Name: 측정을위한 소형 이중 요소 스트레인 게이지의 제조 및 주입 생체 설치류에서 위장 수축. (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-09-18T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 29 s
Description: 배우세요 이중 요소 스트레인 게이지 제조법을 통해 설치류 위장관 평활근 수축을 측정하는 방법을 익히세요. 실리콘 코팅과 브리지 증폭기 연결을 포함한 비용 효율적인 기술을 활용하여 생체 내 위장 운동성 연구에 활용할 수 있습니다.

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연구 자금은 신경 질환 및 뇌졸중 (NS049177 및 NS087834)의 국립 연구소를 통해 수신되었습니다. 저자는 후반 박사 폴베이스와 스트레인 게이지의 원래 디자인에 대한 그의 동료의 지적 기여를 인정하고자하는; 2010 년뿐만 아니라 그녀의 통찰력있는 대응을위한 생산 중단까지 스트레인 게이지의 제조 및 마케팅을위한 캐롤 Tollefsrud.

모든 절차는 건강 지침의 국립 연구소를 다음과 의학의 펜 스테이트 허쉬 대학에서 기관 동물 관리 및 사용위원회에 의해 승인되었습니다. 쥐가 일반적인 동식물 사육장 관행을 사용하여 보관 하였다. 참고 :이 프로토콜은 남성의 Wistar 쥐 ≥8 세의 주와 처음 175 무게 사용 - 200 g의. 스트레인 게이지의 제조 공정 용 1 절차 <ol><li> 대부분의 툴링과 성분은 원래 또는 후속 회사에서 사용 가능한 상태로 유지하고, 표 1에 요약되어있다. </li><li> 제조 및이 단일 요소 스트레인 게이지의 본딩 <ol><li> 조심스럽게 청소 뒤몽 # 5 집게로 스트레인 게이지 요소 (EA-06-031-350)를 처리합니다. 요소의 불필요한 이동을 제한하기 위해, 오염이나 과도한 유착의 위험없이 작업 표면에 요소를 확보하기 위해이 위를 향하도록 접착면에 작은 종이, 청소, 자체 접착 부분을 사용합니다. </li><li> 결합이 단일 스트레인 게이지요소 백투백, 이중 요소를 형성한다. 이소 프로필 알코올로 각 요소 필름의 뒷면을 청소하고 증발 건조 허용 (가제 건조를 자주 제거하기 어려운 섬유 오염 물질을 소개합니다). 실체의지도하에 (1 - 3 배), 및 깨끗한 아티스트 브러쉬 (10-0 낙 두발)를 사용하여, 하나의 소자의 배면에 에폭시 페놀 수지 접착제의 박막을 적용하고 즉시 접촉 다시 두 번째 요소의 대향 배치 와 포일 그리드 (그림 1A)를 맞 춥니 다. </li><li> 완전히 에폭시을 치료하기 위해 60 ° C 오븐 O / N - (50)의 결합 요소를 배치합니다. 참고 : 초과 에폭시 요소에 침투 할 수 있으며 압력이 그리드 정렬 불량의 원인이되므로 결합 요소를 고정하지 마십시오. 이 부분 에폭시 혼합 후 만 육주의 사용 가능한 냉장 수명이있다. 본드 한번에 요소의 충분한 공급을 치료 및 나중에 사용하기 위해 깨끗하고 먼지없는 환경에 보관. </li></ol></li><li> 크기 조정 및 배선이중 요소 스트레인 게이지 <ol><li> # 11 메스 또는 단일 에지 면도날 3 × 3mm의 최종 크기로 결합 된 이중 요소를 낸다. 지연 안전하게 소자 (도 1a)를 처리하기위한 영역을 갖기 위해 이번에 이중 요소의 최상위 부분을 트리밍. </li><li> 각 요소가 결합 가능한 3 구에서 제조 된 네 도선을 필요로 테프론 (P / N 336-FTE) 절연 전선. 세 구성 와이어로 3 상 전선의 한 30cm 꼰 가닥을 분해. </li><li> 세 도선의 두번째 30cm 길이에 포함 된 같은 색 와이어와 결과 단일 전선의 한 쌍, 네 와이어 케이블을 확인하십시오. 다음 단계에서, 이들 컬러 매칭 와이어 최종 스트레인 게이지 (도 1b)에 대한 공통 배선을 형성하는 말단에 결합 될 것이다. </li><li> 열 와이어 스트리퍼 각 와이어의 양쪽 끝에서 테프론 절연 약 1mm를 제거합니다. 활성 로진 졸을 사용플럭스 저온 땜납을 디링 (융점 183 ℃) 와이어 납땜 연필로 끝나는 주석. </li><li> 다음 단계를 들어 microsoldering 팁은 소자 (도 1C)의 막 층에 열 손상을 방지하기 위해 더 많은 이산 솔더 조인트를 형성하기 위해 필요하다. 작은 microsoldering 팁을 제조하기 위해, 구리 와이어는 표준 인두 팁의 길이를 넘어 연장되도록, 한번 표준 납땜 팁 주위에 동선 (~ 0.25 mm 직경)의 작은 조각을 포장. </li><li> 플럭스 청소 브러시 10-0 땜납 하나의 리드와 땜납 패드 (도 1D)으로 쌍을 이루는 공통 리드 중 하나와 결합 된 듀얼 엘리먼트의 일측 단에 솔더 패드. 잔류 자속 수지 용매에 담근 깨끗한 브러시로 나중에 제거 할 수 있습니다. </li><li> 나머지 공통 배선 리드는 원래 공통 리드 대향 패드에 납땜되도록, 반대측 과정을 반복한다. </li></ol></li><li> 테스트차 이중 요소 스트레인 게이지를 epoxying <ol><li> 와이어 리드의 자유 단에 솔더 금 소켓 커넥터 (/ 0 E363). 