절차 흰쥐의 파블로프 에어컨 알코올 추구 행동의 상황에 의한 갱신을 준수합니다

이 절차는 파블로프의 알코올 추구 행동의 재생을 유발하는 알코올 관련 컨텍스트의 능력을 조사합니다. 이것은 먼저 에탄올에 경험이 있는 쥐를 두 가지 고유한 컨텍스트로 구성된 컨디셔닝 챔버에 습관화함으로써 달성됩니다. 절차의 두 번째 단계는 두 가지 다른 청각 신호가 알코올 가용성 또는 알코올 부족을 나타내는 한 가지 맥락에서 파블로프 차별 교육 세션을 수행하는 것입니다.

세 번째 단계는 멸종 훈련을 실시하는 것입니다. 두 청각적 단서가 알코올 없이 제시되는 두 번째 맥락에서, 마지막 단계는 쥐를 원래의 훈련 맥락으로 되돌리고 알코올 없이 두 청각적 단서를 모두 제시하는 것입니다. 이 조작은 이전에 알코올과 관련되었던 청각 신호에 의해 유발된 알코올 추구 행동의 재생을 유발합니다.

도구적 조건화와 같은 기존 절차에 비해 이 기술의 주요 장점은 알코올을 예측하는 파블로프의 단서에 의해 유도된 알코올 추구 행동의 동물 모델을 제공한다는 것입니다. 이 방법은 중독 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다., 예를 들어 알코올과 관련된 맥락이 재발을 유발합니까 훈련하기 전에 쥐를 시험장에 습관화하고 그들이 경험하게 될 두 가지 환경적 맥락을 습관화하십시오. 항상 일관된 방식으로 동물 보호 시설에서 실험실로 쥐를 운반하십시오.

첫 번째 세션에서는 24시간 후에 실내 조명을 켜고 음향 감쇠 칸막이실의 선풍기를 켠 상태에서 쥐를 20분 동안 실험실에 둡니다. 두 번째 습관화 세션은 첫 번째 세션과 마찬가지로 수행하되 이제 각 쥐의 무게를 측정하고 다룹니다. 세 번째 세션은 24시간 후에 실시합니다.

이를 위해 각 조절 챔버를 시각, 후각 자극과 촉각 자극의 두 가지 독특한 조합 중 하나로 설정하십시오. 일관된 맥락을 제공하기 위해, 후각 자극은 각 방에 추가되는 마지막 맥락적 자극이어야 합니다. 서로 다른 후각 자극의 혼합을 최소화하려면 챔버의 문과 각 챔버가 있는 소음 감쇠 칸막이를 닫으십시오.

세 번째 세션에서 후각 자극을 가한 직후, 각 쥐의 무게를 측정하고 20분 동안 컨디셔닝 챔버에 넣는다. 쥐의 절반은 맥락을 경험해야 하고, 나머지 절반은 맥락을 경험해야 한다. 둘째, 쥐와 쥐의 방 사이의 일관성에 대한 중요한 요구를 유지하기 위해 쥐에게 특정 방을 식별하는 번호를 표시하는 것이 유용합니다.

모든 쥐를 방에 넣은 후 1 분 후에 방의 집 조명을 켜십시오 20 분 동안 쥐가 만든 모든 유체 포트 입구를 기록하십시오. 그런 다음 불을 끄고 쥐를 내리고 보호 시설로 돌려보냅니다. 같은 날 늦게, 컨디셔닝 챔버의 맥락이 역전되는 세 번째 세션과 거의 동일한 네 번째 습관화 세션을 수행합니다.

마지막으로, 매 세션 후에는 항상 후각 상황 자극이 적용된 컨디셔닝 챔버와 페트리 접시의 쓰레기통과 바닥 패널을 씻으십시오. 매주 무향 세척액만 사용하십시오. 이 훈련을 위해 챔버를 완전히 청소하십시오.

쥐를 마지막 두 번의 에탄올 접근 세션에서 동일한 평균 에탄올 섭취량을 가진 두 그룹으로 나눕니다. 한 그룹은 맥락에서 훈련되고 다른 그룹은 맥락에서 훈련됩니다. 2. 파블로프식 차별 훈련에 사용되는 맥락을 맥락 A라고 한다.이 세션 동안 쥐는 에탄올과 쌍을 이루는 것과 그렇지 않은 두 가지 청각적 신호를 구별하는 방법을 배운다.

따라서 첫 번째 단계는 에탄올이 함유된 20ml 주사기를 준비하는 것입니다. 유체 포트의 경우 유체 포트 뒤쪽의 튜브를 적재된 주사기에 연결합니다. 뭉툭한 바늘을 사용하여 각 주사기를 소리 감쇠 칸막이 밖에 있는 자체 펌프에 넣습니다.

그런 다음 펌프를 수동으로 전진시켜 튜브를 프라이밍하고 유체 포트에서 과도한 에탄올을 닦아냅니다. 이제 쥐를 실험실 실험실로 데려오십시오. 습관화하는 동안과 마찬가지로, 할당된 조절 챔버에 넣기 전에 각 쥐의 무게를 잰다.

각 챔버 내의 컨텍스트 구성을 다시 확인하고 올바른 챔버에 올바른 쥐를 로드해야 합니다. 잘못된 컨텍스트 또는 잘못된 CS plus에 노출된 쥐는 연구에서 제외되어야 할 수도 있습니다. 모든 쥐의 무게를 측정하고 로드하면 훈련 세션의 이벤트를 제어하는 컴퓨터 프로그램을 시작합니다.

