Name: 보상 성 폐 성장의 마우스 전폐 절제술 모델 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-12-17T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 22 s
Description: 배우세요 마우스 전폐 절제술을 통해 보상 성 폐 성장을 유도하는 방법을. 좌측 흉부 절개와 폐 동맥 결찰을 포함한 수술 기법을 익히고, 폐 재생 및 폐포 성장 메커니즘 연구에 활용하세요.

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저자는 도움을 준 신시내티 아동 병원 수의학 서비스와 부서에 감사드립니다. 이 원고는 미국 국립보건원(National Institutes of Health) K12 HD028827의 지원을 받았습니다. 안나 펄(Anna Perl) 박사는 저자들에게 이 수술 절차를 가르쳤다.

참고 : 동물 use 문 : 본 연구의 모든 절차를 승인 신시내티 아동 병원의 기관 동물 사용 및 관리위원회 (IACUC)의 가이드 라인을 다음과 같이 실시 하였다. 여덟 주령의 C57BL / 6J 수컷 마우스는 잭슨 연구소 (주 바 하버, ME)로부터 획득하고 사용하기 전에 일주일 동안 순응시켰다. 수술까지는 동물은 무균 장벽 시설에 보관하고 멸균 차우 여과 물 광고 libdium를 제공했다. 각 마우스 케이지는 전용 공기와 물을 공급하고, 객실은 12 시간 밤낮주기를 유지 하였다. 수술 회복 후, 마우스, 여과 탑과에서 사육 멸균 우 광고 섭취하는을 제공하고, 물병에서 물을 여과 제공되었다. 악기 1. 준비 <ol><li> 종이 클립과 핀을 사용하여 6 피부 견인기를 확인합니다. 트위스트 종이 핀의 정강이에 종이 클립을 곧게, L일단에 5cm 직선 강선 처마와 와이어의 단부에 단일 0.5 cm &quot;U&quot;자 고리를 만든다. </li><li> 플라스틱 랩을 사용하여 약 15 X 15cm 정사각형 외과 드레이프를 확인합니다. 마우스 당 하나의 드레싱을 준비합니다. 각 랩 사이에 종이 타워를 넣습니다. </li><li> 12 × 12 인치 코르크 타일, 거즈, 그리고 면봉 면봉의 스택과 함께 모든 수술 도구를 소독. </li></ol> 2. 마우스 준비 <ol><li> 2 % 이소 플루 란 마취를 유도한다. 동물의 무게를. </li><li> 전용 수술 준비 영역에서 전기 면도기 왼쪽 흉부와 목 영역을 면도. </li><li> 마우스의 눈에 인공 눈물 연고의 드롭을 적용합니다. </li><li> 클로르헥시딘과 이소 프로필 알코올 목과 왼쪽 가슴의 오염을 제거. 두 번 더 반복한다. </li></ol> 3. 마우스 오로 - 기관 내 삽관 및 기계 환기 <ol><li> 비 멸균 수술 기술자 장소를 예열 외과 영역에서 마우스 부정사가있다.</li><li> 발 핀치에 대한 응답의 부족을 문서화하여 마취의 깊이를 확인합니다. </li><li> 수술 복장, 마스크, 모자를 손을 씻고 걸치고 후, 멸균 수술 장갑을 돈. </li><li> 입체 재단 및 무균 기술을 사용하면, 후두를 노출 앞쪽 중간 목을 통해 1cm 세로 절개를합니다. 살짝 곡선, 톱니 모양의 10cm 집게와 스트랩 근육을 철회하고 직선 가위의 끝 스트랩 근육을 확산하여 후두와 기관을 노출. </li><li> 경구 중반 기관 (그림 1A)에 22 G 뭉툭한 팁 angiocatheter를 삽입하고 시각적으로 배치 (그림 1B)를 확인합니다. 마취를 유지하고 설치류 인공 호흡기를 통해 (스트로크 당 225 μL, 분 당 200 스톡스를) 1-3% 이소 플루 란 (isoflurane)을 이용 환기. 15cm의 H 2 O의 압력 한계를 채용 </li></ol> 4. 마우스 전폐 절제술 <ol><li> 마우스의 뒷면을 향 우측 측와위 위치에 마우스를 놓는다연산자 (왼쪽 위). 멸균 드레이프로 자체 밀봉 플라스틱 랩을 사용합니다. 드레이프를 통해 절단, 4 번째와 5 번째 늑간에서 갈비뼈에 2cm 길이 컷 평행하게 끝이 무딘 곡선 가위를 사용합니다. 