이 시점에서, 이중 요소 어셈블리의 무결성을 테스트하는 기록 앰프 (후술)에 스트레인 게이지를 연결한다. </li><li> 좋은 품질의 볼트 옴 미터로 저항을 측정합니다. 요소는 약 350 Ω의 저항을 등록합니다. 신선한 솔더이 시점에서 Resolder 불충분 연결. </li><li> 솔더 컨넥션 및 이중 요소 조립체가 양호하다고 판단되는 경우, 나머지 요소 막 잘라내. </li><li> 두 부분의 실리콘 고무, 에폭시 수지 (P / N E211)의 얇은 층으로 요소 솔더 패드에 솔더 조인트 절연 시키. 30 분 전에 응용 프로그램 (그림 1E) - 최상의 결과를 위해 일부 (20)의 수지를 경화. </li></ol></li><li> 실리콘의 이중 요소 스트레인 게이지를 캡슐화 <ol><li> 15mm 2와 C에 0.5 mm 두께의 실리콘 시트 (P / N 20-20)의 세 가지를 잘라증류수 실리콘 희박. 실리콘 캡슐 (도 1F)을 변형하지 않고 최종 이중 요소 조립체를 수용하기 위해 U-형상으로 실리콘 시트의 한 조각을 잘라. </li><li> 클리어 코트 실리콘 접착제와 노치없는 실리콘 시트의 내면. </li><li> 부드럽게 초과 실리콘을 누를뿐만 아니라 기포를 안쪽에서 바깥쪽으로, 그리고 노치 정렬 외측 시트 내에 이중 소자 어셈블리를 샌드위치. 조심스럽게 균일 한 두께를 보장하기 위해 24 시간 동안 아무런 변형이 발생하지 것을 금속 막대 주식의 두 블록 사이의 캡슐화 된 어셈블리를 고정. </li><li> 여분의 실리콘 조립 및 치료의 경계를 따라 유지하도록 허용합니다. 시트 실리콘이 원하는 최종 크기 (; 그림 1G 일반적으로 6mm X 8mm)에 손질 할 때이 초과는 제거됩니다. </li></ol></li><li> 와이어 커넥터 및 교정 완료 <ol><li> 솔더 접합 보강개별 터미널 와이어 금 소켓 커넥터의 3mm (8 인치) 튜브를 축소 및 플라스틱 전극 받침대 (MS363, 그림 1H) 내에서 정렬로 연결됩니다. 실험 (그림 1I) 동안 단선을 방지하기 위해 튜브를 축소 0.125와 0.25 인치 직경의 전극 받침대 및 전선을 고정합니다. </li><li> 스트레인 게이지 신호는 높은 게인 브리지 앰프 (P / N AMP-01-SG)를 통해 처리됩니다. 대좌 전극과 일치하도록 - (SL / 6 363) 정합 플러그 케이블을 사용하여 증폭기에 스트레인 게이지를 연결한다. 나사 캡은 실험 기간 동안 중단 신호를 유지하기 위해 추가 보안을 제공한다. </li><li> 제조업체의 지침에 따라 전용 스트레인 게이지로 앰프의 다리, 균형 및 게인 설정을 조정합니다. 와이어 클램프로 수평 강성 종료하고 원래 Pascaud 및 동료에 의해 설명 된 반대편 1g 정하중을 배치하여 위치 보정 스트레인 게이지의 단부 접사2, 16, 17. </li></ol></li></ol> 스트레인 게이지의 급성 주입을위한 2 외과 적 치료 <ol><li> 동물 관리 및 준비 : <ol><li> 음식 (물이 임의로 제공 될 수있다) 수술 주입 전날 밤에 실험 동물을 박탈. </li><li> 동물을 깊게 마취. Thiobutabarbital (100-150 ㎎ / ㎏, 쥐에 대한 IP)은 터미널 바람직하다 스트레인 게이지 주입과 실험으로 인해 쥐 10에서 지속적으로 마취 효과와 위의 반사 신경의 최소한의 변경으로 (즉, 비 생존.). 발 핀치 반사의 부재에 대한 테스트는 마취의 깊이를 결정합니다. </li><li> 수술 도구 살균 절개 사이트를 면도, 수의사 눈 연고를 적용하고 모든 수술 영역을 소독 포함 IACUC 지침을 실험 설계에 의해 결정 및 승인 무균 수술에 대한 쥐를 준비 참고 :. 스트레인 게이지가 만성 사용되도록하는 경우, 소독단 에틸렌 옥사이드 (가스)와 멸균 스트레인 게이지. 열 또는 화학적 멸균 기법의 사용은 스트레인 게이지를 손상시킬 수있다. </li></ol></li><li> 터미널 실험 기관 삽관 : <ol><li> 긴 기간, 단말기의 경우, 실험은기도 확보를 유지할 기관 튜브를 삽관 쥐. 흉골 노치 하악의 열등한 국경에서 목의 복부 측면에 2cm의 정중선을 절개 - 일을합니다. </li><li> 기관을 노출하는 중간 선에 무딘 절개를 사용하여 기본 스트랩 근육을 분리합니다. 기본 식도에서기도 하시고, 합자를 형성하기 위해기도와 식도 사이 3-0 ethilon 봉합의 루프를 배치합니다. </li><li> 갑상선 단지 말초기도의 연골 반지의 둘 사이의 막에 작은 절개를하여 전방기도를 엽니 다. 기관에 폴리에틸렌 튜브 (P는 / N PE-270), 길이 5mm (그리고 일 단부에 모따)의 작은 조각을 삽입및 합자와 함께 제자리에 고정합니다. </li><li> 다시 제자리에 스트랩 근육을 넣고 3-0 ethilon으로 위에있는 피부를 봉합. </li></ol></li><li> 위장 표면에 스트레인 게이지 계측 : <ol><li> 수술 전에 # 14 테이퍼 포인트 3/8 원 바늘을 사용하여 5의 4-0 센티미터 길이, 이하, 살균 실크 봉합사 - 4 스트레인 게이지의 네 모서리 쓰레드. 실크 봉합사는 높은 수준의 유연성을 제공하고, 스트레인 게이지 소자를 캡슐화하는 실리콘이 손상되기 쉽다. 