Name: 기니 돼지의 비 터미널 혈액 샘플링 기법 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-10-11T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 58 s
Description: 학습하세요 기니 돼지의 비 터미널 혈액 샘플링 기법으로 측면 정맥과 족정맥을 이용한 안전한 채혈 방법을 익히세요. 의식 상태와 마취 상태 모두 적용 가능하며 동물 복지를 고려한 반복 채혈에 필수적인 기술입니다.

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우리는 애니 B. 크리스텐센, 엘리자베스 V. 안데르센, 벨린다 B. Bringtoft 및 실험 의학, 프레데릭 스 버그 캠퍼스, 보건 의료 학부, 덴마크 코펜하겐 대학의학과에서 동물 관리인의 숙련 된 지원을 인정합니다. 야곱 Lønholdt는 절차를 촬영에서 자신의 뛰어난 기술 지원에 대해 감사한다. 이 연구는 생체 내 약리학과 코펜하겐의 대학에 대한 LIFEPHARM 센터에 의해 부분적으로 지원되었다.

표시된 절차는 식품, 농업 및 수산부에서 덴마크의 동물 실험 검사관에 의해 승인 프로토콜에 따라 수행 하였다. 측면 복재 또는 눈꺼풀 정맥에서 1 혈액 샘플링 <ol><li> 마취없이이 절차와 하나의 조사, 기니피그를 처리 하나, 그리고 하나의 샘플을 수집의 도움을 수행합니다. </li><li> 혈관이 표시 될 때까지 전기 면도기와 뒷다리의 눈꺼풀 영역을 면도. 영역 천자 사이트 방해 모피 않도록 충분히 크다 확인. </li><li> 미지근한 물을 욕조에 뒷다리를 놓고 조심스럽게 혈관이 더 팽창하고 분명하게 다리를 문질러. </li><li> 깨끗한 수건으로 다리를 닦은 거즈 또는 70 % 알코올로 적신 면봉으로 구멍 사이트를 소독. </li><li> 기니피그을 억제하고 즉시 무릎 관절 t 위에 부드럽게 가압하면서 하방으로 연장 뒷다리오 정체를 제공합니다. </li><li> 21 G 바늘이나 란셋을 사용하여 정맥에 구멍. 혈액 등을 수집합니다., 수집 또는 모세관 튜브를 사용하여. 조심스럽게 혈액 흐름을 돕기 위해 다리를 조작. </li><li> 샘플이 획득 된 후, 정체를 놓습니다. 출혈이 멈출 때까지 천자 사이트에 부드러운 압력을 거즈 나 탈지면의 조각을 적용합니다. </li><li> 지혈을 보장하기 위해 5 ~ 10 분 동안 케이지와 모니터에 동물을 반환합니다. </li></ol> 귀 정맥에서 2 혈액 샘플링 <ol><li> 한 동료의 도움으로 단독으로 또는 바람직 마취없이이 절차를 수행합니다. </li><li> 거즈 또는 70 % 알코올에 적신 면봉을 사용하여 귀에의 등 표면을 소독. </li><li> 정체를 제공하는 귀베이스에 가벼운 압력을 적용합니다. </li><li> 21 G 바늘이나 란셋을 사용하여 정맥에 구멍을하고, 혈액을 수집. </li><li> , 정체를 해제 샘플을 획득하고 나면, GE와 거즈 나 탈지면의 조각을 적용출혈까지 천자 사이트에 ntle 압력이 중지되었습니다. </li><li> 지혈을 보장하기 위해 5 ~ 10 분 동안 케이지와 모니터에 동물을 반환합니다. </li></ol> 경정맥에서 3 혈액 샘플링 <ol><li> 하나의 추가 조사의 도움을 사용하여이 절차를 수행; 하나 기니피그 처리 한 샘플을 수집. </li><li> 이 절차의 전체 기간 동안 적합한 마취제로 기니 피그를 마취시키다. tiletamine의 혼합물 (0.93 ㎎ / ㎏), zolazepam (0.93 ㎎ / ㎏), 자일 라진 (1.49 ㎎ / ㎏) 및 butorphanol (0.06 ㎎ / ㎏)을 사용할 수 있습니다. </li><li> 그 뒷면에있는 마취 기니 피그를 놓고 조심스럽게 꼬리 쪽 앞다리를 철회. </li><li> 면도하고 소독 (예., 70 % 알코올로) 목의 복부 부분. </li><li> 코트 응고 위험을 감소시키기 위해 헤파린 또는 EDTA 샘플링 이전에 하나와 주사기. </li><li> 바늘 하나 ML의 주사기 AP 통신에 장착 (23 G는 나) 쇄골을 만져와 25 G를 삽입에 근접하여 1cm는 어깨 관절의 수준 정중선 측방. 약간의 부정적인 압력을가하면서 약간 위쪽과 중간 각도에서 주사기를 유지합니다. 경정맥이 매우 피상적​​ 위치해로 기본 구조물을 훼손하지 마십시오. 정맥의 증가 정체를 제공하기 위해 약간 뒤로 기니 돼지의 목을 기울입니다. </li><li> 혈액 샘플이 얻어진다 앞다리를 해제하고, 바늘이 후퇴 전에 정체를 경감. 천자 사이트에 부드러운 압력을 적용 거즈 나 탈지면의 건조 조각을 사용합니다. </li><li> 복구 케이지에 동물을 반환하고 마취에서 지혈 및 복구를 보장하기 위해 모니터링 할 수 있습니다. </li></ol>