무딘 끝 곡선 가위를 삽입하고 기본 갈비와 늑간 근육에서 멀리 피부를 해부하다. </li><li> 광장을 1.5 × 1.5 cm 수술 창 (그림 2A)를 노출 네 견인기로 피부를 후퇴. 코르크 보드에 견인기를 고정합니다. </li><li> 곡선 집게를 사용 갈비뼈 아래로 해부하고, 흉강을 입력 곡선 집게 중 하나 팁을 사용합니다. </li><li> 뭉툭한 팁 마이크로 가위를 사용하여, 흉강을 입력 하부 날개를 사용합니다. 반대 방향으로 갈비와 반복 사이에 0.5 cm의 절개를합니다. </li><li> 나머지 두 견인기를 사용하여 전후방 축과 코르크 보드 (그림 2B)로 견인기 보안에 흉부를 엽니 다. </li> &lt;왼쪽 폐 동맥과 기관지가 (그림 3A, B)에 노출 될 때까지 왼쪽 손에 곡선 무딘 팁 집게를 사용하여 리&gt;, 개흉술을 통해 옆으로 하방 왼쪽 폐의 상부를 왼쪽 폐를 잡고 대체. </li><li> 손바닥에 도포 손목 (그림 3C)에서 멀리 가리키는 곡선 팁의 시체와 함께 오른쪽에있는로드 티타늄 혈관 microclip 주걱을 잡고, 왼쪽의 후방 측면의 곡률을 따라 흉부에 도포 팁을 밀어 폐는 왼쪽 기관지 및 폐 동맥 (그림 3D)를 클립. </li><li> 도포를 제거하지만 수축 왼쪽 폐를 유지합니다. 오른손으로 무딘 팁 마이크로 가위를 잡고 클립에 기관지 및 폐 동맥 원위부 절단과 왼쪽 폐 (그림 3E)를 제거합니다. </li><li> 리브 견인기를 제거합니다. </li><li> incisi 열등 피부의 1cm를 끼지 곡선 무딘 집게를 사용하여에하지만 진동판의 수준 이상과 피부를 통해 왼쪽 흉강 (그림 4A, B)에 24 G의 angiocatheter를 삽입합니다. </li><li> 흉강을 닫습니다 제 4 회 약 2 단속 봉합 5 일 리브를 배치 5-0 prolene의 봉합을 사용합니다. </li><li> 피부 견인기를 제거합니다. 절개의 길이를 따라 피부를 피부에 근사하고 폐쇄 붙 집게 두 세트를 사용한다. </li><li> angiocatheter에 3 ㎖ 루어 잠금 주사기를 연결하고 부드러운 흡입을 적용하고 angiocatheter을 인출하여 잔류 공기를 제거합니다. </li><li> 목 절개 전과 집게 두 세트를 사용하는 폐쇄 붙인다. </li></ol> 5. 마우스 위장 전폐 절제술 <ol><li> &quot;마우스 전폐 절제술&quot;프로토콜에서 언급 한 바와 같이 왼쪽 폐를 노출. 왼쪽 흉강에 공기를 허용하는 곡선 무딘 집게로 갈비뼈를 들어 올립니다 (그림 5A, B). </li><li> 왼쪽 상점에 24 G의 angiocatheter를 배치왼쪽 폐를 손상하지 않도록주의 상기와 흉부 캐비티. </li><li> 5-0 prolene의 봉합을 사용하고 폐 (그림 5C)를 구멍을 뚫거나하지 않도록주의, 제 3 회 / 4 회에 봉합사의 두 길이와 5 일 / 6 일 리브의 사이 공간 (그림 5D)를 배치합니다. 왼쪽 폐 탈출증의 위험을 줄이기 위해 묶는 전에 봉합사의 양쪽 길이를 놓습니다. 두 중단 바늘 (그림 5E)을 만들 수있는 봉합사를 묶어. </li><li> 흉부 절개를 통해 피부 접착제, angiocatheter에 잔류 공기를 제거하고, 상기와 목 절개를 붙입니다. </li></ol> 6. 소생술, 진통, 및 복구 <ol><li> 이소 플루 란의 전원을 끄고, 부 프레 노르 핀의 0.1 ㎎ / ㎏을 관리하고 생리 식염수를 피하 0.5 ml의. </li><li> 자발 호흡이 다시 시작하면, 기관 튜브를 제거합니다. </li><li> 다시 외래 때까지 마우스를 관찰합니다. 일반적으로 resum 워킹기관 내 튜브의 제거 후 몇 분 말이지. </li><li> / N을 O를 복구하기 위해 27 ° C 배양기 (가습, 25 % 산소)에 마우스를 놓습니다. 참고 : 우리는 수술 후 첫 24 시간 동안 케이지 바닥에 물을 적신 차우의 몇 가지 알약을 배치합니다. </li><li> 수술 후 하루에 두 번 3 일 동안 복강 주사로 부 프레 노르 핀의 0.1 ㎎ / ㎏을 관리합니다. 동물을 처리 할 때 수술 부위를 열 않도록주의하십시오. </li></ol> 7. 마우스 모니터링 <ol><li> 수술 후 1, 3, 5 및 7 일째에 마우스 체중. </li></ol>

