 피부의 중복을 방지하고 독점적으로 접촉 영역에서 조직 접착제를 적용합니다. </li><li> 마우스 허리 주위에 주름없이 석고를 적용합니다. </li><li> 마우스에 석고를 해결하기 위해 접착제가 아닌 탄력 붕대를 적용 (3 MM은 이동). </li><li> 붕대의 상단 복부 사이트의 3mm에 대한 가위로 절개. 주 :이 TR을 피하기위한 것이다복구 단계에서 마우스의 치아 apping. </li><li> 마취 입 마스크를 제거하고 깨어 때까지 가열 패드에 이식 된 쥐를 유지합니다. </li><li> 완전히 복구 된 경우에만 자신의 새장에 이식 된 쥐를 반환하고 붕대가 너무 꽉되지 않도록 자신의 이동성을 평가합니다. </li><li> 다음 수술을 진행하기 전에 70 % 에탄올로 모든 수술기구를 소독. </li></ol> 4. 수술 후 케어 <ol><li> 식수 (4 ㎎ / ㎖)로 해열 함유 시럽을 추가, 7 일 동안을 관리 할 수​​ 있습니다. </li><li> 이 복구되면 동물의 방에 마우스를 반환합니다. </li><li> 밀접하게 붕대 장소 (1 주)에 시간을 우울증이나 다른 행동 변화 (식사 또는 부동), 비정상적인 모양 (손질의 부족) 또는 자세 (pilo 직립 또는 새우등 자세) 등의 임상 증상에 마우스를 모니터링 할 수 있습니다. </li></ol> 5. 붕대 제거 (6 ~ 7 일 후 이식) <ol><li> 마취투명 유도 상자 (위 참조)의 3 % 이소 플루오 란 용액을 흡입 thetize 마우스. </li><li> 동맥 가위 붕대와 석고를 잘라 조심스럽게 제거합니다. 주 : 이식 사이트의 스트레칭 마십시오. </li><li> 임상 증상에 대한 이식 생쥐 (4.3 참조) 모니터 및 피부 이식 (표 1)의 거부에 대한 점수. 주 : 이식 점수 시스템 등의 피부에 비해 꼬리 피부에 다른 머리 질감을 활용합니다. 이식과 거부의 모양은 3 등급으로 분류됩니다. C57BL / 6 마우스의 면역 동종 피부 (MHC II 일치하지 않는, 예를 들어, IA BM12) 이식은 일반적으로 12~15일 포스트 이식 (자신의 데이터와 15 ~ 20)에서 거부됩니다. </li></ol>

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</ol>

저자는 경쟁하는 금전적 이해관계가 없음을 선언합니다.

피부 이식은 거부하고 T 세포에 따라 허용 공부를위한 널리 사용되는 방법입니다. 피부 이식 모델이 확립 된 이후, 여러 가지 적응 및 변경 사항이 적용되었습니다. 설명 과정에서 IA BM12 꼬리 피부 이식은 마취 가스 (이소 플루오 란)를 사용하여 수행됩니다. 마취 가스의 사용은 이식 된 생쥐에 응력을 감소 실행 및 생쥐 복구 시간을 감소시킨다. 절차는 귀 또는 등쪽 피부 조직보다 말리는 꼬리 피부를 해결하기 위해 조직 접착제를 사용한다. 또한 그것은이 컬링을 줄이고 지느러미 절단 사이트의 꼬리 피부의 위치를​​ 향상으로 가장자리를 절단 및 트리밍 전에 꼬리 피부를 평평하게하는 것이 중요합니다. 이식 거부 또는 수락을 평가하기 위해 그것은 TRA의 득점을 용이하게하기 위해 이식의 중간에 (C57BL / 6 마우스의 예) 검은 줄무늬와 꼬리의 피부를 준비해야합니다머리 질감의 차이에 따라 nsplants. <p class="jove_c...