<ol><li>DeOgburn, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+increased+dietary+cholesterol+with+carbohydrate+restriction+on+hepatic+lipid+metabolism+in+Guinea+pigs%5BTitle%5D)+AND+%22Comp.Med%22%5BJournal%5D)">Effects of increased dietary cholesterol with carbohydrate restriction on hepatic lipid metabolism in Guinea pigs.</a> Comp.Med. 62 (2), 109-115 (2012).</li>
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</ol>

저자가 공개하는 게 없다. 모든 절차는 유럽 협약 ETS (123)의 이사회에 따른다 덴마크의 동물 실험 법에 의해 승인되었습니다.

마우스 및 래트에 비해, 기니피그 자연에 의해 공포되고 침착 접근 및 스트레스를 줄이기 위해 올바르게 처리되어야한다. 보기의 동물 복지의 관점에서,주의 행동을 자연스럽게 우선 순위; 그러나,이도. 수집 된 데이터, 예를 들면에 불안 - 관련 효과의 위험을 줄일 스테로이드 증가한 혈중 농도, 12 글루코스 것이다. 마찬가지로, 일일 처리는 정상적인 절차에 동물을 습관화하고 더욱 스트레스를 감소시키는 역할을 할 수있다. 특히 혈액 샘플링 기술 실용적 전문성 제 숙련 작업자를 관찰하고 능력이 달성 될 때까지 이후의 감독하에 기술을 수행함으로써 획득되어야한다. 선택한 기술은 이상적으로 모두 최소한으로 스트레스와 불편 함을 감소해야하지만, 또한 표본의 크기 및 액세스의 요구 사항에 생존뿐만​​ 아니라 준수를 보장 할 수 있습니다. 모든 제시 혈액 샘플링 방법에 대해서는 무균 기술해야한다감염의 위험을 최소화하고 오염되지 않은 샘플의 수집을 보장하기 위해 사용된다. <p class="jove_co...

기니 피그 인해 비타민 C, 인간의 태반과 함께 효소와 지질 단백질 프로파일뿐만 아니라 공유 유사성을 대사 비교 혈장 단백의 영양 공급을위한 요구 사항으로 인체에 생물학적 유사성의 숫자로 가치 및 검증 실험 동물 모델 태아 개발 1-3,7,8. 이 기니피그 등의 비 알코올 지방간 질환, 심혈관 질환과 비타민 C 결핍증의 추정 효과뿐만 아니라, 예를 들면의 효과로 다이어트 관련 질병의 효과 연구를위한 매력적이고 적합한 모델을 만든다. 산모식이 개입을 개발 자손. 반복 채혈은 종종 생체 내 연구에서 모두 장기 및 단기 필요합니다. 인해 종 특이 해부학 차이 샘플링 기술의 변조는 다른 설치류 모델에 비해 기니피그의 혈액 시료를 얻기 위해 필요 <sup&gt; 4,5. 따라서 샘플링 및 처리 모두에 대한 상이한 요건 및 옵션을 가지고, 이는 정맥과 동맥의 과정에서 변화를 포함하고, 또한 그 기니아 피그 테일이 없다. 복재 또는 눈꺼풀 정맥에서 샘플링, 동물에 최소한의 불편과 스트레스를 유발하고 3,9 마취가 필요하지 않습니다. 이 기술은 혈액 (100 ~ 400 μL), 예를 들면 소량의 샘플을 반복 할 수 있습니다., 혈장 생화학 적 마커를 결정합니다. 더 작은 샘플 크기 (50 내지 100 μL)에 충분한 경우,이 아주 쉽게 귀 정맥을 천공하여 얻을 수있다. 이 기술은 또한 의식적 동물에서 수행하고 10,11 혈당을 측정 할 때, 예를 들면 유용 할 수있다. 경정맥에서 샘플링은 혈액의 많은 양 (1 ~ 2 ㎖)의 수집을 위해 수 있지만 마취가 필요합니다. 여기에, 우리는 의식이나 마취 기니 돼지 중 하나에 대 한 4 개의 서로 다른 혈액 샘플링 기법을 제시한다. PROCedures 않은 모든 터미널 절차는 실험 동물 (6) 혈액 수집을위한 가이드 라인을 초과하지 않는 양의 샘플 및 샘플의 수를 제공합니다. 그것은 스트레스를 최소로 유지해야한다는 동물 복지뿐만 아니라 좋은 과학의 이해 관계에 있습니다. 따라서, 단지 잘 훈련 된 유능한 개인은 동물의 절차를 수행해야합니다.