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</ol>

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우리는 지금까지보고 된 마우스 PNX와 마우스 가짜 PNX 절차의 가장 상세한 설명을 제공하고 있습니다. 우리는 절차를 학습 연구자들은 일반적으로 발생하는 일반적인 함정의 여러 가지의 독자가 인식 한 우리는이 함정을 완화하기 위해 실험실에서 개발 한 몇 가지 기술을 설명했다. 이 모델을 이용하여 다른 실험실은 다른 기술 수​​정을 개발하거나 다른 악기를 사용할 수 있습니다. 기술의 차이를 평가할 때, 개별 연구자들은 이러한 차이는 상당히 실험 결과에 영향을 미칠 여부를 결정해야합니다. 보상 폐 성장 PNX 마우스 모델 폐 수리 및 재생의 다른 동물 모델보다 많은 장점을 갖는다. 형질 전환 마우스를 사용할 수 있도록 계보 추적의 많은 수의 과발현 유전자, 대부분의 실험실 (16)에 대한 달성 목표 유전자 삭제 실험의 일반적인. 둘째, MOR폐포 재성장을위한 정량 phometric 기법 17 잘 설명된다. 셋째,이 모델을 채택하는 비용은 중...

폐의 주요 기능은 유기체와 대기 사이의 산소와 이산화탄소의 교환을 제공하는 것이다. 인간에서, 선천성 및 획득 조건 호스트 손상된 폐 기능의 감소 결과 폐 표면적 이어질. 즉, 폐 - 같은 흡입 코르티코 스테로이드, 기관지 확장제, 산소 보충, 만성 기계 호흡으로 치료의 호스트가 손상된 폐 기능 1-3의 결과를 완화하기 위해 사용되지만, 이러한 조건을위한 이상적인 치료는 기능 폐 조직의 재성장을 촉진 것 재생. 포유류 조직 재생이 잘 설명되어 있습니다. 아프리카 가시 마우스 반흔 4없이 피부의 넓은 지역을 다시 생성 할 수 있습니다. 인간의 말단 지골 부상 또는 절단 5-7 다음 다시 생성 할 수 있습니다. 다음 전폐 절제술 (PNX), 보상 폐 성장 할, 9 쥐, 마우스 (8) 발생GS (10), 및 11 인간. 정의에 따라 보상 폐 성장은 관련 미세 (12)의 확장과이 확대 airspaces의 기존 airspaces의뿐만 아니라 확장,하지만 다시 격막을 포함한다. 유전자 발현 분석은이 모델은 폐 (13)의 개발 시그널링 많은 이벤트를 되풀이 것을 보여 주었다. 네 주 마우스 PNX 후, 폐포 표면적은 가짜 운영 동물 (14)의 그것과 동일하다. 이 논문에서 우리는 마우스 PNX와 가짜 PNX 절차를 설명합니다.