이러한 피부, 심장, 신장 등 고형 장기의 이식은 지금 전 세계적으로 의료 행위 1의 표준 절차입니다. 성공적으로 장기 이식은 기증자의 주요 조직 적합성 항원을 인식받는 사람의 면역 시스템의 활성화에 의해 거부 될 수 있습니다. 따라서 이식 환자는 면역 억제 약물이 치료가 필요합니다. 생쥐 동종 피부 이식은 1955 년에 메다와 동료에 의해 설립 이후 주요 조직 적합성 복합체 (MHC) 클래스 I 및 II로 기술 대상 분자를 식별하는 데 도움이이었다. 그 이후로, 피부 이식 모델은 연속적으로 수정 및 T 세포 서브 세트의 역할 및 이식 거부 2-4을 억제하는 화학적 및 생물학적 개입의 관련성을 연구하도록 채택되었다. 귀 트렁크에서 피부는 준비하기가 더 어렵습니다 꼬리 피부 5보다 저산소증 및 괴사에 더 민감하다; 그러나,이식 절차는 비슷합니다. 또한 꼬리의 피부 이식의 모니터링으로 인해 피부의 특징적인 머리 짜임새에 용이합니다. 이 문서는 CD4 + T 세포 - 매개 동종 이식 거부 반응 및 생쥐의 허용 오차의 다양한 측면의 연구를 허용 MHC 클래스 II 불일치 꼬리 피부 이식에 대한 자세한 절차를 제공합니다. (IA BM12라고 함) MHC 클래스 II 분자 IA B의 자연 3 점 돌연변이는 6-9 C57BL / 6 마우스 8 피부 동종 이식의 거부 반응을 유발하기에 충분하다. IA의 BM12 분자는 다양한 αβ-T 세포 수용체 Vα2Vβ8-TCR 특정 T 세포의 TCR-트랜스 제닉 마우스 (10)를 생성하기 위해 식별 된 구비 C57BL / 6 생쥐 (TCR) 체인과 CD4 + T 세포를 활성화한다. Vα2Vβ8-TCR 특정 T 세포의 대체 송금 면역 결핍 C57B에서 거부 모델을 수립하는 데 사용되어왔다L / 6 Rag2 - / - IA BM12의 피부에 이식 된 쥐. 기증자와받는 사람 사이의 유전 적 차이는 이식 수용과 거부의 결과에 영향을 미칠. 이식의 다른 유형이있다 :자가 이식받는 사람의 개인 자체에서 이식이다; syngrafts 및 동종 이식은 각각 유 전적으로 동일하고 유 전적으로 관련이없는 개인의 이식입니다. 다른 동종 장기 이식의 수용 환자와 마우스 모델 11,3,4의 화학 및 생물 학적 개입에 의해 증명되었다. 기본적인 접근 방식에서, 항 CD3 항체 처리 C57BL / 6 마우스는 IA BM12 꼬리 피부 (게시되지 않은 데이터)의 장기 생존율을 보였다. 세포받는 생쥐에 이식하기 전에 CD4 +와 CD8 + T의 고갈은 MHC 클래스 I 및 II 일치하지 않는 이식 (12 목사)의 수용의 결과. 흥미롭게도, 피부 이식의 거부 반응은 CD4 +의 존재에 따라 달라집니다 </sup&gt; T 세포 (12 계). 이 모델에서, 규제 T 세포와 항체 억제와 공동 자극 분자를 차단하여 다른 면역 세포 사이의 특정한 상호 작용을 대상으로하는 것은 허용 (게시되지 않은 데이터)를 유도 할 수 있습니다. 실제로, CD40 및 CD28을 모두 차단하는 것은 장기적으로 피부 이식 허용 오차 13, 14되었다. 꼬리 피부 이식은 다른 장기의 이식에 비해 수행하기 쉬운 모니터링하기 쉽습니다. 또한, 꼬리, 피부 이식을 준비하기 쉽고 다른 피부 조직에 비해 국소 빈혈에 덜 민감하다. 주입 마취제 달리, 이식 동안 마취 가스 (이소 플루오 란)의 사용 절차와 수신자 복구 시간을 모두 단축시킨다. 불완전 상처 치유 및 이식 거부로 이어질 수 꼬리 피부 이식의 컬링은, 조직 접착제의인가에 의해 방지된다. 또한, IA BM12 꼬리 피부 이식 모델은 독점적으로 CD4를 활성화 <sup&gt; + (동일한 유전 적 배경) 면역 및 면역 결핍 마우스 모두에서 T 세포는 결과의 해석을 용이. 이 프로토콜은 화학 및 생물 학적 개입을 할 수있는, 신뢰할 수있는 재생 가능한 쉽게 모니터링 마우스 모델에 대해 설명합니다. 이 모델은 테일 피부 이식의 거부와 관용 유도를 조사하기위한 것입니다.

