Production and Use of Lentivirus to Selectively Transduce Primary Oligodendrocyte Precursor Cells for <em>In Vitro</em> Myelination Assays

Haley M. Peckham; Anita H. Ferner; Lauren Giuffrida; Simon S. Murray; Junhua Xiao

doi:10.3791/52179

생산 및 선택적으로 형질 도입 기본 희소 돌기 아교 세포 전구체 세포에 렌티 바이러스의 사용을위한

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Developmental Biology

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Production and Use of Lentivirus to Selectively Transduce Primary Oligodendrocyte Precursor Cells for In Vitro Myelination Assays

생산 및 선택적으로 형질 도입 기본 희소 돌기 아교 세포 전구체 세포에 렌티 바이러스의 사용을위한 체외 수초 분석

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10:00 min

January 12, 2015

DOI: 10.3791/52179-v

Haley M. Peckham¹, Anita H. Ferner¹, Lauren Giuffrida¹, Simon S. Murray^1,2, Junhua Xiao^1,2

¹Department of Anatomy and Neuroscience,The University of Melbourne, ²The Florey Institute of Neuroscience and Mental Health Research,The University of Melbourne

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

여기에서는 중추신경계 수초화의 시험관 모델을 통해 희소돌기아교세포에서 희소돌기아교세포의 역할을 구체적으로 조사하기 위해 희소돌기아교세포 전구세포를 바이러스로 조작하여 관심 단백질을 과발현할 수 있는 유연하고 전략적인 기반을 제공하는 프로토콜을 제시합니다.

이 절차의 전반적인 목표는 희소돌기아교세포 전구체 세포 또는 OPC를 바이러스로 조작하여 관심 단백질을 과도하게 발현하는 것입니다. CNS Myelination Nation의 체외 연구의 경우, 이는 먼저 렌티바이러스 벡터를 클로닝하여 수행됩니다. 다음 단계는 렌티바이러스를 생성하고 실험을 위한 최적의 바이러스 농도를 결정하는 것입니다.

그 후, 절개 및 배양된 OPC를 렌티바이러스로 형질도입합니다. 마지막 단계는 DRG에서 절개된 배양된 뉴런에 형질도입된 OPC를 시딩하는 것입니다. 궁극적으로, 수초화 공동 배양은 웨스턴 블롯 분석을 통해 수초화 단백질 발현을 평가하고 면역 염색에 의한 수초화된 축삭 분절의 형성을 시각화합니다.

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