<table><tbody><tr><td>6 인치 혈관 클립 어플리케이터</td><td>Teleflex Medical (WECK)</td> <td>137062</td><td></td></tr><tr><td>Horizon Small 티타늄 레드 클립</td><td>Teleflex Medical (WECK)</td> <td>1201</td><td></td></tr><tr><td>좁은 패턴 12cm 곡선 집게</td><td>Fine Science Tools</td><td>11003-12</td><td></td></tr><tr><td>곡선 톱니 모양 10cm Graefe 집게</td><td>Fine Science Tools</td><td>11052-10</td><td></td></tr><tr><td>Castroviejo 바늘 홀더</td><td>Fine Science Tools</td><td>12565-14</td><td></td></tr><tr><td>스트레이트 9cm 사시 가위 (무딘 끝)</td><td>Fine Science Tools</td><td>14075-09</td><td></td></tr><tr><td>스트레이트 8.5cm 경화 파인</td><td>사이언스 도구</td><td>14090-09</td><td></td></tr><tr><td>스트레이트 무딘 팁 Cohan-Vannas 스프링 가위</td><td>Fine Science Tools</td><td>15000-12</td><td></td></tr><tr><td>피부 접착제</td><td>Gluture</td><td>32046</td><td></td></tr><tr><td>22G Angiocatheter</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>24G Angiocatheter</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>3ml Luer lock 주사기</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>4 개의 짧은 견인</td><td></td><td></td><td></td></tr> 장치 <tr><td>2 개의 긴 견인</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>장치 5-0 Prolene on curved 절단 바늘</td><td>Ethicon</td><td>8698G</td><td></td></tr><tr><td>0.5 ml 주사기 27G 바늘</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>일반 식염수</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>부프레노르핀</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>프레스 앤 씰 랩</td><td>Glad Products Company</td><td></td><td></td></tr><tr><td>12 x 12 인치 코르크 보드 스택</td><td>Office Depot</td><td></td><td></td></tr><tr><td>70% 에탄올</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>베타딘</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>마우스 인공호흡기</td><td>Hugo Sachs Elektronnik</td><td>Minivent Type 845</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane 기화기</td><td>OHMEDA</td><td>Excel 210 SE</td><td></td></tr><tr><td>인공 눈물 연고</td><td>Puralube NDC</td><td>: 17033-211-38</td><td></td></tr></tbody></table>

보상 성 폐 성장의 마우스 전폐 절제술 모델

Mouse Pneumonectomy Model of Compensatory Lung Growth

인간의 경우, 손상된 폐의 수리 및 개조 중단은 궁극적으로 장애나 사망으로 이어질 수 있는 많은 급성 및 만성 폐 질환에 기여합니다. 폐 복구 및 재생에 대한 부상 기반 동물 모델은 부상 특이적 반응에 의해 제한되므로 손상 반응 및 부상 해결과 관련된 변화를 폐 복구 및 폐 재생과 관련된 변화와 구별하기 어렵습니다. 그러나 이러한 복구 및 재생 신호 경로를 식별하기 위해 동물 모델을 사용하는 것은 폐 손상 후 폐 기능을 개선하기 위한 새로운 치료법 개발에 매우 중요합니다. 마우스 폐절제술 모델은 폐포 재격격의 메커니즘을 보다 명확하게 정의하기 위해 보상적 폐 성장을 활용하여 이러한 복구 및 재생 신호를 분리합니다. 여기에서는 마우스 폐절제술과 가짜 폐절제술을 수행하는 기술에 대해 설명합니다. 이 기술은 혈통 추적 또는 기타 형질전환 마우스 모델과 함께 사용하여 폐 복구 및 재생의 분자 및 세포 메커니즘을 정의할 수 있습니다.