<table><tbody><tr><td>베타딘 표준 솔루션</td><td>Mundipharma</td><td></td><td></td></tr><tr><td>면봉</td><td>Carl Roth GmbH</td><td>31025060</td><td></td></tr><tr><td>Dafalgan , UPSA</td><td>Bristol Myers Squibb UPSA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hansaplast finger strips</td><td>Beierdorf AG</td><td>REF.76861</td><td></td></tr><tr><td>Histoacryl tissue adhesive</td><td>Braun</td><td>REF.1050052</td><td></td></tr><tr><td>Leukotape classic , 2 cm x 10 m</td><td>BSN Medical SAS</td><td>REF.02204-00</td><td></td></tr><tr><td>PBS, 인산염 완충 식염수, pH 7.4</td><td>Invitrogen</td><td></td><td>10010015 GIBCO</td></tr><tr><td>멸균 거즈, 5 x 5 cm, 8 ply</td><td>MaiMed</td><td>GmbH 21010</td><td></td></tr><tr><td>좁은 패턴 집게</td><td>FST</td><td>11003-12</td><td></td></tr><tr><td>미세 아이리스 가위 곡선</td><td>FST</td><td>14095-11</td><td></td></tr><tr><td>파인 아이리스 가위 FST</td><td></td><td>14094-11</td><td></td></tr><tr><td>Mayo 가위</td><td>FST</td><td>14010-15</td><td></td></tr><tr><td>동맥 가위 볼 팁 11.5 cm</td><td>FST</td><td>14080-11</td><td></td></tr><tr><td>조직 겸자</td><td>FST</td><td>11021-14</td><td></td></tr><tr><td>수술용 칼날 No. 20</td><td>Swann-Morton LTD</td><td>3006</td><td>탄소강</td></tr><tr><td>수술용 칼날 핸들</td><td>Swann-Morton LTD</td><td></td><td></td></tr><tr><td>주사기, 1 ml</td><td>ARTSANA</td><td></td><td>일회용</td></tr><tr><td>Temgesic, 부프레노르핀</td><td>ESSEX Chemie AG</td><td></td><td>0.3 mg/ml</td></tr><tr><td>조직 배양 접시 10 cm, 60.1 cm2</td><td>TPP</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Vaseline</td><td>Vifor SA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>웜 패드</td><td>Solis</td><td></td><td>Type 223</td></tr></tbody></table>

마우스에 동종 cd4 t 세포 반응을 연구하기 위해 테일 피부 이식

Transplantation of Tail Skin to Study Allogeneic CD4 T Cell Responses in Mice

동종 항원 인식 중 T 세포 반응과 그 결과에 대한 연구에는 공여자와 숙주 T 세포를 구별하고, 이식편을 쉽게 모니터링하고, 다양한 면역학적 질문에 답하기 위해 시스템을 조정할 수 있는 모델이 필요합니다. Medawar와 동료들은 1955년에 생쥐에서 동종 꼬리 피부 이식을 확립했습니다. 그 이후로 피부 이식 모델은 특정 질문에 답하기 위해 지속적으로 수정되고 조정되었습니다. 꼬리 피부를 사용하면 이 모델을 이식 거부 반응에 쉽게 점수를 매길 수 있고, 광범위한 준비나 깊은 마취가 필요하지 않으며, 모든 유전적 배경을 가진 동물에 적용할 수 있고, 허혈성 괴사를 억제하고, 화학적 및 생물학적 개입이 가능합니다. 
일반적으로 CD4+ 및 CD8+ 동종 T 세포는 서로 다른 마우스 균주에서 일치하지 않는 주요 조직적합성 항원을 인식하기 때문에 동종이식편의 거부 반응을 일으킵니다. 피부 이식된 마우스에서 동종 T 세포를 활성화하기 위한 여러 모델이 설명되었습니다. C57BL/6 마우스를 포함한 다양한 마우스 균주에서 주요 조직적합성 복합체(MHC) 클래스 I 및 II 분자를 식별하는 것은 T 세포 매개 동종 반응을 이해하고 연구하기 위한 중요한 단계였습니다. 여기에 기술된 꼬리-피부 이식 모델에서, MHC-class II(I-A b) 분자의 항원 제시 홈에 있는 3점 돌연변이(I-A bm12)는 C57BL/6 마우스에서 강력한 동종 CD4+ T 세포 활성화를 유도하기에 충분합니다. C57BL/6 마우스에 대한 I-Abm12 마우스의 피부 이식은 12-15일 이내에 거부되는 반면, syngeneic 이식은 최대 100일 동안 허용됩니다. T 세포(CD3-/- 및 Rag2-/- 마우스)가 없기 때문에 최대 100일까지 피부 이식 수용이 가능하며, 이는 2 x 104 야생형 또는 형질전환 T 세포를 이식하여 극복할 수 있습니다. 채택적으로 전달된 T 세포는 I-Abm12 이식된 Rag2-/- 마우스에서 증식하고 IFN-γ를 생성합니다.