참고 : 실크 스레드가 아닌 생존 수술과 각막 상피​​에서 박테리아의 심지가 위험하지 않습니다 내부 응용 프로그램에 대한 허용됩니다. 생존 수술을 필요로하는 어플리케이션에서, prolene을 봉합사 실크 봉합사 편조 직물 섬유에 내재 감염의 위험을 감소시키기 위해 필요하다. </li><li> 정중선을 따라 복부의 피부를 절개하여 개복 수술을 수행합니다. 절 따라 직근 abdominus 근육연결 줄씩 알바 (무혈성)는 출혈을 방지합니다. 그런 다음 기본 복부 내장을을 lacerating 방지하기 위해 정수리 복막에 매우 피상적​​ 인 중간 선 절개를합니다. </li><li> 식염수를 적신면 팁 어플리케이터의 도움으로 배를 Exteriorize. 조심스럽게 복부 절개의 꼬리 끝에 식염수 적신 거즈 패드를 배치하여 위치에 배를 유지합니다. </li><li> 원형의 부드러운 근육 섬유와 병렬로 캡슐화 된 스트레인 게이지의 눈금을 맞 춥니 다. 이전 스레드 봉합 (단계 2.3.1)를 사용하여, # 14 테이퍼 포인트 3/8 원 바늘을 이용하여 위암 코퍼스 복부 장막 표면 게이지의 모서리를 연결. 조직 손상 및 출혈 가능성을 최소화하기 위해, 절단 칼날 바늘을 사용하지 않고, 위의 표면 상에 모든 표재성 혈관을 관통하지 않는다. </li><li> 안저 / 코퍼스 경계 근처 위장의 큰 곡률을 따라 게이지의 봉합 패턴을 시작하고 진행다음 안저 따라 / 코퍼스는 소만으로 바운더리. 스트레인 게이지를 기초 장막은 느슨 함이나 과도한 최상의 결과를 얻기 위해 연신 없어야한다. </li><li> 조심스럽게 식염수를 적신면 팁 어플리케이터를 사용하여 해부학 적 위치로 배를 반환합니다. </li><li> 급성 모델에서, 스트레인 게이지가 복부 절개 폐쇄 전에 정중선 절개의 꼬리 끝에서 리드 exteriorize. 동물 또는 터미널 와이어 커넥터 조작시 스트레인 릴리프를 제공하기 위해 동물 (예를 들면., 뒷발)에 무료로 와이어를 고정합니다. 3-0 나일론 봉합사와 별도로 직근 abdominus 근육 및 복부 피부를 닫습니다. 만성 모델에서, 쥐의 등 쪽을 따라 피하 리드를 확보하고 두개골 18 위를 exteriorize. </li><li> 수술 계측 후, 상체를 머리를 지원하고 상승 고정대에 동물을 배치합니다. 후자는 다시 단계를 감소 시키는데 도움녹화 중 spiration 유물. 직장 온도를 모니터링하고 피드백 제어 가열 패드를 사용하여 37 ± 1 ° C로 유지한다. </li><li> thiobutabarbital 마취를 이용하여 터미널 실험의 결론에서, 동물은 안락사에 대한 미국 수의학 협회 (AVMA) 가이드 라인에 부합하는 방식으로 안락사해야합니다. </li></ol></li><li> 위의 운동성 녹음 : <ol><li> 모든 시판 DC 브리지 증폭기 스트레인 게이지 신호를 증폭. </li><li> 임의의 상업적으로 입수 한 데이터 수집 시스템의 차트 레코더 기능을 이용하여 컴퓨터의 DC 출력 신호를 기록한다. 참고 : 앰프 출력의 하드 카피는 거짓말 탐지기 차트 레코더를 통해 생성 할 수 있습니다. </li></ol></li></ol> 위 수축의 3 대표자 측정 뇌간 자극에 따라 <ol><li> 뇌간과 넷째 뇌실의 노출 <ol><li> 수술 계측 및 placem 후목의 기본 방향으로 후두골에서 2cm 중간 선 피부 절개 - 고정대에서 Thiobutabarbital - 마취 동물의 엔트는 1.5을합니다. </li><li> 중간 선을 따라 기본 목 근육의 양측 근육 배를 연결하는 결합 조직을 분리 (표면에서 깊이에 근육은 상안검 거근 AURIS의 longus 두개골 부분, 눈꺼풀 올림 근 AURIS의 longus의 꼬리 부분과 활 경근 두개골 부분이다). </li><li> 중간 선이 명확하게 정의 노출되면 후두골에서 눈꺼풀 올림 근 AURIS의 longus를 분리합니다. </li><li> 조심스럽게 기본 경막에서 활 경근 근육을 분리 무딘 절개를 사용하여 두개골의 꼬리 영역을 노출합니다. </li><li> 조심스럽게 뒤통수 과두에 양측으로 연장되는 난원 매그넘 따라 경막을 분리하기 위해 새로운 25 G 바늘을 사용합니다. </li><li> 넷째 뇌실 위에 놓인 피아과 지주막 수막을 제거하고 뇌간을 노출 # 5 뒤몽의 집게를 사용합니다. </li></ol></li><li> 관리 넷째 뇌실의 갑상선 자극 호르몬 분비 호르몬 또는 정맥 나트륨 니트 로프 루시드 <ol><li> 체중 50 TRH μM의 최종 농도에 도달하는 멸균 생리 식염수에 갑상선 자극 호르몬 분비 호르몬 (TRH)을 녹인다. </li><li> 체중 150 μM의 SNP의 최종 농도에 도달하는 멸균 식염수 중의 나트륨 니트 로프 루시드 (SNP)을 녹인다. </li><li> 10 μL 주사기를 사용하여, 위 수축의 기록을 용이하게하기 위해 뇌간 넷째 뇌실의 등쪽 표면에 (최종 투여 량은 100 pmol의 동일) TRH의 2 μl를 관리 할 수​​ 있습니다. </li><li> 멸균 주사기와 27 G 바늘을 사용하여, 위 휴식의 기록을 용이하게하기 위해 꼬리 정맥을 통해 SNP의 150 μmol의 / kg을 관리 할 수​​ 있습니다. </li></ol></li></ol>