. 모두 PNX와 가짜 전폐 절제술 100 % - PNX와 가짜 운영 마우스 무게의 플롯은 그림 6에 제공됩니다 우리의 손에, 생존은 지속적으로 95이다. 오른쪽 폐 - 성장 다시이 모델과 예상 시간 과정에서, 우리는 기 브니 등. (15)과 왕 등의 원고에 독자를 참조하는 방법에 대한 설명. (14) 몇 가지 일반적인 함정이 성공적으로 마우스 PNX와 마우스 가짜 전폐 절제술 절차를 수행하기 위해 피해야한다. 기관 내 삽관 : 마우스 PNX 기술을 배우는 많은 연구자들은 기관 내 삽관에 어려움이있다. 마우스 후두가 전방이고 기관 내 카테터 성대 통과해야하므로 카테터 식도 내로 통과하기 쉽다. 그림 1A에서 알 수 있듯이, 무딘 팁 카테터 curva 다음 가능한 ...

마우스 폐절제술은 일반적으로 사용되는 보상적 폐 성장 모델입니다. 이 절차는 계통 추적 또는 형질전환 마우스 모델과 함께 사용하여 기본 메커니즘을 밝힐 수 있습니다.

In humans, disrupted repair and remodeling of injured lung contributes to a host of acute and chronic lung disorders which may ultimately lead to ...