첫 번째 방법에서 C57BL / 6 마우스는 IA의 BM12 동종 이식 및 IA B 형 syngrafts 이식되었다. 붕대를 제거한 후, C57BL / 6 마우스 (그림 1A)의 접촉 영역의 폐쇄하지 않고 상처 치유의 명백한 징후를 접목. 붕대를 제거한 후, CD4 + T 세포 매개 염증, 괴사 영역의 모양 (붉은 반점)과 이식 (그림 1B-C, 못 기호) 13 이후 일 이내에 C57BL / 6 마우스의 IA의 BM12 동종 이식의 거부에지도 syngrafts 동안 최대 100 일 (그림 1B-C, 오픈 기호)에 대한 허용했다. 이러한 데이터는 면역 C57BL / 6 마우스의 IA의 BM12 이식의 급성 거부 반응의 진행을 보여줍니다. 다양한 연구가 MHC 클래스 II 일치하지 않는 꼬리 ...

꼬리 피부 이식은 생쥐의 동종 면역 반응 중 T 세포 의존적 거부 및 내성 유도를 연구하기 위한 강력한 모델입니다. 이 프로토콜의 장점은 경미한 침습적 수술과 수용 마우스를 희생할 필요 없이 모니터링이 용이하다는 것입니다.

마우스에 동종 CD4 T 세포 반응을 연구하기 위해 테일 피부 이식

The study of T cell responses and their consequences during allo-antigen recognition requires a model that enables one to distinguish between donor and ...

