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DOI: 10.3791/51806-v
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DNA 수리 경로는 게놈 무결성의 유지 보수 및 예방 돌연변이 및 암 필수적이다. 이 프로토콜의 목적은 중기는 텔로미어 DNA 반복위한 원위치 혼성화 (FISH)에 형광체를 사용하여 마우스 B 세포로부터 확산에 염색체 이상을 직접 관찰하여 게놈 불안정성을 정량화하는 것이다.
다음 실험의 전반적인 목표는 마우스 B 림프구의 게놈 불안정성을 정량화하는 것입니다. 이는 일차 세포 배양을 위해 먼저 B 세포를 분리함으로써 달성됩니다. 다음으로, 세포는 고정되어 중기 확산의 준비를 용이하게 합니다.
마지막으로, 텔로미어 PNA 물고기는 형광 표지된 텔로미어의 시각화를 위해 수행됩니다. 궁극적으로 다양한 유형의 염색체 이상 수준은 형광 현미경으로 정량화할 수 있습니다. 이 기술의 의미는 표적 마우스 모델에서 게놈 안정성을 촉진하는 유전자를 식별하는 데 도움이 될 수 있으므로 DNA 복구 경로에 대한 이해를 확장할 수 있습니다.
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