프로그램이 시작되고 5분이 지나면 각 세션마다 각 챔버의 하우스 조명이 켜지고 16, 10초의 백색 소음과 16, 10초의 딸깍 소리가 표시됩니다. 각 쥐에 대해 에탄올에 대한 이러한 청각 자극 중 하나를 지정하고 Cs의 마지막 6초 동안 두 가지 조건화 맥락에서 이러한 지정의 균형을 맞추면 펌프는 0.2ml의 에탄올을 유체 포트로 전달합니다. 가변 시간 67초 일정으로 자극을 설정하여 1시간 세션을 만듭니다.

Cs 이전 10초, Cs 기간 동안, Cs 이후 10초 동안 시작하는 모든 유체 포트 항목을 기록합니다. 또한 전체 Pavlovian 차별 교육 세션에 대해 만들어진 총 유체 포트 항목 수를 기록합니다. 세션이 끝나면 집 조명을 끄고 쥐를 컨디셔닝 룸의 동물 보호 시설로 되돌려 보냅니다.

유체 포트를 점검하여 쥐가 세션 중에 전달된 3.2ml의 에탄올을 섭취했는지 확인하십시오. 쥐가 챔버에서 꺼낸 후 유체 포트를 확인하여 에탄올을 소비하지 않는 에탄올 쥐를 섭취하고 있는지 확인하고 CS 플러스 동안 낮은 수준의 포트 입구를 보여 주므로 연구에서 제외해야 할 수도 있습니다. 평소와 같이 컨디셔닝 챔버를 청소하십시오.

먼저 튜브를 물로 씻어낸 다음 빈 60ml 주사기를 사용하여 튜브에 공기를 통과시켜 튜브를 청소합니다. 쥐가 포트 진입 반응으로 표시된 두 가지 청각 자극을 구별할 때까지 매일 세션을 반복합니다. 16-20 세션 내에서 안정화되는 CS plus에 대한 포트 항목의 선택적 증가가 예상됩니다.

멸종 세션의 경우. 모든 쥐의 조건화실은 파블로프식 차별 훈련에서 사용된 것과는 다른 맥락으로 설정되어야 한다. 소멸이 이루어지는 맥락을 맥락 B라고 한다.소멸 세션을 차별 세션과 동일하게 동일한 컴퓨터 프로그램을 사용하여 수행하되, CS Plus 중에는 에탄올을 전달하지 않는다.

일관성을 위해 펌프에는 에탄올이 없는 튜브로 챔버에 연결된 빈 20ml 주사기가 로드됩니다. 쥐가 CS 플러스와 마이너스를 구별하지 않을 때까지 매일 멸종 세션을 수행합니다. 이것은 항상 그렇듯이 약 8 개의 세션이 소요될 수 있으며 갱신 테스트를 진행하기 전에 필요에 따라 장비를 청소하십시오.

CS 기간 동안과 멸종 훈련이 끝날 때 처음과 비교하여 포트 진입을 크게 줄이는 것이 중요합니다. 맥락 유도 갱신 테스트는 파블로프 차별 훈련에서 사용된 것과 동일한 챔버 컨텍스트 구성을 사용하며, 이는 멸종 훈련의 맥락과 다른 맥락입니다. 이 단일 세션 테스트는 에탄올이 전달되지 않고 주사기가 비어 있다는 점을 제외하고는 Pavlovian 차별 교육 세션과 동일하게 수행됩니다.

동일한 컴퓨터 프로그램을 사용하여 청각 자극을 제시합니다. 예상되는 결과는 CS에 선택적인 알코올 추구 행동의 갱신과 테스트가 끝날 때 장비를 청소하는 것입니다. 이전과 마찬가지로 쥐가 가정용 케이지에서 주기적으로 에탄올에 간헐적으로 접근했을 때 에탄올 소비와 에탄올 선호도가 8-12회의 훈련 세션 후에 안정적인 수준으로 증가했습니다.

파블로프식 차별 훈련 기간 동안, CS 플러스에 대한 항구 진입 반응은 훈련 세션 전반에 걸쳐 증가했고, CS 마이너스에 대한 반응은 약간 증가했지만, 쥐는 멸종 훈련 동안 두 청각 신호를 구별하는 법을 배웠고, CS 플러스에 대한 항구 진입 응답은 점차 감소한 반면 CS 마이너스에 대한 응답은 낮게 유지되었습니다. 쥐를 파블로프 차별 훈련과 관련된 맥락으로 되돌려 놓았을 때, 멸종 훈련 후의 결과에 비해 CS 플러스 동안 포트 진입의 선택적 증가가 발생했습니다. 반면, CS 마이너스에 대한 응답에는 변화가 없었습니다.

이러한 결과는 신중한 신호에 의해 유발된 알코올 추구 행동이 환경적 맥락에 의해 강력하게 조절될 수 있음을 보여줍니다. 이 절차를 시도하는 동안 연구자는 향수, 향수 또는 기타 향이 나는 제품을 사용하지 않는 것이 중요합니다. 쥐는 매우 후각적인 생물이며 연구자와 관련된 후각 신호는 이 작업의 행동에 방해가 될 수 있습니다 이 방법을 따라 뇌 영역이 무엇에 관여하는지와 같은 추가 질문에 답하기 위해 두개내 마이크로 주입과 같은 다른 절차를 수행할 수 있습니다.

맥락은 파블로프식 조건화된 알코올 추구의 재생을 유도했습니다.