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저자는 경쟁하는 금전적 이해관계가 없음을 선언합니다. 이 원고에 나열된 공급업체는 참고용으로만 제공됩니다.

여기에 제시된 절차는 개별 실험실 포함한 생물학적 응용을위한 중요한 소형 스트레인 게이지를 제조 할 수 있지만, 작은 실험실 동물에서 위장관 운동성에 한정되지. 이러한 스트레인 게이지의 상업적 생산을 중단 한 이후, 위장 기능을 연구 실험실 실험이 가능 애플리케이션의 전체 범위를 허용 할 수없는 다른 기술로 제한된다. 이 보고서는 앞서 설명한 기술 (15)의 업데이트에 대한 자세한 설명을 제공한다. 첨부 된 텍스트 및 비디오 특히 우리는 제조 프로세스의 개발 및 숙달 동안 인식 일반적인 함정 해결책을 다룬다. 설명 된대로 각 단계는 성공적인 제조에 기술을 제공합니다. 깨끗하고 안전하게 모든 연결을 납땜뿐만 아니라 solderin에서 과도한 열을 가진 요소에 손상을 방지에주의g 프로세스가 성공의 가장 흔한 문제입니다. 미세 게이지 와이어가 제대로 수축 튜브 또는 실리콘 에폭시 보강되지 않고 게이지가 부드럽게 굴곡 될 때 신호의 부재에서 발생할 경우 파괴하는 ...