본 실험 절차의 목적은 좌측 폐절제술을 시행하여 우측 폐의 보상적 성장을 유도하는 것입니다. 이를 위해 먼저 좌측 흉강 절개술을 시행하여 좌측 폐문을 노출시킵니다. 절차의 두 번째 단계는 좌측 폐문과 좌측 폐동맥을 결찰하는 것입니다.세 번째 단계는 왼쪽 폐를 제거하는 것입니다. 마지막 단계는 흉강 절개 부위를 봉합하는 것입니다. 보상성 폐 성장의 마우스 폐 절제 모델은 폐포 성장 및 재생의 기전을 규명하기 위해 다른 생체 측정 또는 생화학적 기술과 병행하여 활용될 수 있습니다.이 방법은 중격 형성에 관여하는 주요 세포 과정은 무엇이며, 중격 형성을 재개하는 데 필요한 결정적인 세포 분자 과정은 무엇인가와 같이 폐 발달 및 재생 분야의 몇 가지 핵심 질문에 답할 수 있습니다. 일반적으로 이 기술을 처음 접하는 연구자들은 몇 가지 주요 단계 중 하나에서 어려움을 겪을 수 있습니다. 특히 기관 삽관 과정에서 어려움을 겪을 수 있습니다.적절한 수술 창을 만드는 데 어려움을 겪을 수 있습니다. 폐문을 식별하고 클리핑하는 과정에서 어려움이 있을 수 있으며, 가짜 흉강 절개술(sham thoracotomy) 도중 왼쪽 폐의 손상을 방지하는 데에도 어려움을 겪을 수 있습니다. 본 절차의 시연은 제 실험실의 선임 실험 보조원인 Shang Lu가 담당하겠습니다. 먼저 2% isof fluorine으로 마우스에 마취를 유도한 후, 전기 면도기로 왼쪽 흉부와 목 부위를 제모하고, 마우스의 눈에 인공눈물 연고를 도포합니다. 이어서 클로르헥시딘으로 3회, 이소프로필 알코올로 3회, 다시 클로르헥시딘으로 닦아내어 해당 부위를 소독합니다.세 번 반복합니다. 후두를 노출시키기 위해 목 앞쪽 중앙에 1cm 수직 절개를 가한 후, 강한 집게 자극에 반응이 없음을 기록하여 마취 깊이를 확인하십시오. 톱니 모양의 10cm 포셉을 사용하여 띠근육(strap muscles)을 가볍게 견인합니다. 그다음 직선 가위의 끝부분을 사용하여 띠근육을 벌려줍니다.다음으로, 22 gauge 둔단 혈관 카테터(blunt tip angio catheter)를 구강을 통해 기관 중간에 삽입하고 절개창을 통해 위치를 시각적으로 확인합니다. 마우스를 설치류용 인공호흡기에 연결하고 2% isof fluorine와 15 centimeters.Water의 압력 제한으로 마취 상태를 유지합니다. 마취 상태의 마우스를 오른쪽 측와위(right lateral decubitus position)로 배치하여 왼쪽 등이 시술자를 향하게 합니다.마우스의 몸체 위에 멸균 드레이프로서 자가 밀봉 플라스틱 랩을 덮습니다. 끝이 뭉툭한 곡선 가위를 사용하여 4번째와 5번째 갈비뼈 사이 공간에서 갈비뼈와 평행하게 2 cm 길이로 절개합니다. 그런 다음 가위 끝을 삽입하여 피부를 아래쪽의 갈비뼈 및 늑간근으로부터 박리합니다.피부에 리트랙터 4개를 배치하여 1.5 by 1.5 centimeter 크기의 수술 창을 만듭니다. 각 리트랙터를 코르크 보드에 고정합니다. 곡선 핀셋을 사용하여 갈비뼈까지 절개한 다음 늑간을 둔성 절개합니다.네 번째와 다섯 번째 갈비뼈를 노출시키기 위해, 곡선 핀셋의 한쪽 끝을 사용하여 흉강으로 진입할 구멍을 만듭니다. 그다음 뭉툭한 끝의 미세 가위의 아래쪽 날을 사용하여 아래쪽 날이 흉강에 진입할 때까지 절개선을 따라 누릅니다. 갈비뼈 사이에 0.5 centimeter 절개를 가한 후 반대 방향으로 동일하게 반복합니다.그런 다음 두 개의 리트랙터를 삽입하고 이를 코르크판에 고정하여 전후축을 따라 흉강을 엽니다. 이제 마이크로 클립 어플리케이터를 장전합니다. 다음으로, 비우세손에 쥔 곡선형 둔단 핀셋을 사용하여 왼쪽 폐를 잡고, 왼쪽 폐동맥과 기관지가 노출될 때까지 흉강 절개창을 통해 상부를 외측 및 하측으로 밀어냅니다.