다음 절차의 전반적인 목적은 꼬리 피부 이식을 수행하는 것입니다. 마우스 모델에서 T세포 매개 거부 반응 또는 면역 관용 유도를 연구하기 위해, 먼저 공여자 마우스로부터 꼬리 피부를 채취합니다. 두 번째 단계에서는 수혜 동물의 이식 부위를 준비합니다.다음으로, 마지막 단계에서 이식편을 이식하고 조직 접착제와 붕대로 고정합니다. 이식 후 7일째에 붕대를 제거하고 이식편을 평가합니다. 최종적으로, T 세포 매개 동종면역 반응을 연구할 수 있습니다.이 꼬리 피부 이식 기술은 마우스의 동종 면역 반응 중 T 세포 의존적 거부 반응 및 내성 유도를 연구하기 위한 강력한 모델을 제공합니다. 절차를 시작하기 전, 핑거 스트립 밴드를 열고 면봉을 사용하여 상처 패드에 바셀린을 바르며 거즈가 완전히 덮이도록 합니다. 다음으로, 안락사시킨 공여자 마우스의 꼬리를 소독액으로 소독합니다.그런 다음 꼬리를 깨끗한 플라스틱 보드 위에 놓습니다. 위쪽의 검은 줄무늬가 아래로 향하게 돌리고, 꼬리의 중앙선을 따라 피부에 종방향의 표면 절개를 가합니다. 그리핑 포셉을 사용하여 피부를 벗겨낸 후, 조직을 10 mL의 HBSS가 채워진 10 cm 세포 배양 접시에 넣습니다.마취된 수혜 마우스의 등 부위를 제모하고, 마른 거즈를 사용하여 잔여 털을 제거합니다. 무균 용액으로 제모된 이식 부위를 소독한 후, 핀셋으로 등 오른쪽 중앙의 피부를 집어 곡선 가위를 이용해 지름 약 1 × 0.6 cm의 원형 절개를 실시합니다. 다음으로, 메스를 사용하여 절제된 공여 마우스의 꼬리 피부에서 이식편을 잘라내고, 모서리를 다듬어 조직을 둥글게 만든 뒤 이식편을 메스 위에 올리고 멸균 면봉으로 과잉 HBSS를 닦아냅니다.그런 다음 건조된 조직을 수용 쥐의 이식 부위에 놓습니다. 공여자와 수용자의 피부가 겹치지 않도록 주의하며, 접촉 부위에만 조직 접착제를 도포합니다. 그 후 쥐의 허리 주위를 주름지지 않게 반창고로 감싸고, 쥐가 반창고를 이빨로 갉지 못하도록 신축성 없는 접착식 밴드를 사용하여 반창고를 고정합니다.회복 과정 동안, 시료의 상부 복측에 3 mm 크기의 절개를 가합니다. 가온 패드에서 완전히 회복된 후, 이식된 동물을 케이지로 돌려보내고 운동 능력을 평가합니다. 붕대가 너무 조이지 않도록, 7일 동안 동물의 식수에 파라세타몰 시럽을 섞어 처치합니다.6~7일 후, 멸균된 동맥 가위(artery scissors)를 사용하여 붕대를 자르고 이식 부위가 늘어나지 않도록 주의하며 조심스럽게 제거합니다. 마지막으로, 이식된 마우스의 임상 징후를 모니터링하고 피부 이식편의 거부 반응을 점수화합니다. 본 실험에서는 C 57 BL six 마우스에 IABM 12 동종이식편과 IAB sin 이식편을 이식하였습니다.붕대를 제거한 후, C 57 BL six 마우스의 이식편에서는 접촉 부위의 폐쇄 없이 상처 치유 징후가 나타났습니다. 1~2주 후, CD four 양성 T세포 매개 염증으로 인해 이식편 내부에 괴사 부위가 나타났습니다. C 57 BL six 마우스에서 I A BM 12 동종이식편의 거부는 이식 후 13일 이내에 관찰되었습니다.syn 이식편은 최대 100일까지 거부 반응 없이 유지되었으나, MHC Class two가 불일치하는 꼬리 피부의 거부 반응은 동종 CD four 양성 T 세포의 존재 여부에 따라 결정됩니다. 예를 들어, T 세포가 결핍된 CD three E knockout 마우스와 T 및 B 세포가 결핍된 RAG two knockout 마우스는 완전한 상처 치유를 보이며 I a BM 12 이식편을 최대 100일까지 거부 반응 없이 수용합니다.IABM 12 불일치 꼬리 피부의 수용은 심각한 질환 병리 없이 마우스 모델에서 동종 CD4 양성 T 세포와 그 작동 기능을 연구할 수 있게 합니다. 이 꼬리 피부 이식 모델의 장점은 항원 특이적 CD4 양성 T 세포의 입양 전달을 통해 CD4 양성 T 세포의 기능 분석을 쉽게 수행할 수 있다는 것입니다. 이 대표적인 실험에서, 2 × 10⁴개의 항원 특이적 형질전환 A BM 세포를 전달하는 것으로 rag2 결핍 마우스에서 13일 이내에 IABM 12 이식편의 거부 반응을 유도하기에 충분했습니다. Vα2 Vβ8 TCR 체인을 발현하는 A BM 세포는 EFL 670 희석 분석을 통해 광범위하게 증식하며 PMA 자극 시 IFN-γ를 생성하는 것이 관찰되었습니다.이 데이터는 단 몇 개의 동종 CD4 양성 T 세포만으로도 A BM 12 피부 이식편을 거부하는 데 충분하며, 이는 심각한 병리 현상이 없는 상태에서 동종 T 세포를 분석하기 위한 이상적인 모델임을 보여줍니다. 이 영상을 시청한 후에는 꼬리 피부 이식을 수행하고 이식 거부 반응을 성공적으로 모니터링하는 방법에 대해 충분히 이해하게 될 것입니다.

transplantation-tail-skin-to-study-allogeneic-cd4-t-cell-responses

Research

연구

JoVE Journal

Immunology and Infection

면역학 및 감염학

Allogeneic 피부 이식은 MHC - 서로 다른 기증자 항원을 분석 호스트 T 세포 응답에 대한 표준 모델입니다. 이 비디오 문서 BALB/c--&gt; C57BL / 6 피부 이식을 수행에 관련된 각 단계의 영상 자습서를 제공합니다.

Murine 피부 이식

손쥐 골수 이식은 인간에 이식 - 대 - 호스트 질병에 관한 면역 메커니즘을 연구 할 수있는 널리 사용되는 기술이다. T 세포 거래 패턴을 모니터링 할 수있는...

이식 - 대 - 호스트 질병의 유도 및<em&gt; 생체 내</emMHC 검색 손쥐 모델을 사용&gt; T 셀 모니터링

이 비디오는 동종 조혈모세포와 GvHD 유도 비장 동종성 T 림프구를 사용하여 치사량에 방사선 조사를 받은 마우스에서 장 이식편대숙주병(GvHD)의 유도를 보여줍니다. 이 프로토콜은 중증 급성 장 GvHD 모델을 확립하여 질병의 메커니즘을 이해하고 혁신적인 치료 옵션을 개발하는 데 도움이 됩니다.