실험 조건의 수에 걸쳐 생체 위장 (GI) 운동성 레코드 영양소 항상성에 필요한 기본 정상 및 병태 생리 학적 과정을 이해하기위한 강력한 도구 남아 실험 연구. 전통적으로, 수많은 실험 방법론 직접 GI 수축 레이트 2-5, 관내 압력이 6, 7, 또는 비 흡수성 마커 (8)의 GI 통과 9의 변화를 정량화하기 위해 사용 된 임상 1에서 발견 된 것과 유사성 일부 또는 안정 동위 원소 10-12. 이러한 기술의 각각은 이전에 문헌에 언급 된 고유의 장점과 단점을 갖는다. 흡수성 마커 위장관 회복 실험 애니를 안락사 필요 예를 들어, 압력 변화를 정량화하기 위해 풍선의 내압 유틸리티는 풍선 재료의 고유의 컴플라이언스 때문에 문제시되었다단일 데이터 포인트에 대한 리터. 최근 소형화 동맥압 카테터의인가 및 검증은 쥐 3 위 수축력을 모니터링하기위한 비 - 수술 방법을 제공하는 것으로보고되었다. orogastrically 배치 압력 변환기 효과적으로 침습 수술을 피함으로써 위장 기능에 교란 변수를 제거하지만, 이러한 접근법은 마취 제제에만 적합하다. 또한, 시각적 인 지침의 부족은 위장의 특정 지역 내에서 트랜스 듀서의 일관성있는 배치를 허용하지 않습니다. 따라서,이 응용 프로그램은 십이지장 내에서 단단한 센서 와이어와 결합 시각화 이후 위장이나 대장, 제한 또는 회장은 옵션이 없습니다. 마찬가지로,의 생체 교류 biosusceptometry (ACB) 기술은 GI 수축 분석 4 확인되었습니다. ACB 기술은 비 침습적 인 AP를 제공하지만위장관의 수축을 측정하기위한 접근 방법, ACB는 점에서 유사한 제한 GI 트랙트의 특정 영역의 정확한 기록을 허가하지 않는 자기 검출 섭취 매체의 사용에서 겪고있다. 이러한 제한은 자성 마커 이식 수술을 통해 극복 될 수있다. 그럼에도 불구하고, ACB 기술은 동물이 데이터 수집을 위해 마취를하는 것이 필요로한다. Ultrasonomicrometry 몇몇 GI에 이용 된 공간적 작은 크기를 활용하기 위해 13, 14을 연구하고, 압전 크리스탈 송신기 / 수신기의 시간적 이점. 위장 평활근 수축 파도 고주파 이벤트 아니며 약 3의 비율로 발생 - / 분 5 사이클. 따라서 sonomicrometry의 시간적 장점은 비용을 정당화 할 필요가있을 수 있습니다. 직선 운동 sonomicrometry 정확하게 측정하면서 또한, 제한은 정확한 데이터 위장관 관한 제시되었다결정 (14)의 불충분 한 수의 주입으로 인해 발생할 수있는 해석. 베이스와 동료 2, (15)의 오리지널 디자인에 기초하여이 시각 프로토콜은보다 완전 단계별 제조 및 소형의 실험 애플리케이션 전체 GI 따라 평활근 수축을 기록하기위한 고감도 및 유연성을 갖고 이중 소자 스트레인 게이지를 문서화 기관. 스트레인 게이지 소자 사이즈 요소를 캡슐화 실리콘 시트시 대부분 의존 완성 스트레인 게이지의 감도와 크기 때문에 모든 짐승 응용에 적합하다. 이러한 스트레인 게이지 용이하여 평활근 수축을 정량화 한 기술을 제공하는 마취 자유롭게 행동 실험 동물 모델에서, 급성 및 만성 애플리케이션에 적합하다.

<table><tbody><tr><td>스트레인 게이지 소자</td><td>마이크로 측정 (Vishay Product Group)</td><td>EA-06-031-350</td><td>&nbsp; 선형 패턴, 호일, 응력 해석 스트레인 게이지(2개 필요) <a href="http://www.vishaypg.com/micro-measurements/">www.vishaypg.com/micro-measurements/</a> 또는 <a href="http://www.vishaypg.com/docs/11070/031ce.pdf">http://www.vishaypg.com/docs/11070/031ce.pdf</a></td></tr><tr><td>에폭시-페놀 접착제</td><td>M-bond 610</td><td>스트레인 게이지 요소</td> <td>접착용 범용 접착제<a href="http://www.vishaypg.com/docs/11024/wirecable.pdf">http://www.vishaypg.com/docs/11024/wirecable.pdf</a></td></tr><tr><td>3 도체 절연 전선</td><td>336-FTE</td><td>미세 게이지, 유연한 범용 와이어</td><td><a href="http://www.vishaypg.com/docs/11024/wirecable.pdf">http://www.vishaypg.com/docs/11024/wirecable.pdf</a></td></tr><tr><td>플럭스 및 로진 솔벤트 키트</td><td>FAR-2 M-플럭스 AR 키트</td><td>액체 솔더 플럭스</td><td><a href="http://www.vishaypg.com/docs/11023/soldacce.pdf">http://www.vishaypg.com/docs/11023/soldacce.pdf</a></td></tr><tr><td>솔더</td><td>361A-20R-25</td><td>스트레인 게이지 애플리케이션에 최적화 및 권장</td><td>됨<a href="http://www.vishaypg.com/docs/11023/soldacce.pdf">http://www.vishaypg.com/docs/11023/soldacce.pdf</a></td></tr><tr><td>금 소켓 커넥터</td><td>플라스틱전극</td> 받침대용 <td>E363/0</td><td>소켓 접점 1개 <a href="http://www.plastics1.com/PCR/Catalog/Item.php?item=407">http://www.plastics1.com/PCR/Catalog/Item.php?item=407</a></td></tr><tr><td>전극 받침대</td><td>MS363</td><td>와이어 접점용 보안 플랫폼</td><td><a href="http://www.plastics1.com/PCR/Catalog/Item.php?item=499">http:// www.plastics1.com/PCR/Catalog/Item.php?item=499</a></td></tr><tr><td>6선 케이블</td><td>363 PLUG W/VINYL SL/6</td><td>전극, 받침대 및 단자 끝의 주석 도금 솔더 러그와 일치하는 플러그 어댑터가 있는 사전 제작된 비닐 코팅 케이블(맞춤형 길이)</td> 실리콘 고무 주조 화합물 EIS 전기 제품 Elan Tron E211 <td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td>게이지/와이어 솔더 조인트용 포팅 매체 <a href="http://www.eis-inc.com/">http://www.eis-inc.com</a></td></tr><tr><td>HOTweezers</td><td>Meisei Corporation</td><td>모델 4B</td><td>와이어 절연 스트리퍼 <a href="http://www.impexron.us/">http://www.impexron.us</a></td></tr><tr><td>납땜 스테이션</td><td>웰러 (Apex Tool Group)</td><td>WES 51</td><td>고품질 납땜 장비 <a href = "http://www.apexhandtools.com/weller/index.cfm">http://www.apexhandtools.com/weller/index.cfm< / a ></td></tr> <tr><td>http://www.eis-inc.com 또는 http://www.amazon.com</td><td></td><td></td><td></td>실리콘 시트를 통해 사용 가능</tr><tr><td></td><td>Trelleborg 씰링 솔루션 Northborough-Life Sciences</td><td>Pharmelast 20-20</td><td>캡슐화 스트레인 게이지 요소 10 B Forbes Road Northborough, MA 01532 (800) 634-2000</td></tr><tr><td>Amplifier</td><td>Experimetria Ltd</td><td>AMP-01-SG</td><<td>br/> <a href="http://experimetria.com/Biological_amplifiers.php">http://experimetria.com/Biological_amplifiers.php</a></td></tr></tbody></table>