그 다음, 티타늄 혈관 마이크로 클립 복제기가 장착된 상태로 주사용 손에 쥐며, 어플리케이터 본체는 손바닥에 두고 곡선 팁은 손바닥 반대 방향을 향하게 합니다. 어플리케이터 팁을 좌측 폐 후면의 곡선을 따라 흉강 내부로 밀어 넣은 뒤, 좌측 기관지와 폐동맥을 클립으로 고정합니다. 어플리케이터를 제거하되 좌측 폐는 견인된 상태를 유지합니다.오른손으로 뭉툭한 끝의 마이크로 가위를 잡고 클립 원위부에서 기관지와 폐동맥을 절단하여 왼쪽 폐를 제거합니다. 폐를 제거한 후 늑골 견인기를 꺼냅니다. 그런 다음 곡선형 뭉툭한 포셉을 사용하여 절개 부위 아래쪽이자 횡격막 높이 위쪽의 피부 1cm를 집어 올리고, 24 gauge 안지오 카테터를 피부를 통해 왼쪽 흉강 내로 삽입합니다.다음으로, 4번째와 5번째 갈비뼈 주변에 5-0 proline 봉합사로 단속 봉합을 두 군데 실시합니다. 흉강을 폐쇄하기 위해 피부 견인기를 제거하고, 두 세트의 포셉을 사용하여 절개선을 따라 피부를 맞춘 뒤 조직 접착제를 사용하여 피부를 접합합니다. 마지막으로, 3 mL lu lock 주사기를 혈관 카테터에 연결하고, 가볍게 흡인하며 혈관 카테터를 뽑아내어 잔류 공기를 제거합니다.목 부분을 접착하여 마무리하고, 흉부 절개 폐쇄 시와 마찬가지로 두 세트의 포셉을 사용하여 절개 부위를 폐쇄합니다. 앞서 보여준 대로 마취된 마우스의 왼쪽 폐를 노출시킨 후, 곡선형 둔단 포셉을 사용하여 늑골을 들어 올려 왼쪽 흉강으로 공기가 유입되게 합니다. 앞서 보여준 대로 24 gauge 혈관 카테터를 왼쪽 흉강에 삽입하되, 왼쪽 폐가 손상되지 않도록 주의합니다. 5-0 proline 봉합사를 사용하며 폐에 구멍이 나지 않도록 주의합니다.봉합사를 세 번째와 네 번째, 그리고 다섯 번째와 여섯 번째 갈비뼈 사이 공간에 두 길이로 각각 배치합니다. 좌측 폐 탈출의 위험을 줄이기 위해 봉합사를 묶기 전 두 길이를 모두 배치하십시오. 봉합사를 묶어 두 개의 단속 봉합을 실시합니다.흉부 절개 부위의 피부를 접착제로 붙입니다. 혈관 카테터(angio catheter)를 사용하여 잔류 공기를 제거하고, 앞서 설명한 방식대로 경부 절개 부위를 접착제로 붙입니다. isof fluorine 공급을 중단하고, buprenorphine 0.1 mg/kg과 생리식염수 0.5 mL를 피하 투여합니다.자발 호흡이 재개되면 기관 내 튜브를 제거하십시오. 마우스가 보행할 수 있을 때까지 관찰하십시오. 일반적으로 기관 내 튜브 제거 후 몇 분 뒤에 보행이 재개됩니다.수술 후 3일 동안 매일 2회, buprenorphine 0.1 mg/kg을 복강 내 주사로 투여하십시오. 이 3일 동안 동물을 주의 깊게 관찰하고, 동물을 다룰 때 수술 부위가 열리지 않도록 주의하십시오. 이 이미지는 수술 후 체중 감소를 보여줍니다.수술 24시간 후, pneumo somy 마우스는 평균 1.5 g, sham 마우스는 평균 1.1 g의 체중이 감소합니다. 두 그룹 모두 수술 후 3일째에 수술 전 체중을 회복합니다. 이 형광 이미지는 대조군 조건에서 부엽의 tropo elastin 면역형광 염색 결과를 보여줍니다.여기 pneumo omy 72시간 후 부엽의 tropo elastin 면역형광 이미지가 제시되어 있으며, 기존의 공기 공간이 증가한 것을 확인할 수 있습니다. 이 마지막 TRO Elastin 면역형광 이미지는 Pneumo Otomy 4주 후의 부엽을 보여줍니다. 엽 성장과 재생에 주목하십시오.이 영상을 시청하신 후에는 보상성 폐 성장을 위한 마우스 폐 절제 모델을 수행하는 방법과, 본 절차의 대조군으로 사용되는 가짜 흉곽 절개술을 수행하는 방법에 대해 충분히 이해하시게 될 것입니다.