<table><tbody><tr><td>전기 면도기</td><td>Wella (Contura), 덴마크</td><td>273207</td><td>대체 제품을 사용할 수 있습니다. 여러 공급업체</td></tr><tr><td>주사기&nbsp;</td><td>B.Braun-Omnifix-F, 독일</td><td>9161406V</td><td>대체 제품을 사용할 수 있습니다. 여러 공급 업체</td></tr><tr><td>Needles</td><td>BD Microlance, 스페인</td><td>301156</td><td>대체 제품을 사용할 수 있습니다. 여러 공급업체</td></tr><tr><td>Microvette 수집 튜브&nbsp;</td><td>사르스테트, D-51588N&uuml; mbrecht, Germany</td><td>201,288,100</td><td>대체 제품을 사용할 수 있습니다. 여러 공급업체</td></tr>: <tr><td>Accu-Check 분석기</td>, <td>Roche A/S Diagnostics, 덴마크</td><td></td><td>대체 제품을 사용할 수 있습니다. 여러 공급업체</td></tr>: <tr><td>Heparin 5000 IE/ml</td><td>LEO Pharma, 덴마크</td><td></td><td>대체 제품을 사용할 수 있습니다. 여러 공급 업체</td></tr><tr><td>Anesthesia</td><td>Zoletil 50, Chemvet, 덴마크</td><td></td><td>대체 제품을 사용할 수 있습니다. 여러 공급 업체</td></tr><tr><td>Anesthesia</td><td>Narcoxyl vet 20 mg / ml, Intervet, 덴마크</td><td></td><td>대체 제품을 사용할 수 있습니다. 여러 공급 업체</td></tr><tr><td>Anesthesia</td><td>Torbugesic vet 10 mg / ml, Scanvet, 덴마크</td><td></td><td>대체 제품을 사용할 수 있습니다. 여러 공급업체</td></tr><tr><td>: 중성 눈 연고:</td><td></td><td></td><td>대체 제품을 사용할 수 있습니다. 여러 공급업체</td></tr><tr><td>의 거즈 또는 면봉&nbsp;</td><td></td><td></td><td>대체 제품을 사용할 수 있습니다. 여러 공급업체</td></tr><tr><td>소독제(알코올</td><td></td><td></td> 70%)<td>대체 제품을 사용할 수 있습니다. 여러 공급업체</td></tr></tbody></table>

기니 돼지의 비 터미널 혈액 샘플링 기법

Non-Terminal Blood Sampling Techniques in Guinea Pigs

기니 돼지는 인간에게 여러 가지 생물학적 유사성을 가지고 실험 동물 모델 1-3을 검증하고 있습니다. 특정 방법론 대응 부족에 그러나, 기니아 피그의 사용은 현재 연구와 설명 데이터의 비교적 좁은 영역을 나타냅니다. 기니피그의 해부학 적 특징은 마우스 및 래트에 비해. 따라서 샘플링 기법을 조정함으로써 예컨대, 종 특이 차이를 수용 할 수 있도록, 다른 설치류 모델과 다소 상이 충분히 고품질의 샘플들을 획득하기 위해 필요하다. 생체 내 연구에서 모두 장기 및 단기 자주 샘플링 혈액을 반복하여 필요한만큼 기술의 선택은 물론 동물에서 응력 및 불편 함을 감소시키기 위해 고려해야 할뿐만 아니라 시료의 크기 및 접근의 요구 생존뿐만 아니라 준수하도록. 정맥혈 샘플 기니피그 등의 다수 위치에서 얻을 수있다., 복재 및 경정맥을정맥, 장점과 단점을 모두 포함하는 각 기술 4,5. 여기에, 우리는 의식이나 마취 기니 돼지 중 하나에 대 한 4 개의 서로 다른 혈액 샘플링 기법을 제시한다. 절차는 모든 비 터미널 절차는 실험 동물 (6) 혈액 수집을위한 가이드 라인을 초과하지 않는 양의 샘플 및 샘플의 수를 제공합니다. 모든 설명 방법은 철저한 테스트를 거쳤으며 우리의 연구 시설에서 연구에서 생체 내 혈액 샘플링 반복 적용되고있다.

