높은 재현성과 단순 명료 한 방법이 수행하는 생체 안구 탈핵

이 절차의 전반적인 목표는 매우 간단하고 재현 가능한 방식으로 마취된 마우스에서 눈을 성공적으로 제거하는 것입니다. 이것은 먼저 구부러진 집게로 안각을 부드럽게 눌러 안구를 이동시킴으로써 수행됩니다. 절차의 두 번째 단계는 시신경을 단단히 잡기 위해 겸자를 눈 뒤로 안내하는 것입니다.

세 번째 단계는 원을 그리며 움직이는 것입니다. 집게를 잡은 손으로 마우스 본체가 같은 방향으로 움직입니다. 마지막 단계는 시신경의 수축을 보장하기 위해 움직임의 속도를 점차적으로 증가시켜 안구를 분리하는 것입니다.

궁극적으로, 눈은 예를 들어 쥐의 뇌에서 다양한 감각 박탈 가소성 과정을 밝힘으로써 AFR 시각 경로를 종적으로 연구하는 데 사용할 수 있습니다. 봉합사와 둔기 박리를 자주 사용하는 기존 방법에 비해 이 기술의 가장 큰 장점은 우리의 제법 방법이 단순히 시신경의 수축을 기반으로 하여 출혈이 최소화되거나 전혀 발생하지 않고 배우기가 매우 쉽다는 것입니다. 식염수에 있는 케타민과 마이네의 혼합물을 복강내 주사하여 마우스를 마취시키는 것으로 시작합니다.

마우스의 반사 신경을 확인하여 진정 작용을 확인하십시오. 집게로 발가락을 꼬집고 반사 반응을 확인합니다. 반응이 없으면 면봉 어플리케이터와 70% 에탄올을 사용하여 눈꺼풀과 눈 주위를 청소하십시오.

눈 깜빡임 반응이 없으면 안구 핵 형성을 진행합니다. 안정적이고 평평하며 매끄럽고 건조한 표면에 마우스를 놓습니다. 구부러진 톱니 모양의 집게의 끝을 유리 구슬 살균기로 살균합니다.

사용하기에 가장 좋은 팁 크기는 0.5 x 0.4mm입니다. 다음으로, 안구가 소켓에서 이동하고 시신경에 도달할 수 있을 때까지 집게로 안각을 부드럽게 누릅니다. 그런 다음 겸자를 눈 뒤로 안내하고 시신경을 움켜쥔 상태에서 시신경을 단단히 누르고 유지합니다.천천히 저항이 가장 적은 방향으로 겸자를 원을 그리며 움직이기 시작합니다.

마우스를 수술대에 대고 마우스를 고정해야 합니다. 몸도 움직여야 합니다. 7-15번의 원형 운동 후에 시신경이 수축하고 안구가 분리될 때까지 점차적으로 속도를 높입니다.

회전이 너무 빠르거나 겸자를 너무 세게 당기면 신경이 조기에 끊어지고 애원이 뒤따릅니다. 마취를 역전시키는 것부터 시작하십시오. 마우스에게 식염수에 모든 염산염을 aamaz 복강내 주사합니다.

그런 다음 0.05를 근육주사로 투여합니다. 멜록시캄(meloxicam)과 진통제(진통제)와 같은 준비된 진통제 밀리리터는 24시간마다 투여해야 합니다. 이제 각막의 탈수를 방지하기 위해 나머지 눈에 안연

수술 전에 이것을 바르셨다면, 탁자 위에 번졌을 것입니다. 마우스를 수용 케이지로 옮기고 가열판이나 담요를 사용하여 마우스의 체온을 조절하고 동물이 운동 통제력을 회복하면 회복하는 동안 집 케이지로 다시 옮깁니다. 안구를 성공적으로 제거하려면 안와 조직 또는 안와에 출혈이 없거나 명백한 물리적 손상이 없는 것이 특징입니다.

적출된 눈은 부드러운 각막과 맥락막과 같은 온전한 구체의 특징을 가져야 합니다. 시신경은 망막 기저부에서 수축되어야 합니다. 동물의 남은 신경 길이는 깨끗하게 절단되어야 하며 주변 뇌 영역이 손상되지 않아야 합니다.

이러한 기술을 사용하여 실험을 수행한 후 대뇌 피질에서 시각적으로 유도된 신경 세포 활동을 밝히기 위해 C 2 혼성화에서 방사성에 의해 Z2 68 mRNA를 검출했습니다. 시각적으로 자극된 대조군과는 대조적으로, 양쪽 눈과 핵이 있는 마우스는 시각적 입력이 완전히 부족하기 때문에 좌우 시각 피질에서 기저 활동을 보였습니다. 이렇듯 시각피질과 비시각피질 사이의 경계가 밝혀졌다.

단안 적출법(monocular enucleation)은 두 개의 단안 구동 영역이 제거 염료와 반대쪽 시각 피질에서 저활동적인 것으로 나타났습니다. 이 영역은 중앙 양안 영역의 중간 및 측면에 위치합니다. 이 기술을 숙달하면 제대로 수행하면 1분 이내에 완료할 수 있습니다.

따라서 이비인후과 시력 경로에서 활동, 가소성 또는 기타 현상을 검사하는 효율적인 방법을 제공합니다.