mouse-pneumonectomy-model-of-compensatory-lung-growth

Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

Obliterative bronchiolitis는 폐 이식받는 사람의 장기 생존의 열쇠 장애와 강력한 잠복기 모델의 부족이다 obliterative bronchiolitis의 immunopathogenesis를 검토 걸로. 다른 고형 장기 이식과는 달리, vascularized 마우스 폐 이식이있다는 최근에 개발되었습니다. 여기 murine orthotopic 단일 폐 이식 후 당사 독자 개발한 obliterative bronchiolitis 모델을 보여줍니다.

Orthotopic 폐 이식의 Murine 모델에 Obliterative Bronchiolitis의 개발

여기에서는 마우스의 폐압-부피 곡선을 간단하고 안정적으로 측정할 수 있는 프로토콜을 제시하며, 두 가지 일반적인 폐 병리학인 폐 섬유증과 폐기종에서 표현형 실질 변화를 감지할 수 있을 만큼 충분히 민감하다는 것을 보여줍니다. 이 지표는 병리학의 발달에 따른 폐의 구조적 변화를 정량화할 수 있는 수단을 제공합니다.

마우스 폐의 압력 볼륨 곡선의 측정

이 연구는 반복적으로 오존의 높은 농도에 쥐를 노출 하 여 새로운 만성 폐쇄성 폐 질환 (COPD) 동물 모델의 성공적인 세대를 설명 합니다.

반복된 오존 노출에 의해 쥐에 만성 폐쇄성 폐 질환 모델의 생성

내부 폐 표면적 (ISA)은 폐 질환 및 부상 유발 폐포 재생에서 폐 형태 및 생리학을 평가하는 데 중요한 기준입니다. 폐 절제술 및 인공 삽입물 마우스 모델에서 ISA의 측정 편향을 최소화 할 수있는 표준화 된 방법을 설명합니다.

마우스 폐 전 절제술 및 보철물 삽입을 통한 내시경 표면 측정을위한 표준화 된 방법

설치류 왼쪽된 pneumonectomy 폐 고혈압 연구에 귀중 한 기술 이다. 여기, 선물이 쥐 pneumonectomy 절차와 최소한의 사망률 및 사망을 보장 하기 위해 수술 후 치료를 설명 하는 프로토콜.

쥐에 폐 고혈압의 모델로 Monocrotaline 또는 Sugen와 함께 왼쪽된 Pneumonectomy

여기에서는 결과를 개선하는 데 도움이 되는 쥐 폐 이식 모델에 대한 최적화를 제시합니다. 체중에 따른 커프스 사이즈 가이드, 4차 늑간 공간을 확인하기 위한 측정 전략, 상처 봉합 및 BAL(기관지폐포 세척) 체액 및 조직 수집 방법을 제공합니다.

온난 허혈/재관류 손상의 쥐 폐 이식 모델: 결과 개선을 위한 최적화

우리는 교육 목적으로 폐 역학 및 폐포 모집 기동을 시연하기 위해 생체 외 돼지 폐 모델을 제시합니다. 폐는 폐 역학 변수의 변화를 최소화하면서 하루 이상(최대 5일) 동안 사용할 수 있습니다.

Ex Vivo (체외 주행) 폐 역학 연구 및 교육을 위한 돼지 실험 모델

이 프로토콜은 기관지폐 이형성증의 분자 유발 요인에 대한 이해를 용이하게 하고 치료 번역을 향상시키기 위해 적절하지 않은 계면활성제 양, 고산소증, 고압 환기 및 염증을 포함하여 미숙아 폐에서 발생하는 초기 병원성 사건을 모델링하는 급성 폐 손상의 신생아 새끼 돼지 모델의 개발을 설명합니다.

미숙아 폐의 초기 환경을 재현하는 신생아 새끼 돼지 급성 폐 손상 모델 개발

본 논문은 폐 기능 측정 또는 쥐가 복구 나중에 시간에 공부를 할 수 있습니다 폐 기지에 대한 쥐를 intubating의 striaghforward하고 효율적인 방법을 설명합니다. 절차는 직접 기관을 비춰 저렴한 fiberoptic 광원을 포함한다.

마우스 폐 삽관 법의 간단한 방법

진단 초음파 영상은 사람과 동물을 대상으로 각종 호흡기 질환을 진단하는 데 효과적 일 수있다. 우리는 구체적으로 마우스 모델에서 다이아 프램 역학을 분석하는 박사 ZUO의 실험실에 의해 이용 포괄적 인 초음파 프로토콜을 보여줍니다. 이것은 또한 마우스 호흡기 근육의 기능에 대한 정량적 인 정보를 제공 할 수있는 비 침습적 연구 기법이다.

마우스 다이어프램 기능의 진단 초음파 이미징

배우세요 마우스 전폐 절제술을 통해 보상 성 폐 성장을 유도하는 방법을. 좌측 흉부 절개와 폐 동맥 결찰을 포함한 수술 기법을 익히고, 폐 재생 및 폐포 성장 메커니즘 연구에 활용하세요.

보상 성 폐 성장의 마우스 전폐 절제술 모델

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