측정을위한 소형 이중 요소 스트레인 게이지의 제조 및 주입<em&gt; 생체</em&gt; 설치류에서 위장 수축.

Fabrication and Implantation of Miniature Dual-element Strain Gages for Measuring In Vivo Gastrointestinal Contractions in Rodents.

위장 기능 장애는 이환율과 사망률의 주요 원인으로 남아 있습니다. 실제로, 건강과 질병에 대한 위장(GI) 운동성은 지난 5년 동안 1,400건 이상의 동물 연구가 발표된 생산적인 연구 분야로 남아 있습니다. 위, 소장 및 결장의 평활근 활동을 정량화하기 위해 수많은 기술이 개발되었습니다. 시험관 내 및 생체 외 기술은 GI 기능에 대한 기계론적 연구를 위한 강력한 도구를 제공하지만, 온전한 유기체에 내재된 통합 시스템의 맥락을 벗어납니다. 일반적으로 위의 생체 내 평활근 수축을 측정하려면 외과적으로 배치된 압력 센서의 도입, 약간 부풀어 오른 풍선과 같은 정압 부하 또는 기압으로 제어되는 피드백 하에 액체로 위를 팽창시키는 마취 제제가 포함됩니다. 그러나 이러한 접근 방식 중 다수는 의식이 있는 실험 동물 모델에서 생체 내 사용에 대한 적용 가능성뿐만 아니라 결과 해석과 관련하여 고유한 단점을 제시합니다. 위장관의 장막 표면에 부착된 이중 요소 스트레인 게이지의 사용은 수많은 실험적 이점을 제공했으며, 이는 계속해서 단점을 능가할 수 있습니다. 이러한 Gage는 상업적으로 이용할 수 없기 때문에 이 비디오 프레젠테이션은 이러한 Gage의 현재 설계 제작에 대한 자세한 단계별 가이드를 제공합니다. 이 프로토콜에 설명된 스트레인 게이지는 쥐의 위 운동성을 기록하기 위한 설계입니다. 이 디자인은 전체 위장관을 따라 평활근 활동을 기록하기 위해 수정되었으며 전체 제작에서 미묘한 변화만 필요합니다. 전체 위장관의 대표 데이터뿐만 아니라 분석 방법, 데이터 해석 및 표현에 대한 논의가 포함됩니다.

Thiobutabarbital - 마취 된 쥐에서 대표 데이터는 그림 2에 나타내었다. 상단 트레이스는 갑상선 자극 호르몬 분비 호르몬의 뇌간 관리 (TRH, 100 pmol의), 알려진 운동성을 향상시키는 펩타이드 3, 19시 쥐의 위 코퍼스 수축을 나타냅니다. 그것은 phasic 위암 평활근 활동의 증가에 앞서 기준선 수축을 나타낸다. 참고 : 위 수축 이러한 피크의 분석 Ormsby와베이스 (20)에 의해 고안 원래의 공식을 따릅니다 운동성 지수 = (N 1 1 개) + (N 2 × 2) + (N 3 4 개) + (N 4 배속) 이 식에 기초하여, N은 특정 밀리그램 범위의 피크의 전체 개수와 동일. 50 ㎎, 60 - - 100 ㎎, 110-200 mg의 더 큰 신호 따라...

실험실 동물의 위장관을 따라 평활근 수축을 생체 내에서 측정하는 것은 활용도가 낮지만 강력한 기술로 남아 있습니다. 유연한 이중 요소 스트레인 게이지는 상업적으로 이용 가능하지 않으며 제작이 필요합니다. 이 프로토콜은 설치류에 급성 또는 만성 이식을 위한 신뢰할 수 있고 저렴한 스트레인 게이지의 구성을 설명합니다.

Gastrointestinal dysfunction remains a major cause of morbidity and mortality. Indeed, gastrointestinal (GI) motility in health and disease remains an ...

