2014년 10월 11일
알려진 모델 있지만, 기니 피그는 현재 실험 동물 과학 분야의 틈새 시장을 대표하는 제한된 데이터는 대부분의 절차의 실행에 사용할 수 있습니다. 여기에서 우리는 의식이나 마취 기니피그 중 생체 내 혈액 샘플링 기술의 비 터미널에 네 가지 방법을 제시한다.
이 비디오의 전반적인 목표는 기니피그를 대상으로 한 4가지 혈액 채취 기법의 방법론을 설명하는 것입니다. 표시된 절차는 샘플의 양이나 샘플 수가 혈액 채취 지침을 초과하지 않는 한 최종적이지 않습니다. 실험실 동물에서 우리는 측면 구정맥과 족근 정맥의 원인을 볼
수 있습니다.ous vein은 등쪽과 옆으로 족근 관절 위로 뻗어 있습니다. 각 뒷다리에서 최대 3개의 샘플을 채취해야 하며 샘플당 약 100-400마이크로리터의 혈액을 채취할 수 있습니다. 필요한 장비로는 전기 면도기, 따뜻한 물 목욕, 깨끗한 수건, 약간의 면봉, 70% 알코올과 같은 소독제, 멸균 바늘, 21개 협곡 이하의 수집 튜브가 있습니다.
그리고 혈당을 측정하고 AccuCheck 샘플러를 사용하는 것이 목적인 경우, 마취 없이 기니피그에서 세페우스 또는 족근 정맥에서 혈액 샘플링을 수행할 수 있습니다. 기니피그는 훈련된 조수에 의해 제지되며 정화조 기술을 사용해야 합니다. 족근 부위를 덮고 있는 모발은 전기 면도기로 면도하고 뒷다리는 미지근한 물로 씻고 따뜻하게 합니다.
다리를 청소하는 것 외에도 정맥이 확장되어 더 잘 보이게 됩니다. 뒷다리를 펴고 무릎 바로 위에 부드러운 아래쪽 압력을 가하여 정체를 달성하여 샘플링 직전에 정맥이 보일 수 있도록 합니다. 면도한 부분은 소독제로 닦습니다.
정맥은 바늘이나 란셋으로 구멍을 뚫고 혈액을 모세관 또는 미세관에 모을 수 있습니다. 혈액이 채취되면 정체가 완화되고 면봉 조각으로 부드러운 압력이 가해집니다 지혈을 촉진하기 위해 기니피그 귀의 등쪽 표면에 있는 표재성 동맥과 정맥을 여기에서 볼 수 있습니다. 이 혈관은 매우 적은 양만 필요한 경우 혈액 샘플링에 사용할 수 있습니다.
한 가지 예는 혈당 측정일 수 있습니다. 기니피그는 귀가 닿을 수 있는 상태로 부드럽게 제지됩니다. 펑크 부위는 샘플링 전에 격막으로 준비되어야 하지만 면도는 필요하지 않습니다.
정맥이 더 잘 보이도록 귀 바닥에 약간의 압력을 가할 수 있습니다. 바늘이나 란셋으로 정맥에 구멍을 뚫고 모세관 튜브에 혈액을 채취하거나 AccuCheck 검체 시스템을 사용하여 혈당 수치를 즉시 분석합니다. 혈액을 채취한 후에는 지혈을 용이하게 하기 위해 천자 부위에 부드러운 압력을 가해야 합니다.
이 사진은 경정맥 혈액 채취를 위한 기니피그의 위치와 경정맥의 원인을 보여줍니다. 이 절차는 마취된 동물에 대해서만 수행됩니다. 필요한 장비에는 마취 및 전기 면도기 면봉, 70 % 알코올 청진기와 같은 소독제, 중성 눈 연고, 1 밀리리터 주사기, 멸균 바늘, 보통 23 또는 25 개가 포함됩니다.
Gorge Heparin 및 EDTA는 응고를 방지하기 위해 샘플링 전에 주사기를 세척하는 데 사용할 수 있습니다. 기니피그를 위한 다양한 마취 프로토콜이 존재합니다. 이 경우, 동물은 목에 피하 주사되는 솔릿 타일 사인과 부티프를 혼합한 균형 잡힌 마취로 마취됩니다.
