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지역 사회 기반의 설정에서 획득 샘플의 신속한 분별 및 전체 혈액 성분의 분리
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JoVE Journal Medicine
Rapid Fractionation and Isolation of Whole Blood Components in Samples Obtained from a Community-based Setting

지역 사회 기반의 설정에서 획득 샘플의 신속한 분별 및 전체 혈액 성분의 분리

Full Text
16,922 Views
11:31 min
November 30, 2015

DOI: 10.3791/52227-v

Amy Weckle1,2, Allison E. Aiello3, Monica Uddin1,4, Sandro Galea5, Rebecca M. Coulborn6, Richelo Soliven7, Helen Meier6, Derek E. Wildman1,2

1Carl R. Woese Institute for Genomic Biology,University of Illinois at Urbana-Champaign, 2Department of Molecular and Integrative Physiology,University of Illinois at Urbana-Champaign, 3Department of Epidemiology, Gillings School of Global Public Health,University of North Carolina, 4Department of Psychology,University of Illinois at Urbana-Champaign, 5Department of Epidemiology, Mailman School of Public Health,Columbia University, 6Department of Epidemiology,University of Michigan School of Public Health, 7Center for Molecular Medicine and Genetics,Wayne State University School of Medicine

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This article outlines a streamlined methodology for processing whole blood samples to obtain various components for analysis. The protocol enables rapid, high-throughput processing in a non-clinical setting.

Key Study Components

Area of Science

  • Blood processing
  • Cell isolation
  • Biological sample analysis

Background

  • Whole blood contains various components that can be isolated for research.
  • Efficient processing is crucial for high-quality sample analysis.
  • Traditional methods may be time-consuming and less effective.
  • This study presents an optimized protocol for better efficiency.

Purpose of Study

  • To develop a rapid protocol for processing whole blood samples.
  • To enable simultaneous isolation of multiple blood components.
  • To improve the quality of isolated fractions for further analysis.

Methods Used

  • Centrifugation of serum vacutainers.
  • Aliquot removal for DNA isolation.
  • RNA stabilization treatment of blood samples.
  • Washing of the mononuclear layer with PBS.

Main Results

  • Efficient isolation of DNA, RNA, and plasma from whole blood.
  • High-quality fractions of peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) obtained.
  • Streamlined processing reduces time and increases throughput.
  • Protocol applicable in non-clinical settings.

Conclusions

  • The optimized protocol enhances the efficiency of blood component isolation.
  • It supports high-throughput analysis in research environments.
  • Future applications may include various biological studies.

Frequently Asked Questions

What components can be isolated from whole blood?
The protocol allows for the isolation of DNA, RNA, plasma, and peripheral blood mononuclear cells (PBMCs).
Is this protocol suitable for clinical settings?
The protocol is designed for non-clinical settings but may be adapted for clinical use.
How does this method improve processing time?
By overlapping processing steps and optimizing centrifugation, the method reduces overall time required for isolation.
What is the significance of using RNA stabilization agents?
RNA stabilization agents help preserve the integrity of RNA during processing, ensuring high-quality samples for analysis.
Can this protocol be used for different types of blood samples?
Yes, the protocol can be adapted for various blood sample types, depending on the research needs.

추가 분석을 위한 다양한 성분을 얻기 위해 전혈을 처리하는 방법론을 간략하게 설명합니다. 당사는 비임상 환경에서 전혈 샘플의 빠르고 높은 처리량의 동시 처리를 가능하게 하는 간소화된 프로토콜을 최적화했습니다.

이 절차의 전반적인 목표는 빠른 눈 처리량, 전혈 샘플의 동시 처리를 가능하게 하는 간소화된 프로토콜을 제공하는 것입니다. 비임상 환경에서 액포 처리는 D-N-A-R-N-A 말초 혈액 단핵 세포 또는 pbmc 혈청의 고품질 분획과 혈장 및 적혈구의 잔류 분획을 효율적으로 분리할 수 있도록 중첩 방식으로 수행됩니다. 공정은 혈청 액포의 원심분리, 피알 튜브의 DNA 분리 원심분리를 위해 액포테이너를 포함하는 하나의 피알에서 부분 표본을 제거하는 것으로 시작됩니다.

그런 다음 DNA 분리 후 DNA 분리가 완료되고 K2 EDTA vacutainer에서 RNA 유래 RNA 분리가 발생할 수 있습니다. 각 액포의 혈액은 해당 필터를 통과하고 PBS로 세척한 다음 액포자가 포함된 피알로 돌아가는 RNA 안정화제로 처리합니다. 잔류 플라즈마를 제거하고 단핵층을 PBS로 세척합니다.

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