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DOI: 10.3791/52343-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This study investigates the role of mechanical rigidity in the tumor microenvironment on cancer cell behavior, particularly focusing on invadopodia activity and actomyosin contractility. By utilizing polyacrylamide gels, the invasive and contractile properties of cancer cells can be assessed in response to varying matrix rigidities.
종양 미세 환경에서 기계 강성이 invadopodia 활동을 증가시키고 수축력을 액토 마이 오신으로 악성 동작을 운전에 중요한 역할을한다. 사용하는 폴리 아크릴 아미드 겔 (PAAS)는, invadopodia 및 견인력 분석은 강성 매트릭스에 응답하여 암세포의 침윤 및 수축 특성을 연구하기 위해 이용 될 수있다.
이 절차의 전반적인 목표는 암세포의 침습 및 수축 특성을 연구하기 위해 침입자, 족부 및 견인력 분석 모두에 사용할 수 있는 폴리 아크릴아미드 겔을 만드는 것입니다. 이것은 먼저 유리 꽃 접시의 세계에서 14mm 커버 슬립을 활성화하여 폴리 아크릴아미드 젤이 유리에 결합되도록 함으로써 수행됩니다. 다음으로, 두 분석을 위한 폴리 아크릴아미드 용액은 서로 다른 강성 또는 기계적 특성을 가진 겔을 생성할 준비가 되어 있습니다.
그런 다음 침범된 포디아 분석은 분해를 감지하기 위해 형광 표지된 세포 외 기질의 얇은 층으로 준비됩니다. 마지막으로, 분석은 하룻밤 배양을 위해 암세포를 파종한 다음 침입자, 포디아 플레이트의 고정 및 염색, 견인력 플레이트의 라이브 셀 이미징을 수행합니다. 궁극적으로 형광 현미경 검사는 침입자, 포디아 및 세포 외 기질 분해를 이미지화하는 데 사용됩니다.
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