Isolation and Immortalization of Patient-derived Cell Lines from Muscle Biopsy for Disease Modeling

Jerome D. Robin; Woody E. Wright; Yaqun Zou; Stacy A. Cossette; Michael W. Lawlor; Emanuela Gussoni

doi:10.3791/52307

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Medicine

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Isolation and Immortalization of Patient-derived Cell Lines from Muscle Biopsy for Disease Modeling

질병 모델링을위한 근육 조직 검사에서 환자 유래 세포주의 분리 및 멸화

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11:26 min

January 18, 2015

DOI: 10.3791/52307-v

Jerome D. Robin¹, Woody E. Wright¹, Yaqun Zou², Stacy A. Cossette³, Michael W. Lawlor³, Emanuela Gussoni⁴

¹Department of Cell Biology,UT Southwestern Medical Center, ²National Institute of Neurological Disorders and Stroke,National Institute of Health, ³Division of Pediatric Pathology, Department of Pathology and Laboratory Medicine,Medical College of Wisconsin, ⁴Division of Genetics and Genomics,Boston Children's Hospital

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

이 프로토콜은 근육 또는 피부 조직에서 근육 및 섬유아세포 세포주의 살아있는 세포를 분리하고 1차 배양하는 기술을 설명합니다. 이러한 세포주를 불멸화하는 기술도 설명됩니다. 전체적으로 이러한 프로토콜은 다운스트림 애플리케이션을 위해 환자 유래 세포를 생성하고 보존할 수 있는 신뢰할 수 있는 도구를 제공합니다.

다음 실험의 전반적인 목표는 인간 환자의 근육 생검에서 정제된 근육 세포를 분리하고 후속 연구를 위해 불멸화하는 것입니다. 이는 먼저 수집된 조직의 무게를 측정하고, 다지고, 소화하여 단핵 세포를 해리함으로써 달성됩니다. 두 번째 단계로, 근육 세포는 사실에 의해 비 근육 세포에서 정제됩니다.

다음으로, 근육 세포는 CDK 4와 H turt에 모두 감염되어 불멸 세포를 생성합니다. 그 결과, 환자 유래 살아있는 근육 세포가 여러 계대에 걸쳐 확장될 수 있으며 세포 융합 분석법, 경련하는 근관의 존재 및 근육 생성 마커의 발현에 따라 분화될 수 있음을 보여줍니다. 이 기술의 의미는 근육 질환 진단을 넘어 확장되는데, 이는 약물 스크리닝 또는 많은 수의 세포가 필요한 기타 다운스트림 응용 분야를 위해 잠재적으로 무제한의 근육 세포를 제공할 수 있기 때문입니다.

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