외상성 뇌 손상에 대한 제어 피질 충격 모델

이 절차의 전반적인 목표는 제어된 피질 충격 모델을 사용하여 외상성 뇌 손상을 일으키는 것입니다. 이것은 먼저 마우스를 마취하고 수술을 준비함으로써 달성됩니다. 절차의 두 번째 단계는 C 두개골 절제술을 수행하는 것입니다.

세 번째 단계는 원하는 매개변수로 임팩트 시스템을 설정하는 것입니다. 마지막 단계는 노출된 뇌에 충격을 가하는 것입니다. 궁극적으로, 그 결과는 절개된 뇌의 영상과 면역조직화학을 통해 피질 손상 구멍을 보여줄 수 있습니다.

일반적으로 이 방법을 처음 접하는 개인은 지속적인 뇌 손상을 일으키기 어렵기 때문에 어려움을 겪을 것입니다. 절차를 시연하는 것은 우리 연구실의 연구원인 Shang Gao 박사가 맡을 것입니다. 마취 후 마우스는 귀 사이의 머리를 면도하고 10 % 요오드와 70 % 에탄올을 번갈아 가며 스크럽하여 노출 된 피부를 청소합니다.

다음으로, 눈이 건조해지지 않도록 윤활제를 발라주세요. 그런 다음 귀마개와 바이트 플레이트를 사용하여 정위 프레임에 마우스를 고정합니다. 머리는 매우 안정적이어야 합니다.

가위를 사용하여 머리 중앙을 세로로 절개하여 두개골 절제술을 시작합니다. 그런 다음 지혈제를 사용하여 면봉 어플리케이터로 피부를 옆으로 잡고 두개골 뼈를 닦고 청소하고 노출시킵니다. 계속하기 전에 잠시 건조시키십시오.

건조되면 집게를 사용하여 두개골에 압력을 가합니다. 준비물이 움직이지 않는지 확인하십시오. lambda 및 breg ma 랜드마크를 식별합니다.

그런 다음 중심에 정중선에서 50mm 떨어진 직경 4mm의 원을 그립니다. 다음으로 표시된 원을 따라 드릴을 뚫어 뼈가 쉽게 부러지도록 하되 경막까지 침투하지 마십시오. 필요에 따라 먼지를 제거하십시오.

그런 다음 집게를 사용하여 뼈의 원을 끊어 경막을 노출시킵니다. C 두개골 절제술은 가장 중요한 단계입니다. 일관된 뼈 창 매개변수를 생성하면 일관된 부상 심각도를 허용할 수 있습니다.

적절한 드릴 크기, 속도 및 힘이 잘 사용되는지 확인하십시오. 드릴링 충격 시스템은 액추에이터를 사용하여 두개골에 충격을 가하며 설정해야 하는 몇 가지 매개변수가 있습니다. 액추에이터의 속도를 초당 3미터로 설정합니다.

다음으로, 액추에이터를 정위 프레임에 고정합니다. 마이크로 매니퓰레이터를 사용하여 3mm 너비의 액추에이터를 열린 두개골 영역에 배치합니다. 그런 다음 액추에이터의 팁을 충격 표면과 평행이 되도록 조정합니다.

영점을 설정하려면 액추에이터를 확장하고 팁이 충격 위치에 닿을 때까지 내립니다. 프레임의 해당 Z 채널을 0으로 설정합니다. 이제 이 경우 팁을 1mm 뒤로 빼십시오.

그런 다음 액추에이터를 움직일 적절한 외상성 뇌 손상에 대한 변형 깊이를 설정합니다. 그런 다음 임팩트 버튼을 눌러 임팩트 후 부상을 입습니다. 끝이 솜 달린 애플리케이터로 피를 닦아내되 부상 부위를 만지지 마십시오.

마우스를 따뜻한 패드로 옮기고 부상을 모니터링합니다 출혈이 멈추면 상처를 봉합한 다음 마우스를 따뜻한 패드의 깨끗한 케이지로 다시 넣고 밤새 회복하도록 합니다. 충돌 후 부기, 출혈 및 두개골 뒤틀림의 정도는 부상의 실제 심각성을 나타냅니다. 경막이 완전히 파열되는 것으로 제한되면 출혈의 양에 큰 차이가 생기고 경증에서 중등도의 TBI가 발생합니다.

조직을 고정하고 현미경으로 관찰하면 중등도 TBI와 중증 TBI를 쉽게 구별할 수 있습니다. 여기 nis. L 염색은 대조군을 중등도의 TBIA 구멍이 피질 깊숙이 확장되는 것을 볼

이 모델은 뇌 손상으로 인한 뉴런 사멸 및 기타 조직병리학적 변화뿐만 아니라 이러한 명예 훼손을 조사하는 데 사용할 수 있습니다. 이 기술을 마스터하면 제대로 수행하면 15분 안에 완료할 수 있습니다.