의식이나 마취 기니피그 하나로 비 종단 생체 채혈 기법 개의 상이한 접근법이 제시되었다.도 1 기니피그 가능한 천자 사이트에서 횡 복재 및 족부 혈관의 과정을 도시한다. 기니 돼지 귀의 등쪽 표면에 보이는 귀 정맥은 단지 매우 소량이 필요할 때 이러한 정맥 혈액 샘플링을 위해 사용될 수있는도 2에 도시되어있다. 경정맥 혈액 샘플링을위한 기니피그의 위치는 그림 3에서 쇼이다. 경정맥의 과정은 권장 천자 사이트에서 최상위를 가리키는 화살표와 화살표로 설명된다. <img alt="장갑을 낀 설치류 팔다리; 피부 표시에 집중하십시오." fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51982/51982fig1highres.jpg" width="500" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="그림 1"><b...

알려진 모델 있지만, 기니 피그는 현재 실험 동물 과학 분야의 틈새 시장을 대표하는 제한된 데이터는 대부분의 절차의 실행에 사용할 수 있습니다. 여기에서 우리는 의식이나 마취 기니피그 중 생체 내 혈액 샘플링 기술의 비 터미널에 네 가지 방법을 제시한다.

Guinea pigs possess several biological similarities to humans and are validated experimental animal models1-3. However, the use of guinea pigs currently ...

이 비디오의 전반적인 목표는 기니피그를 대상으로 한 4가지 혈액 채취 기법의 방법론을 설명하는 것입니다. 표시된 절차는 샘플의 양이나 샘플 수가 혈액 채취 지침을 초과하지 않는 한 최종적이지 않습니다. 실험실 동물에서 우리는 측면 구정맥과 족근 정맥의 원인을 볼 수 있습니다.ous vein은 등쪽과 옆으로 족근 관절 위로 뻗어 있습니다. 각 뒷다리에서 최대 3개의 샘플을 채취해야 하며 샘플당 약 100-400마이크로리터의 혈액을 채취할 수 있습니다. 필요한 장비로는 전기 면도기, 따뜻한 물 목욕, 깨끗한 수건, 약간의 면봉, 70% 알코올과 같은 소독제, 멸균 바늘, 21개 협곡 이하의 수집 튜브가 있습니다.그리고 혈당을 측정하고 AccuCheck 샘플러를 사용하는 것이 목적인 경우, 마취 없이 기니피그에서 세페우스 또는 족근 정맥에서 혈액 샘플링을 수행할 수 있습니다. 기니피그는 훈련된 조수에 의해 제지되며 정화조 기술을 사용해야 합니다. 족근 부위를 덮고 있는 모발은 전기 면도기로 면도하고 뒷다리는 미지근한 물로 씻고 따뜻하게 합니다.다리를 청소하는 것 외에도 정맥이 확장되어 더 잘 보이게 됩니다. 뒷다리를 펴고 무릎 바로 위에 부드러운 아래쪽 압력을 가하여 정체를 달성하여 샘플링 직전에 정맥이 보일 수 있도록 합니다. 면도한 부분은 소독제로 닦습니다.정맥은 바늘이나 란셋으로 구멍을 뚫고 혈액을 모세관 또는 미세관에 모을 수 있습니다. 혈액이 채취되면 정체가 완화되고 면봉 조각으로 부드러운 압력이 가해집니다 지혈을 촉진하기 위해 기니피그 귀의 등쪽 표면에 있는 표재성 동맥과 정맥을 여기에서 볼 수 있습니다. 이 혈관은 매우 적은 양만 필요한 경우 혈액 샘플링에 사용할 수 있습니다.한 가지 예는 혈당 측정일 수 있습니다. 기니피그는 귀가 닿을 수 있는 상태로 부드럽게 제지됩니다. 펑크 부위는 샘플링 전에 격막으로 준비되어야 하지만 면도는 필요하지 않습니다.정맥이 더 잘 보이도록 귀 바닥에 약간의 압력을 가할 수 있습니다. 바늘이나 란셋으로 정맥에 구멍을 뚫고 모세관 튜브에 혈액을 채취하거나 AccuCheck 검체 시스템을 사용하여 혈당 수치를 즉시 분석합니다. 혈액을 채취한 후에는 지혈을 용이하게 하기 위해 천자 부위에 부드러운 압력을 가해야 합니다.이 사진은 경정맥 혈액 채취를 위한 기니피그의 위치와 경정맥의 원인을 보여줍니다. 이 절차는 마취된 동물에 대해서만 수행됩니다. 필요한 장비에는 마취 및 전기 면