다음 절차의 전반적인 목표는 이중 요소 스트레인 게이지의 제작을 시연하는 것입니다. 이는 먼저 정렬된 개체, 단일 요소 스트레인 게이지 구성 요소에 결합함으로써 수행됩니다. 두 번째 단계에서는 연결 와이어를 조립하고 접합 요소에 납땜하여 백킹 재료와 게이지 요소가 손상되지 않도록 주의합니다.그런 다음 이중 요소 어셈블리를 실리콘 시트 층 사이에 삽입하여 유연하고 방수되며 재사용 가능한 스트레인 게이지를 형성합니다. 마지막 단계에서 게이지는 적절한 브리지 증폭기에 안전하게 결합하기 위해 안정적인 커넥터와 결합됩니다. 궁극적으로, 제작된 게이지는 소화관을 따라 생체 내 수축의 속도와 상대적 크기를 기록하는 데 사용할 수 있습니다.개별 스트레인 게이지의 제작이 마스터되면 게이지는 연구자가 관심을 가질 수 있는 위장관의 여러 영역을 따라 사용할 수 있는 상대적으로 저렴한 옵션을 제공합니다. 스트레인 게이지 기법은 풍선 압력계, 압력 트랜스듀서 또는 PISO, 전기 결정 송신기 및 수신기를 사용하는 것과 같은 대체 방법에 비해 몇 가지 장점이 있는데, 스트링 게이지는 마취된 피험자에게 급성으로 사용되거나 깨어 있고 자유롭게 행동하는 동물의 장기 녹음을 위해 만성적으로 이식될 수 있기 때문입니다. 이중 요소 스트레인 게이지를 제작하려면 먼저 접착면이 작업대에서 위를 향하도록 작고 깨끗한 접착 종이 조각을 부착합니다.그런 다음 요소를 작업 표면에 고정하여 원치 않는 움직임이나 요소의 오염을 제한합니다. 다음으로, 한 쌍의 숫자 5 Mont 집게로 각 요소를 차례로 잡은 다음 이소 프로필 알코올로 요소 필름의 뒷면을 청소합니다. 요소를 자연 건조시킨 후 실체 현미경 아래에서 깨끗한 10 제로 낙타 털 브러시를 사용하여 요소 중 하나의 뒷면에 에폭시 페놀 접착제의 얇은 필름을 적용합니다.그런 다음 즉시 두 번째 요소의 반대쪽 뒷면을 접착제에 놓고 호일 그리드를 정렬합니다. 접착된 요소를 섭씨 50-60도의 오븐에 밤새 넣어 에폭시를 완전히 경화시킵니다. 다음날 아침 단일 모서리 면도날을 사용하여 결합된 이중 요소를 3 x 3mm의 최종 크기로 자르고 요소의 상단을 자르지 않도록 합니다.다음으로, 3개의 도체 와이어의 30cm 꼰 가닥을 3개의 구성 와이어로 분해합니다. 그런 다음 4 선 케이블 첫 번째 쌍을 만들기 위해, 3 도체 와이어의 두 번째 30cm 길이 내에 포함 된 밝은 색의 와이어를 갖는 단일 와이어 중 하나를 생성한다. 다음으로, 각 와이어의 양쪽 끝에서 약 1mm의 테프론 절연체를 벗겨내고 활성 로진 납땜 플럭스와 저온 솔더를 사용합니다.와이어 끝을 납땜 연필로 주석 처리한 다음 깨끗한 10 제로 브러시로 결합된 이중 요소의 한쪽 면에 있는 솔더 패드를 플롭스하고 단일 리드 하나와 쌍을 이루는 공통 리드 중 하나를 솔더 패드에 납땜합니다. 반대쪽에서 이 과정을 반복한 후 나머지 공통 와이어 리드가 원래 공통 리드 반대쪽 패드에 납땜되었는지 확인한 후 수지 솔벤트에 적신 깨끗한 브러시를 사용하여 세척 절차에 따라 잔류 플럭스를 제거합니다. 2액형 실리콘 고무 에폭시 수지를 20-30분 동안 부분적으로 경화시킵니다.그런 다음 금 소켓 커넥터를 와이어 리드의 자유 단부에 납땜하고 레진의 얇은 층으로 요소 솔더 패드의 솔더 조인트를 절연합니다. 다음으로 0.5mm 두께의 실리콘 시트 3장을 15mm x 15mm 정사각형으로 자르고 실리콘을 증류수로 청소합니다. 그런 다음 시트 중 하나를 U자형으로 절단하여 캡슐화 실리콘 코팅을 변형시키지 않고 최종 이중 요소 어셈블리를 수용하고 노치가 없는 실리콘 시트의 내부 표면을 투명 실리콘 접착제로 만든 다음 이중 요소 어셈블리를 노치와 정렬된 외부 시트 내에 끼웁니다.여분의 실리콘과 기포를 중앙에서 바깥쪽으로 부드럽게 누릅니다. 균일한 두께와 다음날 변형이 없는지 확인하기 위해 두 개의 금속 막대 스톡 블록 사이에 캡슐화된 어셈블리를 24시간 동안 조심스럽게 고정하고 어셈블리의 경계를 따라 여분의 실리콘을 남겨두고 금 소켓의 솔더 조인트를 강화합니다. 개별 단자 와이어의 커넥터는 3mm의 수축 튜브로 연결되며, 새 스트레인 게이지를 처음 사용하기 전에 플라스틱 전극 받침대 내에서 튜브를 정렬합니다.게이지의 경계에서 여분의 실리콘을 잘라내어 원하는 최종 치수를 얻습니다. 이중 요소 또는 와이어 리드가 손상되지 않도록 주의하십시오. 그런 다음 전극 받침대와 와이어를 0.125 및 0.25인치 직경의 수축 튜브로 고정하여 실험 중 분리를 방지합니다.