동종 골수 및 비장 세포 이식을 통한 마우스 모델에서 이식편 대 숙주 질환 유도

여기에서는 syngeneic CD4+CD45RBhigh T cell을 T 및 B cell 결핍 수용자로 이식하여 마우스에서 결장 염증을 유도하는 프로토콜을 제시합니다. 임상적 및 조직병리학적 특징은 인간의 염증성 장 질환을 모방합니다. 이 방법을 사용하면 결장 염증의 시작과 질병의 진행에 대한 연구를 할 수 있습니다.

이펙터 CD4의 입양 전송하여 쥐과 장내 염증의 유도<sup&gt; +</sup&gt; CD45RB<sup&gt; 높은</sup&gt; 면역 결핍 마우스에게 T 세포

슈퍼 미세 혈관 문합을위한 비 봉합 커프 기술을 적용 마우스에서 소성을 뒷다리 이식이 새로운 모델은, 혈관 복합 동종 이식 (VCA)에 관한 생체 역학적 면역 학적 연구를위한 강력한 도구를 제공합니다.

마우스에서 소성을 뒷다리 이식

염증 부위에서 이펙터 CD4 T 세포의 삽입 운동을 제어하는​​ 메카니즘은 상대적으로 알려져 있지 않다. 우리는 시각화 현장에서 이러한 세포의 동적 거동의 연구를 허용 염증 귀 진피의 시험 관내 -primed CD4 T 세포에서 조작하는 비 침습적 방법을 제시한다.

염증이 진피의 이미징 CD4 T 세포 간질 마이그레이션

이 원고는 형질도입-이식 마우스 모델을 확립하는 데 사용되는 방법론에 대한 설명을 제공합니다. 골수 이식을 수행할 때 피해야 할 기술적 오류에 대한 자세한 설명이 제공됩니다. 높은 바이러스 역가, transfection/transduction 및 방사선 조사의 중요성에 대한 명확한 이해를 얻어야 합니다.

골수 증식 종양의 전달-이식 마우스 모델

쥐의 전체 두께 피부 이식은 동종 설정에 거부 반응을 연구하는 잘 확립 된 모델이다. &gt; C57BL / 6 전층 피부 이식 - 여기, 우리는 BALB / C를 수행에 관련된 각 단계의 튜토리얼을 제공합니다.

쥐의 전체 두께 피부 이식

여기에 서술 된 것은 환자 - 유도 된 이종 이식 (PDX) 마우스에서 사이토 카인 - 형질 감염된 간질 세포주의 매주 복강 내 주사를 통해 외인성 사이토킨을 생산하는 방법이다. 이 방법은 PDX의 유용성을 넓히고 다양한 PDX 모델에서 일시적 또는 지속적인 외인성 사이토 카인 전달 옵션을 제공합니다.

Cytokine-induced stromal cell line 주입에 의한 환자 유래 이종 이식편에서의 외인성 사이토 카인의 발현

여기에서, 마우스 종양 모델에서 종양 내재 및 주변부 유래 종양 침윤된 림프구의 특성화를 위한 종양 이식 프로토콜을 제시한다. 유세포 분석기를 사용한 수용자 유래 면역 세포의 유입에 대한 특이적 추적은 항종양 면역 반응 동안 이들 세포의 표현형 및 기능적 변화의 역학을 드러낸다.

마우스에서 종양 침윤성 CD8+ T 세포의 역학을 평가하기 위한 종양 이식

이 프로토콜은 자발적 당뇨병 NOD 마우스에서 정제된 비장 세포로 도전받은 비만 당뇨병(NOD) 중증 복합 면역 결핍 마우스에서 NIT-1 세포를 이식하고 이미징하기 위한 간단하고 최소 침습적인 방법을 설명합니다.

생쥐에서 자가면역 당뇨병의 입양 이식 모델에서 이식편 생존의 생물발광 모니터링

학습하세요 마우스 꼬리 피부 이식술을 통해 동종 CD4 T 세포 매개 거부 반응과 내성 유도 메커니즘을 연구하는 방법을. 이 기법은 최소 침습으로 생체 내 면역 반응을 정밀 분석할 수 있습니다.

마우스에 동종 CD4 T 세포 반응을 연구하기 위해 테일 피부 이식

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