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Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

혈액 연구 다수에 필요한 그리는, 화합물의 pharmacokinetics 프로필을 공부 예를 들어. saphenous 정맥 또는 심장 관통하여 혈액 그릴 : 여기, 우리는 두 가지 기술을 사용하여 쥐에서 혈액을 그리는 방법을 보여줍니다.

Saphenous 베인 통해 심장 찔린로 쥐에서 혈액을 그리기

혈액 샘플은 생체 내 생리학적 상태나 질병의 바이오마커를 평가하는 데 유용합니다. 여기에서는 쥐의 측면 꼬리 정맥에서 혈액을 샘플링하는 방법론을 설명합니다. 이 방법은 최소한의 통증과 침습성으로 빠른 샘플을 제공합니다.

쥐의 측면 꼬리 정맥에서 혈액을 샘플링

여기, 선물이 쥐 하 정 맥에서 혈액 샘플을 수집 하는 프로토콜.

쥐에서 혈액 샘플 컬렉션의 대체 방법으로 빵 꾸 하 정 맥

기니 돼지 PBMCs에 대 한 인터페론-감마 ELISpot 분석 결과 개발 전염병 연구이 관련성이 높은 모델 T 세포 응답의 특성을 수 있습니다. 우리는 DNA 백신의 피부 전달과와 관련 된 T 세포 응답을 측정 하는 분석 결과 적용 했습니다.

예방 접종 후 기니 돼지 모델에서 측정 T 세포 응답에 최적화 된 인터페론-감마 ELISpot 분석 결과

이 문서는 기니 피그 내분비 낭을 말살하고 실험적인 내분비 성 하이드로립을 유도하기 위해 미세 한 선택으로 내분비 증 덕트를 손상시키는 외의 접근 법을 보여줍니다.

기니 피그에서 내인성 수압을 유도하는 개정 된 외과 접근 법

여기에서 우리는 쥐 모델에 대해 빠르고 쉽고 신뢰할 수 있는 채혈 대안을 제공하는 프로토콜을 제시합니다. 우리는 문맥에 따라 세 가지 다른 혈액 샘플링 방법을 설명합니다: 마취 또는 의식이 있는 동물에 대한 꼬리 정맥 천자, 마취 하에 등쪽 음경 정맥 천자.

쥐 모델에서 혈액 샘플링을 위한 수정된 꼬리 정맥 및 음경 정맥 천자

이 동영상은 문서 해안 해양 물 샘플을 수집 및 바이오 매스 농도, 핵산 정화, 세포 풍부, 영양 및 추적 가스 분석 등 다양한 어플 리케이션을위한 스트림을 처리하는 방법을.

해수 샘플링 및 수집

이 프로토콜은 염료가 조정 해상도 등 기니 돼지 장용 신경계의 plexuses으로 손상 신경망에서 전기 활동의 광학 녹음을 활성화하는 방법 전압에 민감한 개념 단일 세포에서 다중 ganglionic 회로 등을 꼽을 수 있습니다.

전압에 민감한 염료를 사용하여 기니 돼지 장용 네트워크에서 전기 활동의 광학 녹음

이미징 CA의 기술 2 + 인간 정자의 시그널링

BK 채널 이온 전류는 패치 클램프 기법을 사용하여 기록됩니다. BK 채널로...

이온 채널 유학을위한 패치 클램프 및 재관류 기법으로 표현 Xenopus oocytes

학습하세요 기니 돼지의 비 터미널 혈액 샘플링 기법으로 측면 정맥과 족정맥을 이용한 안전한 채혈 방법을 익히세요. 의식 상태와 마취 상태 모두 적용 가능하며 동물 복지를 고려한 반복 채혈에 필수적인 기술입니다.

기니 돼지의 비 터미널 혈액 샘플링 기법

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