이중 요소 스트레인 게이지를 이식하려면 먼저 숫자 14 테이퍼 0.3 8번째 원형 바늘을 사용하여 스트레인 게이지의 네 모서리를 4-5cm 길이의 4-5cm 길이의 4개의 0 또는 더 작은 멸균 실크 봉합사로 끼웁니다. 다음으로, 개복술 절개를 시행한 후, 출혈을 방지하기 위해 연결된 선형 팔꿈치를 따라 복직근 근육 조직을 만듭니다. 그런 다음 식염수에 적신 면 팁 어플리케이터를 사용하여 밑에 있는 복부 내장이 찢어지는 것을 방지하기 위해 두정막에 매우 표면적인 정중선을 만듭니다.복부 절개 부위의 코들 끝에 있는 식염수를 적신 거즈 패딩 위에 위를 조심스럽게 놓습니다. 장기를 해부학적 위치에 유지하면서 캡슐화된 스트레인 게이지의 그리드를 원형 평활근 섬유와 평행하게 정렬합니다. 그런 다음 이전에 나사산이 있는 봉합사와 숫자 14 테이퍼 0.3 8번째 원 바늘을 사용하여 게이지의 모서리를 위 말뭉치의 복부 시러스 표면에 부착합니다.이제 안저 말뭉치 경계 근처에서 위의 더 큰 곡률을 따라 게이지의 봉합 패턴을 시작하고 이 경계를 따라 더 작은 곡률을 향해 진행하여 최상의 결과를 얻습니다. 스트레인 게이지의 기저에 있는 ci rosa는 이 이미지에서와 같이 느슨하거나 과도하게 늘어나서도 안 됩니다. 봉합사를 놓은 후 식염수에 적신 솜 팁 애플리케이터를 사용하여 위를 해부학적 위치로 되돌립니다.급성 모델 외부화의 경우, 스트레인 게이지는 복부 절개 부위를 닫기 전에 정중선 절개 부위의 코들 끝에서 리드합니다. 그런 다음 직근 근육과 복부 피부를 별도의 3 개의 제로 나일론 봉합사로 닫습니다. 동물 또는 단자선 커넥터를 조작하는 동안 변형 완화를 제공하기 위해 자유 전선을 동물에 고정합니다.마지막으로, 동물을 입체성 프레임에 넣어 머리를 지지하고 상체를 들어 올려 녹음하는 동안 호흡 아티팩트를 줄입니다. 피드백 제어 발열 패드를 사용하여 직장 온도를 섭씨 37도 이상으로 유지합니다. Aobut Barbital 마취 쥐의 대표 데이터가 그래프에 나와 있습니다.상단 트레이스는 알려진 운동성 향상 펩타이드인 갑상선 자극 호르몬 방출 호르몬의 뇌간 투여 중 동물의 위 말뭉치 수축을 나타내며, 위상 위 평활근 활동이 증가하기 전의 기준선 수축 수준을 보여줍니다. 두 번째 추적은 동일한 동물에서 기준선 위 평활근 긴장도의 감소를 보여줍니다. 산화질소 공여체 나트륨 측에 대한 응답으로 이 전압 신호를 사용하여 그램 단위의 등가 정적 부하를 도출할 수 있습니다.이러한 대표적인 데이터는 위 권장(위 권)에 적절하게 부착된 이중 요소 스트레인 게이지의 양방향 기능을 보여줍니다. 세 번째 트레이스는 공복 쥐의 십이지장의 시에로 표면에 봉합된 서브 미니어처 스트레인 게이지에 의해 기록된 기저 평활근 수축을 나타냅니다. 이 대표적인 실험에서 스트레인 게이지 요소의 방향은 십이지장의 원형 근육과도 평행했습니다.스트레인 게이지를 위장관에 연결하는 동안, ci와 혈관 구조의 파괴를 최소화하면서 게이지를 봉합하는 것을 기억하는 것이 중요합니다. 이 비디오를 시청한 후에는 소형 스트레인 게이지를 제작하는 방법을 잘 이해하게 될 것이며, 작고 섬세한 구성 요소를 개별적으로 납땜하는 것과 같이 공정의 기술적으로 더 까다로운 측면과 관련된 몇 가지 초기 함정을 피할 수 있을 것입니다.

fabrication-implantation-miniature-dual-element-strain-gages-for

Research

연구

JoVE Journal

Bioengineering

생명공학

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재관류의 decellularization는 기관의 세포외 기질 구성과 마이크로 아키텍처를 유지 전체 간 공사장 공중 발판을 생산하는 새로운 기술입니다. 여기에, hepatocytes과 재관류의 decellularization 이후 repopulation를 사용하여 전체 오르간 공사장 공중 발판을 준비하는 방법이 설명되어 있습니다. 기능 및 transplantable 간 이식이 기술을 사용하여 생성할 수 있습니다.

전체 간은의 Decellularization 및 Recellularization

배우세요 이중 요소 스트레인 게이지 제조법을 통해 설치류 위장관 평활근 수축을 측정하는 방법을 익히세요. 실리콘 코팅과 브리지 증폭기 연결을 포함한 비용 효율적인 기술을 활용하여 생체 내 위장 운동성 연구에 활용할 수 있습니다.

측정을위한 소형 이중 요소 스트레인 게이지의 제조 및 주입

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