이 혼합물을 식염수로 희석하여 투여를 보다 정확하게 할 수 있습니다. 주사 후 기니피그는 우리로 돌아가 조용히 방치해야 합니다. 주변 효과는 일반적으로 약 10분 후에 나타나며 샘플링 전에 30-40분 동안 지속됩니다.
반사 신경을 확인하여 마취 깊이를 평가하고 눈을 보호하기 위해 중성 안연고를 투여합니다. 경정맥은 기니피그를 등에 대고 앞다리를 분기별로 접어 넣어 접근합니다. 해당 부위를 면도하고 무균 상태로 준비하고, 쇄골을 촉진하고, 1밀리리터 주사기에 장착된 23 협곡 바늘을 정중선 측면으로 약 1cm 측면으로, 쇄골 등쪽으로 두개골 쪽으로 삽입합니다.
주사기는 약간 위쪽과 내측 각도로 유지해야 합니다. 피부가 관통되자마자 경정맥이 상당히 표면적으로 위치하기 때문에 주사기에 약간의 음압이 가해지고 약 3-4mm의 삽입 깊이로 충분합니다. 샘플이 수집되면 앞다리의 장력을 풀고 펑크 쪽에 부드러운 압력을 가합니다.
그런 다음 동물을 회복 케이지로 되돌릴 수 있지만 지혈과 마취 후 회복을 확인하기 위해 모니터링해야 합니다. 기니피그가 마취에서 완전히 회복되면 우리로 돌아갈 수 있습니다. 기니피그의 해부학적 특징은 다른 설치류 모델과 약간 다르며, 종 특이적 차이를 수용하고 가능한 한 짧은 시간 내에 충분한 품질의 샘플을 얻기 위해서는 샘플링 기술의 조절이 필요합니다.
장단기적으로. 생체 내 연구에서는 반복적인 혈액 채취가 필요한 경우가 많습니다. 스트레스와 불편함을 줄이고 생존을 보장하며 표본 크기 및 접근성에 대한 요구 사항을 준수하기 위해 기술 선택을 신중하게 고려해야 합니다.
설명된 모든 방법은 철저한 테스트를 거쳤으며 반복적인 생체 내 혈액 샘플링에 성공적으로 적용되었습니다. 우리 연구 시설의 연구에서 기니피그는 실험 동물 과학의 틈새 시장을 대표하지만 기본 절차의 실행에 대한 데이터는 제한적입니다. 이 비디오 논문에서는 샘플의 양과 샘플의 수가 실험실 동물의 혈액 채취 지침을 초과하지 않는 한 의식이 있거나 마취된 동물의 비말단 생체 내 혈액 샘플링에 대한 네 가지 접근 방식을 제시했습니다.
이 절차는 반복적인 혈액 샘플링이 필요한 기니피그에게 사용하는 데 권장됩니다. 학습 프로토콜에서.
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본 영상에서는 의식 상태와 마취 상태의 기니피그를 대상으로 한 네 가지 비말단 혈액 채취 기술을 시연합니다. 이러한 방법들은 절차적 데이터가 제한적인 이 모델 생물을 연구하는 연구자들에게 매우 중요합니다.
기니피그의 비종말 혈액 샘플링은 동물의 복지를 유지하면서 반복적으로 고품질의 샘플을 수집할 수 있게 함으로써 종단적 in vivo 연구를 지원합니다. 이러한 역량은 연속적 샘플링을 통해 표적 결합 및 기전적 리스크 감소(de-risking)를 파악해야 하는 전임상 약동학 및 약역학 평가에서 매우 중요합니다. 본 기술들은 틈새 영역이지만 중개 연구 관점에서 유의미한 모델의 방법론적 공백을 메워, 초기 발견 워크플로우의 데이터 신뢰성을 높여줍니다.
이러한 샘플링 방법은 표적 경로 분석 및 리드 화합물 평가를 위한 신뢰할 수 있는 생물학적 매질을 제공함으로써 발견 생물학 워크플로우에 통합됩니다.